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中山大学学报（医学科学版） 2023年第5期44卷 768-775页

作者：耿清华赵月阳贺桂琼余华荣重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

【目的】探讨甘草素(LG)对绝经前后APP/PS1小鼠肠道菌群的影响。【方法】将40只3月龄雌性APP/PS1双转基因小鼠随机分为假手术组(sham,n=20)、去卵巢组(OVX,n=20)。术后第7天,将每组小鼠再分别用LG和生理盐水处理,另取10只野生型C57BL/6... 详细信息

【目的】探讨甘草素(LG)对绝经前后APP/PS1小鼠肠道菌群的影响。【方法】将40只3月龄雌性APP/PS1双转基因小鼠随机分为假手术组(sham,n=20)、去卵巢组(OVX,n=20)。术后第7天,将每组小鼠再分别用LG和生理盐水处理,另取10只野生型C57BL/6J小鼠作正常对照组(WT)。LG处理组剂量为30 mg·kg^(-1)·d^(-1),药物处理90 d后,采集粪便样本,提取基因组,采用16S rDNA扩增子测序对各组小鼠的肠道菌群进行分析;利用水迷宫,评估小鼠的学习与记忆能力;采用免疫荧光观察小鼠脑内老年斑(SP)。【结果】水迷宫结果表明,LG可显著改善绝经前后AD小鼠的学习记忆能力(P<0.05),显著减少绝经前后AD小鼠脑内老年斑数量,且差异均具有统计学意义(P<0.0001)。16s rDNA测序结果显示,LG处理可显著增加绝经前后APP/PS1小鼠肠道中厚壁菌门和乳杆菌属的相对丰度(P<0.05),降低拟杆菌门下的有害菌的相对丰度(P<0.05)。LG处理后,别样棒菌属相对丰度在APP/PS1小鼠肠道中呈上升趋势(P>0.05),而在绝经APP/PS1小鼠肠道中下降(P>0.05),差异不具有统计学意义。LEfSe分析结果显示,在WT *** ***比较中,正常WT小鼠肠道菌群中最具差异丰度的菌是厚壁菌门、芽孢杆菌纲和乳杆菌目(P<0.05);罗伊氏乳杆菌在LG组影响较大(P<0.05);拟杆菌纲、拟杆菌目拟杆菌属等在Sham组小鼠肠道聚集(P<0.05),差异均具有统计学意义。而在WT *** *** ***+LG比较中,厚壁菌门和别样棒菌属是WT组的优势菌群(P<0.05);在Sham组小鼠肠道中,拟杆菌门、拟杆菌纲和拟杆菌目影响较大(P<0.05);在OVX组小鼠,拟杆菌科和拟杆菌属最具差异丰度(P<0.05);而在OVX+LG组,乳杆菌科和乳杆菌属在OVX+LG组肠道中数量较高(P<0.05),差异均具有统计学意义。【结论】LG可改善绝经前后APP/PS1小鼠肠道中有益菌和有害菌的比例,减少其脑内老年斑数量,进而改善其学习记忆能力;LG对APP/PS1小鼠绝经前后部分肠道菌群的变化一致,但亦有差异。推测雌激素缺乏的APP/PS1小鼠存在脂质代谢紊乱,但该现象还有待进一步研究。

关键词：阿尔茨海默病甘草素肠道菌群绝经乳杆菌属

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姜黄素通过增强Rab7的表达促进N2a/APP695swe细胞中的自噬流

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重庆医科大学学报 2021年第8期46卷 863-868页

作者：康清梅梁洁周凡琳张雄李昱重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:观察姜黄素(curcumin)对稳定表达APP695swe的Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞(N2a/APP695swe)中自噬流的作用;再进一步深入探讨其作用于N2a/APP695swe细胞中自噬流的可能机制。方法:首先将细胞分成4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Co... 详细信息

