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重庆医科大学学报 2012年第9期37卷 779-782页

作者：高敏娜李昱重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

目的:探讨乳腺髓样癌(Medullary carcinoma of the breast,MBC)的雌激素受体(Estrogen receptor,ER)、孕激素受体(Progesterone receptor,PR)、人表皮生长因子受体-2(Human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)和细胞增殖抗原Ki67表达情况及其临床意义。方法:收集43例临床病理资料完整的MBC病例,采用免疫组化S-P法检测癌组织中ER、PR、HER-2、Ki67的表达情况并分析其结果,取同期的120例乳腺浸润性导管癌(Invasive ductal carcinoma,IDC)作对照研究。结果:免疫组化显示MBC组ER阳性率为8/43(18.75%),PR阳性率为11/43(25.58%),Her-2阳性率为14/43(32.56%),Ki67阳性率为7/43(16.28%)。乳腺IDC中ER、PR、HER-2、Ki67的阳性率分别为25/120(20.83%)、33/120(27.50%)、49/120(40.83%)、42/120(35.00%)。Ki67的阳性率明显高于MBC组,差异有统计学意义(P<0.05)。Ki67的表达与患者的年龄、临床分期无显著相关性,而与肿瘤大小以及有无淋巴结转移有关(P<0.05)。MBC组织中Ki67表达强度与Her-2呈正相关性(r=0.447,P<0.05);与ER和PR的表达无显著相关性(r=0.113和r=1.129,P>0.05)。结论:Ki67表达与乳腺癌发生、发展有关,可作为评价MBC发生、发展的生物学指标,联合ER、PR、HER-2检测有助于MBC预后的判断。

关键词：乳腺髓样癌雌激素受体孕激素受体人表皮生长因子受体-2 细胞增殖抗原Ki67

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靶向SATB1基因的短发夹RNA诱导肺癌A549细胞凋亡

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肿瘤 2012年第7期32卷 501-506页

作者：蒋金曹友德磨娜莫显刚重庆医科大学基础医学院病理教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 贵阳医学院附属医院综合病房贵阳550004

目的:探讨靶向SATB1(special AT-rich sequence-binding protein-1)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对肺癌A549细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:构建靶向SATB1基因的shRNA重组质粒SATB1-shRNA,采用脂质体法将其转染至A549细胞;分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测A549细胞中SATB1、Bcl-2、BaxmRNA和SATB1、Bcl-2、Bax、caspase3蛋白的表达水平;FCM检测A549细胞的凋亡率。结果:成功构建了SATB1-shRNA重组质粒;SATB1-shRNA转染A549细胞后,SATB1、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达下调,Bax mRNA和Bax、caspase3蛋白表达上调(P<0.05)。SATB1-shRNA转染组细胞凋亡率[(14.18±1.59)%]较对照组[(1.84±0.57)%]明显增加(P<0.01)。结论:SATB1-shRNA可显著下调肺癌A549细胞中SATB1基因的表达水平并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2基因表达所引起的级联效应有关。

关键词：肺肿瘤 RNA,小分子干扰细胞凋亡基因,SATB1

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MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF自分泌及体外成管作用的影响

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复旦学报（医学版） 2012年第4期39卷 370-375页

作者：隆霜沈宜谢莹珊范维珂姜蓉陈黎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(human umbilical veinendothelial cell,HUVEC)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)自分泌及体外成管作用的影响,探讨肿瘤细胞源exosome在肿瘤微环境中对血管内皮细胞血管生成的调控作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVEC与exosome共培养24h后上清液中VEGF的变化水平;Western blot技术检测HUVEC与exosome共培养24h后VEGF、VEGFR2及p-VEGFR2的蛋白表达情况;RT-PCR法检测HUVEC与exosome共培养24h后VEGF的基因表达情况;观察HUVEC与exosome共培养24h后的体外成管能力。结果 HUVEC与exosome共培养24h后上清液中VEGF为(110.851±18.404)pg/mL,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);Westernblot结果显示,HUVEC与exosome共培养24h后VEGF和p-VEGFR2的蛋白表达水平均增加(P<0.05);RT-PCR结果显示,HUVEC与exosome共培养24h后VEGF的基因表达水平增加(P<0.05);体外成管实验显示,exosome显著提高了HUVEC的管腔形成能力(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome促进了血管内皮细胞VEGF的表达及分泌,激活了血管内皮细胞VEGF/VEGFR2自分泌环并提高了血管内皮细胞的体外成管能力,对促肿瘤血管生成有一定的调控作用。

