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携带Lipocalin 2基因重组减毒沙门菌的构建及其对分枝杆菌生长影响的研究

重庆医科大学学报 2020年第2期45卷 239-244页

作者：唐弘王瑜伟何永林卢楠徐蕾庄稀尧李智颖杨婕陈俊伊熊雨涵杨春重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心病原生物学教研室重庆400016 重庆市中医院检验科重庆400021

目的:探讨携带脂质运载蛋白2(lipocalin 2,Lcn2)的减毒沙门菌对分枝杆菌生长的影响。方法:以巨噬细胞RAW264.7提取RNA逆转录为c DNA为模版,采用PCR法扩增Lcn2基因,定向克隆到质粒pBudCE4.1-orim的多克隆位点中,构建重组质粒pBudCE4.1-or... 详细信息

目的:探讨携带脂质运载蛋白2(lipocalin 2,Lcn2)的减毒沙门菌对分枝杆菌生长的影响。方法:以巨噬细胞RAW264.7提取RNA逆转录为c DNA为模版,采用PCR法扩增Lcn2基因,定向克隆到质粒pBudCE4.1-orim的多克隆位点中,构建重组质粒pBudCE4.1-orim-Lcn2;将重组质粒转染RAW264.7细胞,用RT-qPCR法检测Lcn2的mRNA相对表达量,并以空白载体为对照组;将重组质粒转入减毒沙门菌SL7207得到重组菌株SL7207-pBudCE4.1-orim-Lcn2;重组菌感染RAW264.7细胞,Western blot检测Lcn2的蛋白表达,RT-qPCR法检测Lcn2的mRNA的相对表达量,并以空载菌组为对照;7H10平板上通过菌落计数观察重组菌对感染RAW264.7细胞的卡介苗(Bacille calmette-guerin,BCG)生存的影响,以空载菌组为对照。用重组菌灌胃小鼠,检测脾组织Lcn2和血清IFN-γ水平,以空载菌和生理盐水为对照组。结果:PCR扩增出Lcn2基因;重组质粒经双酶切及基因测序鉴定正确。重组菌感染RAW264.7细胞Lcn2的蛋白表达量较对照组增加(P=0.000)。RT-qPCR法检测重组菌、重组质粒Lcn2 mRNA表达较对照组明显升高(P=0.000,F=5.281;P=0.000,F=22570)。7H10平板上重组菌组BCG数量与空载菌组相比明显减少(P=0.000,F=11.41)。重组菌组与空载对照菌组相比小鼠脾组织Lcn2表达升高(P=0.000,F=4.449),重组菌组与生理盐水组血清IFN-γ升高(P=0.004,F=15.27)。结论:成功构建了携带Lcn2基因的重组减毒沙门菌。重组菌感染RAW264.7细胞后Lcn2的表达增加,对感染RAW264.7的BCG存活起到一定的抑制作用。重组菌灌胃后小鼠脾组织Lcn2表达增加,血清IFN-γ含量增加,小鼠免疫状态有利于结核病转归。该研究为进一步研究脂质运载蛋白和结核分枝杆菌感染的关系及分子机制打下基础。

关键词：减毒沙门菌 Lcn2基因分枝杆菌 RAW264.7细胞

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CSE基因敲除小鼠的基因型鉴定方法

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遵义医科大学学报 2021年第5期44卷 669-672页

作者：覃明王海燕田丹郑静汪化军冯仁和庹宇宇张悦李妍霓张浪浪杨婷婷遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563099 遵义医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室贵州遵义563099

目的介绍一种胱硫醚-γ-裂解酶(Cystathionine-γ-lyase,CSE)基因敲除小鼠基因型的鉴定方法。方法提取3只野生型(Wild type,WT)小鼠(CSE^(+/+))和21只杂合子小鼠(CSE^(+/-))繁殖的子代小鼠的鼠尾基因组DNA,以其为模板,聚合酶链反应(Poly... 详细信息

目的介绍一种胱硫醚-γ-裂解酶(Cystathionine-γ-lyase,CSE)基因敲除小鼠基因型的鉴定方法。方法提取3只野生型(Wild type,WT)小鼠(CSE^(+/+))和21只杂合子小鼠(CSE^(+/-))繁殖的子代小鼠的鼠尾基因组DNA,以其为模板,聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增后凝胶电泳;然后分别提取3只WT小鼠和6只随机选择的CSE基因敲除小鼠(CSE^(-/-))肠道组织和骨髓来源的巨噬细胞(Bone marrow-derived macrophage,BMDM)蛋白,并用免疫印迹法(Western blot)检测其中CSE蛋白的表达。结果凝胶电泳结果显示:只在167 bp处有表达的是WT鼠或CSE^(+/+)小鼠;在167 bp处、309 bp处均有表达的是CSE^(+/-)小鼠;只在309 bp处有表达的是CSE^(-/-)小鼠。Western blot检测结果表明,与野生鼠相比,CSE^(-/-)小鼠肠道组织和BMDM中CSE蛋白表达显著性降低(P<0.01),与凝胶电泳实验结果一致。结论采用PCR结合凝胶电泳的方法鉴定CSE基因敲除小鼠的基因型是一种较为准确的鉴定方法,此方法可以为使用该动物的实验研究节约经济成本和时间成本。

