检索结果-内蒙古大学图书馆

磁性纳米粒介导沉默PI3Kγ基因调控肿瘤相关巨噬细胞抗小鼠肺癌细胞效应的研究

中国细胞生物学学报 2020年第2期42卷 296-311页

作者：陈全刘佳霖贺静荣范晓霞吴蕊鑫重庆医科大学免疫学研究中心基础医学院免疫学教研室重庆400016

为了探讨超顺磁性Fe3O4纳米粒子(superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs)介导的磷脂酰肌醇3激酶γ(phosphatidylinositol 3 kinaseγ,PI3Kγ)抑制表达调控的肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)对小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC)增殖和凋亡的影响,该研究构建了能启动巨噬细胞(macrophage,MФ)特异性表达PI3Kγ催化亚基p100 siRNA的pSilencer-EGFP-SP-p110质粒,通过SPIONs负载成磁性纳米质粒复合物(SPIONs-DNA),在强磁作用下转染MФ,通过普鲁士蓝染色法检测SPIONs-DNA在细胞内的分布,Real-time PCR和Western blot检测细胞PI3Kγp110亚基的表达水平。建立M1、M2型MФ模型,将SPIONs-DNA在强磁作用下转染M2型MФ,通过Real-time PCR和Western blot鉴定细胞表型,明确M2型MФ转化为M1型的强度。采用Transwell系统建立SPIONs-DNA转染的M2型MФ与小鼠LLC细胞的共培养模型,通过锥虫蓝染色法检测LLC细胞的活细胞数并绘制细胞生长曲线,CCK-8法检测LLC细胞增殖情况,硝酸还原酶法检测共培养液上清中NO含量,流式细胞术检测LLC细胞凋亡情况。结果显示,制备的SPIONs-DNA在强磁作用下成功转染MФ并大量分布在细胞胞核周围,SPIONs-DNA转染组细胞PI3Kγp110 mRNA和蛋白表达水平显著低于空白细胞对照组(P<0.05)。建立的M1型MФ高表达iNOS(P<0.001),M2型MФ高表达ARG-1(P<0.001)。M2型MФ转染SPIONs-DNA后细胞iNOS mRNA和蛋白的表达显著增加(P<0.001),ARG-1 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.01)。在共培养组中,SPIONs-DNA转染的M2型MФ组能大量分泌NO,LLC细胞生长和增殖能力显著降低(P<0.05),凋亡率显著增高(P<0.01)。结果表明,磁性纳米粒负载pSilencer-EGFP-SP-p110重组质粒能够特异性靶向抑制巨噬细胞PI3Kγp110的表达,诱导M2型MФ转化为M1型;其转染的M2型MФ可显著抑制LLC细胞的生长和增值,促进细胞凋亡,这与其大量分泌NO有关。该磁性纳米质粒复合物可诱导TAM发挥抗肿瘤作用,为研究开发有效的抗肺癌基因治疗措施奠定基础。

关键词：巨噬细胞 PI3Kγ 超顺磁性Fe3O4纳米粒子 Lewis肺癌增殖凋亡

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乙型肝炎病毒密码子偏好性及影响因素分析

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中国病原生物学杂志 2020年第12期15卷 1404-1410页

作者：吴炜倩胡源胡接力黄爱龙涂增重庆医科大学第二临床医学院重庆400016 感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)B、C基因型密码子使用偏好性及其影响因素,探讨HBV密码子使用模式与宿主、病毒进化的关系。方法从GenBank数据库中收集47株HBV的全基因组序列,利用EMBOSS、SPSS24.0、MEGAX等软件对其密码子偏好性进行统计分... 详细信息