关键词： exosome 血管内皮生长因子(VEGF) 血管生成乳腺癌

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中国西部两个省（市）农村留守与非留守儿童忽视状况

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中华预防医学杂志 2012年第1期46卷 38-41页

作者：钟引钟朝晖潘建平王应雄刘晨煜杨新胡晨蔡林利徐亚重庆医科大学公共卫生与管理学院流行病学教研室 400016 西安交通大学医学院公共卫生系重庆医科大学基础医学院重庆医科大学临床学院

目的了解中国西部地区农村留守与非留守儿童忽视现状及影响因素。方法采用“中国农村儿童忽视评价常模”中制定的量表和评价方法，采用分层多级整群抽样方法，于2010年12月分别在陕西省和重庆市各抽取3个区（县），再在每个区（县）抽... 详细信息

目的了解中国西部地区农村留守与非留守儿童忽视现状及影响因素。方法采用“中国农村儿童忽视评价常模”中制定的量表和评价方法，采用分层多级整群抽样方法，于2010年12月分别在陕西省和重庆市各抽取3个区（县），再在每个区（县）抽取部分0—6岁农村儿童共1568名作为调查对象，用忽视率和忽视度描述其受忽视状况，采用logistic回归方法分析影响忽视率的影响因素。结果在1568名调查对象中，留守与非留守儿童数分别为859和709名，总的忽视率为29．78％（467／1568），忽视度为48．51±6．49。留守儿童与非留守儿童的忽视率分别为34．34％（295／859）、24．26％（172／709）（P〈0．05），忽视度分别为49．59±6．54、47．19±6．18（P〈0．05）。0～2岁组留守儿童与非留守儿童忽视度分别为48．59±6．33、45．78±5．94，3～6岁组分别为50．43±6．60、48．25±6．16；男童组留守儿童与非留守儿童忽视度分别为49．83±6．67、47．36±6．28，女童组分别为49．32±6．38、47．01±6．08（P值均〈0．05）。0～2岁组留守儿童与非留守儿童忽视率为39．33％（153／389）、18．54％（56／302）；男童组留守儿童与非留守儿童忽视率为34．91％（162／464）、25．13％（94／374），女童组分别为33．67％（133／395）、23．28％（78／335）（P值均〈0．05）。留守儿童中父亲文化程度低、儿童与母亲关系疏远者更容易受到忽视（OR值分别为1．29、1．55，P值均〈0．05），非留守儿童中父亲职业为务农或外出务工、父母之间关系不好者更容易受到忽视（OR值分别为0．85、1．92，P值均〈0．05）。结论西部地区农村儿童忽视状况较为严重，留守儿童的忽视率和忽视度均高于非留守儿童，且两组儿童忽视率的影响因素各有不同。

关键词：中国农村儿童忽视儿童伤害横断面研究

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L-精氨酸对人肝细胞中内源凝血因子Ⅷ表达的激活作用

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中国生物制品学杂志 2012年第10期25卷 1303-1306页

作者：朱重阳李鑫温泉张军重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨L-精氨酸对人肝细胞LO2中内源凝血因子Ⅷ(Coagulation factorⅧ,FⅧ)表达的激活作用。方法将LO2细胞分为试验组和对照组,试验组加入L-精氨酸(终浓度为10 mmol/L)分别培养24、36、48和60 h,对照组用等体积的灭菌水取代L-精氨酸... 详细信息

目的探讨L-精氨酸对人肝细胞LO2中内源凝血因子Ⅷ(Coagulation factorⅧ,FⅧ)表达的激活作用。方法将LO2细胞分为试验组和对照组,试验组加入L-精氨酸(终浓度为10 mmol/L)分别培养24、36、48和60 h,对照组用等体积的灭菌水取代L-精氨酸培养。采用RT-PCR法检测LO2细胞中人FⅧ基因mRNA的转录水平并测序鉴定,一期法检测细胞培养上清液中人FⅧ的促凝活性(FⅧ∶C),Western blot检测24、48 h时相点LO2细胞中人FⅧ蛋白的表达,免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜观察L-精氨酸作用48 h后LO2细胞中人FⅧ的表达。结果加入L-精氨酸培养36、48、60 h后,LO2细胞中有人FⅧ基因mRNA的转录,而对照组未出现人FⅧ基因mRNA的转录;各时相点两组细胞培养上清液中人FⅧ∶C的水平差异均无统计学意义(P>0.05);Western blot及激光共聚焦均观察到加L-精氨酸培养48 h后LO2细胞中出现人FⅧ的表达,而对照组细胞中均无人FⅧ的表达。结论 L-精氨酸可激活人正常肝细胞中内源FⅧ的表达。

