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第三军医大学学报 2016年第13期38卷 1506-1511页

作者：张杨梁芯唐静高原黄春霞蒋林綦英强朱殷青唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室、干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院老年科重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

目的运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠海马DG体积、DG突触密度、突触总数的改变情况。方法筛选4~5周龄雄性SD大鼠分为对照组(n=15)和CUS组(n=23)。CUS组大鼠通过孤养并结合慢性... 详细信息

目的运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠海马DG体积、DG突触密度、突触总数的改变情况。方法筛选4~5周龄雄性SD大鼠分为对照组(n=15)和CUS组(n=23)。CUS组大鼠通过孤养并结合慢性不可预知应激方式建立模型,对照组每5只为1笼,正常喂养。建模期间,每周进行糖水偏好试验。建模4周后,结合糖水偏好试验、旷场实验、高架十字迷宫实验对两组大鼠行为学表现进行评估。随后运用现代体视学与免疫组织化学相结合的方法测量两组大鼠海马DG体积、DG突触密度和突触总数。结果经过4周CUS干预后,CUS组大鼠与对照组相比,体质量显著降低(P<0.05),糖水偏好显著下降(P<0.05);旷场实验中央区域路程、中央路程比和中央时间比显著降低(P<0.05)。CUS组大鼠海马DG突触密度[(0.48±0.13)/μm^3]和突触总数(6.713 5×10~8)较对照组大鼠[突触密度(0.15±0.03)/μm^3,突触总数(2.103 3×10~9)]显著下降(P<0.05)。结论抑郁症模型大鼠海马DG的突触总数减少、突触密度减小,表明海马齿状回突触改变可能是抑郁症发病的重要神经结构基础之一。

关键词：抑郁症大鼠海马齿状回突触体视学

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当归多糖对辐射损伤小鼠造血系统保护作用的研究

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重庆医学 2012年第35期41卷 3734-3736,F0004页

作者：何晓莉张雁吴宏姜蓉重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室/干细胞与组织工程研究室 400016

目的研究当归多糖(APS)对电离辐射引起小鼠骨髓损伤的影响,旨在阐明APS对辐射性造血损伤的保护作用。方法采用直线加速器一次性4.0Gy剂量全身均匀照射C57BL/6小鼠,建立小鼠放射损伤动物模型。取外周血并进行常规检测,提取骨髓单个核细胞... 详细信息

目的研究当归多糖(APS)对电离辐射引起小鼠骨髓损伤的影响,旨在阐明APS对辐射性造血损伤的保护作用。方法采用直线加速器一次性4.0Gy剂量全身均匀照射C57BL/6小鼠,建立小鼠放射损伤动物模型。取外周血并进行常规检测,提取骨髓单个核细胞(BMNC)并计数;骨髓切片染色观察骨髓造血细胞数量改变;流式细胞术检测细胞周期,细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测p53的表达。结果与对照组相比,生理盐水(NS)组外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)及BMNC计数均明显减少,骨髓腔内造血组织显著减少,BMNC G0/G1期比例、凋亡率、p53表达均升高;2mg/kg APS组和8mg/kg APS组均能提高外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数,增加骨髓腔内造血细胞数量,降低G0/G1期细胞比例以及细胞凋亡率。结论 APS可以促进骨髓造血系统恢复,对辐射损伤具有良好的保护作用。

关键词：辐射损伤造血系统细胞周期细胞凋亡当归多糖

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当归多糖对电离辐射致小鼠骨髓单个核细胞凋亡及氧化损伤的影响

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重庆医科大学学报 2012年第4期37卷 315-319页

作者：何晓莉关雪晶吴宏姜蓉重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:探讨当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对电离辐射引起小鼠骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclearcell,BMNC)凋亡及氧化损伤的影响,旨在阐明APS对辐射性造血损伤的保护作用。方法:直线加速器4.0 Gy一次性全身均匀X射线照射... 详细信息