关键词： CSE 基因敲除基因型鉴定聚合酶链反应凝胶电泳

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急性脑梗死患者外周血白细胞水平对意识障碍程度的评估价值

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第三军医大学学报 2021年第16期43卷 1575-1580页

作者：吴冬梅陆德宾李玉琴黄艳玲胡志安姚忠祥张艳重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 中国科学院大学重庆仁济医院(重庆市第五人民医院)内分泌科重庆400062 重庆大学附属中心医院(重庆市急救医疗中心)神经内科重庆400014 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生理学教研室重庆400038 重庆市綦江区人民医院神经内科重庆401420

目的探讨急性脑梗死患者外周血白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞水平对意识障碍程度的评估价值。方法从2018年1~12月在重庆大学附属中心医院住院的急性脑梗死患者中筛选出136例,按入院时格拉斯哥昏迷指数(Glasgow coma scale,GCS)分为意识... 详细信息

目的探讨急性脑梗死患者外周血白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞水平对意识障碍程度的评估价值。方法从2018年1~12月在重庆大学附属中心医院住院的急性脑梗死患者中筛选出136例,按入院时格拉斯哥昏迷指数(Glasgow coma scale,GCS)分为意识障碍组(GCS≤14分,n=59)与无意识障碍组(GCS=15分,n=77),比较两组间外周血白细胞绝对值、中性粒细胞绝对值与百分比、淋巴细胞绝对值与百分比、中性粒细胞/淋巴细胞比值,以及常见血管危险因素(年龄、性别、高血压、糖尿病、房颤、高脂血症)的差异。在意识障碍组中分别比较上述外周血指标与GCS评分的关联性。结果意识障碍组外周血白细胞绝对值、中性粒细胞绝对值和百分比、房颤患者比例均显著高于无意识障碍组,而淋巴细胞绝对值和百分比、中性粒细胞/淋巴细胞比值、年龄、性别以及高血压、糖尿病、高脂血症病史差异均无统计学意义。此外,意识障碍组外周血白细胞绝对值、中性粒细胞绝对值和百分比越高,则GCS评分越低,二者呈负相关。运用协方差分析分别校正了房颤以及其他血管危险因素后,以上负相关仍然存在。结论急性脑梗死患者外周血白细胞、中性粒细胞绝对值和百分比升高与意识障碍GCS评分降低密切相关。

关键词：急性脑梗死意识障碍外周血白细胞中性粒细胞淋巴细胞

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铜绿假单胞菌必需基因的研究进展

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微生物学通报 2021年第6期48卷 2143-2154页

作者：张明月胡福泉黄广涛遵义医科大学第一临床学院贵州遵义563000 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室重庆400038 遵义医科大学附属医院烧伤整形外科贵州省临床(创面修复)研究中心贵州遵义563000

铜绿假单胞菌为专性需氧非发酵革兰氏阴性杆菌,是医院感染的常见条件致病菌之一,可引起呼吸道、泌尿道、烧伤创面和菌血症等严重感染。铜绿假单胞菌耐药形势日益严峻,给临床治疗带来困难。必需基因是生长过程中必不可少的看家基因,对铜... 详细信息

铜绿假单胞菌为专性需氧非发酵革兰氏阴性杆菌,是医院感染的常见条件致病菌之一,可引起呼吸道、泌尿道、烧伤创面和菌血症等严重感染。铜绿假单胞菌耐药形势日益严峻,给临床治疗带来困难。必需基因是生长过程中必不可少的看家基因,对铜绿假单胞菌必需基因进行深入研究,不仅有助于了解细菌的生长、毒力等基本特性,也有助于筛选新的抗菌药物靶标。本文针对铜绿假单胞菌及其必需基因进行综述,首先介绍了铜绿假单胞菌的基本生理特性及目前耐药趋势,又归纳了必需基因的研究方法,最后对铜绿假单胞菌必需基因的研究进展进行总结。

