检索结果-内蒙古大学图书馆

长链非编码RNA Rpph1对高糖培养的肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响

第三军医大学学报 2019年第1期41卷 33-40页

作者：张攀扬孙艳彭睿彭惠民张政重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) Rpph1对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球系膜细胞炎症因子的影响。方法采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测Rpph1细胞定位,实时定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测Rpph1在DN小鼠肾脏组织和系膜细胞中的水平;生物信息学技术预测Rpph1的编码蛋白能力。构建Rpph1的过表达质粒,并设计合成Rpph1的siRNAs,用qRT-PCR验证其转染效率。在高糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1-siRNA;在低糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1过表达质粒,通过Western blot检测转染Rpph1的siRNA和过表达Rpph1后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)以及单核细胞趋化蛋白-1(macrophage cationic peptide 1,MCP-1)的表达情况。结果与正常小鼠比较,Rpph1在DN小鼠肾脏组织中显著上调(P <0. 01);同样,高糖培养的系膜细胞中Rpph1表达较低糖培养的系膜细胞显著上调(P <0. 01),其主要定位于系膜细胞的细胞质。此外,生物信息学证实Rpph1不具有编码蛋白的能力。且过表达Rpph1后炎症相关因子TNF-α和MCP-1的水平明显上调(P <0. 05);在下调Rpph1后,炎症相关因子TNF-α和MCP-1的表达也随之下降(P <0. 05)。结论在DN小鼠肾脏组织和高糖环境下的系膜细胞中lncRNA Rpph1显著高表达,且增强炎症相关因子的表达。Rpph1可能与糖尿病肾病炎症的发生相关。

关键词：糖尿病肾病长链非编码RNA Rpph1 肾小球系膜细胞炎症

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二甲双胍对血管内皮细胞自噬的作用

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第三军医大学学报 2020年第8期42卷 783-789页

作者：李冰玉刘威远林鑫赵祉颖王志刘杨东王韵重庆医科大学附属第一医院血管外科重庆400016 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院细胞生物学教研室重庆400038

目的观察二甲双胍对内皮细胞自噬的影响,并探讨其可能的调控机制。方法以不同浓度二甲双胍(0、2.5、5、10、20、40 mmol/L)处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)24 h,并以5 mmol/L二甲双胍分别处理细胞2... 详细信息

目的观察二甲双胍对内皮细胞自噬的影响,并探讨其可能的调控机制。方法以不同浓度二甲双胍(0、2.5、5、10、20、40 mmol/L)处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)24 h,并以5 mmol/L二甲双胍分别处理细胞24、48、72 h,用CCK-8法检测细胞存活率;药物处理细胞分4组:对照组(ctl)、二甲双胍组(Met)、TGFβ1组(TGF)、二甲双胍+TGFβ1处理组(M+T),透射电镜观察各组细胞中自噬体的形成;免疫荧光和Western Blot检测自噬相关分子LC3Ⅱ、Beclin-1的表达。在原分组基础上进一步加入Hippo信号通路抑制剂XMU-MP-1和Hippo信号转录因子YAP阻断剂维替泊芬处理,包括XMU-MP-1处理组(XMU),二甲双胍+XMU-MP-1处理组(M+X)、维替泊芬组(Ver)、维替泊芬+TGFβ1共处理组(V+T)、维替泊芬+XMU-MP-1共处理组(V+X),Western Blot检测LC3Ⅱ、YAP、pYAP及其靶蛋白CTGF的表达。结果CCK-8结果表明,与0 mmol/L组相比,10、20、40 mmol/L二甲双胍处理24 h,细胞存活率显著降低(P<0.01),因此后续实验采用5 mmol/L二甲双胍处理24 h;电镜、免疫荧光及Western blot结果表明,与ctl组比较,TGF组细胞内自噬体形成增多,LC3Ⅱ、Beclin-1的表达上调(P<0.05),YAP磷酸化水平降低(P<0.01),CTGF表达上调(P<0.01),加入二甲双胍共处理的M+T组中上述变化明显被阻断;与TGF组比较,V+T组LC3Ⅱ和CTGF表达均下调(P<0.01)。此外,与ctl组比较,XMU组LC3Ⅱ表达增强(P<0.01)、YAP磷酸化水平降低(P<0.01)、CTGF表达(P<0.01)显著上调,与TGF组表达趋势一致;经二甲双胍处理(M+X组),同样逆转上述变化,与M+T组表达趋势一致;与XMU组比较,加入维替泊芬的V+X组LC3Ⅱ和CTGF的表达均下调(P<0.01)。结论二甲双胍通过阻断YAP信号分子的激活抑制了TGFβ1诱导的内皮细胞自噬,从而可能对血管起到保护作用。

