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免疫学杂志 2014年第10期30卷 897-901页

作者：杨磊唐萃王旎杨俊艳刘智敏重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心 400016 重庆医科大学附属口腔医院检验科 400016

目的探讨低氧诱导因子-1(HIF-1α)、Smad蛋白的相互作用蛋白1(SIP1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测72例人甲状腺乳头状癌和37例癌旁正常组织中HIF-1α、SIP1和MMP-9的表达水... 详细信息

目的探讨低氧诱导因子-1(HIF-1α)、Smad蛋白的相互作用蛋白1(SIP1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测72例人甲状腺乳头状癌和37例癌旁正常组织中HIF-1α、SIP1和MMP-9的表达水平,分析其表达与临床病理指标的关系及三者间表达的相关性。结果在PTC组织中,HIF-1α、SIP1和MMP-9的阳性表达率分别为51.56%、51.39%和54.16%,显著高于癌旁正常组织(P<0.01)。HIF-1α、SIP1和MMP-9的表达与患者颈部淋巴结转移显著相关(P<0.05)。HIF-1α与SIP1、HIF-1α与MMP-9、SIP1和MMP-9的表达均呈显著正相关(rs=0.304,P=0.009;rs=0.243,P=0.040;rs=0.277,P=0.019)。2种蛋白(HIF-1α/SIP1,HIF-1α/MMP-9,SIP1/MMP-9)联合表达较二者之一表达与颈部淋巴结转移更具相关性(P<0.05)。HIF-1α、SIP1和MMP-9 3种蛋白联合表达较三者之一表达与颈部淋巴结转移更具有相关性(P<0.05)。结论 HIF-1α、SIP1和MMP-9在PTC组织中的表达与颈部淋巴结转移密切相关,且三者存在相互协同作用,其表达情况可能作为监测PTC颈部淋巴结转移的指标。

关键词：甲状腺乳头状癌 HIF-1α SIP1 MMP-9

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沉默整合素连接激酶基因对TCA8113舌癌细胞移植瘤生长的影响

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第三军医大学学报 2014年第19期36卷 1996-2000页

作者：幸宇齐进邓世雄陈俊霞重庆医科大学基础医学院法医生物信息学研究室重庆400016 细胞生物学及遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科重庆400015

目的研究沉默TCA8113舌癌细胞整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因的表达,对其下游底物Akt和GSK3β磷酸化状态及对移植瘤生长和自发性转移的影响。方法通过Lipofectamine 2000介导将特异性siILK表达载体和无同源性的对照载... 详细信息

目的研究沉默TCA8113舌癌细胞整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因的表达,对其下游底物Akt和GSK3β磷酸化状态及对移植瘤生长和自发性转移的影响。方法通过Lipofectamine 2000介导将特异性siILK表达载体和无同源性的对照载体,稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA8113组、TCA8113 vector组和TCA8113 siILK组,将3组细胞分别注入裸鼠皮下构建移植瘤模型,5周后检测瘤质量,对裸鼠肺及瘤组织形态学行常规病理学检查,使用免疫荧光技术检测体外和体内癌细胞p-Akt和p-GSK3β等的表达,并观察瘤组织内血管生成情况。结果 TCA8113组、TCA8113 vector组肺组织均发生自发性转移瘤,TCA8113 siILK组肺组织未发现自发性转移瘤;TCA8113 siILK组移植瘤细胞形态较其他2组体积减小,核分裂象较少,核浆比例缩小;TCA8113 siILK组在体内和体外实验中的p-Akt和p-GSK3β表达较其他2组均明显下降(P<0.05);TCA8113 siILK组移植瘤质量较其他2组显著降低(P<0.05),抑瘤率分别为84%和92%;TCA8113 siILK组移植瘤血管生成较其他2组也明显减少(P<0.05)。结论沉默TCA8113舌癌细胞ILK表达可抑制其下游信号传导分子Akt和GSK3β的磷酸化,并抑制移植瘤血管生成,从而抑制移植瘤的生长。

关键词：整合素连接激酶人舌鳞癌细胞移植瘤生长微血管

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细菌耐药机制及耐药性消除的研究进展

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中国微生态学杂志 2014年第8期26卷 984-986,990页

作者：李科张德纯重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

抗菌药物选择压力导致细菌耐药性日趋严重。究其根源,细菌耐药机制的探讨是为了揭示菌株耐药的根本原理,并从中找到消除耐药性的有效方法。本研究就现今国内外对耐药机制的研究以及耐药性消除的研究进行综述。

关键词：耐药机制消除研究进展

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mIL-21-hIgGFc融合蛋白在293E细胞中的表达纯化及其对CD8^+T细胞表型的影响

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中国免疫学杂志 2014年第7期30卷 884-887,892页

作者：黄启彬刘明月符少月邢巧刘潇淇王盛典易发平重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 中国科学院生物物理研究所中国科学院感染与免疫重点实验室北京100101

