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重庆医科大学学报 2025年第6期 785-790页

作者：刘峻金陈映汐吕洋重庆医科大学附属第一医院老年科重庆医科大学基础医学院神经科学研究所解剖教研室

目的：探讨声音识别功能在痴呆早期筛查中的应用价值。方法：本研究共纳入170例老年人，其中认知功能受损者55例（A组，n=55），认知功能正常者115例（B组，n=115）。通过简易智力状态检查（mini-mental state examination,MMSE）判断... 详细信息

目的：探讨声音识别功能在痴呆早期筛查中的应用价值。方法：本研究共纳入170例老年人，其中认知功能受损者55例（A组，n=55），认知功能正常者115例（B组，n=115）。通过简易智力状态检查（mini-mental state examination,MMSE）判断受试者是否存在认知功能受损，再通过设计的声音基本辨别和名人声音辨认2种题目，判断受试者是否存在声音识别功能减退，来分析声音识别功能和认知功能间的关系。结果：声音基本辨别题目正确数：A组低于B组，差异有统计学意义（P<0.001）。名人声音辨认题目正确数：A组低于B组，差异有统计学意义（P<0.001）。通过受试者工作特征曲线下面积（area under the receiver operating characteristic curve,AUROC）分析，认知功能与声音基本辨别测试题的相关性为0.180(95%CI=0.108～0.253)，认知功能与名人声音辨认测试题的相关性为AUROC=0.139(95%CI=0.079～0.199)，差异均有统计学意义。声音识别功能测试用于初筛，在保障阴性预测值约90%的前提下，声音基本辨别测试题的分界值为10题（共12题），名人声音辨认测试题为7题（共12题）。结论：认知功能受损老年人和正常老年人，在声音基本辨别和名人声音辨认测试题的表现均具有明显统计学差异，提示声音识别测试可用于早期痴呆患者的筛查，延缓病情进展和减轻医疗负担。

关键词：声音识别功能认知功能痴呆

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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺处理的SH-SY5Y细胞模型的作用及分子机制

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解剖学报 2023年第5期54卷 521-530页

作者：李梦一吴安婷许泽婷张庭李军伟周鹏崔怀瑞孙臣友温州医科大学基础医学院解剖学教研室浙江温州325035 温州医科大学基础医学院神经科学研究所浙江温州325035 温州医科大学基础医学院浙江温州325035

目的探讨调控哺乳动物雷帕霉素蛋白复合物2(mTORC2)/Akt信号通路对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞系是否具有保护作用,并阐明其分子作用机制。方法经维甲酸(RA)处理的SH-SY5Y细胞分别给予6-OHDA、mTORC2信号通路抑制剂PP242和... 详细信息

目的探讨调控哺乳动物雷帕霉素蛋白复合物2(mTORC2)/Akt信号通路对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞系是否具有保护作用,并阐明其分子作用机制。方法经维甲酸(RA)处理的SH-SY5Y细胞分别给予6-OHDA、mTORC2信号通路抑制剂PP242和激动剂A-443654,通过免疫荧光染色观察各组细胞数目的变化;提取细胞总蛋白进行Western blotting和免疫共沉淀(CoIP)实验,明确mTORC2信号通路关键蛋白的表达水平及其相互作用;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。同时制备SH-SY5Y与Bv-2细胞系共培养的帕金森病(PD)模型,运用MTT及ELISA方法检测各组细胞活力及培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素β(IL-1β)的含量。结果6-OHDA损伤的PD细胞模型组酪氨酸羟化酶(TH)/增殖细胞核抗原(PCNA)/Hochest-、TH/5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)-单标或双标阳性细胞数较正常组明显减少,凋亡率升高;Rictor、p-Akt、发育及DNA损伤反应调节蛋白1(REDD1)的表达均上升,且Rictor与p-Akt或REDD1存在相互作用;共培养模型中细胞活力明显降低且上清液中TNF-α和IL-β含量上升。A-443654组随着上述蛋白表达的进一步上调,细胞存活和凋亡以及炎性因子水平均有明显改善,而PP242组则呈现相反的变化。结论A-443654通过使Akt磷酸化而激活mTORC2信号通路,引起Rictor和REDD1蛋白的表达增加,继而提高细胞存活率并降低凋亡率,促进SH-SY5Y细胞的增殖分化,改善了6-OHDA引起的细胞损伤以及抑制了炎症因子的释放。