目的:观察姜黄素(curcumin)对稳定表达APP695swe的Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞(N2a/APP695swe)中自噬流的作用;再进一步深入探讨其作用于N2a/APP695swe细胞中自噬流的可能机制。方法:首先将细胞分成4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素组(Curcumin组)。透射电镜观察各组中自噬体形态特点,Western blot检测p62和LC3Ⅱ的表达;并分别运用Western blot及免疫荧光检测Rab7蛋白表达,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测Rab7 mRNA表达。在N2a/APP695swe细胞中分别过表达及沉默Rab7后,将细胞分成5组:Control组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-Rab7组、NC-siRNA组和Rab7-siRNA组。再运用透射电镜观察各组自噬体形态特点,Western blot检测p62和LC3Ⅱ蛋白表达。结果:经姜黄素处理后,透射电镜观察到细胞中的自噬体主要为单层膜结构的自噬溶酶体,同时,自噬活性关键性蛋白LC3Ⅱ的表达增加(P=0.000),而自噬底物蛋白p62的表达减少(P=0.000);Rab7在蛋白水平及mRNA水平均明显升高(P=0.000、0.000)。过表达Rab7后,自噬体主要为单层膜结构的自噬溶酶体,p62蛋白表达明显减少(P=0.000),LC3Ⅱ蛋白表达无明显变化(P=0.669)。沉默Rab7后,自噬体主要为双层膜结构的早期自噬体形态,p62蛋白表达明显增加(P=0.000),LC3Ⅱ蛋白表达无明显变化(P=0.622)。结论:姜黄素促进N2a/APP695swe细胞中的自噬流,其作用机制可能与增强Rab7表达有关。

关键词：阿尔茨海默病姜黄素自噬流 Rab7

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姜黄素通过提高Rab家族蛋白的表达增强N2a/APP695swe细胞的自噬作用

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重庆医科大学学报 2020年第1期45卷 51-57页

作者：周凡琳熊晓敏梁洁张雄李世杰高敏娜李昱重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:研究姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞中自噬和Rab家族蛋白的影响,并且探讨姜黄素调节N2a/APP695swe细胞自噬的可能机制。方法:采用N2a/WT和N2a/APP695swe细胞,并将其分为4个组:N2a/WT组(WT组)、N2a/APP695swe组(APP组)、DMSO溶剂对照组(DMSO组,5μmol/L,24 h)、curcumin处理组(curcumin组,5μmol/L,24 h)。Western blot分别检测各组自噬标志性蛋白LC3BⅡ和底物蛋白SQSTM1的表达,以及Rab家族蛋白Rab1、Rab5、Rab7、Rab9、Rab24和Rab33B的表达;共聚焦显微镜观察免疫荧光进一步验证各组LC3BⅡ与SQSTM1蛋白的表达情况。结果:Western blot结果表示,curcumin组LC3BⅡ蛋白表达量明显高于APP组和DMSO组(0.54±0.02 vs. 0.29±0.09,0.54±0.02 vs. 0.29±0.09,P=0.000);同时,curcumin组SQSTM1蛋白表达量则明显低于APP组(0.67±0.01 vs. 1.02±0.02,P=0.000)。共聚焦显微镜观察免疫荧光实验再次验证了LC3B和SQSTM1蛋白的这种表达趋势。Western blot进一步检测发现,与APP组相比,curcumin组Rab家族蛋白Rab1、Rab5、Rab7和Rab33B的蛋白表达量均明显增加(1.00±0.02 vs. 0.63±0.02,P=0.000;0.94±0.03 vs. 0.79±0.03,P=0.000;0.75±0.00vs. 0.56±0.01,P=0.000;0.88±0.04 vs. 0.59±0.03,P=0.000),而Rab9和Rab24的改变差异无统计学意义(1.04±0.02 vs. 1.06±0.02,P=0.578;0.79±0.00 vs. 0.80±0.00,P=0.067)。结论:姜黄素提高N2a/APP695swe细胞的自噬水平,其机制可能与增强Rab家族蛋白Rab1、Rab5、Rab7和Rab33B的表达有关。

关键词：姜黄素自噬 Rab家族蛋白阿尔茨海默病

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二甲双胍激活AMPK/p53调节尿素循环抑制结肠癌HCT116细胞增殖

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中国药理学通报 2020年第10期36卷 1361-1367页

作者：张滔胡玲唐加峰徐航田宽黄世莹杜玉梅杨周倩李静陈地龙冉建华重庆医科大学基础医学院解剖教研室神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校重庆404120 重庆医科大学公共卫生与管理学院重庆400016