关键词： L-精氨酸肝细胞凝血因子Ⅷ 转录表达

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兔肋软骨膜间充质干细胞的分离与鉴定

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中国生物制品学杂志 2012年第7期25卷 911-914页

作者：李敏刘俊姜蓉汪维伟重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞研究室重庆400016

目的从兔肋软骨膜中分离间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs),并进行鉴定。方法取3～4周龄新西兰大白兔,采用机械消化法和酶消化法结合的两步消化法获取肋软骨膜细胞,体外培养观察其生长形态;免疫组化法鉴定其表型特征;并检测其... 详细信息

目的从兔肋软骨膜中分离间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs),并进行鉴定。方法取3～4周龄新西兰大白兔,采用机械消化法和酶消化法结合的两步消化法获取肋软骨膜细胞,体外培养观察其生长形态;免疫组化法鉴定其表型特征;并检测其诱导成骨、成脂的分化潜能。结果从肋软骨膜中分离的原代细胞聚集成团,以圆形和多角形为主,从第2代开始细胞形态均一,以梭形为主,呈漩涡状排列,并开始表达CD29和CD90,不表达CD34和Ⅱ型胶原,现已传至15代,生长良好;第3代细胞经诱导可分化为成骨细胞或脂肪细胞。结论从兔肋软骨膜中可获得干细胞,其具有与MSCs相似的特性。

关键词：肋软骨膜间质干细胞分离表型分化

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Pre-miR-10a重组腺病毒载体对K562细胞增殖的抑制作用

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第10期28卷 1033-1036页

作者：齐杰玉陶崑王灿蔚李秋红邓一平重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆市妇幼保健院检验科重庆400013 重庆医科大学实验中心重庆400016

目的:观察在K562细胞高表达miR-10a对细胞增殖及凋亡的影响。方法:用pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体感染K562细胞,采用RT-PCR检测感染后K562细胞中miR-10a和bcr/abl融合基因的表达水平,Western blot法检测BCR/ABL融合蛋白表达水平,MTT... 详细信息

目的:观察在K562细胞高表达miR-10a对细胞增殖及凋亡的影响。方法:用pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体感染K562细胞,采用RT-PCR检测感染后K562细胞中miR-10a和bcr/abl融合基因的表达水平,Western blot法检测BCR/ABL融合蛋白表达水平,MTT、流式细胞术(FCM)分别检测感染后K562细胞的增殖及凋亡。结果:与对照组相比,K562细胞在转染pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体后,其miR-10a表达水平明显升高、bcr/abl融合基因水平显著降低;BCR/ABL融合蛋白表达明显下调、K562细胞增殖活力被抑制、细胞凋亡增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体能明显抑制K562细胞的增殖、促进细胞凋亡。

关键词：慢性粒细胞白血病(CML) bcr/abl miR-10a K562细胞

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高浓度氧暴露对N9小胶质细胞功能的影响

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南方医科大学学报 2012年第1期32卷 71-74页

作者：蒋朴徐颖胡良安刘杨邓世雄重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016 重庆医科大学附属儿童医院麻醉科和儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室重庆400014 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

目的探讨常压高浓度氧暴露对N9小胶质细胞功能的影响。方法体外培养N9小胶质细胞,分别在900 ml/L高浓度氧中暴露2、6、12、16、24、48 h后（1）流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率;（2）DCFH-DA荧光探针检测活性氧（ROS）含量的变化;（3... 详细信息