关键词：帕金森病哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2 PP242 A-443654 免疫荧光 SH-SY5Y细胞系

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激活mTORC2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺模型小鼠多巴胺能神经元和行为学的影响

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解剖学报 2023年第1期54卷 13-22页

作者：边维李梦一周鹏李军伟张庭吴安婷戚双双崔怀瑞孙臣友温州医科大学基础医学院解剖学教研室温州医科大学基础医学院神经科学研究所浙江温州325035 温州医科大学基础医学院浙江温州325035 温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)药剂科浙江温州325035

目的探讨激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)/Akt信号通路对6-羟基多巴胺(6-OHDA)模型小鼠多巴胺能神经元和行为学的影响及可能的机制。方法将36只体重20~25 g 3月龄Nestin-CreERTM::ROSA26-LacZ雄性C57BL/6J小鼠分为NS+玉米油... 详细信息

目的探讨激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)/Akt信号通路对6-羟基多巴胺(6-OHDA)模型小鼠多巴胺能神经元和行为学的影响及可能的机制。方法将36只体重20~25 g 3月龄Nestin-CreERTM::ROSA26-LacZ雄性C57BL/6J小鼠分为NS+玉米油组、6-OHDA+玉米油组、6-OHDA+PP242组、6-OHDA+A-443654组,并在小鼠右侧纹状体注射6-OHDA制备帕金森病(PD)小鼠模型以及每日腹腔注射mTORC2/Akt信号通路激动剂A-443654或抑制剂PP242。通过ELISA测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的水平;免疫组织化学和免疫荧光染色考察黑质(SN)-纹状体小胶质细胞、脑室周围神经前体细胞(NPCs)和多巴胺能神经元数目,Western blotting检测中脑水管mTORC2/Akt信号通路各相关蛋白Rictor,p-Akt和DNA损伤反应调节1(REDD1)的表达并通过免疫共沉淀验证它们之间的相互作用,最后观察各组小鼠行为学的变化。结果6-OHDA模型小鼠伴随小胶质细胞的激活和炎症因子的增加,黑质多巴胺能阳性神经元数目明显下降,小鼠的运动功能发生障碍,但NPCs数目较对照组小鼠明显增加,mTORC2/Akt信号通路相关蛋白表达也明显上调,在激动剂A-443654处理后随着相关蛋白的表达进一步上调,上述各指标均有明显改善,而抑制剂PP242处理组则呈现与激动剂A-443654完全相反的情况。结论A-443654通过上调mTORC2/Akt信号通路关键蛋白促进NPCs的增殖,增加新生多巴胺能神经元的数目并减少小胶质细胞的激活和炎症反应最终导致PD模型小鼠黑质-纹状体多巴胺能神经元和小鼠行为学的改善。

关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2 帕金森病多巴胺能神经元小胶质细胞神经再生免疫印迹法小鼠

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脑膜淋巴管重塑在中枢神经系统疾病中的研究进展

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生命科学 2023年第2期35卷 165-172页

作者：李建涛陈志毅齐淑雅黄青芸谭国鹤广西脑科学研究重点实验室广西医科大学神经科学研究所广西医科大学基础医学院人体解剖学教研室

近年来，随着脑膜淋巴管(meningeal lymphatic vessels, MLVs)研究的进一步深入，越来越多的证据表明MLVs在中枢神经系统疾病的发生发展中扮演着重要角色，而血管内皮生长因子C (vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C)/血管内... 详细信息

