检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2015年第13期37卷 1331-1337页

作者：潘湘阳彭源陈俊霞重庆医科大学基础医学院:细胞生物学与遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院第一临床学院重庆400016

目的研究核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI稳定转染B16细胞,未转染和空质粒作对照组(p IRES2-EGFP组),经G418筛选出阳性克隆。RT-... 详细信息

目的研究核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI稳定转染B16细胞,未转染和空质粒作对照组(p IRES2-EGFP组),经G418筛选出阳性克隆。RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光检测RI的表达;MTT检测细胞的增殖;流式细胞术、TUNEL及Hochest33342检测细胞周期及凋亡;Western blot检测凋亡相关的蛋白及ILK/PI3K/AKT信号通路关键分子的表达;分别注射各组B16细胞到C57/BL小鼠建立移植瘤模型,观察肿瘤的生长及肿瘤微血管的变化,进一步分析ILK/PI3K/AKT信号通路蛋白在肿瘤组织中的表达。结果转染RI细胞组的RI mRNA和蛋白表达水平显著升高;MTT结果显示B16-RI细胞较对照组增殖能力明显降低,流式细胞结果显示B16-RI细胞的S期明显增加,表明RI表达上调后细胞生长停滞于S期(P<0.05);Hochest 33342、TUNEL及Annexin V和PI双染色流式法细胞凋亡检测结果证实,B16-RI细胞与对照组相比出现大量凋亡细胞(P<0.01)及典型凋亡形态特征:染色质凝集,核碎裂和明亮的蓝色荧光等;Western blot结果显示,与对照组相比,B16-RI细胞中ILK、p-Akt、p-GSK3β、Bcl-2及β-catenin的表达明显降低,而活化的Caspase-3和Bax蛋白的表达显著增加(P<0.01);动物的移植瘤实验结果显示,转RI组的小鼠的瘤重显著降低(P<0.01),瘤组织中的血管密度明显减少,同时ILK、p-Akt、p-GSK3β、β-catenin在瘤组织中表达减少。TUNEL肿瘤组织凋亡检测结果与体外细胞一致。结论过表达RI可能通过调节ILK/PI3K/AKT信号通路显著抑制了小鼠黑色素瘤B16细胞的生长并诱导了B16细胞的凋亡。

关键词：核糖核酸酶抑制因子 B16细胞增殖凋亡 ILK/PI3K/AKT信号通路

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颅骨骨性标志点对称性研究及其法医人类学意义

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重庆医科大学学报 2015年第11期40卷 1476-1480页

作者：徐吕子万立华吕宙唐瑞沈厉重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016 重庆医科大学附属大学城医院眼科重庆400016

目的:对颅骨11项骨性标志点对称性进行研究,确定其偏移范围。方法:采用颅像重合仪采集已标定骨性标志点的84枚男性颅骨、21枚女性颅骨图像,并制作所有图像的水平反转像。将原始像与反转像以颅骨中线为基准进行重合,测量反转像与原始像... 详细信息

目的:对颅骨11项骨性标志点对称性进行研究,确定其偏移范围。方法:采用颅像重合仪采集已标定骨性标志点的84枚男性颅骨、21枚女性颅骨图像,并制作所有图像的水平反转像。将原始像与反转像以颅骨中线为基准进行重合,测量反转像与原始像骨性标志点之间的距离。结果:在11项骨性标志点中,额颞点、眶额颧点、颞额颧点、眶外结节对称性最好,偏移范围在1 mm左右,是对破碎或残缺不全颅骨修复的优秀标志点。结论:额颞点、眶额颧点、颞额颧点、眶外结节对称性好,可以用于对破碎或残缺不全颅骨的颅像重合,是对颅骨进行修复及校正良好指标。

关键词：颅像重合破碎颅骨残缺不全颅骨颅骨修复与校正

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链脲佐菌素致阿尔茨海默病模型大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的变化

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重庆医科大学学报 2015年第5期40卷 687-692页

作者：王华杨容余华荣重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:观察侧脑室(intracerebroventricular,ICV)注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对大鼠脑内m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ICV注射生理盐水,模... 详细信息