关键词：血管损伤内皮细胞自噬 TGFβ1 二甲双胍 YAP

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氟西汀对8月龄APP/PS1小鼠海马齿状回内胆碱能神经元作用的体视学研究

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第三军医大学学报 2019年第8期41卷 786-793页

作者：吴永鑫周春妮范金花蒋林张毅张蕾晁凤蕾马晶梁芯綦英强唐静杨春茂唐勇重庆医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室重庆400016

目的探讨给予氟西汀(fluoxetine, FLX)干预后,8月龄APP/PS1小鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)内胆碱能神经元的总数以及密度的变化,分析认知功能的改善是否与FLX干预后DG区内胆碱能神经元数量变化有关。方法选用20只8月龄雌性APP/PS1小... 详细信息

目的探讨给予氟西汀(fluoxetine, FLX)干预后,8月龄APP/PS1小鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)内胆碱能神经元的总数以及密度的变化,分析认知功能的改善是否与FLX干预后DG区内胆碱能神经元数量变化有关。方法选用20只8月龄雌性APP/PS1小鼠,采用完全随机法分为对照组和干预组,分别给予8周生理盐水和等量FLX腹腔注射后,进行Morris水迷宫测试以检测小鼠学习和记忆能力;运用体视学方法计算两组小鼠海马DG区内胆碱能神经元的总数和密度;运用酶联免疫吸附剂测定胆碱能相关神经递质。结果水迷宫实验结果显示,干预组的逃避潜伏期较对照组明显缩短(P<0.05)。体视学结果显示,FLX显著增加了APP/PS1小鼠海马DG区内胆碱能神经元的数量和密度(P<0.01);酶联免疫吸附实验结果显示,FLX增加了8月龄APP/PS1小鼠海马乙酰胆碱(acetylcholine, ACh)含量(P<0.01)。结论海马DG区内胆碱能神经元总数的变化以及海马ACh含量的变化可能与FLX干预后8月龄APP/PS1小鼠行为学的改变有关。

关键词：胆碱能神经元海马氟西汀体视学

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基于多种数据库分析E2F3基因在黑色素瘤中的变异、表达及临床意义

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海南医学院学报 2023年第20期29卷 1563-1573页

作者：韩利民叶钢邓川代姣赵海龙重庆市长寿区人民医院内分泌内科重庆401220 重庆市长寿区人民医院肝胆外科重庆401220 重庆市长寿区人民医院神经内科重庆401220 重庆市长寿区人民医院药学部重庆401220 遵义医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州遵义563000

目的:探究E2F3基因在黑色素瘤中的变异、表达及临床意义。方法:首先,采用cBioportal数据库、Oncomine数据库、GEO数据库分析E2F3基因在黑色素瘤中的变异情况和表达水平,OSskcm数据库和TISIDB数据库分析E2F3与黑色素瘤的预后和肿瘤免疫... 详细信息

目的:探究E2F3基因在黑色素瘤中的变异、表达及临床意义。方法:首先,采用cBioportal数据库、Oncomine数据库、GEO数据库分析E2F3基因在黑色素瘤中的变异情况和表达水平,OSskcm数据库和TISIDB数据库分析E2F3与黑色素瘤的预后和肿瘤免疫浸润细胞的关系。接着,采用LinkedOmics数据库鉴定黑色素瘤中与E2F3表达相关的差异基因并进行生物学功能分析,利用Cytoscpae筛选Hub基因。最后,通过CMap数据库筛选治疗黑色素瘤的小分子化合物。结果:E2F3基因在黑色素瘤中的变异率为约4%,突变位点有21个。与正常皮肤组织相比,E2F3基因在黑色素瘤中的表达明显升高(P<0.01)。E2F3基因的变异和表达水平升高与黑色素瘤患者的总生存期(OS)缩短有关(P<0.05)。E2F3的CNA水平与pDC、Neutrophil、Act DC、Th17等淋巴细胞的表达水平呈负相关,与CXCL5、CCL13、CCR1等趋化因子的表达水平呈负相关。E2F3的甲基化水平与Th1、Neutrophil、Act DC等淋巴细胞的表达水平呈正相关,与CXCL16、CXCL12、CCR1等趋化因子的表达水平呈正相关。E2F3的表达水平与Th17、Tcm CD4、Th1等淋巴细胞的表达水平呈负相关,与CXCL 16、CCL 22、CCL 2等趋化因子的表达水平呈负相关。黑色素瘤中UHRF1BP1等96个基因的表达与E2F3的表达呈显著相关(|cor|≥0.5,P<0.05),以上基因主要与RNA转运、真核生物的核糖体生物生成、细胞周期等通路有关;其中,WDR12、WDR43、RBM28、UTP18、DKC1、PAK1IP1、DDX31、TEX10、TRUB1、TRMT61B是前10位hub基因。YC-1、辛伐他汀、细胞松弛素-d、Deforolimus和细胞松弛素-b可能是治疗黑色素瘤的5种潜在小分子化合物。结论:E2F3基因突变和表达水平升高与黑色素瘤的不良预后有关,可通过影响不同肿瘤免疫浸润细胞亚型的表达参与黑色素瘤的发生和发展,其可能是黑色素瘤的潜在诊断标志物和治疗靶点。