目的探讨二甲双胍(metformin,Met)对HCT116细胞增殖的抑制作用及机制。方法采用CCK-8法检测细胞增殖情况;细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成的能力;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期和凋亡率;免疫荧光染色观察磷酸化腺苷酸... 详细信息

目的探讨二甲双胍(metformin,Met)对HCT116细胞增殖的抑制作用及机制。方法采用CCK-8法检测细胞增殖情况;细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成的能力;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期和凋亡率;免疫荧光染色观察磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶(p-AMPK)的定位情况,Western blot检测p-AMPK、AMPK、p53、p-p53、精氨酸酶1(ARG1)、鸟氨酸转氨甲酰酶(OTC)和鸟氨酸脱羧酶(ODC)的表达情况。结果 CCK-8结果显示:Met呈浓度和时间依赖性抑制细胞的增殖;FCM结果显示:Met能诱导细胞发生凋亡,将细胞周期阻滞于G1期;克隆形成实验显示:Met可以抑制细胞的克隆形成能力;经免疫荧光染色可知:Met处理组细胞胞质及胞核内p-AMPK的表达增加;Western blot结果显示:p-AMPK、p53、p-p53蛋白的表达上调,ARG1、OTC、ODC蛋白的表达下调。结论 Met可抑制结肠癌细胞HCT116的增殖,诱导G1期细胞周期阻滞,促进细胞凋亡;其可能的机制与激活AMPK、p53信号,抑制尿素循环ARG1、OTC和多胺生成限速酶ODC的表达有关。

关键词：二甲双胍 HCT116 p53 ARG1 OTC ODC 增殖

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姜黄素改善N2a/APP695swe细胞线粒体功能和抑制细胞凋亡的作用

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重庆医科大学学报 2018年第2期43卷 155-161页

作者：梁洁康清梅张雄周凡琳高敏娜李昱重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:观察姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞线粒体形态和功能及细胞凋亡的影响;探讨其可能的神经保护机制。方法:实验细胞分为4个组:N2a/APP695组(WT)、N2a/APP695swe组(APP)、溶剂对照组(DMSO,5μmol/L)、姜黄素组(Curcumin,5μmol/L)。流式细胞术分别检测细胞凋亡、活性氧水平和膜电位水平、免疫细胞化学检测细胞色素C的表达、电镜观察细胞线粒体形态的改变,Western blot检测Caspase3、Caspase9蛋白表达,分光光度检测Caspase3、Caspase9酶活性。结果:流式细胞术结果显示,Curcumin组细胞的凋亡率、活性氧水平较APP组明显降低[(0.05±0.01)vs.(0.18±0.01),P=0.000;(49.67±4.16)vs.(197.67±8.08),P=0.000];而Curcumin组线粒体膜电位较APP组升高[(1.00±0.03)vs.(0.64±0.03),P=0.000]。电镜结果发现姜黄素可以减轻线粒体的肿胀,改善其形态。同时免疫细胞化学结果显示姜黄素减少了细胞色素C的释放。Western blot检测发现,与APP组相比,Curcumin组Caspase3、Caspase9蛋白的表达均降低[(0.62±0.12)vs.(1.39±0.10),P=0.000;(0.64±0.20)vs.(1.78±0.03),P=0.000];并且Curcumin组较APP组的Caspase3与Caspase9的活性明显降低[(0.66±0.04)vs.(2.12±0.06),P=0.000;(0.58±0.04)vs.(0.93±0.03),P=0.000]。结论:姜黄素能抑制N2a/APP695swe细胞的凋亡,其机制可能与改善线粒体功能有关。

关键词：姜黄素线粒体阿尔茨海默病凋亡

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重庆医科大学学报 2017年第5期42卷 481-486页

作者：康清梅梁洁张雄周凡琳李丹高敏娜李昱重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:全面研究姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞自噬作用的影响,进一步探讨姜黄素调节N2a/APP695swe细胞自噬的可能机制。方法:将细胞分为4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素处理组(Curcu... 详细信息

