目的 分析帕金森病（PD）患者自主神经功能障碍在快速眼动睡眠行为障碍（RBD）和日常生活能力之间的纵向中介作用及其随时间的变化趋势。方法 本研究纳入帕金森进展标志物计划（PPMI）数据库410例PD患者资料，分别采用快速眼动睡眠行为障碍筛查量表（RBDSQ）、自主神经症状量表（SCOPA-AUT）和帕金森病统一评价量表第二部分（UPDRS II）评估RBD、自主神经功能障碍和日常生活能力。以RBD为自变量，自主神经功能障碍为中介变量，日常生活能力为因变量构建潜变量增长曲线中介模型。采用全息极大似然估计进行参数估计，偏差校正的非参数百分位Bootstrap法进行中介效应检验，Chi-Square(df)、非规范拟合指数（Tucker Lewis index,TLI）、比较拟合指数（comparative fit index,CFI）指标来评价模型的拟合度。结果 相关分析显示，RBD、自主神经功能障碍、日常生活能力六次随访两两之间均呈正相关（P<0.01）。潜变量增长曲线中介模型结果显示，快速眼动睡眠障碍的截距→日常生活能力的截距的总效应显著（β=0.427,95%CI:0.310～0.534），快速眼动睡眠障碍的截距→自主神经功能障碍的截距→日常生活能力的截距的间接效应显著（β=0.231,95%CI:0.158～0.324），快速眼动睡眠障碍的截距→日常生活能力得分的截距的直接效应显著（β=0.196,95%CI:0.045～0.331）。快速眼动睡眠障碍的斜率→自主神经功能障碍的斜率→日常生活能力的斜率的间接效应显著（β=0.272,95%CI:0.112～0.509），但快速眼动睡眠障碍的斜率→日常生活能力的斜率的总效应不显著（β=0.030,95%CI:-0.189～0.270），快速眼动睡眠障碍的斜率→日常生活能力的斜率的直接效应不显著（β=-0.242,95%CI:-0.515～0.016）。结论 PD患者自主神经功能障碍在RBD和日常生活能力之间的纵向中介效应显著，RBD的症状通过自主神经功能障碍症状的加重从而影响患者的日常生活能力。因此，在PD早期可对自主神经功能采取有效的预防和干预措施，提高PD患者日常生活能力水平。
目的探究雌二醇(E2)结合其重组人雌激素受体β(ESR2)对C28I2细胞增殖和凋亡的效应。方法PCR扩增ESR2序列并构建腺病毒重组质粒pAd-ESR2,在HEK293细胞中包装重组腺病毒Ad-ESR2。用Ad-ESR2和ESR2-siRNA处理人正常软骨细胞C28I2,分别设置对照组(C28I2+DMSO)、E2组(C28I2+E2)、Ad-ESR2组(C28I2+DMSO+Ad-ESR2)、E2+Ad-GFP组(C28I2+E2+Ad-GFP)、E2+Ad-ESR2组(C28I2+E2+Ad-ESR2)、E2+sicontrol组(C28I2转染sicontrol+E2)、E2+ESR2-si1组(C28I2转染ESR2-si1+E2)、E2+ESR2-si3组(C28I2转染ESR2-si3+E2)。免疫印迹测定ER Stress和细胞凋亡相关蛋白表达,qRT-PCR检测增殖相关标志基因的表达,借助EdU试剂盒和流式细胞术测定细胞增殖和凋亡情况。使用ERK通路抑制剂U0126分别设定E2组、E2+U0126组(C28I2+E2+U0126)、E2+Ad-ESR2组、E2+Ad-ESR2+U0126组(C28I2+E2+Ad-ESR2+U0126)。通过免疫印迹实验探究C28I2细胞中E2通过ERβ调控ERK信号通路影响ER stress和凋亡。结果成功构建过表达腺病毒Ad-ESR2和靶向ESR2的siRNA;过表达Ad-ESR2能够促进E2处理后IRE1α[1.20±0.06 vs 0.95±0.05,P<0.05]、PERK[1.29±0.04 vs 1.03±0.02,P<0.05]和XBP1s[1.17±0.03 vs 0.82±0.02,P<0.05]的表达,促进凋亡Cleaved Caspase12(P<0.05)、抑制增殖相关标志基因PCNA(P<0.05)、CyclinB1(P<0.05)、CyclinD1(P<0.05)的表达,且ERK磷酸化激活降低(P<0.05);转染ESR2-siRNA后,细胞的内质网应激相关蛋白和细胞凋亡相关蛋白的表达降低,与细胞增殖相关的基因被上调,且细胞内pERK/ERK比值相对增加。经特异性ERK通路抑制剂U0126处理后,雌二醇结合ERβ促进的内质网应激蛋白及细胞凋亡蛋白的表达被拮抗。结论雌二醇靶向ERβ通过激活ERK通路磷酸化调控内质网应激及凋亡,进而抑制软骨细胞增殖。
暂无评论