检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织化学与细胞化学杂志 2016年第5期25卷 385-391页

作者：何菲樊春华郭珮王弘凯周宏宇陈益李晋芳冉建华重庆医科大学基础医学院解剖学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400016

目的探讨PKCβ/p66Shc通路在高浓度尿素引起的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)产生中的作用。方法体外培养HUVECs,分为正常对照组、甘露醇组、尿素组和尿素+LY333531(PKCβ抑制剂)组。采用CCK8法检测高浓度尿素对细胞活性的影响,倒置显微镜观察细胞形态改变;DCFH-DA法检测细胞内ROS含量;Western blot检测细胞中p66Shc、p-p66Shc、PKCβ和p-PKCβ水平;免疫荧光技术观察细胞内p-p66Shc水平。结果 25mmol/L尿素明显抑制HUVECs活力,并引起细胞排列紊乱、细胞间隙增大、铺路石样排列结构受到破坏等形态学改变。与对照组相比,25mmol/L尿素引起细胞内ROS水平明显升高,在6h达到峰值;加入PKCβ抑制剂LY333531后ROS水平明显降低。Western blot结果显示,25mmol/L尿素诱导p66Shc、p-p66Shc、PKCβ和p-PKCβ水平随作用时间的延长而逐渐增加。25mmol/L尿素负荷6h后可见细胞胞质内p-p66Shc免疫反应性明显增强,LY333531可阻断该作用;Western blot检测也显示LY333531可显著抑制高浓度尿素对p-p66Shc水平的上调。结论 PKCβ/p66Shc信号通路是高浓度尿素诱导HUVECs内ROS产生的重要途径。

关键词：尿素人脐静脉内皮细胞活性氧簇

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2-甲氧基雌二醇对鼻咽癌CNE-2干细胞体外增殖、迁移及放疗敏感性的影响

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第三军医大学学报 2016年第22期38卷 2424-2430页

作者：吴顺龙李少林李亚军重庆医科大学附属第一医院肿瘤科重庆400016 重庆医科大学基础医学院放射医学与肿瘤教研室重庆400016 遵义医学院附属医院肿瘤科贵州遵义563000 遵义医学院第三附属医院肿瘤科贵州遵义563000

目的探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-Me OE2)对人鼻咽癌CNE-2干细胞(nasopharyngeal cancer stem cells,NPCSCs)增殖、迁移及放疗敏感性的影响及其可能机制。方法收集本课题组前期富集并已鉴定的鼻咽癌CNE-2干细胞,Western b... 详细信息

目的探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-Me OE2)对人鼻咽癌CNE-2干细胞(nasopharyngeal cancer stem cells,NPCSCs)增殖、迁移及放疗敏感性的影响及其可能机制。方法收集本课题组前期富集并已鉴定的鼻咽癌CNE-2干细胞,Western blot检测亲本CNE-2细胞及NPCSCs乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)和核转录因子(NF-κB p65)的蛋白表达,克隆形成实验检测两组细胞的放射敏感性。按2-Me OE2浓度分为3组,分别用0、4、8μmol/L 2-Me OE2处理鼻咽癌干细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8及Transwell检测细胞增殖及迁移能力,再联合X射线(0、2、4、8 Gy)照射,克隆形成实验检测3组细胞放疗敏感性;同时用4μmol/L 2-Me OE2处理鼻咽癌干细胞后不同时间(0、24、48 h)提取蛋白,Western blot检测不同浓度2-Me OE2处理以及4μmol/L 2-Me OE2处理后0、24、48 h提取的干细胞HIF-1α和NF-κB p65蛋白表达。结果相对于亲本CNE-2细胞,干细胞HIF-1α和NF-κB p65蛋白表达明显增高(P均<0.01),X射线辐射后干细胞各放射学参数D0、Dq、N及SF2均高于亲本CNE-2细胞。0、4、8μmol/L 2-Me OE2处理干细胞后,随浓度增加,致密球状生长的干细胞微球体逐渐变得离散,干细胞增殖活力降低(P<0.01);迁移能力降低(P<0.01);放疗敏感性增高,4μmol/L2-Me OE2组放射增敏比(sensitivity enhancement ratio,SER)为1.19,8μmol/L 2-Me OE2组SER为1.39;HIF-1α、NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01),呈浓度依赖性。2-Me OE2(4μmol/L)处理干细胞后随时间延长HIF-1α、NF-κB p65蛋白表达明显降低(P<0.01),呈时间依赖性。结论相对于亲本CNE-2细胞,干细胞高表达HIF-1α和NF-κB p65,并且对放疗具有较低的敏感性。2-Me OE2能有效抑制鼻咽癌CNE-2干细胞增殖、迁移并增加其放疗敏感性,其机制可能为2-Me OE2抑制HIF-1α和NF-κB p65蛋白表达。

