检索结果-内蒙古大学图书馆

2010全国新型兽药研发与质量管理及动物疫病防治研讨会

作者：周裕珍杨致邦胡洪铭韩建勋海南省海口市美兰区大昌养猪场，海口 570000 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室，重庆 400016 海南省海南医学院药学系化分实验室，海口 571101

目的:了解益生菌饲喂生长育肥猪的效果，为制备适宜本地的猪饲料益生菌添加剂提供实验依据。方法:从键康肥猪分离鉴定出酵母菌，乳酸菌，芽胞杆菌，丝状菌等8种优势菌，配制益生菌添加剂，加入猪饲料中饲喂生长育肥猪。在猪日粮中添加3... 详细信息

目的:了解益生菌饲喂生长育肥猪的效果，为制备适宜本地的猪饲料益生菌添加剂提供实验依据。方法:从键康肥猪分离鉴定出酵母菌，乳酸菌，芽胞杆菌，丝状菌等8种优势菌，配制益生菌添加剂，加入猪饲料中饲喂生长育肥猪。在猪日粮中添加3～4％益生菌添加剂饲喂，与未加益生菌添加剂饲喂的生长育肥猪比较，观察生长育肥猪的日增重、饲料转化率、患病率等。结果:生长育肥猪全期日增重，试验组比对照组提高9.29％，饲料利用率提高10.57％，患病率降低77.8％，均有显著性差异。试验猪毛色光亮，粪便正常，且无臭味。结论:采用益生菌添加剂饲喂生长育肥猪能提高猪的生长速度和效率，降低患病率，增加经济效益，减少环境污染。

关键词：生长育肥猪猪饲料益生菌添加剂

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用虚拟实验软件进行医学免疫学和病原生物学实验考试的实践

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基础医学教育 2010年第S1期12卷 78-78页

作者：杨致邦陈全武卫华蒋仁举邓西川胡小莉重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室

随着信息科学技术的迅猛发展,计算机、虚拟现实等技术已进入社会的各个领域,产生了巨大的影响。在教育领域,多媒体、虚拟现实等技术已逐渐成为有效的教学媒体和工具,成为实验教学的新手段,使教学模式发生了巨大变化。

关键词：医学免疫学病原生物学教学方法虚拟实验实验考试

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幽门螺杆菌hp1188基因的原核表达及免疫学鉴定

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中国免疫学杂志 2009年第4期25卷 340-345页

作者：韩飞杨致邦郭丽媛范贵荣重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室；神经科学研究中心；基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

目的:构建高效表达Hp1188重组蛋白的基因工程菌pQE30-hp1188-DH5α,提纯重组蛋白,鉴定其抗原性和免疫原性。通过小鼠灌胃试验,验证Hp1188蛋白阻止幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)在胃内定植的作用。方法:构建重组质粒pQE30-hp1188,... 详细信息

目的:构建高效表达Hp1188重组蛋白的基因工程菌pQE30-hp1188-DH5α,提纯重组蛋白,鉴定其抗原性和免疫原性。通过小鼠灌胃试验,验证Hp1188蛋白阻止幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)在胃内定植的作用。方法:构建重组质粒pQE30-hp1188,DNA测序分析正确后,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达。表达蛋白用Ni2+-NTA树脂纯化,SDS-PAGE分析纯度,Bradford法测定浓度,Western blot鉴定对相应抗原的特异性,双向琼脂扩散实验检测效价。纯化重组蛋白和粘膜佐剂霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin subunit B,CTB)的混合液灌胃免疫接种预防组BALB/c小鼠,同时设阴性对照组和阳性对照组,免疫4周后用*** NCTC 11637攻击3次,末次攻击4周后处死小鼠,进行胃组织***培养;***定植半定量、炎症程度及其炎症活动度的评分,以评价重组蛋白对胃组织***感染的免疫保护作用。结果:构建的重组表达质粒pQE30-hp1188经DNA测序证实序列完整,插入的基因片段全长810bp,与基因文库中的hp1188基因同源性达98%,并在大肠杆菌DH5α中表达出分子量约为30kD大小的可溶性目的蛋白,表达量占全菌总量的47%,表达蛋白纯化后纯度达90%,浓度为1.0mg/ml。Western blot证实有良好抗原结合特异性,双向琼脂扩散效价为1∶16。预防组***感染率、定植及炎症程度评分均明显低于阳性对照组(P<0.05)。预防组不仅可以降低***的定植,而且能减轻***造成的小鼠胃组织的局部慢性炎症反应。结论:成功构建了基因工程菌pQE30-hp1188-DH5α,并高效表达了Hp1188重组蛋白,表达蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,在小鼠体内能阻止***的定植。