目的探讨常压高浓度氧暴露对N9小胶质细胞功能的影响。方法体外培养N9小胶质细胞,分别在900 ml/L高浓度氧中暴露2、6、12、16、24、48 h后（1）流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率;（2）DCFH-DA荧光探针检测活性氧（ROS）含量的变化;（3）RT-PCR检测Toll样受体4（TLR4）mRNA表达变化;（4）ELISA检测N9细胞培养上清中IL-1β和TNF-α的含量;（5）免疫荧光化学染色检测TLR4蛋白的表达变化。结果流式细胞术结果示,细胞凋亡率在高氧暴露12 h后明显高于空气对照组（P〈0.05）,16 h达高峰（P〈0.01）;高氧暴露2 h后,细胞内ROS含量明显增加,呈一定时间依赖性;TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显高于空气对照组（P〈0.05）;高氧暴露后细胞上清中TNF-α及IL-1β含量随暴露时间延长而增加,均在6 h开始升高,12~16 h达高峰（P〈0.05）,IL-1β增高较TNF-α更为明显。结论高氧暴露后N9小胶质细胞TLR4通路激活,产生大量神经毒性因子（ROS、IL-1β及TNF-α）,细胞凋亡增加。

关键词： N9小胶质细胞常压高浓度氧 Toll样受体4 活性氧促炎症因子凋亡

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200例外伤致视力损害的回顾性研究

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重庆医科大学学报 2012年第8期37卷 721-723页

作者：姚岚吴晓醒万立华重庆医科大学基础医学院法医教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院普外科重庆400016

目的：通过对外伤造成视力损害的分析,探讨其损伤的原因,受伤机制,鉴定时的要点。方法：对200例达到分级标准的眼损伤案例,从年龄、性别、损伤性质、致伤原因、相应病变、视力损伤程度等因素进行回顾性分析。结果：外伤所致视力损伤案... 详细信息

目的：通过对外伤造成视力损害的分析,探讨其损伤的原因,受伤机制,鉴定时的要点。方法：对200例达到分级标准的眼损伤案例,从年龄、性别、损伤性质、致伤原因、相应病变、视力损伤程度等因素进行回顾性分析。结果：外伤所致视力损伤案例中男女比例为2.92∶1;左右眼比例为1.50∶1;年龄分布于2~83岁,其中40~49岁最多,平均年龄41岁。致伤原因最多的是车祸,占所有致伤原因的45.0%,其次为钝器伤,车祸所致损伤主要为视神经损伤,钝器伤则主要造成眼球挫伤。视力残疾鉴定中低视力1级和2级占44.0%,而盲目3级以上占47.7%。结论：外伤是导致视力损害的主要原因,且致盲率较高,致伤机制以车祸伤引起的神经损伤最为多见。鉴定时应注意外伤后的视力损害的与外伤是否有直接关系。单纯的角膜损伤以及外伤性青光眼所造成的视力损害低视力1级为主,但有并发症时视力损伤明显加重。

关键词：外伤视力损伤法医临床学

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青蒿水提液对家兔心血管和呼吸功能的影响

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重庆医科大学学报 2012年第7期37卷 595-598页

作者：张丹张会军王莎莉重庆医科大学神经科学中心、基础医学院生理教研室重庆400016

目的:观察青蒿水提液对正常家兔心血管和呼吸功能的影响。方法:32只健康新西兰大白兔随机分为4组,分别对其静脉注射10 ml/kg的生理盐水,10、100 mg/kg和500 mg/kg的青蒿水提液,连续用药第12天时,记录各实验兔的动脉血压、心电图与呼吸运... 详细信息

目的:观察青蒿水提液对正常家兔心血管和呼吸功能的影响。方法:32只健康新西兰大白兔随机分为4组,分别对其静脉注射10 ml/kg的生理盐水,10、100 mg/kg和500 mg/kg的青蒿水提液,连续用药第12天时,记录各实验兔的动脉血压、心电图与呼吸运动;动脉血气分析和肺组织学观察。结果:与对照组比较:(1)各实验组对家兔动脉血压、心率、心电图与呼吸运动均未见明显改变(P>0.05)。(2)高剂量组PaO2下降,P<0.05,其余组pH值、PaCO2、PaO2、HCO3-、BE和SaO2未见明显改变,P>0.05。结论:青蒿水提液对家兔的心血管系统功能未产生明显毒副作用,但在较高剂量时会造成家兔肺组织炎症反应。

关键词：青蒿水提液兔心血管功能呼吸功能

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