关键词：黑色素瘤 E2F3 数据库突变免疫浸润预后

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CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼lkb1基因及表型分析

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第三军医大学学报 2019年第15期41卷 1445-1452页

作者：梁森李帅庭袁志黄慧哲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院发育生物学研究室重庆400016

目的利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼lkb1基因,观察和验证纯合子表型,初步探讨Lkb1对肾小管发育的影响。方法针对斑马鱼lkb1基因设计并体外合成gRNA,通过显微注射技术将gRNA和Cas9 mRNA注入野生型胚胎一细胞期卵黄中,利用T7E1酶切和测序... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼lkb1基因,观察和验证纯合子表型,初步探讨Lkb1对肾小管发育的影响。方法针对斑马鱼lkb1基因设计并体外合成gRNA,通过显微注射技术将gRNA和Cas9 mRNA注入野生型胚胎一细胞期卵黄中,利用T7E1酶切和测序筛选出高效gRNA,通过测序筛选出F0代突变体及可遗传突变体,野生鱼和可遗传突变体鱼杂交产生F1代杂合子突变体,测序鉴定F1代杂合子突变类型,通过F1代杂合子自交产生F2代纯合子幼鱼,通过观察鉴定出纯合子表型;通过RT-PCR和免疫印迹验证纯合子表型。结果制备了斑马鱼lkb1 gRNA和Cas9 mRNA,筛选出3种产生移码突变的杂合子,发现斑马鱼lkb1基因敲除纯合子幼鱼受精后第5天游动时头尾剧烈摆动,异常兴奋,鱼鳔缺失,体轴弯曲,卵黄消耗过快,肝脏暗淡,肠道水肿;第9天大多数死亡;纯合子g6pase、pdk2b、pcpck1 mRNA显著升高,Lkb1完全不表达;肾小管标志蛋白mRNA显著升高。结论利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼lkb1基因产生了多种表现,包括肝脏衰竭、肠道水肿、体轴弯曲、鱼鳔缺失、早期致死的表型,同时表明Lkb1对斑马鱼肾小管发育有影响。

关键词： CRISPR/Cas9 lkb1 斑马鱼

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甘草素通过抗炎发挥对阿尔茨海默病的保护作用

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免疫学杂志 2019年第4期35卷 327-333页

作者：杜烨湘罗敏冯敏汪克建贺桂琼重庆医科大学神经科学中心 400016 重庆医科大学基础医学院人体解剖学教研室 400016

目的研究植物雌激素甘草素(liquiritigenin,LG)是否通过抗炎对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发挥保护作用。方法 LG是从中药甘草中提取的一种黄酮类化合物单体,具有多靶向作用,如抗炎、抗氧化等。本实验用N2A细胞(神经瘤母细胞... 详细信息

目的研究植物雌激素甘草素(liquiritigenin,LG)是否通过抗炎对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发挥保护作用。方法 LG是从中药甘草中提取的一种黄酮类化合物单体,具有多靶向作用,如抗炎、抗氧化等。本实验用N2A细胞(神经瘤母细胞)作为正常对照细胞和稳定表达瑞士突变型淀粉样蛋白前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)的N2A细胞(N2AAPP)作为AD细胞模型,结合LG处理,通过MTT、ELISA、Western blot、RT-PCR检测LG对AD模型细胞的细胞活性、雌激素受体(ERβ)、炎症相关蛋白NLRP3和caspase-1以及炎症因子IL-1β、TNF-α的影响。结果与正常的N2A细胞相比,N2A-APP细胞中APP、BACE1蛋白表达以及Aβ水平显著增加,说明N2A-APP作为AD模型细胞的有效性。MTT结果显示LG不影响N2A的细胞活力(P>0.05)。Westers blot结果显示,与正常N2A细胞相比,N2A-APP细胞内ERβ的表达显著下调,而LG处理可显著逆转ERβ的表达。Westers blot结果还发现,与正常细胞相比,N2A-APP细胞内炎症相关蛋白NLRP3和p-caspase-1蛋白表达显著增强,而LG处理可有效逆转NLRP3和p-caspase-1的表达上调(P<0.01)。相应地,RT-PCR结果发现,LG可显著降低N2A-APP细胞内炎症因子IL-1β、TNF-α的水平。结论甘草素可有效抑制AD模型细胞的炎症反应,其机制可能与其上调ERβ蛋白的表达有关。