关键词：铜绿假单胞菌必需基因转座子生物信息学 CRISPRi

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自闭症儿童睡眠障碍神经机制研究进展

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临床与病理杂志 2022年第10期42卷 2566-2573页

作者：季齐(综述) 励思嘉(综述) 赵君波(综述) 熊匀(综述) 郑蕴鑫(审校) 谢姝婉(审校) 朱志茹(审校) 陆军军医大学军事认知心理学教研室重庆400038 陆军军医大学基础医学院学员四大队重庆400038 重庆师范大学教育科学学院重庆401331 重庆医科大学公共卫生学院重庆400016

睡眠障碍在自闭症谱系障碍(autismspectrumdisorder,ASD)儿童中发病率很高。睡眠障碍会加剧ASD儿童病程发展,增加护理难度和成本,给家庭和社会造成沉重负担,因此具有重要研究价值。对导致ASD儿童睡眠障碍的神经机制的研究表明,睡眠-觉... 详细信息

睡眠障碍在自闭症谱系障碍(autismspectrumdisorder,ASD)儿童中发病率很高。睡眠障碍会加剧ASD儿童病程发展,增加护理难度和成本,给家庭和社会造成沉重负担,因此具有重要研究价值。对导致ASD儿童睡眠障碍的神经机制的研究表明,睡眠-觉醒相关神经环路结构功能异常与睡眠障碍发生发展密切相关。首先,ASD儿童蓝斑(locuscoeruleus,LC)-去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)系统超兴奋活动、下丘脑后部组胺受体增加、下丘脑外侧-食欲素系统活动增强以及中脑黑质致密部多巴胺转运体功能异常可导致其觉醒延长。其次,ASD儿童丘脑网状核功能异常,短链脂肪酸、铁元素、维生素A等物质水平降低会导致其非快速眼动(non-rapid eye movement,NREM)睡眠异常,而中缝背核5-羟色胺能神经元活动增强以及杏仁核调控作用异常可扰乱其快速眼动(rapid eye movement, REM)睡眠。此外,ASD儿童脑内褪黑素水平降低和基底前脑胆碱能神经元结构功能改变可导致其睡眠时相转换异常。因此,研究ASD儿童睡眠障碍病理特征并探索其神经机制对进一步寻找针对其核心症状的治疗新策略具有重要意义。

关键词：睡眠障碍自闭症神经机制

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利培酮治疗首发精神分裂症的疗效及对患者心肌标志物水平的影响

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药店周刊 2022年第9期31卷 97-99,102页

作者：吴远大何娟汤华军重庆市精神卫生中心精神科重庆 400036 重庆市公共卫生医疗救治中心结核科重庆沙坪坝 400036 西南医科大学基础医学院人体解剖学教研室四川泸州 646000

目的:研究对首发精神分裂症(FES)患者给予利培酮治疗的临床效果,以及对患者心肌标志物水平的影响.方法:选取2018年12月—2021年12月本院收治的206例FES患者作为研究对象,依据随机数字表法将患者分为参照组和实验组,每组103例,参照组采... 详细信息

目的:研究对首发精神分裂症(FES)患者给予利培酮治疗的临床效果,以及对患者心肌标志物水平的影响.方法:选取2018年12月—2021年12月本院收治的206例FES患者作为研究对象,依据随机数字表法将患者分为参照组和实验组,每组103例,参照组采取常规抗精神药物氯丙嗪治疗,实验组采取利培酮治疗,对比两组疗效.结果:对比参照组,实验组总有效率更高(P<0.05).用药前,两组AST、CK、CK-MB水平及PANSS评分对比差异无统计学意义(P>0.05);用药后,相较于参照组,实验组AST、CK、CK-MB水平与PANSS评分均更低(P<0.05).相较于参照组,实验组不良反应发生率更低(P<0.05).用药前,两组阳性症状、阴性症状、一般精神病理症状评分对比差异无统计学意义(P>0.05);用药后,对比参照组,实验组各项评分均更低(P<0.05).结论:针对FES患者给予利培酮治疗具有良好的临床效果,可有效降低心肌标志物相关指标,减轻临床症状,且不良反应发生率较低,相较于氯丙嗪治疗安全性较高,值得临床应用与推广.

