检索结果-内蒙古大学图书馆

分析化学 2012年第4期40卷 551-555页

作者：蒋凤杨军王振宇胡宁郑小林谢琳杨忠陈洁重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆医科大学附属儿童医院儿童营养研究中心

利用旋转蒸发法制作基于大豆卵磷脂的一种大型脂质体,在微电极阵列芯片上进行脂质体电融合实验研究。在电融合过程中,利用介电电泳力实现脂质体在微流控芯片中的排队,再利用高场强的电脉冲使脂质体膜发生可逆性电穿孔,在持续的介电电泳... 详细信息

利用旋转蒸发法制作基于大豆卵磷脂的一种大型脂质体,在微电极阵列芯片上进行脂质体电融合实验研究。在电融合过程中,利用介电电泳力实现脂质体在微流控芯片中的排队,再利用高场强的电脉冲使脂质体膜发生可逆性电穿孔,在持续的介电电泳力作用下,使穿孔的脂质体实现融合。芯片上脂质体的融合率可以达到20%左右。而且,玻璃基底材料和低深宽比的通道结构更有利于脂质体融合过程的观察与控制。

关键词：微流控脂质体介电电泳电融合微电极

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基于薄膜电极的细胞电融合芯片

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高等学校化学学报 2012年第8期33卷 1698-1702页

作者：张小玲杨军胡宁侯文生郑小林谢琳杨忠陈洁重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室重庆400030 第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆400042 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 重庆医科大学附属儿童医院儿童营养研究中心重庆400014

构建了一种薄膜电极阵列结构的细胞电融合芯片,通过多聚物微通道底/顶层凸齿状的微电极,以及多聚物微通道侧壁上溅射形成的一层离散式金属薄膜电极,共同形成离散式"三明治"微电极结构.该微电极结构可在微通道内部形成与传统... 详细信息

构建了一种薄膜电极阵列结构的细胞电融合芯片,通过多聚物微通道底/顶层凸齿状的微电极,以及多聚物微通道侧壁上溅射形成的一层离散式金属薄膜电极,共同形成离散式"三明治"微电极结构.该微电极结构可在微通道内部形成与传统凸齿状电极相似的非均匀分布的梯度电场,通过介电电泳效应进行细胞控制及排队.利用多聚物在芯片上填充了传统凸齿状电极的凹陷区,克服了细胞在凹陷区无法有效排队与融合的缺点.在芯片上利用K562细胞开展了基于介电电泳效应的细胞排队实验及基于可逆性电穿孔效应的电融合实验,结果表明该芯片能够较好地实现细胞排队及融合,融合所需控制电压低至10 V左右.细胞排队率达99%以上,几乎无细胞在绝缘物填充区(传统凸齿电极芯片的凹陷区)滞留,细胞两两排队高于60%,细胞融合效率约为40%,比传统的细胞电融合方法和凸齿电极芯片有较大提高.

关键词：薄膜电极细胞电融合微流控芯片排队电穿孔

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MK-801诱导的精神分裂症小鼠模型中胼胝体髓鞘损伤的研究

MK-801诱导的精神分裂症小鼠模型中胼胝体髓鞘损伤的研究

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中国解剖学会2012年年会

作者：修芸张蕾陈林卢伟仇玄高原彭超程国华李永德唐勇重庆医科大学生命科学研究院重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室

＜正＞白质功能紊乱可能参与精神分裂症的发病是新近研究的热点。本实验采用c57BL/6J小鼠48只,随机分为模型组和对照组。模型组连续2周腹腔注射NMDA受体阻断剂MK-801（0.25 mg/kg/d）,对照组则注射等体积的0.9%生理盐水。造模完成后第4...