目的:探讨当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对电离辐射引起小鼠骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclearcell,BMNC)凋亡及氧化损伤的影响,旨在阐明APS对辐射性造血损伤的保护作用。方法:直线加速器4.0 Gy一次性全身均匀X射线照射C57BL/6小鼠,建立小鼠放射损伤动物模型。照射后连续7 d腹腔注射不同剂量APS或生理盐水(Normal saline,NS),并于照射后第1、3、7天处死小鼠,提取BMNC,流式细胞术检测细胞周期,细胞凋亡率以及免疫细胞化学法检测P53的表达;比色法检测其超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性以及丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)含量。结果:与正常组相比,NS组G0/G1期细胞比例及凋亡率升高;SOD活性明显降低以及MDA含量明显升高;P53有表达。2 mg/kg APS组和8 mg/kg APS组均能降低G0/G1期细胞比例以及细胞凋亡率,降低突变型P53的表达,提高SOD活性,降低MDA含量。结论:APS可抑制辐射引起的细胞凋亡,还具有抗细胞氧化损伤的作用。

关键词：当归多糖电离辐射骨髓单个核细胞凋亡 P53 氧化损伤

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p16^(INK4A)在动情周期和早孕期小鼠子宫内膜的表达

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解剖学报 2010年第1期41卷 132-136页

作者：郗强朱兴春姜蓉杨戎魏莎莉张文文重庆医科大学生殖生理学教研室重庆400016 川北医学院附属医院检验科四川南充637000 重庆医科大学干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的检测肿瘤抑制基因p16INK4A在小鼠动情周期和早孕期子宫内膜中的表达,初步探讨p16INK4A在小鼠胚胎植入过程中的生物学作用。方法运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测动情周期和早孕期小鼠子宫内膜p16INK4A mRNA的表达水平;用免... 详细信息

目的检测肿瘤抑制基因p16INK4A在小鼠动情周期和早孕期子宫内膜中的表达,初步探讨p16INK4A在小鼠胚胎植入过程中的生物学作用。方法运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测动情周期和早孕期小鼠子宫内膜p16INK4A mRNA的表达水平;用免疫组织化学和Western blotting方法检测p16INK4A蛋白的表达。结果RT-PCR显示,早孕期比动情周期p16INK4A mRNA的表达有显著增强。动情周期中动情期比其他3期表达明显增强;早孕期中,随妊娠天数的增加,p16INK4A mRNA的表达也逐渐增强,孕5d达峰值,之后又逐渐减弱。免疫组织化学和Western blotting的结果也都显示,p16INK4A蛋白在子宫内膜的表达及规律与RT-PCR的结果一致。结论p16INK4A在小鼠的胚泡植入过程中起重要作用。

关键词： p16^INK4A 子宫内膜反转录-聚合酶链式反应免疫组织化学免疫印迹法小鼠

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去乙酰化酶1在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞衰老中的作用

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解剖学杂志 2016年第1期39卷 5-9页

作者：周玥王亚平王建伟丁继超大理大学组织学与胚胎学教研室大理671000 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的：探讨去乙酰化酶1（SIRT1）在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞（HSC/HPC）衰老中的作用。方法：免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠Sca-1^＋HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。^60Co γ射线致死剂量辐射雌性受体... 详细信息

目的：探讨去乙酰化酶1（SIRT1）在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞（HSC/HPC）衰老中的作用。方法：免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠Sca-1^＋HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。^60Co γ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组，照射对照组、衰老模型组、Rg1治疗衰老组和Rg1预防衰老组。衰老相关β半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色、造血祖细胞混合集落（CFU-Mix）培养和细胞周期分析检测Rg1体内调控Sca-1^＋HSC/HPC衰老的作用。荧光定量PCR及免疫印迹检测衰老调控分子SIRT1、核因子-κB（NF-κB）mRNA及蛋白的表达。结果：连续移植后受体鼠Sca-1^＋HSC/HPC出现细胞衰老特征，随移植代数的增加，Sca-1^＋HSC/HPC G0/G1期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高，CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比，Rg1治疗衰老组及Rg1预防衰老组受体鼠Sca-1^＋HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降，CFU-Mix数量升高；SIRT6 mRNA及蛋白表达上调，NF-κB mRNA及蛋白表达下调；Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论：Rg1可能通过调控SIRT1/NF-κB信号轴发挥其在连续移植过程中抗Sca-1^＋HSC/HPC衰老的作用。