目的:观察侧脑室(intracerebroventricular,ICV)注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对大鼠脑内m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ICV注射生理盐水,模型组于第1天和第3天侧脑室注射STZ(ICV-STZ,3 mg/kg)建立AD模型。第1次注射后36 d采用Morris水迷宫检测2组大鼠空间学习和记忆能力的变化;Western blot检测2组大鼠大脑皮质和海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-m TORSer2448)、核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(P70 ribosomal S6 protein kinase,P70S6K)、磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(phosphorylated P70 ribosomal S6 protein kinase,p-P70S6KThr389)、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substract-1,IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(phosphorylated insulin receptor substract-1,p-IRS-1Ser636)蛋白的表达;HE染色观察2组大鼠大脑皮质和海马组织形态学的改变;甲硫素S染色观察2组大鼠脑内Aβ的沉积。结果:Morris水迷宫结果显示ICV-STZ能明显降低大鼠目标象限停留时间[对照组:(55.945±9.447)s,模型组:(31.961±5.346)s,t=8.558,P=0.000]和穿越平台次数[对照组:(7.533±2.560)次,模型组:(2.867±1.506)次,t=6.086,P=0.000];HE染色可见:ICV-STZ大鼠大脑皮质和海马的部分细胞出现了明显的固缩和肿胀;甲硫素S染色发现:在ICV-STZ处理后,大鼠脑内出现Aβ的大量沉积。Western blot结果表明:ICV-STZ能同时增加大鼠大脑皮质p-P70S6KThr389[对照组:(0.268±0.066),模型组:(0.654±0.079),t=-8.409,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组:(0.710±0.092),模型组:(1.033±0.135),t=-4.417,P=0.002]和海马p-P70S6KThr389[对照组:(0.405±0.064),模型组:(0.732±0.077),t=-7.339,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组:(0.498±0.093),模型组:(0.836±0.102),t=-5.496,P=0.001]蛋白的表达,但不影响大鼠大脑皮质和海马P70S6K、m TOR、p-m TORSer2448、IRS-1蛋白的表达。结论:ICV-STZ能增加大鼠脑内m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路的激活,提示异常活化的m TOR/P70S6K/IRS-1信号通路可能参与了AD的发生发展。

关键词：阿尔茨海默病哺乳动物雷帕霉素靶蛋白核糖体40S小亚基S6蛋白激酶胰岛素受体底物-1

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抑郁症大鼠海马CA1区及齿状回毛细血管的体视学研究

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重庆医科大学学报 2015年第5期40卷 649-655页

作者：谭川雪王飞飞陈林木黄春霞高原蒋林张毅周春妮晁凤蕾张蕾唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室、干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院老年科重庆400016

目的:研究慢性不可预见性刺激(chronically unpredicted stress,CUS)所致抑郁症模型大鼠海马CA1区和齿状回(dentate gyrus,DG)体积及毛细血管的改变。方法:选取Sprague Dawley(SD)大鼠,经筛选后随机分为对照组10只和模型组10只。模型组... 详细信息

目的:研究慢性不可预见性刺激(chronically unpredicted stress,CUS)所致抑郁症模型大鼠海马CA1区和齿状回(dentate gyrus,DG)体积及毛细血管的改变。方法:选取Sprague Dawley(SD)大鼠,经筛选后随机分为对照组10只和模型组10只。模型组采取慢性不可预见刺激建立抑郁症模型,共给予应激35 d,对照组不给予应激。利用糖水偏好实验和开场实验检测模型是否建立成功。建模成功后,分别从模型组和对照组中各随机选取5只SD大鼠,运用体视学和免疫组化染色相结合的方法对大鼠海马CA1区和DG毛细血管进行定量研究,剩余5只进行相关分子生物学研究。结果:模型组大鼠和对照组大鼠在体质量[(314.81±31.52)g,(349.18±28.23)g,t=2.569,P=0.019]、糖水偏好实验[(82.37±8.44)%,(89.33±3.97)%,t=2.359,P=0.03]、开场实验结果[(48.30±39.49)分,(87.70±38.32)分,u=-1.988,P=0.047]具有统计学差异,模型组较对照组大鼠海马总体积[(88.84±7.51)mm3,(99.89±12.55)mm3,t=2.388,P=0.028]、海马CA1区[(27.78±1.84)mm3,(32.38±3.69)mm3,t=3.522,P=0.004]和DG[(21.02±2.61)mm3,(24.20±3.33)mm3,t=2.377,P=0.029]体积明显减少,模型组较对照组大鼠海马CA1区毛细血管总长度[(8.454±1.010)m,(11.012±1.642)m,t=2.967,P=0.018]、总体积[(0.104±0.019)mm3,(0.151±0.021)mm3,t=3.720,P=0.006]、总表面积[(1.025±0.113)cm2,(1.589±0.313)cm2,t=3.794,P=0.013]、平均直径[(3.884±0.458)μm,(4.580±0.419)μm,t=2.509,P=0.036]下降以及DG毛细血管的总体积[(0.078±0.021)mm3,(0.117±0.024)mm3,t=2.716,P=0.026]、总表面积[(0.838±0.184)cm2,(1.133±0.074)cm2,t=3.32,P=0.011]、平均直径[(3.611±0.493)μm,(4.630±0.635)μm,t=2.834,P=0.022]下降,结果具有统计学意义。结论:抑郁症模型大鼠大脑海马萎缩,CA1区、DG毛细血管改变,海马结构与毛细血管的改变可能参与了抑郁症的发病机制。