目的:在293E细胞中表达小鼠IL-21-hIgGFc融合蛋白,并检测该蛋白对CD8+T细胞表型的影响。方法:运用RT-PCR方法从BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞扩增出IL-21基因,插入到PTT3-hIgGFc载体上,获得重组质粒PTT3-mIL-21-hIgGFc;用磷酸钙瞬时转染293E细... 详细信息

目的:在293E细胞中表达小鼠IL-21-hIgGFc融合蛋白,并检测该蛋白对CD8+T细胞表型的影响。方法:运用RT-PCR方法从BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞扩增出IL-21基因,插入到PTT3-hIgGFc载体上,获得重组质粒PTT3-mIL-21-hIgGFc;用磷酸钙瞬时转染293E细胞,48 h和72 h后分别收集培养上清。培养上清经MOLLIPORE LabscaleTMTFF system浓缩后,Protein G琼脂糖柱纯化获得mIL-21-hIgGFc融合蛋白,再用ELISA和SDS-PAGE电泳检测融合蛋白的含量和纯度。mIL-21-hIgGFc刺激P1A小鼠的CD8+T细胞,72 h后,运用流式细胞术检测其表型改变情况。结果:重组质粒PTT3-mIL-21-hIgGFc经酶切和测序确定载体构建成功,ELISA检测表明293E细胞上清中含有787 ng/ml,SDS-PAGE结果显示得到了较纯的融合蛋白,纯化后获得500μg融合蛋白mIL-21-hIgGFc。融合蛋白mIL-21-hIgGFc处理P1A小鼠CD8+T细胞后,CD44lowCD62Lhi CD8+T细胞明显增多。结论:我们成功构建了PTT3-mIL21-hIgGFc重组质粒,在293E细胞中表达并纯化出mIL21-hIgGFc融合蛋白。mIL21-hIgGFc能促进CD8+T细胞向CD44lowCD62LhiCD8+记忆干细胞表型分化,这对于肿瘤过继免疫治疗方案的改进具有重要的参考意义。

关键词：白细胞介素21(IL-21) 293E细胞表达纯化 CD8^+T细胞

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MCPHl在肺组织的表达及其对人肺癌细胞株H1299凋亡的影响

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第三军医大学学报 2014年第6期36卷 574-577页

作者：张冀麦力昊晓彬肖明袁成福卜友泉宋方洲重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:探讨MCPHl基因在肺癌组织和正常组织的蛋白表达分布及其过表达后对人肺腺癌细胞系H1299凋亡的影响。方法:临床收集20例肺癌组织和8例正常肺组织标本,免疫组化法检测MCPHl蛋白在肺组织的表达分布,真核表达质粒pcDNA3.1(-)/MCPHl和... 详细信息

目的:探讨MCPHl基因在肺癌组织和正常组织的蛋白表达分布及其过表达后对人肺腺癌细胞系H1299凋亡的影响。方法:临床收集20例肺癌组织和8例正常肺组织标本,免疫组化法检测MCPHl蛋白在肺组织的表达分布,真核表达质粒pcDNA3.1(-)/MCPHl和空白质粒pcDNA3.1瞬时转染肺癌细胞株H1299,并设立未处理组。转染质粒48h后,采用***法检测细胞中MCPHl基因mRNA的转录表达情况;转染72h后提取细胞总蛋白,Westernblot检测细胞中MCPHl蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:MCPHl蛋白在肺癌组织中表达低于正常组织,而且MCPHl蛋白在癌组织中表现为核质低表达,在正常组织中为核质高表达;H1299转染pcDNA3.1(-)/MCPHl重组质粒后,可有效上调H1299细胞中MCPHl基因的mRNA和蛋白表达,处理组的细胞凋亡率(18.10±1.87)%较pcDNA3.1(-)转染组(5.76±1.85)%和未处理组(5.85±0.57)%显著增加(P<0.05)。结论:MCPHl在人肺癌组织表达降低,过表达之后可诱导肺腺癌细胞发生凋亡。

关键词：蛋白质类/遗传学肺肺肿瘤/病理学基因细胞凋亡细胞系质粒转染人类

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高原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化及意义

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西北国防医学杂志 2014年第1期35卷 40-42页

作者：杨磊杨有利周其全唐萃解放军第十医院检验科甘肃武威733000 第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心

目的:了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的变化。方法:对参加玉树(海拔3 700m)抗震救灾116d后返回平原的613名官兵(观察组)在返回后的第2、15、30天分别抽取空腹静脉血,放射免疫竞争法分析其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度。未... 详细信息

目的:了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的变化。方法:对参加玉树(海拔3 700m)抗震救灾116d后返回平原的613名官兵(观察组)在返回后的第2、15、30天分别抽取空腹静脉血,放射免疫竞争法分析其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度。未到高原的140名官兵作为对照组。结果:观察组返回平原第2、15天T含量略高于对照组(P>0.05),第30天T含量略低于对照组(P>0.05)。与对照组相比,观察组返回平原第2、15、30天E2含量均明显降低(P<0.05)。观察组返回平原第30天E2含量明显低于第2、15天的含量(P<0.05),但第15天与第2天比较无统计学差异(P>0.05)。结论:成年男性高原短期暴露返回低海拔地区后,血清T水平呈先增高后降低趋势,并出现过度重新调整现象,E2水平呈持续下降趋势。由于E2缺乏与骨质疏松相关,应避免过度训练引发骨损伤。