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)B、C基因型密码子使用偏好性及其影响因素,探讨HBV密码子使用模式与宿主、病毒进化的关系。方法从GenBank数据库中收集47株HBV的全基因组序列,利用EMBOSS、SPSS24.0、MEGAX等软件对其密码子偏好性进行统计分析。结果HBV各蛋白编码序列的ENC值为56.37-58.74,CAI值为0.678-0.697,GC3含量为0.474-0.506。RSCU>1的密码子共27个,主要以U/C结尾。高频使用密码子为UCU、CCU和AGC,低频使用密码子为CUA、CCG、CGA、ACG和UCG。ENC绘图显示47株病毒均位于预期曲线之下。中性绘图分析表明GC12与GC3无显著相关性(R2=0.005,P<0.01)。PR2绘图显示第三位碱基T和C含量较高。对应分析显示这些病毒的密码子偏好性受碱基组成影响的可能性较小。利用CAI值和卡方检验的方法确定GAC和GAA为上述毒株的最优密码子。密码子使用频率比值表明B、C基因型与人类的密码子偏好性相近,而聚合酶(P)、表面(S)基因与人类的密码子偏好性存在一定的差异,以P基因差异更大。系统发生分析显示,HBV毒株分类的进化越相近,其密码子偏好性越相似。结论B、C基因型HBV偏爱使用U/C结尾的密码子,其密码子偏好性主要受到自然选择的影响。结合密码子偏好性与密码子优化可能有助于理解HBV进化过程和对最适宿主的选择机制。

关键词：乙型肝炎病毒密码子使用偏好性进化

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异氟醚预处理通过降低肝脏caspase-1/caspase-11的表达减轻肝脏缺血再灌注损伤

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医学理论与实践 2021年第1期34卷 1-3,19页

作者：王小莹申丽娟重庆医科大学附属第三医院麻醉科重庆市401120 昆明医科大学基础医学院病理学教研室

目的:通过研究异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤小鼠肝脏中caspase-1/caspase-11表达的影响,探究异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法:建立肝脏缺血再灌注损伤模型。将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组、异氟醚预... 详细信息

目的:通过研究异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤小鼠肝脏中caspase-1/caspase-11表达的影响,探究异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法:建立肝脏缺血再灌注损伤模型。将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组、异氟醚预处理组和手术组。异氟醚预处理组小鼠吸入1.4%异氟醚30min后,间隔30min进行手术。对组织HE染色切片进行观察及病理评分,检测小鼠血清中ALT/AST水平用以评估异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。用Western Blot检测肝脏组织中caspase-1/caspase-11的表达。结果:(1)肝脏组织切片HE染色:对3组小鼠肝脏HE染色切片进行Suzuki’s病理评分,得出手术组评分较对照组明显增高(P<0.05),异氟醚预处理组较手术组明显降低(P<0.05);(2)血清ALT/AST:手术组血清中ALT/AST均较对照组明显增高(P<0.05),异氟醚预处理组较手术组明显降低(P<0.05);(3)Western Blot:手术组小鼠肝脏中caspase-1/caspase-11的表达均显著高于对照组,而异氟醚预处理后caspase-1/caspase-11的表达均较手术组显著降低。结论:异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制肝脏caspase-1/caspase-11的表达,从而抑制肝脏与细胞焦亡相关的炎症反应有关。

关键词：肝脏缺血再灌注损伤异氟醚预处理细胞焦亡 caspase-1 caspase-11

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慢性HBV感染不同临床阶段患者外周血T细胞免疫状态的研究

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中国免疫学杂志 2020年第12期36卷 1494-1498页

作者：罗雅煊李婷婷王嘉悦秦波金艾顺重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016 肿瘤免疫基础与转化重庆市重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院感染科重庆400016

目的:探讨慢性HBV感染(CHI)不同临床阶段患者外周血T细胞状态,为CHI临床分期和防治提供科学依据。方法:本研究收录CHI患者,按照患者临床症状将其划分为免疫耐受(IT)、免疫活跃(IA)、免疫控制(IC)、再活化组(RA),健康志愿者(HD)为对照组... 详细信息