关键词：抑郁症海马 CA1 齿状回毛细血管体视学

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经典Wnt/β-catenin信号通路介导子痫前期滋养细胞氧化应激损伤的机制研究

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重庆医科大学学报 2015年第6期40卷 801-805页

作者：罗欣庄白妹饶海英李庆姝刘西茹漆洪波重庆医科大学附属第一医院产科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

目的:研究经典Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路参与人滋养细胞氧化应激损伤的机制,探讨其在子痫前期(preeclampsia,PE)发病中的作用。方法:(1)采用免疫组化SP法和蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测胎盘组织中β-catenin信号分... 详细信息

目的:研究经典Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路参与人滋养细胞氧化应激损伤的机制,探讨其在子痫前期(preeclampsia,PE)发病中的作用。方法:(1)采用免疫组化SP法和蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测胎盘组织中β-catenin信号分子的表达。(2)将HTR8/SVneo分为正常培养对照组、缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)处理组、氯化锂(Li Cl)+H/R处理组、Li Cl+正常培养组。利用WB法和间接免疫荧光法检测β-catenin在各组细胞中的表达。(3)利用流式细胞仪检测各组细胞凋亡指数及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。(4)利用Transwell小室模型和明胶酶谱法分析检测各组HTR8/SVneo的侵袭率及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、9的活性。结果:(1)与正常晚孕比较,子痫前期胎盘组织中β-catenin蛋白表达降低(P<0.05)。(2)与正常培养组相比较,H/R处理组的β-catenin蛋白水平显著下降,经Li Cl预处理后H/R细胞中的β-catenin蛋白表达增加(P<0.01)。(3)与正常对照组相比,H/R处理可导致HTR8/SVneo凋亡率及ROS水平增加(P<0.01);予以Li Cl预处理可有效抑制H/R导致的细胞凋亡及ROS聚集(P<0.05,P<0.01)。(4)H/R组细胞的体外侵袭能力及MMP-2、9的活性均低于正常培养组;经Li Cl预处理后,H/R组细胞的体外侵袭能力及清液中MMP-2、9的活性显著上升(P<0.01)。结论:Li Cl通过特异性激活Wnt/β-catenin信号通路,对滋养细胞氧化应激损伤有保护性作用。

关键词：子痫前期滋养细胞氧化应激 β-连环蛋白氯化锂

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UHRF2通过其PHD结构域与组蛋白H3K9乙酰化相互作用

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重庆医科大学学报 2015年第11期40卷 1485-1490页

作者：张婷赵灵琳曾盛源段昌柱重庆医科大学基础医学院细胞生物学遗传学教研室重庆400016

目的:探讨UHRF2蛋白与组蛋白组蛋白H3第9位赖氨酸残基乙酰化(Histone H3 Lys9 acetylation,H3K9ac)的相互作用及两者相互作用结合区域的测定。方法:在LO2和Hep G2细胞中转染p CMV-FLAG-UHRF2,激光共聚焦分别检测UHRF2与组蛋白H3、H3K9ac... 详细信息

