检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2013年第16期35卷 1717-1720页

作者：范贵荣杨致邦黄进重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室基础医学实验教学中心病原生物学与免疫实验室重庆400016

目的探讨利福平对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含256μg/mL利福平和无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含利福平的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养... 详细信息

目的探讨利福平对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含256μg/mL利福平和无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含利福平的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基内返祖培养。将含利福平和无利福平的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电镜观察其表面微观结构。含利福平的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无利福平的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观察其菌落形态。对诱导前接种菌和返祖菌的16S rDNA进行鉴定。结果在含256μg/mL利福平浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌的细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落。256μg/mL利福平浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形。16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌。结论利福平成功诱导脓肿分枝杆菌L型。

关键词：脓肿分枝杆菌 L型细菌利福平细胞壁

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人PGI基因siRNA慢病毒质粒的构建及对白血病细胞增殖的影响

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第三军医大学学报 2013年第1期35卷 20-23页

作者：赵亮李静魏强游智梅夏菁李丹阳陈地龙重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法 RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562... 详细信息

目的构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法 RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562、KG1-α、HL-60细胞中PGI mRNA和蛋白表达水平,筛选高表达PGI的白血病细胞系;构建人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照,经293T细胞包装后,获得可表达人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照;分别使用重组病毒(干扰组)、原始病毒(阴性对照组)和等量PBS(空白对照组)转染白血病KG1-α细胞,筛选稳定转染细胞株。RT-PCR和Western blot检测干扰组、阴性对照组及空白对照组KG1-α细胞PGI基因表达水平;CCK-8检测各组细胞增殖情况并作生长曲线。结果 PGI基因在白血病KG1-a细胞中高表达;成功构建了稳定低表达PGI的白血病细胞株(KG1-α-siPGI);低表达PGI基因的KG1-α细胞增殖能力较空白对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了低表达PGI基因的白血病KG1-α细胞株,干扰PGI基因的表达能够抑制KG1-α细胞的生长。

关键词：白血病慢病毒载体 RNA干扰细胞增殖

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ERK途径可能参与抗坏血酸诱导的神经干细胞向多巴胺能细胞分化

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第三军医大学学报 2013年第22期35卷 2430-2434页

作者：邓小兰晋贞超王健郑敏重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010

目的探讨抗坏血酸（ascorbic acid，AA）诱导神经干细胞（neural stem cells，NSCs）向多巴胺能神经元方向分化的作用并初步探索其机制。方法从12.5 d胚胎大鼠中脑获得NSCs，培养扩增后分为对照组和分别加入1、10、50、100、200 μmol/L... 详细信息

目的探讨抗坏血酸（ascorbic acid，AA）诱导神经干细胞（neural stem cells，NSCs）向多巴胺能神经元方向分化的作用并初步探索其机制。方法从12.5 d胚胎大鼠中脑获得NSCs，培养扩增后分为对照组和分别加入1、10、50、100、200 μmol/L AA处理组，比较NSCs向多巴胺能神经元分化结果；采用免疫细胞化学对NSCs以及分化后神经元进行鉴定和检测，RT-PCR检测酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）、多巴胺转运子（dopamine transporter，DAT）、SHH、Nurr1、Ptx3 mRNA表达；在AA诱导分化中加入ERK阻断剂 PD98059，以探讨ERK通路在分化中的作用。结果获得大量的神经球并且表达nestin强阳性；AA处理组比对照组表现出较强的多巴胺能分化，其中100 μmol/L AA诱导组表达TH和DAT阳性细胞数量比对照组明显增加（P〈0.05），增加30～50倍；AA诱导增加了Nurr1、TH、DAT、SHH mRNA的表达，ERK抑制剂PD98059能抑制AA诱导后Nurr1、TH、DAT mRNA的表达而不影响SHH mRNA表达（P〈0.05 ）。结论抗坏血酸能诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元，ERK途径可能是AA诱导过程中参与多巴胺能分化的途径之一，Nurr1基因可能参与到ERK途径中或者是其下游基因。

关键词：神经干细胞分化促分裂原活化蛋白激酶细胞外信号调节激酶通路信号转导

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临床误诊肝脏原发恶性纤维组织细胞瘤1例及文献回顾

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重庆医科大学学报 2013年第12期38卷 1530-1531页

作者：杨柳杨达荣徐红梅吴时军米粲重庆市合川区人民医院病理科重庆401520 重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

恶性纤维组织细胞瘤（malignantfibroushistiocytoma，MFH）是起源于间叶组织的恶性肿瘤。好发于成年人，常发生于四肢软组织、腹膜后和躯干，而原发于肝脏的MFH极为罕见。本文报道1例临床误诊的肝脏原发MFH，检索并阅读复习国内外相关... 详细信息