目的:探讨慢性HBV感染(CHI)不同临床阶段患者外周血T细胞状态,为CHI临床分期和防治提供科学依据。方法:本研究收录CHI患者,按照患者临床症状将其划分为免疫耐受(IT)、免疫活跃(IA)、免疫控制(IC)、再活化组(RA),健康志愿者(HD)为对照组。分离外周血单个核细胞(PBMC),使用多色流式细胞术分析患者外周血CD4^+T细胞、CD8^+T细胞亚群频率和CD8^+T细胞表面PD-1的表达量。结果:与HD相比,CHI组T细胞及亚群变化无显著差异;RA组CD3^+T细胞百分比显著下降。对于CD8^+T细胞亚型,IC和RA组初始CD8^+T细胞(Na ve T cell,Tn)频率下降;IT组效应记忆CD8^+T细胞(Tem)频率降低;而IC组效应CD8^+T细胞(Te)频率显著增高(P<0.05)。相较于高HBV DNA载量组(IT),低HBV DNA载量组(IC和RA)Tn频率降低,Te频率增高(P<0.05);IA组CD8^+T细胞PD-1表达量最高,其次是IC组(P<0.05)。对于CD4^+T细胞亚型,与HD相比,CHI中IT和RA组中枢记忆CD4^+T细胞(Tcm)频率明显升高;各组Treg频率均上升,IA组Treg频率升高较明显(P<0.05),Treg频率与ALT呈正相关(r=0.7436,P=0.0036)。结论:临床诊断指标联合CHI患者T细胞亚型频率变化及免疫抑制功能检测,对慢性HBV感染疾病的分期诊断和治疗以及预测预后转归具有重要参考意义。

关键词：慢性HBV感染 T细胞亚型调节性T细胞程序性死亡分子1 HBV DNA载量

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miR-30a的高表达促进K562细胞的凋亡

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中国实验血液学杂志 2019年第2期27卷 396-402页

作者：徐敏高雯琬雒钰杰王毅陶崑重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016

目的:探讨miR-30a的高表达对慢性髓系白血病K562细胞株的促凋亡作用及其机制。方法:构建pEGFP-pre-miR-30a重组质粒并转染K562细胞,采用实时定量PCR法检测miR-30a和BCR/ABL mRNA的表达水平,应用annexinV-FITC/PI双集流式细胞术(flow cyt... 详细信息

目的:探讨miR-30a的高表达对慢性髓系白血病K562细胞株的促凋亡作用及其机制。方法:构建pEGFP-pre-miR-30a重组质粒并转染K562细胞,采用实时定量PCR法检测miR-30a和BCR/ABL mRNA的表达水平,应用annexinV-FITC/PI双集流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析K562细胞凋亡百分率,应用蛋白印迹法(Western blot)分析BCR/ABL融合蛋白、凋亡相关蛋白BCL-2、BAX及PTEN、AKT、p-AKT的变化。结果:测序与酶切图谱证实成功构建重组质粒。与pEGFP-C1-K562阴性对照组和K562空白对照组比,重组质粒pEGFP-pre-miR-30a转染组miR-30a表达水平显著升高,BCR/ABL mRNA与蛋白表达明显下调,凋亡细胞所占比例明显增加(P<0.05),抗凋亡蛋白BCL-2水平降低,促凋亡蛋白BAX表达增加,抑癌蛋白PTEN表达明显上升,AKT无明显变化,但活性形式的p-AKT显著降低,差异均有统计学意义。结论:高表达的miR-30a能抑制K562细胞癌基因BCR/ABL mRNA及蛋白的表达并促进细胞凋亡,其机制可能与抑制BCR/ABL-PTEN/AKT信号通路的活性有关。

关键词： miR-30a 慢性髓系细胞白血病 BCR/ABL PTEN/AKT通路细胞凋亡

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布拉酵母菌补充三联疗法根除儿童幽门螺杆菌的疗效:随机对照试验的Meta分析

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中国微生态学杂志 2020年第2期32卷 161-165页

作者：梅昭均李丹丹罗再春张琴王燕重庆医科大学附属永川医院儿科重庆永川402160 青岛大学基础医学院药理学教研室山东青岛266071

目的探讨补充布拉酵母菌的三联疗法对儿童幽门螺杆菌根除率和治疗相关副作用的疗效。方法电子检索数据库,包括CNKI、VIP、WanFang、Embase、The Cochrane Library和PubMed。搜集布拉酵母菌补充三联疗法治疗儿童幽门螺杆菌感染的随机对... 详细信息