目的:全面研究姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞自噬作用的影响,进一步探讨姜黄素调节N2a/APP695swe细胞自噬的可能机制。方法:将细胞分为4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素处理组(Curcumin组,5μmol/L)。Western blot分别检测自噬标志性蛋白LC3Ⅱ和底物蛋白SQSTM1的表达,以及Atg蛋白Beclin1、Atg5、Atg7、Atg12、Atg16L1的表达;免疫荧光法进一步验证SQSTM1蛋白的表达。各组分别转染细胞自噬体指示探针(GFPLC3)和溶酶体红色探针(Lyso Red)后,激光共聚焦显微镜观察自噬体和自噬溶酶体的数量检测自噬流。结果:Western blot结果表明,Curcumin组LC3Ⅱ蛋白表达量较对照组明显增高(0.59±0.03 vs.0.11±0.01,P=0.000);同时,Curcumin组SQSTM1蛋白表达量较对照组明显降低(0.19±0.04 vs.0.66±0.05,P=0.000)。免疫荧光实验再次验证了SQSTM1蛋白的这个表达趋势。共聚焦显微镜观察发现,与对照组相比,Curcumin组细胞内自噬体数量增加(154.67±7.37 vs.89.00±7.21,P=0.000),同时自噬溶酶体数量也显著增加(84.67±12.50 vs.42.33±6.51,P=0.000)。Western blot进一步检测发现,与对照组相比,Curcumin组Atg蛋白Beclin1、Atg7、Atg16L1的表达均明显增加(0.55±0.09 vs.0.10±0.02,P=0.000;0.89±0.12 vs.0.39±0.07,P=0.000;0.36±0.07vs.0.13±0.02,P=0.003),而Atg5和Atg12改变差异无统计学意义(0.79±0.12 vs.0.79±0.10,P=0.470;0.94±0.13 vs.0.87±0.16,P=0.587)。结论:姜黄素增强N2a/APP695swe细胞的自噬水平,其机制可能与提高自噬体形成相关蛋白Beclin1、Atg7、Atg16L1的表达有关。

关键词：姜黄素自噬阿尔茨海默病 Beclin1 Atg7 Atg16L1

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姜黄素通过下调VEGF的表达抑制髓母细胞瘤Daoy细胞增殖的作用研究

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重庆医科大学学报 2017年第9期42卷 1137-1142页

作者：高敏娜张雄康清梅梁洁李昱重庆医科大学基础医学院病理教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:血管的新生与髓母细胞瘤的生长、侵袭和转移密切相关,本实验旨在观察姜黄素对髓母细胞瘤Daoy细胞的生长及其血管生长因子的影响,并探讨可能的机制。方法:体外培养髓母细胞瘤Daoy细胞,然后经不同浓度(5、10、20、40μmol/L)的姜黄... 详细信息