关键词：幽门螺杆菌 hp1188基因表达免疫原性体内试验

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白细胞介素-1B和肿瘤坏死因子-α基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性

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中国生物制品学杂志 2009年第10期22卷 1010-1014页

作者：向瑜杨致邦陈瀑苏善平郭丽媛石海波周汛重庆医科大学基础医学院基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

目的探讨人群中白细胞介素-1B(IL-1B)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性。方法选取幽门螺杆菌阳性的39例胃溃疡患者、35例胃癌患者和70名健康对照者,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP... 详细信息

目的探讨人群中白细胞介素-1B(IL-1B)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性。方法选取幽门螺杆菌阳性的39例胃溃疡患者、35例胃癌患者和70名健康对照者,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测该人群中IL-1B-511、TNF-A-308和TNF-A-857基因多态性。结果疾病组与对照组中IL-1B-511各基因型频率的分布差异无统计学意义。与对照组比较,胃溃疡组TNF-A-308各基因型的频率分布、TNF-A-857各基因型的频率分布以及胃癌组TNF-A-308各基因型的频率分布差异均有统计学意义。经Logistic回归分析,与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生胃溃疡的危险性为OR=21.62(95%CI:2.07～226.13);与携带TNF-A-857C/C者比较,携带TNF-A-857T/T者发生胃溃疡的危险性为OR=5.37(95%CI:1.28～22.50);与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生胃癌的危险性为OR=16.41(95%CI:1.62～116.55)。结论TNF-α基因多态性与胃溃疡、胃癌的易感性相关。

关键词：白细胞介素-1B 肿瘤坏死因子-α 基因多态性胃溃疡胃癌幽门螺杆菌

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硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组VacA卵黄抗体的保护作用

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中国生物制品学杂志 2009年第5期22卷 457-460,467页

作者：郭丽媛杨致邦田一玲黄伟韩飞范贵荣向瑜重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 西南大学荣昌校区动物医学系重庆402460

目的观察硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组细胞空泡毒素抗原(VacA)卵黄抗体(IgY)的保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础。方法诱导重组菌DH5α-vacA-pQE30,大量表达并纯化VacA重组蛋白,免疫洛曼母鸡,制备VacAIgY,并进行纯化。... 详细信息

目的观察硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组细胞空泡毒素抗原(VacA)卵黄抗体(IgY)的保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础。方法诱导重组菌DH5α-vacA-pQE30,大量表达并纯化VacA重组蛋白,免疫洛曼母鸡,制备VacAIgY,并进行纯化。在不同pH值的IgY液中加入不同浓度的硫糖铝和不同浓度的胃蛋白酶,将含不同浓度硫糖铝的IgY反复冻融7次,将含30%硫糖铝的IgY室温放置1d～4周,ELISA法测定各实验组IgY的相对抗体活性(AT/AC)。结果在pH1.5、2.0和3.0的条件下,含30%～60%硫糖铝的IgY的相对抗体活性高于不加硫糖铝的IgY;在pH1.5条件下,60%硫糖铝可使IgY的相对抗体活性保持68.7%;在pH2.0和3.0条件下,50%和40%以上的硫糖铝几乎可完全保持IgY的相对抗体活性。在pH值为2.0和3.0时,正常胃蛋白酶浓度(0.02mg/ml)下,30%以上的硫糖铝均可有效保护IgY的相对抗体活性。30%以上的硫糖铝可增强IgY的抗冻融能力。室温放置4周后,含30%硫糖铝的IgY仍能保持80%以上的相对抗体活性。结论30%以上的硫糖铝可增强VacAIgY对低pH和胃蛋白酶的耐受能力及抗冻融能力,是较理想的IgY保护剂。

关键词：幽门螺杆菌细胞空泡毒素抗原卵黄抗体硫糖铝抗体活性

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白介素-1和肿瘤坏死因子-α基因多态性与幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病的关系

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细胞生物学杂志 2009年第2期31卷 271-276页

作者：向瑜杨致邦陈瀑范贵荣郭丽媛成凤重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院检验科重庆400016

为探讨汉族人群中IL-1和TNF-α基因多态性与幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病之间的关系,本文选取***阳性的38例慢性胃炎患者、30例十二指肠溃疡患者和70例健康对照者,采用PCR-限制性长度片段多态方法检测该人群中IL-1B-511、TNF-A-308、... 详细信息