近年来，随着脑膜淋巴管(meningeal lymphatic vessels, MLVs)研究的进一步深入，越来越多的证据表明MLVs在中枢神经系统疾病的发生发展中扮演着重要角色，而血管内皮生长因子C (vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C)/血管内皮生长因子受体3 (vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)信号通路在MLVs重塑中起到重要作用。本文拟对VEGF-C/VEGFR-3信号通路的作用机制及其介导的MLVs重塑在阿尔茨海默病、多发性硬化症、创伤性脑损伤等中枢神经系统疾病的发病和进展中的作用进行综述，旨在为中枢神经系统疾病的治疗提供新策略。

关键词：脑膜淋巴管血管内皮生长因子C 血管内皮生长因子受体3 淋巴管重塑中枢神经系统疾病

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免疫球蛋白κJ区重组信号结合蛋白对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响

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解剖学报 2022年第2期53卷 144-154页

作者：叶鑫边维李梦一吴安婷张庭李军伟周鹏崔怀瑞孙臣友温州医科大学基础医学院解剖学教研室浙江温州325035 温州医科大学基础医学院神经科学研究所浙江温州325035 温州医科大学基础医学院基础医学院浙江温州325035

目的探讨免疫球蛋白κJ区的重组信号结合蛋白(RBP-Jκ)对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响及可能的机制。方法分离孕12 d的美国癌症研究所(ICR)胚胎小鼠(3只)侧脑室室管膜细胞进行原代培养,并使用RBP-Jκ-siRNA干扰RBP-Jκ,以及选... 详细信息

目的探讨免疫球蛋白κJ区的重组信号结合蛋白(RBP-Jκ)对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响及可能的机制。方法分离孕12 d的美国癌症研究所(ICR)胚胎小鼠(3只)侧脑室室管膜细胞进行原代培养,并使用RBP-Jκ-siRNA干扰RBP-Jκ,以及选用2~3月龄体重为20~25 g的CD133-CreER^(TM)::ROSA26-LacZ::RBP-Jκ^(flox/flox)小鼠(3只),通过腹腔注射他莫昔芬(TAM)敲除RBP-Jκ,通过免疫荧光双标染色检测CD133阳性室管膜细胞的增殖和分化变化的情况,最后通过Real-time PCR、Western blotting检测RBP-Jκ及其上下游相关分子表达情况。结果干扰或敲除RBP-Jκ后,无论是细胞还是动物水平CD133或β-半乳糖苷酶(β-GAL)/双肾上腺皮质激素(DCX)/β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)、CD133或β-GAL/微管相关蛋白2(MAP-2)或神经元核抗原(NeuN)、CD133或β-GAL/增殖细胞核抗原(PCNA)双阳性细胞数目均明显增加。同时Real-time PCR和Western blotting结果表明,在干扰或敲除RBP-Jκ后RBP-Jκ-和Splity多毛增强子1(Hes1)mRNA及蛋白表达量均显著下降,而Notch1 mRNA及蛋白的表达量反而显著增加。结论干扰或敲除RBP-Jκ,通过Notch1表达上调、Hes1表达下调,最终引起CD133阳性室管膜细胞的增殖与分化增加。

关键词： CD133阳性室管膜细胞 Notch信号通路免疫球蛋白κJ区重组信号结合蛋白免疫荧光小鼠

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组蛋白去乙酰化在癫痫发病及治疗中的研究新进展

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中华神经医学杂志 2023年第4期22卷 422-428页

作者：赵嘉欣史俊林谭国鹤广西脑科学研究重点实验室广西医科大学神经科学研究所广西医科大学基础医学院人体解剖学教研室南宁530021 长寿与老年相关疾病教育部重点实验室广西医科大学转化医学研究中心南宁530021

癫痫是一种复杂的神经系统疾病,其发病机制至今尚未明确。越来越多的证据表明,癫痫与组蛋白去乙酰化等表观遗传学机制密切相关。组蛋白去乙酰化酶抑制剂参与保护神经发生和调节多种神经信号级联反应,是一种潜在的癫痫靶向治疗药物。本... 详细信息

