检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2010年第6期23卷 605-608,612页

作者：姜歆彭真年熊学华孙迪重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

目的观察溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA)对人卵巢癌细胞SKOV3 P120catenin(P120ctn)表达的影响,探讨LPA和P120ctn在卵巢癌发生发展中的作用机制。方法将不同浓度的LPA作用于SKOV3细胞,MTT法检测细胞的增殖率;以最佳浓度的LPA及... 详细信息

目的观察溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA)对人卵巢癌细胞SKOV3 P120catenin(P120ctn)表达的影响,探讨LPA和P120ctn在卵巢癌发生发展中的作用机制。方法将不同浓度的LPA作用于SKOV3细胞,MTT法检测细胞的增殖率;以最佳浓度的LPA及不同浓度的酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein作用于SKOV3细胞,MTT法检测细胞的增殖抑制率;将SKOV3细胞分为3组:对照组、LPA组和LPA+Genistein组,分别于培养6、12、24h,采用免疫荧光细胞化学法和Western blot分析P120ctn表达的变化,RT-PCR法检测P120ctn基因mRNA的转录水平。结果 20μmol/LLPA作用24h促进SKOV3细胞增殖的作用最强,而200μmol/LGenistein对LPA促进SKOV3细胞增殖有明显的抑制作用。LPA可诱导SKOV3细胞膜中P120ctn的表达减少,胞质中的表达增多;而Genistein与LPA共同作用后,P120ctn在细胞膜中的表达增多,而在胞质中的表达减少。结论 LPA可诱导SKOV3细胞中P120ctn表达的改变,其机制可能与相关的酪氨酸蛋白激酶磷酸化有关。

关键词：溶血磷脂素类 P120catenin 蛋白酪氨酸激酶蛋白激酶抑制剂卵巢肿瘤

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人结肠癌细胞株CW-2干细胞富集方法的比较

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第三军医大学学报 2010年第9期32卷 912-916页

作者：刘美李少林陈宓李小青龙浩重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016

目的比较3种细胞分选方法对人结肠癌细胞株CW-2干细胞的富集效率,探讨获得肿瘤干细胞的有效方法。方法采用单纯无血清悬浮培养、无血清悬浮培养+奥沙利铂、无血清悬浮培养+奥沙利铂+流式细胞术(多重联合)分别富集人结肠癌细胞株CW-2干细... 详细信息

目的比较3种细胞分选方法对人结肠癌细胞株CW-2干细胞的富集效率,探讨获得肿瘤干细胞的有效方法。方法采用单纯无血清悬浮培养、无血清悬浮培养+奥沙利铂、无血清悬浮培养+奥沙利铂+流式细胞术(多重联合)分别富集人结肠癌细胞株CW-2干细胞;应用流式细胞术、NOD-SCID小鼠致瘤实验和Transwell侵袭实验比较3种方法的富集效率;分别测量不同时间点(4、7、9、14、21、28d)各组小鼠成瘤情况;免疫组化检测移植瘤中CD44和EPCAM的表达情况。结果无血清悬浮培养细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞和多重联合分选细胞中具有结肠癌干细胞特性的CD44+EPCAM+细胞,细胞比例分别为57.39%、73.85%、89.57%;多重联合分选细胞接种NOD-SCID小鼠后成瘤时间早、瘤体增长速度快,各时间点体积分别为(209.25±31.54)、(500.00±72.90)、(852.75±157.51)、(2280.00±440.91)、(4897.00±1154.15)、(11070.00±3559.86)mm3,与无血清悬浮培养细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞的成瘤能力比较差异有统计学意义(P<0.05);单纯无血清悬浮培养细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞和多重联合分选后细胞接种72h后穿过人工基底膜的细胞数分别为(98±7)/视野、(135±7)/视野、(188±6)/视野,3组之间差异有统计学意义(P<0.05);各组移植瘤中均表达CD44和EPCAM。3种分选方法所获得细胞中干细胞含量由高到低为:多重联合分选后细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞、单纯无血清悬浮培养细胞。结论多重联合法富集肿瘤干细胞的效果明显强于单纯无血清悬浮培养和无血清悬浮培养+化疗药物法,是获得肿瘤干细胞较好的方法。