＜正＞白质功能紊乱可能参与精神分裂症的发病是新近研究的热点。本实验采用c57BL/6J小鼠48只,随机分为模型组和对照组。模型组连续2周腹腔注射NMDA受体阻断剂MK-801（0.25 mg/kg/d）,对照组则注射等体积的0.9%生理盐水。造模完成后第48 h及第2周分别进行旷场试验、探孔试验测试行为学改变,随后取各组小鼠大脑组织切片行碱性髓鞘蛋白（myelin basic protein,MBP）免疫组化染色和电镜下观察胼胝体。结果显示:造

关键词：

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当归多糖对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞细胞周期及细胞凋亡的影响

当归多糖对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞细胞周期及细胞凋亡的影响

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中国解剖学会2012年年会

作者：张雁芮永军糜菁熠吴宏无锡市第九人民医院重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室

探讨当归多糖(APS)对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞(BMNCs)细胞周期及细胞凋亡的影响,旨在阐明APS防护辐射性造血损伤的分子机制。本实验中BALB/c小鼠随机分为3组:正常对照组、生理盐水(NS)组和APS组。NS组和APS组小鼠全身均匀照射X射线,... 详细信息

探讨当归多糖(APS)对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞(BMNCs)细胞周期及细胞凋亡的影响,旨在阐明APS防护辐射性造血损伤的分子机制。本实验中BALB/c小鼠随机分为3组:正常对照组、生理盐水(NS)组和APS组。NS组和APS组小鼠全身均匀照射X射线,照射后腹腔注射给药NS和8 mg/kg APS,0.2 ml/次/d,连续6 d,第7天计数外周血WBC、RBC、PLT及

关键词：当归多糖细胞周期细胞凋亡放射损伤骨髓单个核细胞

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结缔组织对人胎骨髓间充质干细胞向上皮分化的诱导作用

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解剖学报 2011年第1期42卷 119-123页

作者：田静段江洁张建华姜蓉汪维伟重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学临床学院产科重庆400016

目的探讨结缔组织诱导人胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为上皮细胞的机制。方法取20例孕16～20周因故引产胎儿,10例选择性剖宫产妇羊膜,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测去上皮羊膜和胎儿肠壁结缔组织中表皮生长因子(EGF)的含量;分离、... 详细信息

目的探讨结缔组织诱导人胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为上皮细胞的机制。方法取20例孕16～20周因故引产胎儿,10例选择性剖宫产妇羊膜,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测去上皮羊膜和胎儿肠壁结缔组织中表皮生长因子(EGF)的含量;分离、培养、扩增胎儿BMSCs;将4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记的第3代BMSCs(P3-BMSCs)种植于羊膜上,分别加入肠壁结缔组织上清液、羊膜上清液(均含EGF 30μg/L)、外源性EGF 30ug/L、30ng/L、完全培养基(1～5组)中。培养7d后,免疫组织化学和激光扫描共焦显微镜检测BMSCs表达的细胞角蛋白(CK)及CK20。结果每100mg肠壁结缔组织及羊膜中EGF含量分别为(320.22±0.257)pg、(299.20±0.994)pg。羊膜与肠壁结缔组织上清液或羊膜上清液联合诱导BMSCs后,其CK和CK20阳性细胞率均明显强于羊膜与外源性EGF诱导组以及单纯羊膜诱导组,P<0.01。羊膜与肠壁结缔组织上清液诱导后BMSCs表达CK20高于羊膜与羊膜上清液组,P<0.05。羊膜诱导组与外源性EGF联合诱导组间的差异无统计学意义。结论直接接触可能是羊膜结缔组织诱导BMSCs向上皮细胞分化的机制之一。肠壁结缔组织上清液和羊膜上清液均能联合羊膜诱导BMSCs向上皮细胞及具有肠上皮细胞表型的细胞分化。

关键词：羊膜结缔组织骨髓间充质干细胞诱导分化免疫组织化学人胎

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胼胝体额区有髓神经纤维髓鞘超微结构老年改变的体视学研究

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第三军医大学学报 2011年第23期33卷 2476-2479页

作者：卢芳张蕾卢伟徐瑲姜蓉龚霞闵琦埕唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨大鼠胼胝体额区有髓神经纤维髓鞘超微结构的老年性改变。方法运用电子显微镜和三维体视学方法分别对年轻组(6月龄)、中老年组(18月龄)和老年组(27月龄)雌性Long-Evans大鼠大脑胼胝体额区有髓神经纤维超微结构进行定量研究。结... 详细信息