关键词：鼻咽癌癌干细胞 HIF-1α 2-MeOE2 NF-κB p65 放疗敏感性

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乳腺癌相关抗原ROR1 H-2Kd限制性CTL表位预测及初步鉴定

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重庆医科大学学报 2016年第2期41卷 168-171页

作者：马天明张娜郑维萍陈黎唐俐苏新良重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室组织工程与干细胞研究室重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科重庆400016

目的:预测并鉴定乳腺癌相关抗原受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1,ROR1)H-2Kd限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位,为研究以ROR1为靶点的乳腺癌免疫治疗奠定基础。方法... 详细信息

目的:预测并鉴定乳腺癌相关抗原受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1,ROR1)H-2Kd限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位,为研究以ROR1为靶点的乳腺癌免疫治疗奠定基础。方法:采用生物信息学方法预测乳腺癌相关抗原ROR1 H-2Kd限制性CTL表位,选取预测软件中评分较高的抗原表位肽进行人工合成及纯化。肽结合试验检测抗原表位肽与H-2Kd分子的亲和力。选用亲和力较高的抗原表位肽体外刺激脾淋巴细胞,ELISA法检测细胞因子γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和白介素-12(interleukin-12,IL-12)的分泌。结果:预测的4条候选ROR1 CTL表位肽均具有较高的亲和力,其荧光指数(fluorescence index,FI)在30μg/ml时均大于1.5。ELISA结果显示表位肽ROR1(NYMFPSQGI)可在体外有效诱导IFN-γ和IL-12细胞因子的产生。结论:ROR1(NYMFPSQGI)为乳腺癌相关抗原ROR1H-2Kd限制性CTL表位,为研究以ROR1为靶点的乳腺癌免疫治疗奠定了基础。

关键词：乳腺癌 ROR1 CTL表位生物信息学方法

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在法医学专业开设学科整合型PBL课程的实践与探索

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继续医学教育 2016年第2期30卷 43-44页

作者：陈全邓世雄唐仁宽李剑波刘云志王娅兰余华荣重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

法医学是实践性和应用性较强的学科,在法医学本科专业学生中,开设多学科整合型PBL课程,让学生早期接触法医实例,建立基础与法医的联系,提高学生学习兴趣、自主学习和逻辑思维能力、分析和解决问题能力,渐进性培养了学生的法医逻辑思维模... 详细信息

法医学是实践性和应用性较强的学科,在法医学本科专业学生中,开设多学科整合型PBL课程,让学生早期接触法医实例,建立基础与法医的联系,提高学生学习兴趣、自主学习和逻辑思维能力、分析和解决问题能力,渐进性培养了学生的法医逻辑思维模式,并且丰富学生在法律、人文及伦理等方面的知识。

关键词： PBL 整合课程法医学教学改革

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表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对免疫性肝损伤的保护作用及其机制研究

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中国免疫学杂志 2016年第10期32卷 1458-1461页

作者：于淑静周莲娣魏彩冰孙宗良张起辉陶崑重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室重庆400016 重庆大学化学化工学院重庆400044

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对雷公藤甲素(TP)诱导的免疫性肝损伤的保护性作用及其作用机制。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为4组,即正常对照组、EGCG对照组、TP组、EGCG治疗组。以赖氏法检测血清中ALT水平,以分光光度法检... 详细信息