关键词：肿瘤干细胞结肠肿瘤流式细胞术细胞分离细胞培养技术

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人结肠癌细胞株CW-2干细胞生物学特性研究

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中国医科大学学报 2010年第6期39卷 417-419页

作者：刘美艾亮陈宓龙浩李少林重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016

目的从人结肠癌细胞株CW-2中分离癌干细胞,并观察其生物学特性。方法采用多重联合法分离人结肠癌干细胞,应用流式细胞仪检测分离后细胞中CD44+EpCAM+癌干细胞含量;细胞周期检测、体外侵袭实验、体内成瘤实验对癌干细胞进行生物学特性研... 详细信息

目的从人结肠癌细胞株CW-2中分离癌干细胞,并观察其生物学特性。方法采用多重联合法分离人结肠癌干细胞,应用流式细胞仪检测分离后细胞中CD44+EpCAM+癌干细胞含量;细胞周期检测、体外侵袭实验、体内成瘤实验对癌干细胞进行生物学特性研究。结果分离后细胞中CD44+EpCAM+癌干细胞含量为89.57%;CD44+EpCAM+癌干细胞的增殖能力、侵袭能力、致瘤能力均强于非癌干细胞,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CD44+EpCAM+癌干细胞具有低增殖性、高侵袭性、高致瘤性,并可通过多重联合分离获得。

关键词：癌干细胞结肠癌流式细胞技术细胞分离 CD44+EpCAM+细胞

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120例围生期妇女、婴儿死亡导致医疗纠纷案例分析报告

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重庆医科大学学报 2010年第5期35卷 744-749页

作者：宋安林刘云志唐任宽黄伟杨明朱素敏朱英赵鹏李剑波重庆医科大学基础医学院法医教研室重庆400016

目的:比较分析各相关因素对围生期妇女、婴儿死亡的影响,对引起死亡及导致医疗纠纷的原因进行总结。方法:回顾分析重庆医科大学法医教研室2000～2009年解剖医疗纠纷案例中围生期死亡妇女、婴儿共120例,其中妇女72例,婴儿48例。统计内容... 详细信息

目的:比较分析各相关因素对围生期妇女、婴儿死亡的影响,对引起死亡及导致医疗纠纷的原因进行总结。方法:回顾分析重庆医科大学法医教研室2000～2009年解剖医疗纠纷案例中围生期死亡妇女、婴儿共120例,其中妇女72例,婴儿48例。统计内容包括:尸检数量、死亡原因、死亡时间、医院级别、分娩方式、产前疾病、临床诊断与尸检诊断符合情况等。结果:①围生期妇女、婴儿死亡导致医疗纠纷主要集中在一级医院和二级医院;②各级医院围生儿组的平均误诊率为77.1%,远高于妇女组的误诊率:40.3%;③发生医疗纠纷的围生期死亡妇女年龄偏高,平均年龄30.5岁,大于28岁的占65.3%;④发生医疗纠纷的围生期死亡妇女职业主要为农民和无业,分别占62%和17%;⑤75%的死亡妇女为高危妊娠,其高危因素的前3位依次是:妊娠合并症、妊娠异常和分娩异常;⑥发生医疗纠纷的围生期妇女死亡原因前5位依次是:产后大出血、羊水栓塞、严重感染、肺动静脉血栓形成、急性坏死性胰腺炎,死亡时间的3个高峰期为:进入产程～分娩结束、分娩结束～产后6h、产后12h～产后24h;⑦发生医疗纠纷的围生期婴儿死亡原因前4位依次为:肺部因素、脐带因素、胎盘因素和产程因素,其中进入产程～出生48h是婴儿死亡的高峰期,占婴儿总死亡例数的77.1%。结论:医疗条件、高危妊娠、治疗抢救是否及时有效是影响围生期妇女、婴儿死亡的重要因素。提高一级医院和二级医院的医疗条件,增强其处理围生期妇女高危妊娠、产后大出血、羊水栓塞、围生儿肺部因素和脐带因素的能力,是降低重庆地区围生期妇女、婴儿死亡率及其导致的医疗纠纷发生率的关键。