为探讨汉族人群中IL-1和TNF-α基因多态性与幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病之间的关系,本文选取***阳性的38例慢性胃炎患者、30例十二指肠溃疡患者和70例健康对照者,采用PCR-限制性长度片段多态方法检测该人群中IL-1B-511、TNF-A-308、TNF-A-857位点多态性和IL-1受体拮抗剂基因多态性。结果显示在慢性胃炎组中TNF-A-308各基因型的频率与对照组比较,分布有差异,具有统计学意义(χ2=22.614,P<0.001)。在十二指肠溃疡组中TNF-A-857各基因型的频率与对照组比较,分布有差异,具有统计学意义(χ2=9.444,P=0.009)。再经Logistic回归分析,与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生慢性胃炎的危险性为OR=22.70(95%CI:2.51-205.40);与携带TNF-A-857C/C者相比较,携带TNF-A-857T/T者发生十二指肠溃疡的危险性为OR=6.73(95%CI:1.71-26.53)。这些结果表明TNF-α基因多态性与幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病的发生相关。为探讨汉族人群中IL-1和TNF-α基因多态性与幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病之间的关系,本文选取***阳性的38例慢性胃炎患者、30例十二指肠溃疡患者和70例健康对照者,采用PCR-限制性长度片段多态方法检测该人群中IL-1B-511、TNF-A-308、TNF-A-857位点多态性和IL-1受体拮抗剂基因多态性。结果显示在慢性胃炎组中TNF-A-308各基因型的频率与对照组比较,分布有差异,具有统计学意义(χ2=22.614,P<0.001)。在十二指肠溃疡组中TNF-A-857各基因型的频率与对照组比较,分布有差异,具有统计学意义(χ2=9.444,P=0.009)。再经Logistic回归分析,与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生慢性胃炎的危险性为OR=22.70(95%CI:2.51-205.40);与携带TNF-A-857C/C者相比较,携带TNF-A-857T/T者发生十二指肠溃疡的危险性为OR=6.73(95%CI:1.71-26.53)。这些结果表明TNF-α基因多态性与幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病的发生相关。

关键词：胃十二指肠疾病基因多态性幽门螺杆菌白细胞介素-1 肿瘤坏死因子-α

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真菌病的实验室诊断进展

真菌病的实验室诊断进展

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：周汛重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室基础医学院病原生物学教研室

一、真菌病的分类及常见真菌病真菌病是由真菌感染引起的疾病。真菌通过真菌过敏、真菌中毒及侵袭性真菌感染致病,其中,通过向组织内侵入、增殖引起疾病是临床最常见的致病形式。根据真菌侵犯人体的部位,真菌病分为浅部真菌病和深部真菌... 详细信息

一、真菌病的分类及常见真菌病真菌病是由真菌感染引起的疾病。真菌通过真菌过敏、真菌中毒及侵袭性真菌感染致病,其中,通过向组织内侵入、增殖引起疾病是临床最常见的致病形式。根据真菌侵犯人体的部位,真菌病分为浅部真菌病和深部真菌病,浅部真菌病又分为浅表及皮肤真菌病;深部真菌病分为皮下组织和系统性真菌病。

关键词：真菌病半乳甘露聚糖实验室诊断

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两种纯化幽门螺旋杆菌VacA-HpaA融合蛋白包涵体方法的比较

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中国病原生物学杂志 2009年第2期4卷 81-84,94页

作者：范贵荣杨致邦田一玲向瑜郭丽媛韩飞重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心基础医学实验教学中心病原生物学与免疫实验室重庆400016

目的比较Ni2+-NTA树脂和切胶纯化重组VacA-HpaA融合蛋白的纯化效果,探讨纯化蛋白包涵体的简易方法。方法克隆并表达重组pQE30-vacA-hpaA-DH5α工程菌,获得重组VacA-HpaA融合蛋白的包涵体,分别进行Ni2+-NTA树脂和切胶纯化,获得可溶性重... 详细信息

目的比较Ni2+-NTA树脂和切胶纯化重组VacA-HpaA融合蛋白的纯化效果,探讨纯化蛋白包涵体的简易方法。方法克隆并表达重组pQE30-vacA-hpaA-DH5α工程菌,获得重组VacA-HpaA融合蛋白的包涵体,分别进行Ni2+-NTA树脂和切胶纯化,获得可溶性重组蛋白,Western blot鉴定其抗原性;用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清抗VacA、HpaA和VacA-HpaA的IgG水平,鉴定其免疫原性。结果两种方法均能纯化重组VacA-HpaA融合蛋白包涵体,得到可溶性的重组蛋白,Ni2+-NTA树脂纯化法获得的可溶性重组蛋白的纯度为95.8%,得率为63.5%;切胶纯化法获得可溶性重组蛋白的纯度为93.3%,得率为75.2%。Western blot鉴定纯化蛋白均具有良好的抗原性。ELISA法检测显示小鼠血清均能与重组蛋白VacA、HpaA和VacA-HpaA发生反应,两组IgG水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),均具有良好的免疫原性。结论切胶纯化重组VacA-HpaA融合蛋白包涵体是一种简单、经济的可行方法,有利于重组蛋白包涵体的纯化。