目的探讨大鼠胼胝体额区有髓神经纤维髓鞘超微结构的老年性改变。方法运用电子显微镜和三维体视学方法分别对年轻组(6月龄)、中老年组(18月龄)和老年组(27月龄)雌性Long-Evans大鼠大脑胼胝体额区有髓神经纤维超微结构进行定量研究。结果年轻组、中老年组和老年组的有髓神经纤维轴突平均直径(内径)、有髓神经纤维平均直径(外径)、平均内周长、平均外周长、髓鞘平均厚度均未见显著性改变。将有髓神经纤维髓鞘厚度按<0.2μm、0.2～0.4μm(不含0.4,以下类推)、0.4～0.6μm、0.6～0.8μm、0.8～1.0μm、≥1.0μm 6个段分别进行统计分析,结果显示,在0.2～0.4μm直径段内,中老年组和老年组髓鞘厚度较年轻组均存在显著降低(P<0.05);在0.4～0.6μm直径段内,老年组髓鞘厚度较年轻组存在显著性降低(P<0.05);在0.6～0.8μm直径段内,老年组髓鞘厚度较中老年组显著性降低(P<0.05)。结论胼胝体额区有髓神经纤维尤其是小直径的有髓神经纤维髓鞘厚度存在显著老年性降低。

关键词：有髓神经纤维髓鞘胼胝体额区体视学

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小鼠造血干细胞衰老体内模型构建及相关生物学研究

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重庆医科大学学报 2011年第4期36卷 385-388页

作者：蔡世忠周玥姜蓉杨斌王亚平重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:构建小鼠造血干细胞(Homatopoietic stemcell,HSCs)衰老体内模型,并探讨其生物学特点,为延缓HSCs衰老的研究提供平台。方法:免疫磁性分选法分离、纯化雄性鼠的Sca-1+HSCs,流式细胞术鉴定分选纯度,免疫荧光检测Sca-1表达。将1×... 详细信息

目的:构建小鼠造血干细胞(Homatopoietic stemcell,HSCs)衰老体内模型,并探讨其生物学特点,为延缓HSCs衰老的研究提供平台。方法:免疫磁性分选法分离、纯化雄性鼠的Sca-1+HSCs,流式细胞术鉴定分选纯度,免疫荧光检测Sca-1表达。将1×104个雄性供体鼠Sca-1+HSCs经尾静脉移植给9Gy60Coγ射线全身辐射的雌性受体鼠。PCR检测移植后受体鼠造血细胞Y染色体性别决定(Sex-determining region of Ychromosome,Sry)基因,混合造血祖细胞集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分析HSCs衰老的生物学特点;计数受体鼠脾集落形成单位(CFU-S)、测定脾脏和胸腺指数,检测受体鼠外周血指标(WBC、RBC、PLT、HCT),评价供体鼠Sca-1+HSCs在受体鼠内衰老和造血功能重建情况。结果:免疫磁性分选法得到的Sca-1+HSCs纯度达87.2%以上。雌性受体鼠的造血细胞均能检测出342 bp的Sry基因。供体鼠Sca-1+HSCs连续2次移植后,形成CFU-Mix集落数量和形成集落的细胞数明显减少;HSCs出现G1期阻滞,G0+G1期细胞比例增高,S期比例下降;SA-β-Gal染色阳性细胞百分率明显增高;脾脏与胸腺指数明显降低;CFU-S形成能力下降;外周血各项指标均有下降。结论:雄性供体Sca-1+HSCs移植能有效重建受体鼠造血功能,连续尾静脉移植2次能初步建立HSCs复制性衰老的体内模型。

关键词：造血干细胞衰老体内模型连续移植生物学研究

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人胚胎生殖细胞饲养层的制备

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重庆医科大学学报 2011年第12期36卷 1440-1444页

作者：姜蓉黎晓莉吴宏王璐重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:建立稳定高效的人包皮成纤维细胞(Human foreskin fibroblasts,HFF)饲养层培养体系,用于培养人胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells,EGCs)。方法:取4～5岁小儿包皮,采用机械法和组织消化法分离、培养成纤维细胞,倒置相差显微镜观察... 详细信息