恶性纤维组织细胞瘤（malignantfibroushistiocytoma，MFH）是起源于间叶组织的恶性肿瘤。好发于成年人，常发生于四肢软组织、腹膜后和躯干，而原发于肝脏的MFH极为罕见。本文报道1例临床误诊的肝脏原发MFH，检索并阅读复习国内外相关文献四十余篇。综合报道如下。

关键词：原发恶性纤维组织细胞瘤文献回顾临床误诊肝脏四肢软组织恶性肿瘤间叶组织 MFH

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低压低氧环境下5-羟甲基糠醛对大鼠作业能力的影响

低压低氧环境下5-羟甲基糠醛对大鼠作业能力的影响

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中华医学会第七次全国高原医学学术会议暨中国病理生理学会第九次全国缺氧和呼吸病理生理学术会议

作者：官立彬黄瑊李晓栩李锦松杨诚忠蔡明春谭小玲崔宇宓保梅梁潇第三军医大学高原军事医学系高原生理学与高原生物学教研室高原医学教育部重点实验室全军高原医学重点实验室重庆 400038 广东药学院中药学院广东广州 510006 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室 400016

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脓肿分枝杆菌耐利福平机制的研究

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中国人兽共患病学报 2013年第12期29卷 1172-1176页

作者：范贵荣杨致邦黄进高继业重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

目的探讨脓肿分枝杆菌耐利福平的机制。方法采用棋盘微量稀释法,分别测定利福平在加入不同浓度的改变细胞壁通透性的试剂和主动外排泵抑制剂时对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度。通过利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度的变化情况来分析... 详细信息

目的探讨脓肿分枝杆菌耐利福平的机制。方法采用棋盘微量稀释法,分别测定利福平在加入不同浓度的改变细胞壁通透性的试剂和主动外排泵抑制剂时对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度。通过利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度的变化情况来分析细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平机制中的作用。结果随着TWEEN-80、Trixon X-100、甲苯、乙醚、CCCP、利血平和泮托拉唑浓度的增加,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度逐渐降低。对于TWEEN-80、Trixon X-100、CCCP和泮托拉唑,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度由512μg/mL降至小于32μg/mL,0.1%的TWEEN-80、0.006 25%的Trixon X-100、0.1μg/mL的CCCP和32μg/mL的泮托拉唑为最适浓度;对于甲苯、乙醚和利血平,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度由512μg/mL降至64μg/mL,0.25%的甲苯、0.25%的乙醚和8μg/mL的利血平为最适浓度。它们均能促进利福平对脓肿分枝杆菌的抑菌作用。结论细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平的机制中有重要作用。

关键词：脓肿分枝杆菌利福平细胞壁通透性主动外排

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Pre-miR-10a重组腺病毒质粒的构建及其在K562细胞中的表达

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中国生物制品学杂志 2013年第5期26卷 657-660页

作者：齐杰玉陶崑王灿蔚李秋红邓一平重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆市妇幼保健院检验科重庆400013 重庆医科大学实验中心重庆400016

目的构建pre-miR-10a(miR-10a前体)重组腺病毒表达质粒,感染K562细胞,并检测其基因表达水平。方法化学合成pre-miR-10a基因序列,克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,将构建正确的重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV pre-miR-10a与腺病毒骨... 详细信息

目的构建pre-miR-10a(miR-10a前体)重组腺病毒表达质粒,感染K562细胞,并检测其基因表达水平。方法化学合成pre-miR-10a基因序列,克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,将构建正确的重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV pre-miR-10a与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183感受态细胞,经同源重组获得重组腺病毒质粒pAd-pre-miR-10a,转染HEK293细胞,包装出重组腺病毒,经4轮扩增后检测病毒滴度。收集病毒后,以100 MOI感染K562细胞,RT-PCR法检测miR-10a基因的转录水平。结果重组腺病毒质粒pAd-pre-miR-10a经PacⅠ酶切,证明带有目的基因的重组腺病毒穿梭质粒已整合到腺病毒基因组中,4轮扩增后腺病毒滴度为1.5×1011pfu/ml,可高效感染K562细胞,感染效率达90%以上;重组腺病毒Ad-pre-miR-10a感染的K562细胞中miR-10a基因转录水平明显升高,过表达率为150.82%。结论已成功构建重组腺病毒表达质粒pAd-pre-miR-10a,并可在K562细胞中高效表达,为进一步从体内和体外水平研究其抗白血病效应奠定了基础。

关键词： pre-miR-10a 腺病毒科 K562细胞基因表达

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重庆市0～5岁儿童出生缺陷空间地理分布及其与土壤化学元素关系的研究

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中华流行病学杂志 2013年第10期34卷 975-979页

作者：董燕钟朝晖李红李杰王应雄彭斌张茂忠黄巧闫菊徐飞龙重庆医科大学公共卫生与管理学院流行病学教研室 400016 重庆医科大学公共卫生与管理学院基础医学院 400016 重庆医科大学公共卫生与管理学院公共卫生与管理学院统计教研室 400016 重庆市人口和计划生育科学技术研究院重庆市地堪局川东南地质大队