关键词：幽门螺旋杆菌包涵体重组蛋白切胶纯化 Ni^2+-NTA树脂纯化

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幽门螺杆菌重组HpaA蛋白包涵体的切胶纯化分析

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中国微生态学杂志 2009年第3期21卷 193-196,199页

作者：范贵荣杨致邦栗俊杰郭丽媛向瑜韩飞重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心基础医学实验教学中心病原生物学与免疫实验室重庆400016

目的探讨切胶纯化的最佳条件及纯化重组HpaA蛋白包涵体的可行性。方法克隆并表达pQE30-hpaA-DH5α工程菌,获得重组HpaA蛋白包涵体,使用切胶纯化法进行纯化,得到可溶性的重组HpaA蛋白。SDS-PAGE电泳后使用不同浓度、不同pH的醋酸钠溶液... 详细信息

目的探讨切胶纯化的最佳条件及纯化重组HpaA蛋白包涵体的可行性。方法克隆并表达pQE30-hpaA-DH5α工程菌,获得重组HpaA蛋白包涵体,使用切胶纯化法进行纯化,得到可溶性的重组HpaA蛋白。SDS-PAGE电泳后使用不同浓度、不同pH的醋酸钠溶液以及不同的染色时间染色电泳蛋白条带,分析切胶纯化的最佳条件。Western blot鉴定重组HpaA蛋白的抗原性。将重组蛋白免疫BALB/c小鼠,双向免疫扩散法检测血清抗HpaA抗体,鉴定重组蛋白的免疫原性。结果4 mol/L醋酸钠溶液、pH13.0、作用1 h为切胶纯化的最佳条件。经切胶纯化法获得的重组HpaA蛋白体积为6 ml,浓度为0.2942 mg/ml,蛋白量为1.7652 mg,得率为77.1%,West-ern blot显示该蛋白具有良好的抗原性。小鼠免疫血清能与重组HpaA蛋白反应,双扩效价大于等于1∶16,具有良好的免疫原性。结论切胶能够纯化重组HpaA蛋白包涵体,获得高纯度的可溶性重组HpaA蛋白,该蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,可用于进一步的科学研究。

关键词：幽门螺旋杆菌粘附素切胶纯化

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白介素-1β-31、白介素-10-819和肿瘤坏死因子-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌感染相关性胃溃疡和胃癌的关系

白介素-1β-31、白介素-10-819和肿瘤坏死因子-α-1031基因多态性...

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：苏善平杨致邦田一玲向瑜吴敏马小京重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心

目的探讨人群中IL-1β31、IL-10-819和TNF-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌感染相关性胃溃疡和胃癌易感性之间的关系,为临床诊断及预防该疾病提供新的思路和方法。方法选取***阳性的51例胃溃疡患者,43例胃癌患者和100例健康对照者,采用P... 详细信息

目的探讨人群中IL-1β31、IL-10-819和TNF-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌感染相关性胃溃疡和胃癌易感性之间的关系,为临床诊断及预防该疾病提供新的思路和方法。方法选取***阳性的51例胃溃疡患者,43例胃癌患者和100例健康对照者,采用PCR-限制性长度片段多态法检测其IL-1B-31 IL-10-819,TNF-A-1031位点,统计学分析其多态性。结果在胃溃疡组中TNF-A-1031各基因型的频率（T/T,49%;T/C,43%;C/C,8%）与对照组（T/T,73%;T/C,25%;C/C,2%）比较,分布有差异,具有统计学意义（x=9.464,P<0.001）。在胃癌组中TNF-A-1031各基因型的频率（T/T,50%;T/C,41%;C/C,9%）与对照组（T/T,73%;T/C,25%;C/C,2%）比较,分布有差异,具有统计学意义（x=9.335,P<0.001）;Logistic回归分析与携带TNF-A-1031T/T者比较,携带TNF-A-1031 C/C者发生胃溃疡的危险性为OR=5.84（95%CI:1.00-33.84）;与携带TNF-A-1031T/T者比较,携带TNF-A-1031C/C者发生胃癌的危险性为OR=6.95（95%CI:1.19-40.63）。在疾病组和对照组中IL-10-819,IL-1B-31的各基因型频率的分布在统计学上无显著意义（α>0.05）。结论TNF-α-1031基因多态性与胃溃疡、胃癌的易感性相关。

关键词：胃溃疡胃癌基因多态性幽门螺杆菌 IL-1β IL-10 TNF-α

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