目的:建立稳定高效的人包皮成纤维细胞(Human foreskin fibroblasts,HFF)饲养层培养体系,用于培养人胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells,EGCs)。方法:取4～5岁小儿包皮,采用机械法和组织消化法分离、培养成纤维细胞,倒置相差显微镜观察细胞生长状况,免疫细胞化学法、MTT法、流式细胞术检测细胞纯度、生长曲线及细胞周期,筛选丝裂霉素C作用的最佳浓度和时间。分离5～11周人胚胎原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)并培养于经丝裂霉素C处理的HFF饲养层上,观察人EGCs生长情况。结果:机械法和组织消化法结合分离HFF方法可靠,纯度高,细胞生长活性好,能快速进入对数生长期,细胞周期与细胞生长曲线保持一致,细胞可以传60代以上,P3～P30代均适宜作饲养层;丝裂霉素C抑制细胞增殖的适宜浓度及时间为12.5 mg/L作用2.5 h;分离的人PGCs在该饲养层上培养可形成典型的EGCs集落,体外连续培养超过3代。结论:HFF饲养层能有效地支持人EGCs的生长。

关键词：人胚胎生殖细胞包皮成纤维细胞饲养层

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硝普钠促进静脉移植BMSCs向溃疡性结肠炎大鼠结肠的迁移

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重庆医科大学学报 2011年第2期36卷 152-155页

作者：陈晓云徐艳华姜蓉汪维伟重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:观察硝普钠能否促进静脉移植的大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis,UC)大鼠结肠的迁移。方法:分离培养4、’,6-二脒基-2-苯基吲哚盐酸(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)荧光标记SD大鼠BMSCs。免疫复合法建立UC大鼠模型,1、2组UC大鼠均经尾静脉注射DAPI标记BMSCs的细胞悬液,2组细胞悬液还含0.2 mg/kg体重的硝普钠。移植后第7、14天各处死5只大鼠,取溃疡及非溃疡部位结肠做恒冷切片,荧光显微镜下分别计数各组DAPI标记BMSCs在溃疡及非溃疡部位结肠的细胞数。结果:移植第7、14天,2组结肠溃疡部位阳性细胞数均明显高于非溃疡部位(P<0.01);移植第7天,2组溃疡及非溃疡部位的阳性细胞数均高于1组(P<0.05)。结论:静脉移植BMSCs的同时给予硝普钠能促进BMSCs向结肠溃疡部位的迁移。

关键词：骨髓间充质干细胞移植溃疡性结肠炎硝普钠

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结缔组织生长因子全长及其缺失突变体重组腺病毒的构建和鉴定

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重庆医科大学学报 2011年第8期36卷 949-953页

作者：孙双双陈红唐敏施琼黎玉叶王建伟周兰何通川左国伟重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的:结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)含有4个不同功能结构域,构建表达带有3×Flag标签的全长基因及5个缺失突变体的重组腺病毒,以研究CTGF各结构域的功能和作用机制。方法:通过聚合酶链反应(Polymerasecha... 详细信息

目的:结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)含有4个不同功能结构域,构建表达带有3×Flag标签的全长基因及5个缺失突变体的重组腺病毒,以研究CTGF各结构域的功能和作用机制。方法:通过聚合酶链反应(Polymerasechain reaction,PCR)等克隆方法制备目标质粒DNA,然后通过腺病毒穿梭载体与骨架载体的重组、包装构建全长CTGF和缺失突变体重组腺病毒。用anti-Flag抗体作为一抗做Western blot检测目的基因表达情况。结果:通过腺病毒基因组DNA PCR确认有CTGF全长和缺失突变体的存在;Western blot法验证了CTGF全长和缺失突变体的表达。结论:成功构建了6个表达CTGF全长和缺失突变体的重组腺病毒,为进一步研究CTGF的结构域功能奠定了基础。

关键词：结缔组织生长因子缺失突变体重组腺病毒

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