癫痫是一种复杂的神经系统疾病,其发病机制至今尚未明确。越来越多的证据表明,癫痫与组蛋白去乙酰化等表观遗传学机制密切相关。组蛋白去乙酰化酶抑制剂参与保护神经发生和调节多种神经信号级联反应,是一种潜在的癫痫靶向治疗药物。本文就组蛋白去乙酰化在癫痫发病机制中的研究进展以及组蛋白去乙酰化酶抑制剂在癫痫治疗中的应用前景作一综述。

关键词：癫痫组蛋白去乙酰化组蛋白去乙酰化酶抑制剂

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别孕烯醇酮对6-羟基多巴胺损伤的细胞系SH-SY5Y的保护作用

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解剖学报 2021年第1期52卷 5-13页

作者：王彤彤叶鑫边维陈治池杜娟娟傅维达陈梦娇李俊楠孙臣友温州医科大学基础医学院人体解剖学教研室浙江温州325035 台州职业技术学院医学与制药工程学院护理教研室浙江台州318000 温州医科大学基础医学院神经科学研究所浙江温州325035 温州医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室浙江温州325035 温州医科大学第一临床医学院、医学影像学本科浙江温州325035

目的明确别孕烯醇酮(APα)对6-羟多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞系的保护作用,并阐明可能的分子机制。方法向体外培养的SH-SY5Y细胞系中分别加入6-OHDA、APα、γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)拮抗剂荷包牡丹碱(Bic)和电压门控L型Ca^(2+)通... 详细信息

目的明确别孕烯醇酮(APα)对6-羟多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞系的保护作用,并阐明可能的分子机制。方法向体外培养的SH-SY5Y细胞系中分别加入6-OHDA、APα、γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)拮抗剂荷包牡丹碱(Bic)和电压门控L型Ca^(2+)通道拮抗剂硝苯地平(nifedipine),采用免疫荧光细胞化学染色方法观察不同组别酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞的变化,Western blotting检测胞质钙调蛋白(CaM)、钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ3(Ca MKⅡδ3),胞核Ca MKⅡδ3、脑源性神经营养因子(BDNF)和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK1)表达的变化,采用蛋白质免疫共沉淀验证Ca MKⅡδ3与CDK1/BDNF的相互作用。结果APα作用后,6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞TH和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)阳性细胞数目均明显增加,而TH/Brd U双阳性细胞数目无显著变化;同时Western blotting结果表明,SH-SY5Y细胞胞质和胞核上述蛋白的表达与单纯6-OHDA组相比也明显上升,经Bic处理后各蛋白增加更为明显。免疫共沉淀结果表明,Ca MKⅡδ3与CDK1/BDNF存在相互作用。结论APα对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞的保护中,GABAAR发挥负性调控作用,通过稳定细胞的内环境达到增加TH阳性神经元数量的目的,其中Ca^(2+)-Ca M-CaMKⅡδ3信号通路和BDNF与CDK1发挥了关键作用。

关键词：别孕烯醇酮 γ-氨基丁酸A受体多巴胺能神经元钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 脑源性神经营养因子免疫印迹法

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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物在神经发生中的研究进展

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神经解剖学杂志 2021年第3期37卷 367-370页

作者：陈梦娇李俊楠傅维达王彤彤叶鑫边维李梦一孙臣友温州医科大学第一临床医学院温州325035 温州医科大学基础医学院人体解剖学教研室温州325035 温州医科大学基础医学院神经科学研究所温州325035

神经发生过程失调可导致多种神经功能障碍,引起一系列的神经病症,如癫痫和自闭症等。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通过整合细胞内信号来控制细胞生长、营养代谢和蛋白质翻译,同时也参与调节大脑发育过程中神经元的增殖、分化、迁移和... 详细信息

神经发生过程失调可导致多种神经功能障碍,引起一系列的神经病症,如癫痫和自闭症等。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通过整合细胞内信号来控制细胞生长、营养代谢和蛋白质翻译,同时也参与调节大脑发育过程中神经元的增殖、分化、迁移和树突形成等。此外,mTOR在突触形成和可塑性方面也起着重要作用。多种神经系统发育的严重缺陷与mTOR活动异常有关,解析mTOR在神经发生关键时期的广泛作用将极大地扩展我们对神经发生的理解。本文根据近年来的文献及研究就mTOR复合物在神经发生中的作用作一综述。