目的探讨补充布拉酵母菌的三联疗法对儿童幽门螺杆菌根除率和治疗相关副作用的疗效。方法电子检索数据库,包括CNKI、VIP、WanFang、Embase、The Cochrane Library和PubMed。搜集布拉酵母菌补充三联疗法治疗儿童幽门螺杆菌感染的随机对照试验(RCT)。检索时间从建库到2019年8月。两名研究者独自完成文献筛选、提取资料和质量评价。采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入6项研究,计1 114例患儿。Meta分析结果显示,布拉酵母菌组与对照组相比,可提高幽门螺杆菌根除率[OR=2.02,95%CI(1.48,2.76),P<0.001]。补充布拉酵母菌显著降低了腹泻[OR=0.42,95%CI(0.29,0.60),P<0.001]、便秘[OR=0.35,95%CI(0.23,0.52),P<0.001]、口腔炎[OR=0.24,95%CI(0.13,0.43),P<0.001]等的发生率。两组研究资料在恶心、呕吐、腹痛发生率方面差异均无统计学意义。结论现有证据表明,布拉酵母菌作为三联疗法的辅助手段,可以提高幽门螺杆菌的根除率,并减少儿童治疗相关腹泻、便秘、口腔炎的发生率。但受纳入样本量和质量限制,需进一步开展大规模高质量随机对照试验加以验证。

关键词：布拉氏酵母菌幽门螺杆菌儿童 Meta分析

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组蛋白乙酰化在衰老中的作用

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神经药理学报 2021年第2期11卷 53-64页

作者：黄波月杨宝学重庆医科大学基础医学院解剖教研室重庆400000 天然药物及仿生药物国家重点实验室北京大学基础医学院药理学系北京100191

衰老过程中细胞稳态丢失,组织功能改变,且身体健康水平普遍下降,最终导致死亡。随着年龄的增长,由多种表观遗传因素共同调控的基因表达控制将减弱。组蛋白修饰是控制染色质结构和基因转录的关键调控因子,从而影响各种重要的细胞表型。... 详细信息

衰老过程中细胞稳态丢失,组织功能改变,且身体健康水平普遍下降,最终导致死亡。随着年龄的增长,由多种表观遗传因素共同调控的基因表达控制将减弱。组蛋白修饰是控制染色质结构和基因转录的关键调控因子,从而影响各种重要的细胞表型。越来越多的研究表明,各种环境刺激下组蛋白乙酰化均参与调控翻译,从而影响基因表达和寿命。该综述总结了组蛋白乙酰化在基因转录调控和衰老过程中的机制,并探讨了组蛋白乙酰化直接或间接参与衰老相关基因表达和信号通路调控的作用,列举了目前靶向组蛋白的抗衰老药物,旨在促进研究者以组蛋白乙酰化为靶点的衰老研究的深入。

关键词：组蛋白乙酰化转移酶组蛋白去乙酰化酶衰老转录沉默

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大鼠骨骼肌新鲜度指标与早期死亡时间关系

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中国法医学杂志 2021年第2期36卷 130-133,139页

作者：朱伟豪郑哲孙凯杨梦姿李双龙莫耀南河南科技大学法医学院河南洛阳471003 重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016 河南科技大学基础医学院河南洛阳471003

目的计算不同时间大鼠骨骼肌新鲜度指标(K值、K_(1)值、K_(0)值、H值、P值、G值和IMP比例)变化规律,研究其与早期PMI的关系,筛选出最优评价指标,用于早期PMI推断。方法SD大鼠处死后,保存在20℃恒温条件下,于死后即刻(0h)、4h、8h、16h、... 详细信息

目的计算不同时间大鼠骨骼肌新鲜度指标(K值、K_(1)值、K_(0)值、H值、P值、G值和IMP比例)变化规律,研究其与早期PMI的关系,筛选出最优评价指标,用于早期PMI推断。方法SD大鼠处死后,保存在20℃恒温条件下,于死后即刻(0h)、4h、8h、16h、24h、32h和48h提取大鼠双后腿骨骼肌,利用高效液相色谱仪测定ATP相关代谢产物(ATP,ADP,AMP,IMP,Ino,Hx),计算其肌肉组织的K值、K1值、K0值、H值、P值、G值和IMP比例,并建立与PMI关系的相关回归方程。结果随PMI推移,IMP比例呈现下降趋势,K值、K_(1)值、K_(0)值、P值、G值和H值逐渐增加。7种新鲜度指标均可用于早期PMI推断(R^(2)=0.922-0.971,P<0.01),其中H值与PMI相关系数最高、曲线拟合关系最好(R^(2)=0.971)。结论测定尸体肌肉组织新鲜度指标有望成为法医实践中PMI推断的有效方法,其H值为最优早期PMI推断指标。