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对雷公藤甲素(TP)诱导的免疫性肝损伤的保护性作用及其作用机制。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为4组,即正常对照组、EGCG对照组、TP组、EGCG治疗组。以赖氏法检测血清中ALT水平,以分光光度法检测肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的变化情况,以HE染色观测小鼠肝脏组织形态学变化,以ELISA方法检测肝脏中白细胞介素(IL)-17和IL-6的表达水平,以Western blot方法检测肝脏中Toll样受体4(TLR4)的表达情况。结果:TP组小鼠血清转氨酶水平明显高于正常对照组(P<0.005),EGCG对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),而EGCG治疗组小鼠血清转氨酶水平与TP组相比下降明显(P<0.005)。TP组小鼠肝脏病理切片示较多肝细胞坏死和中性粒细胞浸润,EGCG对照组和正常对照组小鼠肝脏形态学基本正常,EGCG治疗组示肝细胞炎症坏死程度较TP组有大幅减轻。TP组小鼠肝脏中MDA、IL-17及IL-6水平明显高于正常对照组(P<0.005),而SOD和GSH水平明显低于正常对照组(SOD,P<0.05;GSH,P<0.005),EGCG对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),EGCG治疗组小鼠肝脏中MDA、IL-17及IL-6水平均下降明显(P<0.005),而SOD和GSH水平均增高,与TP组比较有显著性差异(SOD,P<0.05;GSH,P<0.005)。TP组肝脏TLR4蛋白表达水平高于正常对照组,EGCG对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),而EGCG治疗组TLR4水平显著降低。结论:EGCG对TP所致小鼠肝损伤有明显的保护作用,可能与其抗氧化作用及对炎症因子的调节有关。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯雷公藤甲素肝损伤炎症因子抗氧化作用

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沉默NF-κB p65基因可抑制鼻咽癌CNE-2干细胞的增殖和迁移并促进凋亡

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肿瘤 2016年第2期36卷 158-165页

作者：吴顺龙李亚军胡瑶瑶张娜刘双王颖李少林重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016 遵义医学院附属医院肿瘤科贵州遵义563000 重庆市肿瘤研究所肿瘤放疗科重庆400030

目的 :探讨沉默核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65对鼻咽癌CNE-2干细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响。方法 :将沉默NF-κB p65基因的重组慢病毒感染CNE-2干细胞,应用蛋白质印迹法检测CNE-2干细胞中NF-κB p65、Bcl-2和Bax蛋... 详细信息

目的 :探讨沉默核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65对鼻咽癌CNE-2干细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响。方法 :将沉默NF-κB p65基因的重组慢病毒感染CNE-2干细胞,应用蛋白质印迹法检测CNE-2干细胞中NF-κB p65、Bcl-2和Bax蛋白的表达,免疫荧光实验观察NF-κB p65在细胞核和细胞质中的表达变化,CCK-8法检测细胞的增殖能力,FCM法检测细胞的凋亡,Transwell小室法检测细胞的迁移能力。结果 :沉默NF-κB p65基因的重组慢病毒感染后,CNE-2干细胞中NF-κB p65和Bcl-2蛋白的表达水平低于空白对照组(CNE-2干细胞未进行任何转染)和阴性对照组(CNE-2干细胞转染阴性对照慢病毒)(P值均<0.01),Bax蛋白的表达水平高于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.01);而空白对照组和阴性对照组细胞中NF-κB p65、Bcl-2和Bax蛋白表达水平间的差异无统计学意义(P值均>0.05)。沉默NF-κB p65基因的重组慢病毒感染后,CNE-2干细胞的增殖能力和迁移能力下降(P<0.05和P<0.01),而凋亡率升高(P<0.01)。结论 :NF-κB p65可介导鼻咽癌CNE-2干细胞的增殖、凋亡及迁移能力,其作用可能与调节Bcl-2和Bax的表达有关。

关键词：鼻咽肿瘤肿瘤干细胞 NF-κB 细胞增殖细胞凋亡细胞迁移分析

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基于母胎胆汁酸代谢轮廓的妊娠肝内胆汁淤积症分度研究

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重庆医科大学学报 2016年第3期41卷 228-233页

作者：崔悦王文娟田刚张晓清邓丹邵勇丁敏重庆医科大学检验医学院、临床检验诊断学教育部重点实验室重庆医科大学公共卫生与管理学院卫生统计学教研室重庆医科大学附属第一医院妇产科重庆400016