关键词：尸体解剖死亡原因病理诊断围生期医疗纠纷

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抗PeroxiredoxinⅠ肺腺癌噬菌体抗体的筛选及其在荷瘤裸鼠体内的分布

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吉林大学学报（医学版） 2010年第5期36卷 841-846页

作者：李淑杰罗弋庞华李少林樊春波王洁重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院核医学科重庆400016

目的:通过对已构建的肺腺癌相关人源单链抗体库进行筛选,得到抗过氧化物酶PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)肺腺癌单链抗体,评价抗体在动物模型体内分布及靶向显像作用。方法:PCR法检测大肠杆菌TG1中单链抗体single-chain variable fragment(scFv... 详细信息

目的:通过对已构建的肺腺癌相关人源单链抗体库进行筛选,得到抗过氧化物酶PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)肺腺癌单链抗体,评价抗体在动物模型体内分布及靶向显像作用。方法:PCR法检测大肠杆菌TG1中单链抗体single-chain variable fragment(scFv)基因插入率;凝胶电泳鉴定SfiⅠ和NotⅠ双酶切质粒结果;以肺腺癌细胞株A549和在肺癌中高表达的抗氧化蛋白PrxⅠ为靶抗原,对抗体库进行富集筛选。阳性克隆用IPTG诱导表达并检测。放射性核素131I标记纯化抗体,进行荷瘤裸鼠体内分布及SPECT放射免疫显像研究。结果:scFv基因插入率为77%(23/30),双酶切鉴定证实目的条带。通过亲和筛选,肺腺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮是第1轮的180倍。选取10个克隆经ELISA法检测,其中6个克隆与A549细胞呈阳性反应,阳性率60%(6/10)。SDS-PAGE及ELISA检测证实得到人源抗PrxⅠ肺腺癌单链抗体。竞争ELISA显示抗体能有效结合A549细胞。核素标记抗体的放射化学纯度为(95.6±3.7)%,比活度为(2.8±0.2)TBq·g-1。体内分布研究显示抗体与肺腺癌组织有效结合。尾静脉注射48h后,瘤/血和瘤/肌肉放射性比值均达最大值,分别为(4.06±0.13)和(5.17±0.97)%ID·g-1。SPECT示抗体与肿瘤有效结合。抗体注射后48h的T/NT值(3.73±0.20)明显高于12h(1.26±0.15)、24h(2.18±0.16)和72h(2.85±0.18)(均P<0.01)。结论:利用肺腺癌细胞A549和PrxⅠ为靶抗原,从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗PrxⅠ肺腺癌单链抗体。在体内抗体能与肺腺癌组织特异性结合。

关键词：噬菌体抗体库单链抗体 Peroxiredoxin Ⅰ 放射免疫显像腺瘤病肺

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姜黄素对乳腺癌MDA-MB-231细胞NOTCH1和NF-κB表达的影响

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肿瘤防治研究 2010年第2期37卷 158-161页

作者：龙丽曹友德重庆医科大学基础医学院病理教研室 400016

目的检测姜黄素作用于乳腺癌细胞后NOTCH1和核转录因子-κB(NF-κB)的变化,了解姜黄素抑制乳腺癌细胞增殖的可能机制。方法不同剂量(1.25,5.0,20.0μmol/L)姜黄素分别处理乳腺癌MDA-MB-231细胞24,48,72h,MTT法检测细胞增殖改变。RT-PCR... 详细信息