目的:探讨UHRF2蛋白与组蛋白组蛋白H3第9位赖氨酸残基乙酰化(Histone H3 Lys9 acetylation,H3K9ac)的相互作用及两者相互作用结合区域的测定。方法:在LO2和Hep G2细胞中转染p CMV-FLAG-UHRF2,激光共聚焦分别检测UHRF2与组蛋白H3、H3K9ac和H3K14ac在细胞内的共定位。采用免疫沉淀技术分别检测UHRF2与组蛋白H3、H3K9ac和组蛋白H3第14位赖氨酸基乙酰化(Histone H3 Lys14 acetylation,H3K14ac)在细胞中的相互作用,以及用UHRF2的不同缺失体层粒分别与组蛋白H3K9ac相结合方法来检测UHRF2与之相互作用的功能性结合区域。结果:(1)UHRF2与组蛋白H3、H3K9ac和H3K14ac在LO2和Hep G2细胞中存在共定位现象。(2)在LO2和Hep G2细胞中,UHRF2与H3K9ac相互结合。(3)在正常肝细胞LO2中,UHRF2与H3K9ac相互作用的结合区域为PHD结构域。而在肝癌细胞Hep G2中,除了PHD结构域以外,YDG/SRA结构域也是UHRF2与H3K9ac的关键结构域。结论:UHRF2通过其PHD结构域与H3K9ac相互作用。

关键词： UHRF2 组蛋白H3 组蛋白H3K9乙酰化组蛋白H3K14乙酰化表观遗传学

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^(131)I-CD133mAb诱导CD133^+HepG2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化

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第三军医大学学报 2015年第11期37卷 1086-1090页

作者：史燕龙李亚军康强强侯妍利刘锐李少林重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院肝胆外科重庆400016

目的研究131I-CD133mA b可诱导CD133+Hep G2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化(mesenchymal-epithelial transition,MET)及可能分子机制。方法 1用免疫磁珠分选法分选Hep G2人肝癌细胞,采用流式细胞术检测分选前后CD133的表达率,体外成球和... 详细信息

目的研究131I-CD133mA b可诱导CD133+Hep G2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化(mesenchymal-epithelial transition,MET)及可能分子机制。方法 1用免疫磁珠分选法分选Hep G2人肝癌细胞,采用流式细胞术检测分选前后CD133的表达率,体外成球和体内成瘤实验鉴定其干细胞特性。2氯胺T法制备131I标记CD133mA b并用γ免疫计数器检测标记率、放化纯度。用不同剂量(0、2.4、4.8、9.6 MBq)的131I-CD133mA b作用CD133+Hep G2细胞,用Transwell侵袭实验检测侵袭能力,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平。结果流式细胞术显示分选前后CD133表达率分别为(7.21±0.05)%和(95.26±0.05)%。CD133+细胞体外成球和体内成瘤能力强于CD133-细胞。γ免疫计数器检测131I-CD133抗体标记率为86.97%,放化纯度为98.84%。Transwell侵袭实验示131I-CD133mA b各处理组(2.4、4.8、9.6 MBq)24 h细胞穿过Matrigel胶的细胞分别为(107.7±3.2)、(76.3±2.5)、(44.0±3.0)/视野,显著少于对照组(0 MBq,P<0.01)。Western blot结果显示,与对照组(0 MBq)相比,131I-CD133mA b(2.4、4.8、9.6 MBq)处理组N-cadherin和Vimentin的蛋白表达量降低(P<0.01),E-cadherin的蛋白表达量增加(P<0.01)。结论在体外131I-CD133mA b作用于人肝癌CD133+Hep G2细胞可诱导间质-上皮逆转分化。

关键词： CD133+HepG2 间质-上皮逆转分化 ^131 I-CD133mAb

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RNAI沉默Grp94基因对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响

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第三军医大学学报 2015年第12期37卷 1222-1225页

作者：樊建军武家艳李海玉李韵高月曾帆刘革力宋方洲重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的探讨RNAI沉默Grp94基因表达对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响和可能机制。方法设计、合成靶向Grp94基因的siRNA基因片段,应用脂质体包埋转染食管癌ECA109细胞,采用Real-time PCR和Western blot法分别检测转染后的细胞内Gr... 详细信息