目的:探讨基于母胎血清胆汁酸代谢轮廓的妊娠肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)分度。方法:采用高效液相色谱-紫外检测法对61名正常孕妇,轻、重度ICP患者母、脐血的9种结合型胆汁酸成分进行测定,并将受试者分... 详细信息

目的:探讨基于母胎血清胆汁酸代谢轮廓的妊娠肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)分度。方法:采用高效液相色谱-紫外检测法对61名正常孕妇,轻、重度ICP患者母、脐血的9种结合型胆汁酸成分进行测定,并将受试者分为建模集(n=40)与验证集(n=21),结合偏最小二乘判别分析对胆汁酸代谢轮廓进行分析、建模与验证。结果:母血胆汁酸代谢模型可区分正常孕妇组,轻度ICP组,与重度ICP组;脐血胆汁酸代谢模型可区分重度ICP组与非重度组。母、脐血分度模型的验证效率分别达90.5%与100.0%。牛磺熊去氧胆酸(P=0.004),牛磺胆酸(P=0.005)以及甘氨胆酸(P=0.032)在ICP孕妇中明显增高;甘氨石胆酸(P<0.001)和牛磺脱氧胆酸(P=0.001)在ICP胎儿中明显增高。结论:ICP母、脐血各有其特征的胆汁酸代谢轮廓,均可用于对ICP分度。

关键词：妊娠肝内胆汁淤积症胆汁酸代谢轮廓分度胎盘保护

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白藜芦醇对阿尔茨海默病动物模型miRNA-106 b的影响

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中华神经科杂志 2016年第11期49卷 846-851页

作者：孔丹莉赵祖国何玉清丁元林罗燕鸿梁碧玉王瑾于海兵广东医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室东莞523808 广东医科大学公共卫生学院微生物与免疫教研室东莞523808 广东医科大学系统生物学研究所东莞523808 广东医科大学基础医学院东莞523808 广东医科大学科技处东莞523808

目的：探讨白藜芦醇对阿尔茨海默病（ AD）动物模型中miRNA-106b的影响。方法取3月龄健康昆明雄性小鼠50只，按照完全随机区组的抽样方法将其分为正常对照组、AD模型组和白藜芦醇高、中、低剂量组，每组10只。除正常对照组外，对其余各... 详细信息

目的：探讨白藜芦醇对阿尔茨海默病（ AD）动物模型中miRNA-106b的影响。方法取3月龄健康昆明雄性小鼠50只，按照完全随机区组的抽样方法将其分为正常对照组、AD模型组和白藜芦醇高、中、低剂量组，每组10只。除正常对照组外，对其余各组均制作AD模型，连续30 d。从第31天起对对照及模型组每天灌胃双蒸水，其余组分别灌胃不同剂量白藜芦醇，连续60 d。给药结束后，观测小鼠行为记忆功能；检测各组小鼠大脑组织中淀粉样前体蛋白（ APP）、P62、载脂蛋白A1（ApoA1）、miRNA-106b、三磷酸腺苷结合盒转运子A1（ABCA1）表达变化；同时验证APP 3′UTR 序列中是否包含miRNA-106b的结合位点。结果通过跳台实验发现模型组小鼠记忆功能较对照组有不同程度下降，白藜芦醇干预组小鼠记忆功能较模型组均有不同程度提高（均P＜0.05）；AD小鼠大脑组织中APP表达（1.131±0.035）较正常对照组（0.652±0.026）高，而P62（0.412±0.022）、ApoA1（0.534±0.032）表达较低（均P＜0.05），高、中剂量白藜芦醇处理后可不同程度下调APP水平（0.733±0.018，0.929±0.019，F＝177.733）并升高P62（0.954±0.035，0.633±0.015，F＝434.5）、ApoA1（1.042±0.051，0.824±0.034，F＝286.582）水平（均P＜0.05）。 AD模型组动物脑组织miRNA-106b （0.464±0.314）及ABCA1（0.293±0.042）的表达较正常对照组miRNA-106b（1.064±0.032，F＝238.159）及ABCA1（0.781±0.027，F＝341.61）降低（均P＜0.05），高、中剂量白藜芦醇处理后miRNA-106b（0.843±0.034，0.601±0.012）及ABCA1（0.882±0.025，0.624±0.036）水平有不同程度升高（均P＜0.05）；荧光素酶报告载体实验表明APP 3′UTR序列中包含miRNA-106b的结合位点。结论 APP是miRNA-106b的靶基因之一，白藜芦醇可通过提高AD动物模型中miRNA-106b的表达并降低其靶基因APP的表达，同时可通过提高其他靶基因P62、ApoA1的水平来改善AD情况。这为AD的临床治疗提供了新的理论依据。