目的检测姜黄素作用于乳腺癌细胞后NOTCH1和核转录因子-κB(NF-κB)的变化,了解姜黄素抑制乳腺癌细胞增殖的可能机制。方法不同剂量(1.25,5.0,20.0μmol/L)姜黄素分别处理乳腺癌MDA-MB-231细胞24,48,72h,MTT法检测细胞增殖改变。RT-PCR和Western blot检测NOTCH1、NF-κBmRNA和蛋白质表达。结果MTT显示,20μmol/L姜黄素处理72h,乳腺癌细胞抑制率为(52.0±0.42)%,与余组比较差异具有统计学意义;PCR结果显示随着剂量和时间的增加,NOTCH1和NF-κB的OD值逐渐下降,Western blot的结果与PCR一致。结论姜黄素可下调乳腺癌细胞NOTCH1及NF-κB表达,并呈现剂量和时间依赖性,提示姜黄素具有抑制乳腺癌细胞增殖的作用。

关键词：姜黄素乳腺癌 NOTCH-1 NF-κB

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短期丰富生存环境干预下中老年大鼠海马结构有髓神经纤维的性别差异

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第三军医大学学报 2010年第6期32卷 546-549页

作者：黄春霞仇玄卢伟杨姝李琛夏磊唐勇重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的研究短期丰富生存环境干预下正常中老年大鼠海马结构有髓神经纤维的性别差异。方法将20只14月龄的SD大鼠(雌雄各10只)随机均分为丰富生存环境组与普通环境组,前者在丰富生存环境条件下饲养4个月,后者在普通环境中饲养4个月,运用透... 详细信息

目的研究短期丰富生存环境干预下正常中老年大鼠海马结构有髓神经纤维的性别差异。方法将20只14月龄的SD大鼠(雌雄各10只)随机均分为丰富生存环境组与普通环境组,前者在丰富生存环境条件下饲养4个月,后者在普通环境中饲养4个月,运用透射电子显微镜和体视学方法对两组大鼠海马结构有髓神经纤维进行定量研究。结果普通环境组雌性大鼠海马结构内有髓神经纤维的总体积、平均直径均显著大于雄性大鼠(P<0.05),而海马结构总体积、海马结构内有髓神经纤维的总长度雌雄两组之间不存在显著性差异(P>0.05)。丰富生存环境组雌性大鼠海马结构内有髓神经纤维的平均直径显著小于雄性大鼠(P<0.05),而海马结构总体积、海马结构内有髓神经纤维的总体积、总长度雌雄两组之间不存在显著性差异(P>0.05)。结论普通环境组和丰富环境组中老年大鼠海巴结构有髓神经纤维存在的性别差异,提示雌、雄性中老年大鼠对短期丰富生存环境干预的反应不同。

关键词：大鼠丰富生存环境海马结构有髓神经纤维性别差异体视学

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刚地弓形虫RH株对小鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响

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第三军医大学学报 2010年第23期32卷 2524-2526页

作者：葛璞车艺林玲黄开顺彭净叶彬重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院肿瘤与分子医学中心重庆400016 重庆医科大学生命科学院重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的通过研究刚地弓形虫强毒株RH株对体外培养的孕期小鼠胎盘滋养层细胞凋亡的影响,初步探讨不同毒力虫株引起病理妊娠的机制。方法将小鼠胎盘滋养层细胞分别接种于不同细胞培养瓶,对照组加入DMEM培养基孵育,实验组加入相同体积不同数量... 详细信息