关键词：法医病理学早期PMI 新鲜度指标骨骼肌大鼠

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细粒棘球绦虫胰岛素受体蛋白的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2020年第11期15卷 1295-1298页

作者：王芬胡容李龙黎昆赵明才陈林刘家瑞遂宁市中心医院检验科四川遂宁629000 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室

目的采用生物信息学软件分析细粒棘球绦虫胰岛素受体(EgIR)蛋白的分子特性,并分析其功能。方法从NCBI蛋白质数据库中下载EgIR的氨基酸序列,采用SignalP 4.1、ProtParam、SMART、NetPhos 3.1等在线分析程序预测EgIR蛋白的信号肽序列、理... 详细信息

目的采用生物信息学软件分析细粒棘球绦虫胰岛素受体(EgIR)蛋白的分子特性,并分析其功能。方法从NCBI蛋白质数据库中下载EgIR的氨基酸序列,采用SignalP 4.1、ProtParam、SMART、NetPhos 3.1等在线分析程序预测EgIR蛋白的信号肽序列、理化性质、保守结构域及磷酸化位点;采用Pairwise Sequence Alignment Tools分析EgIR与其他物种来源IR间的序列一致性;采用MEGA 6.06程序对不同物种来源的IR蛋白进行多序列比对并构建进化树,进行系统分析。结果EgIR蛋白由1661aa组成,为一种亲水性的非分泌跨膜蛋白。EgIR蛋白具有TyrKc、FnⅢ等IR保守的结构域,含有117个丝氨酸磷酸化位点、51个苏氨酸磷酸化位点和16个酪氨酸磷酸化位点。EgIR蛋白的二级结构主要为无规卷曲,占41.06%;三维结构呈倒"V"型。EgIR在近膜区缺少NPXY基序,也不含有YxxxYY基序。EgIR与EmIR2和SjIR1的序列一致性分别为92.9%和35.1%,亲缘关系较近,与人、牛、羊IR的序列一致性分别为27.5%、27.2%和25.3%,亲缘关系较远。结论EgIR蛋白有与EmIR2和SjIR1相似的功能,参与虫体葡萄糖代谢的调节及生长发育,可作为防治囊性包虫病的药物靶标。

关键词：细粒棘球绦虫胰岛素受体生物信息学分子特性

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自噬调控因子mTOR对心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究进展

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解放军医学杂志 2020年第11期45卷 1161-1166页

作者：韩利民罗小红赵海龙遵义医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州遵义563000 重庆市长寿区人民医院病理科重庆401220

心肌缺血再灌注(I/R)损伤是临床上缺血性心脏病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后发生心肌损伤的重要原因,其机制主要与氧自由基暴发、Ca2+超载、线粒体功能障碍、炎症等相关,但近年来的研究证实,心肌细胞的不恰当自噬水平同样参与了心... 详细信息

心肌缺血再灌注(I/R)损伤是临床上缺血性心脏病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后发生心肌损伤的重要原因,其机制主要与氧自由基暴发、Ca2+超载、线粒体功能障碍、炎症等相关,但近年来的研究证实,心肌细胞的不恰当自噬水平同样参与了心肌I/R损伤的发生。哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)是自噬的重要调控分子,在不同条件下主要通过PI3K/AKT/mTOR、AMPK/mTOR信号通路调控自噬。体外和体内研究结果显示,多种药物均可通过mTOR调控心肌细胞自噬水平,从而改善心肌I/R损伤,但具体作用机制尚不明确。该文主要对mTOR在心肌I/R损伤中的研究进展进行综述,明确其相关作用机制,探讨mTOR作为心肌I/R损伤潜在治疗靶点的可能性。

关键词：哺乳动物雷帕霉素靶点心肌缺血再灌注损伤自噬

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