目的:血管的新生与髓母细胞瘤的生长、侵袭和转移密切相关,本实验旨在观察姜黄素对髓母细胞瘤Daoy细胞的生长及其血管生长因子的影响,并探讨可能的机制。方法:体外培养髓母细胞瘤Daoy细胞,然后经不同浓度(5、10、20、40μmol/L)的姜黄素作用不同时间(24、48、72 h)后,通过MTT法检测姜黄素对Daoy细胞生长增殖的影响;ELISA法检测上清液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的生成水平,Western blot检测Daoy细胞中Wnt/β-catenin通路中重要分子β-catenin以及VEGF蛋白水平的表达。结果:MTT结果示空白对照组、DMSO组、5μmol/L组、10μmol/L组、20μmol/L组和40μmol/L组作用24 h后,细胞的抑制率分别为(4.2±0.3)%、(4.3±0.5)%、(6.1±0.3)%、(6.9±0.7)%、(30.5±1.7)%和(40.9±2.4)%,差异具有统计学意义(F_(浓度)=151.997,P=0.000);当20、40μmol/L的姜黄素作用48 h和72 h后,Daoy细胞的增殖抑制率分别为(41.3±2.0)%、(51.2±2.9)%、(48.4±1.6)%和(60.9±3.2)%,相较于作用24 h,差异也具有统计学意义(F_(时间)=281.531,P=0.000;F_(浓度×时间)=269.728,P=0.000)。ELISA结果显示:空白对照组、DMSO对照组、5μmol/L组、10μmol/L组、20μmol/L组、40μmol/L组细胞上清液中VEGF的含量分别为(237.5±2.5)、(248.4±3.0)、(235.6±7.1)、(230.8±3.8)、(198.2±9.9)、(150.5±3.6)pg/m L,差异具有统计学意义(F_(浓度)=30.921,P=0.000)。当20μmol/L和40μmol/L的姜黄素作用48 h和72 h后,Daoy细胞上清液中生成的VEGF含量分别为(170.3±2.7)、(124.6±3.1)、(140.1±13.9)和(111.5±11.6)pg/m L,与作用24 h比较,差异也具有统计学意义(F_(时间)=69.234,P=0.000;F_(浓度×时间)=185.173,P=0.000)。Western blot结果显示,空白对照组、DMSO组、5μmol/L组、10μmol/L组、20μmol/L组和40μmol/L组Daoy细胞内β-catenin蛋白水平表达相对吸光度(absorbance,A)值分别为(0.654±0.021)、(0.873±0.034)、(0.869±0.018)、(0.857±0.024)、(0.472±0.035)和(0.351±0.019)(F_(浓度×时间)=27.813,P=0.000);VEGF蛋白水平的相对A值为(0.781±0.027)、(0.801±0.025)、(0.792±0.034)、(0.750±0.024)、(0.324±0.015)和(0.201±0.012)(F_(浓度)=74.826,P=0.000)。结果还显示,当姜黄素浓度为20μmol/L时,随着药物作用时间的延长,Daoy细胞内β-catenin和VEGF蛋白表达的相对A值明显降低,差异具有统计学意义,呈时间依赖性(F=19.156,P=0.001;F=100.282,P=0.000)。结论:姜黄素可通过下调Wnt/β-catenin通路及下游靶基因VEGF的表达进而抑制Daoy细胞增殖。

关键词：姜黄素髓母细胞瘤 Wnt/β-catenin 血管内皮生长因子

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注射用核糖核酸Ⅱ上调p53诱导人白血病细胞凋亡

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中国药理学通报 2016年第12期32卷 1729-1734页

作者：郭珮冉建华李静陈地龙杨宝学何菲熊伟石雪萍李海星重庆医科大学基础医学院组织细胞工程与干细胞研究室北京100191 重庆医科大学基础医学院解剖学教研室北京100191 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 北京大学医学部基础医学院药理学系北京100191

目的研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人白血病细胞系K562和KG1a细胞凋亡的作用。方法以K562和KG1a细胞为研究对象,采用CCK-8法检测注射用核糖核酸Ⅱ对细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;Hoechst33258染色观察细胞核形态;免疫印... 详细信息

目的研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人白血病细胞系K562和KG1a细胞凋亡的作用。方法以K562和KG1a细胞为研究对象,采用CCK-8法检测注射用核糖核酸Ⅱ对细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;Hoechst33258染色观察细胞核形态;免疫印迹技术检测p53及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3的表达。结果以100~300 mg·L^(-1)注射用核糖核酸Ⅱ处理K562和KG1a细胞12、24、48 h后,CCK-8检测结果显示K562和KG1a细胞的增殖降低,抑制率明显增高,并呈时间剂量依赖性;100、150、200mg·L^(-1)注射用核糖核酸Ⅱ处理K562和KG1a细胞24 h后,FCM结果显示细胞凋亡率随药物剂量增加而增高;Hoechst33258染色观察到细胞核出现染色质浓缩聚集、染色加深等凋亡指征;Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ上调p53、Bax和cleaved caspase-3的表达,下调Bcl-2表达。结论注射用核糖核酸Ⅱ通过上调p53,调控Bcl-2/Bax的表达,激活caspase-3诱导人白血病K562和KG1a细胞凋亡。

关键词：注射用核糖核酸Ⅱ 白血病 p53 K562细胞 KG1a细胞凋亡

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链脲佐菌素致阿尔茨海默病模型大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的变化

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重庆医科大学学报 2015年第5期40卷 687-692页

作者：王华杨容余华荣重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:观察侧脑室(intracerebroventricular,ICV)注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对大鼠脑内m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ICV注射生理盐水,模... 详细信息