目的通过研究刚地弓形虫强毒株RH株对体外培养的孕期小鼠胎盘滋养层细胞凋亡的影响,初步探讨不同毒力虫株引起病理妊娠的机制。方法将小鼠胎盘滋养层细胞分别接种于不同细胞培养瓶,对照组加入DMEM培养基孵育,实验组加入相同体积不同数量(2×106/ml、4×106/ml、8×106/ml)弓形虫速殖子培养2、4、8h,Annexin-V-FITC/PI染色细胞后上流式细胞仪检测各个时间点细胞凋亡率变化;荧光显微镜观察细胞形态改变情况;Western blot分析凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达或活性。结果流式细胞仪检测弓形虫感染后的滋养层细胞凋亡率较对照组有下降趋势(P<0.05),呈量效依赖性,弓形虫数量8×106/ml实验组8h凋亡率最低,为(15.81±0.19)%;荧光显微镜观察到8h不同数量实验组滋养细胞凋亡形态改变情况,各组均有典型的早期凋亡细胞:细胞膜着绿色,细胞核拒染。随着弓形虫感染数量增加,凋亡细胞数目有所减少。Western blot检测刚地弓形虫RH株作用于滋养层细胞8h后实验组的Bax、Bcl-2蛋白表达较对照组分别有明显的降低与升高(P<0.05)。结论刚地弓形虫RH株可抵抗体外培养的孕期小鼠滋养细胞正常凋亡,其机制可能与滋养细胞Bax表达下调和Bcl-2表达上调有关。

关键词：刚地弓形虫RH株滋养细胞凋亡 Bax Bcl-2

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靶向肠道病毒71型VP1基因的siRNA表达质粒的构建

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中国生物制品学杂志 2010年第6期23卷 573-576页

作者：吕玉春陈全严莎候艳重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建靶向肠道病毒71型(EV71)VP1基因的siRNA表达质粒,并进行鉴定。方法构建靶向EV71VP1基因的siRNA表达质粒pSVSi1、pSVSi2和pSVSi3;脂质体法转染A549细胞株,筛选阳性克隆,通过荧光定量PCR和Western blot,分别在mRNA水平和蛋白水平... 详细信息

目的构建靶向肠道病毒71型(EV71)VP1基因的siRNA表达质粒,并进行鉴定。方法构建靶向EV71VP1基因的siRNA表达质粒pSVSi1、pSVSi2和pSVSi3;脂质体法转染A549细胞株,筛选阳性克隆,通过荧光定量PCR和Western blot,分别在mRNA水平和蛋白水平鉴定EV71VP1基因的表达。结果质粒pSVSi1、pSVSi2和pSVSi3经测序证明构建正确。pSVSi1对A549细胞VP1基因的抑制效果最好,在mRNA和蛋白水平上的抑制率分别为87%和89%,pSVSi2和pSVSi3在mR-NA水平上的抑制率分别为60%和70%。结论已成功构建了靶向EV71VP1基因的siRNA表达质粒,并筛选出一种对VP1基因有显著抑制作用的siRNA,为手足口病的siRNA基因治疗奠定了基础。

关键词：肠道病毒A型人 VP1基因 RNA干扰 RNA 小分子干扰

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大鼠死后心肌肌红蛋白mRNA的含量变化与死亡时间的相关性研究

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重庆医科大学学报 2010年第8期35卷 1205-1208页

作者：王全芳邓世雄蒋朴黄海李虹重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016

目的:研究大鼠心肌肌红蛋白(Myoglobin,Mb)mRNA的降解规律,探讨其与死亡时间(Postmortem interval,PMI)的关系。方法:在25℃±1℃,65%～70%温湿度控制系统下,通过采用RT-PCR技术检测大鼠死后心肌MbmRNA在体保存和离体保存条件下各... 详细信息

目的:研究大鼠心肌肌红蛋白(Myoglobin,Mb)mRNA的降解规律,探讨其与死亡时间(Postmortem interval,PMI)的关系。方法:在25℃±1℃,65%～70%温湿度控制系统下,通过采用RT-PCR技术检测大鼠死后心肌MbmRNA在体保存和离体保存条件下各相应时间段的含量变化,用SPSS17.0软件对数据进行分析。结果:大鼠死后心肌MbmRNA随死亡(离体)时间延长而逐渐降低,且与死亡(离体)时间呈线性关系,但在体保存要比离体保存降解慢。结论:MbmRNA的降解呈时间相关性,在体与离体条件下的降解规律并不完全一致;MbmRNA有望用于推断较早期死后经过时间。

关键词：法医病理学死亡时间心肌肌红蛋白逆转录-聚合酶链式反应

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