目的探讨出生缺陷发生率与土壤化学元素含量的相关性，为筛选致病因子及其防治提供科学依据。方法用Maplnfo7．0软件绘制33个研究区出生缺陷发生率和11种土壤化学元素含量水平的空间分布地图，将两变量地图叠加进行空间相关性分析；采用... 详细信息

目的探讨出生缺陷发生率与土壤化学元素含量的相关性，为筛选致病因子及其防治提供科学依据。方法用Maplnfo7．0软件绘制33个研究区出生缺陷发生率和11种土壤化学元素含量水平的空间分布地图，将两变量地图叠加进行空间相关性分析；采用SAS8．0软件做两者的单因子、多因子及主成分分析，并综合评价两者的关联程度。结果出生缺陷发生率空间分布图与土壤化学元素铜（Cu）、铬（cr）、碘（I）、硒（se）、锌（Zn）含量异常的分布图呈一定程度的负相关，与铅（Pb）含量水平呈一定程度正相关；主成分回归方程提示：Cu（0．002）、砷（As）（-0．07）、镉（Cd）（0．05）、Cr（-0．001）、Zn（0．001）、I（-0．03）、Pb（0．08）、氟（F）（-0．002）元素含量的高低可能是影响出生缺陷患病率的重要因素。结论出生缺陷发生率与土壤中Cu、Cr、I、Se、Zn、Pb的含量水平在空间地理分布上具有相关性，其中元素Cr、I、Pb可能是出生缺陷发生的原因之一。

关键词：出生缺陷土壤，化学元素地理信息系统空间分布

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c-ski基因重组腺病毒质粒的构建及其对肿瘤相关成纤维细胞增殖的影响

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中国生物制品学杂志 2013年第12期26卷 1738-1742页

作者：王黎阳赵浏阳彭琼乐孙艳柳满然重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdT... 详细信息

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdTrack-c-ski,经PmeⅠ线性化后,转化感受态大肠埃希菌BJ5183,获得重组腺病毒质粒,经PacⅠ线性化后,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒,经扩增及纯化后测定病毒滴度。将纯化的重组腺病毒感染乳腺癌CAFs,采用Western blot法检测感染细胞中c-Ski蛋白的表达水平;MTT法和细胞计数法检测重组腺病毒对CAFs细胞增殖活力的影响。结果重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切鉴定证明构建正确;转染HEK-293细胞48 h后可见大量绿色荧光蛋白的表达,纯化的重组腺病毒的滴度为3.11×1010IFU/ml;感染重组腺病毒的乳腺癌CAFs中c-Ski蛋白的表达水平明显高于空病毒组和空白对照组(P<0.001),且增殖活力明显高于空白对照组(P<0.05)。结论成功构建了表达c-ski基因的重组腺病毒质粒,其可明显促进CAFs的增殖,为进一步研究c-Ski对CAFs增殖分化等生物学功能的影响及作用机制提供了实验依据。

关键词： c-ski基因腺病毒成纤维细胞细胞增殖

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外磁场作用下SPIO标记脂肪干细胞经尾静脉移植治疗急性脑缺血

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激光杂志 2013年第4期34卷 95-97页

作者：陈晓丹郑洁李成鹏王顺和重庆医科大学基础医学院病理学教研室干细胞与组织工程研究实验室重庆400016

目的:观察外置磁场能否提高超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的脂肪干细胞经静脉移植治疗SD大鼠急性脑缺血的成功率。方法:线栓法制备MCAo大鼠模型40只,随机分成缺血未干预对照组(IO组)、未磁性标记ADSCs静脉移植组(IC组),磁性标记ADSCs静脉移... 详细信息

目的:观察外置磁场能否提高超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的脂肪干细胞经静脉移植治疗SD大鼠急性脑缺血的成功率。方法:线栓法制备MCAo大鼠模型40只,随机分成缺血未干预对照组(IO组)、未磁性标记ADSCs静脉移植组(IC组),磁性标记ADSCs静脉移植组(ICS组)和磁性标记ADSCs静脉移植并加外加磁场组(ICSM组),各组在细胞移植后1天,7天分别进行行为学评分,普鲁士蓝染色观察磁标记ADSCs在大脑内的分布情况,TTC染色比较缺血体积,原子吸收光谱仪测各组大脑铁含量。结果:细胞移植后7天ICSM组动物较其他三组神经系统功能明显改善(P<0.05),ICSM组缺血区普鲁士蓝染色阳性细胞增多,缺血体积显著减小(P<0.01),铁含量显著增多(P<0.01)。结论:外磁场可以诱导SPIO标记的ADSCs在体内的定向迁移,提高尾静脉移植ADSCs治疗急性脑缺血大鼠的成功率。

关键词：磁场脂肪干细胞迁移脑缺血超顺磁性氧化铁

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