关键词：白藜芦醇阿尔茨海默病 miRNA 抗-淀粉样前体蛋白

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降钙素基因相关肽参与调节Th17和Treg细胞分化

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河北医科大学学报 2017年第3期38卷 326-330页

作者：刘文宣杨磊刘文聪姚智燕李涛苏鹏河北医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室河北石家庄050017 河北医科大学第一医院超声科河北石家庄050031 河北医科大学基础医学院免疫学教研室河北石家庄050017 辽宁省辽阳市中心医院胸外科辽宁辽阳111000

目的研究降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)对人外周血中Th17(IL-17producing T cell)和Treg(regulatory T cell)细胞分化的调节作用。方法采用免疫磁珠法(magnetic activated cell sorting,MACS)分离人外周血中CD4^+CD45RA^+T细胞,即初始CD4^+T细胞,在一定条件下分别体外诱导其向Th17细胞和Treg细胞分化,之后用流式细胞术测定Th17和Treg细胞所占比例;用实时定量RT-PCR方法检测Th17和Treg细胞分化的特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(orphan nuclear receptorγt,RORγt)和转录因子FoxP3(foxhead box protein 3)mRNA的表达水平;用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测Th17细胞上清中IL-17A的含量,进而从多个方面探讨CGRP对Th17和Treg细胞分化的影响。结果 CGRP可剂量依赖性增加Th17细胞所占的比例和RORγt mRNA的表达水平(P<0.05);另外,CGRP也促进了IL-17A的分泌(P<0.05)。同时,CGRP能剂量依赖性抑制Treg细胞所占的比例和FoxP3mRNA的表达(P<0.05)。结论 CGRP可促进人外周血中初始CD4^+T细胞向Th17细胞分化,而抑制其向Treg细胞分化。

关键词：降钙素 Th17细胞 T淋巴细胞,调节性

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17β-雌二醇对人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞Hsp27表达的影响及作用机制

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基础医学与临床 2016年第10期36卷 1348-1353页

作者：莫小梅朱平刘智敏李梨重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨17β-雌二醇对人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞Hsp27表达的影响及作用机制。方法用10-8 mol/L的17β-雌二醇(E2)处理不同时间BCPAP细胞,Western blot检测细胞中Hsp27蛋白的表达;分别用E2、PPT和DPN处理BCPAP细胞,Western blot检测细... 详细信息

目的探讨17β-雌二醇对人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞Hsp27表达的影响及作用机制。方法用10-8 mol/L的17β-雌二醇(E2)处理不同时间BCPAP细胞,Western blot检测细胞中Hsp27蛋白的表达;分别用E2、PPT和DPN处理BCPAP细胞,Western blot检测细胞中Hsp27蛋白的表达;设计合成ERαsiRNA、ERβsiRNA并转染BCPAP细胞,Western blot检测细胞中ERα、ERβ和Hsp27蛋白的表达;CHIP检测ERα、ERβ对Hsp27基因启动子的影响。结果用10-8mol/L的E2处理不同时间BCPAP细胞,随着E2处理时间增加,E2对BCPAP细胞中Hsp27蛋白的表达水平逐渐增高,在24 h达到峰值(P<0.05);E2作用转染ERαsiRNA的BCPAP细胞24 h,与E2处理组相比,Hsp27蛋白的表达水平降低(P<0.05);E2作用转染ERβsiRNA的BCPAP细胞24 h,与E2处理组相比,Hsp27蛋白的表达水平升高(P<0.05);Ch IP结果显示ERα能够与Hsp27基因启动子区域结合。结论 E2可以通过ERα促进BCPAP细胞中Hsp27蛋白水平的增高。

关键词： 17β-雌二醇 Hsp27 雌激素受体甲状腺乳头状癌

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