关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白神经干细胞神经发生

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别孕烯醇酮对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的影响及可能的分子机制

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解剖学报 2020年第4期51卷 473-482页

作者：王彤彤陈治池叶鑫边维杜娟娟傅维达陈梦娇李俊楠孙臣友温州医科大学基础医学院人体解剖学教研室浙江温州325035 台州职业技术学院医学与制药工程学院浙江台州318000 温州医科大学基础医学院神经科学研究所浙江温州325035 温州医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室浙江温州325035 温州医科大学第一临床医学院浙江温州325035

目的探讨别孕烯醇酮(APα)对帕金森病(PD)小鼠黑质-纹状体多巴胺能系统及行为学的影响及可能的分子机制。方法90只3月龄体重为20~25 g雄性C57BL/6小鼠1侧纹状体被注射6-羟多巴胺(6-OHDA)复制小鼠PD模型,再给予APα及γ-氨基丁酸A受体(GA... 详细信息

目的探讨别孕烯醇酮(APα)对帕金森病(PD)小鼠黑质-纹状体多巴胺能系统及行为学的影响及可能的分子机制。方法90只3月龄体重为20~25 g雄性C57BL/6小鼠1侧纹状体被注射6-羟多巴胺(6-OHDA)复制小鼠PD模型,再给予APα及γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)拮抗剂荷包牡丹碱(Bic)。采用ELISA检测血清及大脑皮质APα含量和纹状体多巴胺水平,免疫组织化学法检测黑质多巴胺能神经元及其纹状体纤维投射数量的变化,Western blotting检测中脑胞膜GABAAR、胞质及胞核各蛋白水平的变化,并通过免疫共沉淀验证它们之间的相互作用,观察小鼠行为学的变化。结果PD小鼠大脑皮质内源性APα水平显著降低,黑质多巴胺能阳性神经元及其纹状体纤维投射含量下降,胞膜、胞质和胞核各蛋白的水平也明显下降,小鼠的运动功能发生障碍。在给予外源性APα处理后,上述情况均有所改善。但在应用Bic后,上述调控GABAAR/钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ3/脑源性神经营养因子信号呈现相反的变化,免疫共沉淀结果显示,蛋白之间存在相互作用。结论外源性的APα通过增加其内源性水平调控GABAAR/钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ3/脑源性神经营养因子信号通路促进PD模型小鼠黑质-纹状体多巴胺能神经系统和小鼠行为学的改善。

关键词：别孕烯醇酮帕金森病多巴胺能神经元钙离子-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱδ3 脑源性神经营养因子免疫印迹法小鼠

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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路在帕金森病中的作用

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解剖学杂志 2021年第4期44卷 337-341页

作者：边维李梦一余心悦周鹏崔怀瑞戚双双孙臣友温州医科大学基础医学院人体解剖学教研室温州325035 温州医科大学基础医学院神经科学研究所温州325035 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院温州325035

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,调控细胞生长、增殖、运动、存活和自噬等生物学活动,作为细胞代谢和生存的关键调节剂,现已成为帕金森病(PD)的新型治疗靶点。越来越多的研究表明,在PD模型中恢复受干扰... 详细信息

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,调控细胞生长、增殖、运动、存活和自噬等生物学活动,作为细胞代谢和生存的关键调节剂,现已成为帕金森病(PD)的新型治疗靶点。越来越多的研究表明,在PD模型中恢复受干扰的mTOR信号转导可以预防神经元的死亡。然而,在PD中通过mTOR介导产生作用的分子机制尚未完全清楚。现将mTOR信号通路与PD关系的最新进展进行综述,并进一步讨论mTOR信号通路在PD中的潜在作用。

关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白帕金森病雷帕霉素 α-突触核蛋白氧化应激

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