关键词：阿尔兹海默病甘草素炎症雌激素受体β

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CRISPR/Cas13技术作为病毒核酸检测工具的研究进展

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热带医学杂志 2025年第2期25卷 282-288页

作者：冯文杰王芳应旗康古天乐董宇航张俊梅李冬静贺晓龙吴兴安延安大学生命科学学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710068 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

病毒感染性疾病一直是人类生命健康所面临的威胁之一,建立一个快速、精准的病毒核酸检测平台对于控制病毒的传播以及应对重大公共卫生安全事件具有重要意义。基于成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)以及CRISPR相关蛋白Cas13组成的CRISP... 详细信息

病毒感染性疾病一直是人类生命健康所面临的威胁之一,建立一个快速、精准的病毒核酸检测平台对于控制病毒的传播以及应对重大公共卫生安全事件具有重要意义。基于成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)以及CRISPR相关蛋白Cas13组成的CRISPR/Cas13系统开发出的核酸检测技术可以特异性识别特定的病毒核酸序列,激活Cas13蛋白活性,顺式切割靶标RNA的同时反式切割RNA检测探针实现检测结果的可视化,达到检测的目的。本文综述了基于CRISPR/Cas13开发出多种高特异性和高灵敏度的核酸检测技术,并且总结了这些检测技术在人类、动物以及植物感染性病毒中的应用;同时介绍了基于这些检测技术开发出的简便样品处理方法和高效的结果判读方法,实现在较短的时间内获得准确的结果。CRISPR/Cas13检测技术的不断改进和完善有助于在病毒大流行期间提供可行方案遏制病毒传播。

关键词：基于成簇规律间隔短回文重复序列 Cas13 切割活性病毒核酸检测

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藤黄节杆菌ATCC21606的全基因组测序及序列分析

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基因组学与应用生物学 2020年第5期39卷 2071-2078页

作者：谷璐婷李凌彦孔道春易发平重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 北京大学生命科学学院蛋白质与植物基因研究国家重点实验室北京100871

藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus,***)ATCC 21606是一种革兰氏阳性短杆状的放线菌。该菌分泌的溶菌酶(Lyticase)能够有效裂解酵母细胞壁,同时能分泌限制性核酸内切酶AluⅠ和热稳定的黄嘌呤氧化酶,但目前还没有该菌株的全基因组序列相关... 详细信息

藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus,***)ATCC 21606是一种革兰氏阳性短杆状的放线菌。该菌分泌的溶菌酶(Lyticase)能够有效裂解酵母细胞壁,同时能分泌限制性核酸内切酶AluⅠ和热稳定的黄嘌呤氧化酶,但目前还没有该菌株的全基因组序列相关的报道。本研究首先通过对*** ATCC 21606菌株的基因组进行高通量测序;再利用SOAPdenovo、GeneMarks等软件对基因组进行组装和组分分析;接着与COG、GO、KEGG、NR、Swiss-Prot和CAZy数据库比对进行基因功能注释;并利用antiSMASH软件进行次级代谢产物合成基因簇预测;最终得到大小为4209480 bp的全基因组序列,GC含量为74.68%,共预测到编码基因3741个。基因序列已提交至美国国立生物技术信息中心(NCBI)的GenBank数据库,登录号为RQIK000-00000。本研究首次报道了*** ATCC 21606的全基因组序列,为后续该菌株的功能基因、代谢产物合成途径及比较基因组学等相关研究提供基础。

关键词：藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus) 溶菌酶全基因组测序基因注释基因簇

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中医学在自然哲学-科学发展的历史定位——对中医药优势特点及未来发展的哲学再思考

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世界科学技术-中医药现代化 2021年第5期23卷 1470-1477页