关键词：高原男性性激素睾酮雌二醇

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纳米细菌促进乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡

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第三军医大学学报 2013年第16期35卷 1688-1691页

作者：刘胜男张德纯张名均郭亚楠杨晓容许舸重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室生命科学院电镜组重庆400016

目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺... 详细信息

目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺癌MDA-MB-231细胞共同培养24、48、72 h,通过CCK-8检测其对细胞的毒性作用;培养12、24、48、72 h,取上清,经全自动生化分析仪测定LDH活性;作用72 h,经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测定其凋亡率,透射电镜观察其超微结构的变化情况。结果 CCK-8显示,NB组24、48、72 h对细胞的抑制作用均强于nHAP组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);NB组LDH含量在24、48、72 h时均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);24、48、72 h均高于nHA组,但仅24、48 h有统计学差异(P<0.05)。nHAP组LDH活性仅在72 h与正常对照组比较有统计学差异(P<0.01);72 h后NB组细胞凋亡率高于nHAP组,差异有统计学意义(P<0.01);透射电镜下观察,NB组可以看到胞质空泡样变,核固缩以及明显的凋亡小体,nHAP组未见明显异常。结论 NB可以抑制乳腺癌细胞的生长,促进其发生凋亡,其导致细胞凋亡的成分不仅仅是NB羟基磷灰石的外壳,也可能与NB的其他组分或代谢产物有关。

关键词：纳米细菌纳米羟基磷灰石凋亡乳腺癌

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高原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化及意义

高原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议暨第八届全军定量病理学学术会议

作者：周其全杨有利杨磊唐萃第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆400038 解放军第十医院检验科甘肃武威733000 解放军第十医院检验科甘肃武威733000 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的：了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的改变. 方法：对参加玉树(海拔3700m)抗震救灾116天后返回平原的613名官兵(设为观察组)和未参加救灾的140名官兵(设为对照组)在返回后的第2天,第15天和第30天分别采取清晨空腹静脉血,... 详细信息

目的：了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的改变. 方法：对参加玉树(海拔3700m)抗震救灾116天后返回平原的613名官兵(设为观察组)和未参加救灾的140名官兵(设为对照组)在返回后的第2天,第15天和第30天分别采取清晨空腹静脉血,采用放射免疫竞争法分析其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度. 结果：高原短期暴露男性，返回平原第2天组、第15天组测得T含量略高于对照组，返回平原第30天组T含量略低于对照组，均无统计学差异(P>0.05)。E2的浓度一直呈下降趋势，与对照组相比，返回平原第2天组、返回平原第15天组及返回平原第30天组的E2含量明显降低，有显著差异(P<0.05);返回平原第30天E2含量低于返回平原后第2天和15天的含量，并明显低于对照组(P<0.05);返回第15天组与返回平原第2天组比较无统计学差异(P>0.05)。返回第2、15、30天组E2异常率明显高于对照组，正常率明显低于对照组。结论：成年男性高原短期暴露返回低海拔地区后，血清T水平呈先增高后降低趋势，并出现矫枉过正现象，E2水平呈持续下降趋势。E2缺乏与骨质疏松密切相关，提示应当重视高原暴露官兵返回平原后的低雌激素水平和骨质疏松，避免因过度训练引发的骨损伤发生。

关键词：高原短期暴露低海拔地区性激素脱适应期

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尿微量蛋白联合检测对高原短期暴露人群返回低海拔地区后肾脏脱适应损伤的判定

尿微量蛋白联合检测对高原短期暴露人群返回低海拔地区后肾脏脱适...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议暨第八届全军定量病理学学术会议

目的:了解平原人高原短期暴露再返回平原后尿微量蛋白变化规律,进一步探讨高原脱适应对肾脏的影响.方法:对参加高原军事任务116天的738名官兵分别在返回平原后的第2天、第15天和第30天采集晨起中段尿20mL,使用全自动化学发光免疫分析仪...

目的:了解平原人高原短期暴露再返回平原后尿微量蛋白变化规律,进一步探讨高原脱适应对肾脏的影响.方法:对参加高原军事任务116天的738名官兵分别在返回平原后的第2天、第15天和第30天采集晨起中段尿20mL,使用全自动化学发光免疫分析仪,对尿液中的α-1微球蛋白(α1-MG), β2-微球蛋白(β2-MG),尿微量白蛋白(MA1b)进行检测,并对结果进行统计学分析.

关键词：

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Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

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第二军医大学学报 2013年第11期34卷 1166-1170页

作者：胡代曦张锡峰张超钟沁冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定... 详细信息

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析分别检测14-19细胞中上皮标记物和间质标记物的表达改变。结果显微镜下可见高表达wnt3的14-19细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验和细胞迁移实验结果显示,高表达wnt3的14-19细胞迁移能力明显提高,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,间质标记物N-cadherin、vimentin和twist1的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E-cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。

关键词： wnt3 肝前体细胞上皮-间质转化肝硬化

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