关键词：首发精神分裂症利培酮氯丙嗪心肌标志物

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T细胞免疫在脓毒症继发侵袭性真菌感染中作用的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2019年第11期39卷 1325-1328页

作者：赵乙汜余应喜林时辉徐昉重庆医科大学附属第一医院重症医学科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)是一种具有很高发病率及死亡率的疾病,且多见于院内感染,特别是在脓毒症时,继发IFI的概率大大增加。脓毒症出现免疫抑制会影响T细胞免疫功能,不同的T细胞亚群对IFI各种真菌病原体都有不... 详细信息

侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)是一种具有很高发病率及死亡率的疾病,且多见于院内感染,特别是在脓毒症时,继发IFI的概率大大增加。脓毒症出现免疫抑制会影响T细胞免疫功能,不同的T细胞亚群对IFI各种真菌病原体都有不同的作用。此综述探讨了脓毒症继发IFI中T细胞免疫的病理生理变化、作用机制及治疗方法的研究进展,旨在对脓毒症继发IFI中T细胞的作用做一个总结,并介绍最新研究出的免疫治疗方法。

关键词：侵袭性真菌感染 T淋巴细胞亚群脓毒症免疫疗法

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《医学微生物学》课程思政案例设计与效果分析

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中华医学教育探索杂志 2020年第12期19卷 1414-1417页

作者：何永林杨春徐蕾涂增田一玲蒋仁举郭亚楠卢楠重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室 400016

在新时期,专业课教师不单单起到传授专业知识的作用,更应该立足自身学科特点思考"为谁培养人、培养什么人、怎样培养人"的思政问题。《医学微生物学》是高等医药院校课程体系中的一门主干课程。教研室结合该课程的特点,凝练... 详细信息

在新时期,专业课教师不单单起到传授专业知识的作用,更应该立足自身学科特点思考"为谁培养人、培养什么人、怎样培养人"的思政问题。《医学微生物学》是高等医药院校课程体系中的一门主干课程。教研室结合该课程的特点,凝练设计出一些典型的教学案例,将"爱国、奉献、担当"等思政要素和"严谨、求真、务实"的科研素质融入教学过程中,使学生在专业知识获取的同时渗透政治素养、道德品质和科研素质,从而促进学生综合素质的全面提升。

关键词：医学微生物学课程思政案例设计

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深切缅怀现代体视学奠基人***教授

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中国体视学与图像分析 2021年第2期26卷 197-198页

作者：唐勇杨正伟刘国权重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016 川北医学院形态定量研究室南充637000 北京科技大学材料学部北京100083

2021年2月1日,国际最著名的现代体视学奠基人之一,Hans Jrgen Gottlieb Gundersen教授,因病去世,享年78岁。Gundersen于1970年获得丹麦奥胡斯大学(University ofrhus)医学博士学位。作为奥胡斯大学体视学研究室(Stereological Research Laboratory)——成立于1988年的、可能是世界上唯一直接以"stereology"命名的著名研究室——的教授,他毕生致力于基于设计的无偏体视学(design-based unbiased stereology,常被称为现代体视学)的创建与推广。

关键词：体视学博士学位奥胡斯大学奠基人

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miR-449a通过Trim11影响高糖培养的肾小球系膜细胞增殖

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第三军医大学学报 2019年第16期41卷 1520-1526页

作者：陈雯韵孙艳彭睿彭惠民张政重庆医科大学基础医学院:细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院:分子肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨在高糖培养的系膜细胞中miR-449a与Trim11结合对细胞增殖的调控作用。方法 RT-qPCR检测miR-449a在高糖(25 mmol/L)和低糖(5.5 mmol/L)培养的系膜细胞中的表达;EdU检测miR-449a及Trim11对系膜细胞增殖的影响;生物信息学预测miR-4... 详细信息

目的探讨在高糖培养的系膜细胞中miR-449a与Trim11结合对细胞增殖的调控作用。方法 RT-qPCR检测miR-449a在高糖(25 mmol/L)和低糖(5.5 mmol/L)培养的系膜细胞中的表达;EdU检测miR-449a及Trim11对系膜细胞增殖的影响;生物信息学预测miR-449a与Trim11的结合位点;双荧光素酶验证miR-449a与Trim11靶向作用;Western blot检测上调、下调miR-449a后Trim11蛋白的变化。结果与低糖组比较,miR-449a在高糖培养的系膜细胞中的表达显著降低(P<0.01);双荧光素酶证实miR-449a直接靶向Trim11,过表达miR-449a后,细胞增殖减少,Trim11蛋白水平显著降低(P<0.01);沉默miR-449a,细胞增殖增加,Trim11蛋白水平显著上调(P<0.01);沉默Trim11后,抑制miR-449a对于细胞增殖促进作用被阻止。结论 miR-449a可抑制系膜细胞增殖,其机制可能与抑制靶基因Trim11的表达有关,可能是糖尿病肾病的重要保护性因子。

关键词：肾小球系膜细胞 miR-449a Trim11 细胞增殖

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