作者：杜力军赵玉男王玉刚谢伟东雷帆李俊孙虹袁梽漪清华大学生命科学学院北京100084 南京中医药大学基础医学院病理教研室南京210046 华中科技大学同济医学院基础医学院武汉430030 清华大学国际深圳研究生院生命与健康学部深圳518055 江西中医药大学创新药物与高效节能降耗制药设备国家重点实验室南昌330006 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100094 重庆医科大学药学院重庆400016

一直以来对中医学与当代自然科学的关系存在着争论。对于中医学这种临床具有强大生命力的学科,从历史发展的角度对其进行分析定位,对于全面深入认识与发展中医学具有重要意义。为此,我们从西方自然哲学-自然科学的发展角度来探讨中医学... 详细信息

一直以来对中医学与当代自然科学的关系存在着争论。对于中医学这种临床具有强大生命力的学科,从历史发展的角度对其进行分析定位,对于全面深入认识与发展中医学具有重要意义。为此,我们从西方自然哲学-自然科学的发展角度来探讨中医学的历史定位,从中获得对中医学的理性认识,为中医药学科的发展提供哲学和科学依据。结果表明:(1)从探讨自然运行规律来看,中医学属于科学范畴;(2)从历史角度来看,中医学应属于自然哲学下,与由数理实验科学发展而来的自然科学并列;(3)"形而上学-辨证论治-信息反馈修正"是其理论形成的主要闭环模式,并以此确保了这种形而上学与临床诊疗紧密结合在防治疾病上的可行性和可确证性;(4)对中医学的研究应该既不同于自然哲学也不同于自然科学;(5)坚持科学自觉和哲学自觉是研究发展中医学的重要治学态度。

关键词：中医学自然哲学自然科学中药学科学

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肠道NDRG2参与PTSD状态下内脏高敏感作用及其机制研究

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胃肠病学 2021年第3期26卷 139-144页

作者：王静王彦钧王悠邓天伟曾玮玮梁华平王建民陈东风张健陈阳美杨敏陆军军医大学大坪医院消化内科 400042 重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆大学附属三峡医院消化内科陆军军医大学大坪医院战伤感染与特需药品研究室 400042 陆军军医大学大坪医院武器杀伤生物效应评估研究室 400042 空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

背景:内脏高敏感是功能性胃肠病(FGIDs)发生的最重要的病理生理学机制。创伤后应激障碍(PTSD)状态下存在广泛的内脏敏感性改变,但在肠道水平敏化的机制尚不清楚。目的:探讨PTSD状态下N-Myc下游调控基因2(NDRG2)在肠道水平参与内脏高敏... 详细信息

背景:内脏高敏感是功能性胃肠病(FGIDs)发生的最重要的病理生理学机制。创伤后应激障碍(PTSD)状态下存在广泛的内脏敏感性改变,但在肠道水平敏化的机制尚不清楚。目的:探讨PTSD状态下N-Myc下游调控基因2(NDRG2)在肠道水平参与内脏高敏感的作用。方法:采用单一连续刺激(SPS)方法建立PTSD模型。将SD大鼠分为正常对照组、CTX组、PTSD组、PTSD+CTX组,小鼠分为正常对照组、PTSD组、NDRG2^(-/-)组和NDRG2^(-/-)+PTSD组。采用结直肠扩张法(CRD)和内脏运动反射(VMR)评估大鼠和小鼠的内脏敏感性变化,免疫荧光法评估大鼠肠道NDRG2表达。结果:CRD压力为40、60 mm Hg时,PTSD小鼠的VMR显著高于正常对照小鼠(P=0.033,P=0.021),NDRG2^(-/-)+PTSD组小鼠的VMR显著低于PTSD小鼠(P=0.015,P=0.002)。CRD压力为40、60 mm Hg时,PTSD大鼠的VMR显著高于正常对照大鼠(P=0.003,P<0.001),CTX组VMR显著低于正常对照大鼠(P=0.022,P=0.012),PTSD+CTX组的VMR显著低于PTSD大鼠(P=0.003,P<0.001)。与正常对照大鼠相比,PTSD大鼠结肠NDRG2表达显著增高(P=0.007),CTX大鼠显著降低(P=0.001);与PTSD大鼠相比,PTSD+CTX组大鼠结肠NDRG2表达显著降低(P<0.001)。结论:在PTSD状态下,肠道NDRG2在外周水平参与了内脏高敏感的形成,CTX干预可下调NDRG2表达,从而发挥抗内脏伤害性刺激的作用。

关键词：应激障碍,创伤后基因,NDRG2 内脏高敏感内脏运动反射头孢曲松

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