目的:观察侧脑室(intracerebroventricular,ICV)注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对大鼠脑内m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ICV注射生理盐水,模型组于第1天和第3天侧脑室注射STZ(ICV-STZ,3 mg/kg)建立AD模型。第1次注射后36 d采用Morris水迷宫检测2组大鼠空间学习和记忆能力的变化;Western blot检测2组大鼠大脑皮质和海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-m TORSer2448)、核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(P70 ribosomal S6 protein kinase,P70S6K)、磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(phosphorylated P70 ribosomal S6 protein kinase,p-P70S6KThr389)、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substract-1,IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(phosphorylated insulin receptor substract-1,p-IRS-1Ser636)蛋白的表达;HE染色观察2组大鼠大脑皮质和海马组织形态学的改变;甲硫素S染色观察2组大鼠脑内Aβ的沉积。结果:Morris水迷宫结果显示ICV-STZ能明显降低大鼠目标象限停留时间[对照组:(55.945±9.447)s,模型组:(31.961±5.346)s,t=8.558,P=0.000]和穿越平台次数[对照组:(7.533±2.560)次,模型组:(2.867±1.506)次,t=6.086,P=0.000];HE染色可见:ICV-STZ大鼠大脑皮质和海马的部分细胞出现了明显的固缩和肿胀;甲硫素S染色发现:在ICV-STZ处理后,大鼠脑内出现Aβ的大量沉积。Western blot结果表明:ICV-STZ能同时增加大鼠大脑皮质p-P70S6KThr389[对照组:(0.268±0.066),模型组:(0.654±0.079),t=-8.409,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组:(0.710±0.092),模型组:(1.033±0.135),t=-4.417,P=0.002]和海马p-P70S6KThr389[对照组:(0.405±0.064),模型组:(0.732±0.077),t=-7.339,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组:(0.498±0.093),模型组:(0.836±0.102),t=-5.496,P=0.001]蛋白的表达,但不影响大鼠大脑皮质和海马P70S6K、m TOR、p-m TORSer2448、IRS-1蛋白的表达。结论:ICV-STZ能增加大鼠脑内m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路的激活,提示异常活化的m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路可能参与了AD的发生发展。

关键词：阿尔茨海默病哺乳动物雷帕霉素靶蛋白核糖体40S小亚基S6蛋白激酶胰岛素受体底物-1

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白藜芦醇通过Sirtuins 1通路促进自噬减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

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基础医学与临床 2015年第4期35卷 496-501页

作者：石瑶郭倩周也涵万丹叶秀峰重庆医科大学基础医学院病理学教研室神经科学研究中心重庆400016

目的观察白藜芦醇(Res)在大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤中脑保护作用与自噬的关系。方法随机将大鼠分成假手术组(S组)、脑缺血/再灌注模型组(I/R组)、低和高剂量(15和40 mg/kg)Res处理组(R1和R2组),其中将R2组另设2个亚组:R2+3-甲... 详细信息

目的观察白藜芦醇(Res)在大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤中脑保护作用与自噬的关系。方法随机将大鼠分成假手术组(S组)、脑缺血/再灌注模型组(I/R组)、低和高剂量(15和40 mg/kg)Res处理组(R1和R2组),其中将R2组另设2个亚组:R2+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组和R2+Sirt1抑制剂Sirtinol组。线栓法构建大鼠I/R模型。缺血2 h,再灌注24 h后,用尼氏染色观察皮质区的组织学形态;用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑组织的梗死体积;用real-time QPCR和Western blot检测脑组织中Sirt1和LC3的mRNA和蛋白表达。结果与S组相比,I/R组大鼠可见明显的脑梗死灶,显微镜下见病理损伤改变,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Sirt1表达均有上升。Res预处理后,能明显减轻I/R大鼠皮质区的病理损伤,减少脑梗死体积(P<0.01),显著增加I/R大鼠脑组织中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Sirt1的表达(P<0.01);而Sirt1抑制剂及3-MA能削弱Res的作用。结论 Res减轻大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用可能与Res通过提高Sirt1的表达进而促进自噬来完成的。

关键词：脑缺血/再灌注损伤白藜芦醇自噬沉默信息调控因子1

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