目的探讨RNAI沉默Grp94基因表达对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响和可能机制。方法设计、合成靶向Grp94基因的siRNA基因片段,应用脂质体包埋转染食管癌ECA109细胞,采用Real-time PCR和Western blot法分别检测转染后的细胞内Grp94、基质金属蛋白酶MMP2及MMP9的表达,采用Transwell实验检测沉默Grp94基因对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果Si Grp94组中Grp94mRNA和蛋白水平显著下调(P<0.01),MMP2、MMP9表达明显下调(P<0.05);Si Grp94组细胞迁移及侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沉默Grp94基因可明显抑制ECA109细胞的迁移及侵袭能力,Grp94可能通过影响MMP2、MMP9参与其中。

关键词： Grp94 ECA109 迁移与侵袭 MMPs

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巨噬细胞Coronin-1的表达与非Mtb源性自噬相关性的实验研究

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中国免疫学杂志 2015年第5期31卷 613-619页

作者：李黎陈全周芳妮刘革力张路渝重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室重庆400016

目的:研究巨噬细胞Coronin-1与非Mtb源性细胞自噬的相关性及其可能信号通路。方法:分别构建过表达Coronin-1的p EGFP-C1-Coronin-1质粒和干扰Coronin-1表达的p Genesil-1-Coronin-1质粒,通过G418加压筛选其RAW264.7细胞稳定转染株,即Coronin-1高表达细胞株(***)和Coronin-1低表达细胞株(***)。将***组、RAW264.7组和***组细胞分别采取完全培养基(空白处理对照)、饥饿、雷帕霉素、环孢素A等因素处理后,通过RT-PCR法检测Beclin-1的基因转录水平,Western blot法检测Coronin-1、LC3BⅡ/LC3BⅠ及Beclin-1的蛋白表达水平。结果:Coronin-1过表达质粒和siRNA质粒均构建成功,其细胞稳定筛选株具有过表达或抑制表达Coronin-1特性。1空白处理三组细胞,Western blot法检测LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值:***组>RAW264.7组>***组;Western blot法检测Beclin-1:***组>RAW264.7组>***组;RTPCR法检测Beclin-1转录水平,趋势同Western blot;2饥饿处理三组细胞,LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值:***组

关键词：巨噬细胞 Coronin-1 自噬雷帕霉素环孢素A 结核分枝杆菌

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跑步锻炼对抑郁症模型大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维影响的体视学研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第1期23卷 27-33页

作者：王飞飞谭川雪陈林木高原黄春霞周春妮蒋林张毅晁凤蕾张蕾唐勇重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学基础医学院附属第一医院老年科重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

目的运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预见性应激(CUS)所致的抑郁模型大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的改变及跑步锻炼对其改变的影响。方法雄性SD大鼠,适应环境1w,筛选出符合条件的40只大鼠将其随机分为空白对照组(10只)和抑郁... 详细信息

目的运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预见性应激(CUS)所致的抑郁模型大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的改变及跑步锻炼对其改变的影响。方法雄性SD大鼠,适应环境1w,筛选出符合条件的40只大鼠将其随机分为空白对照组(10只)和抑郁模型组(30只)。从第2w开始模型组动物采用慢性不可预见性应激的方法建立抑郁症大鼠模型,为期4w。选取建模成功的大鼠20只,随机等分为模型对照组和模型跑步组,模型跑步组大鼠进行4w的跑步锻炼。采用糖水偏好试验、强迫游泳试验及旷场试验进行行为学检测;利用体视学方法测定白质的总体积及白质内有髓神经纤维的总长度。结果应激第4w末,与空白对照组相比,抑郁模型组大鼠体重、糖水偏好百分比、旷场得分均降低,强迫游泳不动时间增加,差异具有统计学意义(P<0.05);跑步锻炼四周后,模型跑步组糖水偏好百分比显著性高于模型对照组(P<0.05)。模型对照组大鼠大脑白质总体积、有髓神经纤维总长度均显著性低于空白对照组(P<0.01);与模型对照组相比,模型跑步组大鼠大脑白质总体积及有髓神经纤维总长度显著性增加(P<0.05);与空白对照组相比,模型跑步组大鼠大脑白质总体积无显著性差异(P>0.05),白质内有髓神经纤维总长度显著性降低(P<0.05)。结论跑步锻炼对抑郁症模型大鼠大脑白质内有髓神经纤维改变具有积极保护作用,这可能是跑步锻炼治疗抑郁症的重要结构基础之一。

关键词：抑郁症跑步锻炼白质有髓神经纤维体视学

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