关键词：人参皂苷Rg1 去乙酰化酶1 核因子-κB Sca-1^+造血干/祖细胞衰老

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ErbB2受体抑制剂AG825对ErbB2非过表达乳腺癌细胞增殖的作用及意义

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重庆医科大学学报 2009年第12期34卷 1646-1650页

作者：赵婷婷邓华瑜赵敬杜佳陈黎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室、干细胞和组织工程研究室重庆400016

目的:探讨在ErbB2非过表达乳腺癌细胞中是否存在NRGs/ErbB2这种配体作用方式的信号通路活化,进而研究神经调节因子(Neuregulins’NRGs)对ErbB2受体信号转导活化和细胞增殖生长的作用。方法:以ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7... 详细信息

目的:探讨在ErbB2非过表达乳腺癌细胞中是否存在NRGs/ErbB2这种配体作用方式的信号通路活化,进而研究神经调节因子(Neuregulins’NRGs)对ErbB2受体信号转导活化和细胞增殖生长的作用。方法:以ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7为研究对象,台盼蓝拒染法检测细胞生长曲线;免疫细胞化学法和Western blot法检测细胞中NRG的表达。应用ErbB2受体功能抑制剂AG825处理两株细胞,MTT法检测比较两株细胞的增殖抑制作用,求出AG825作用MDA-MB-231细胞48h的IC50。40μmol/LAG825处理MDA-MB-231细胞48h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果:与MCF-7细胞比较,MDA-MB-231细胞具有较强的增殖生长能力。NRG在MDA-MB-231细胞内呈显著表达,MCF-7细胞中无NRG的表达。Western blot实验检测MDA-MB-231细胞可见分子量44kD的NRG抗体阳性反应条带。应用ErbB2受体功能抑制剂AG825后,MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用明显,AG825作用MDA-MB-231细胞48h的IC50为56.59μmol/L。40μmol/LAG825处理MDA-MB-231细胞48h后,细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05);细胞凋亡增加(P<0.01)。结论:ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231可能通过NRGs自分泌或旁分泌作用方式使ErbB2受体信号转导处于激活状态,这与其高增殖、低凋亡恶性行为有关。

关键词： ErbB2非过表达乳腺癌细胞 AG825 神经调节因子增殖

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大鼠大脑海马结构内有髓神经纤维髓鞘老年性改变的体视学研究

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第三军医大学学报 2010年第19期32卷 2053-2057页

作者：张蕾卢伟闵琦埕龚霞卢芳唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的进一步认识大鼠大脑海马内有髓神经纤维髓鞘的老年性改变。方法将16只雌性Long-Evans大鼠分为青年组(6月龄)5只、中老年组(18月龄)5只和老年组(27月龄)6只,运用新的体视学方法和透射电镜技术分别对大鼠大脑海马内有髓神经纤维直径,... 详细信息

目的进一步认识大鼠大脑海马内有髓神经纤维髓鞘的老年性改变。方法将16只雌性Long-Evans大鼠分为青年组(6月龄)5只、中老年组(18月龄)5只和老年组(27月龄)6只,运用新的体视学方法和透射电镜技术分别对大鼠大脑海马内有髓神经纤维直径,有髓神经纤维轴突直径,有髓神经纤维髓鞘内外周长和平均厚度进行定量研究。结果老年组有髓神经纤维平均直径较中老年组明显增加了10.8%(P<0.05),而与青年组比较则无显著性改变(P>0.05)。老年组直径<0.3μm的有髓神经纤维髓鞘厚度比中老年组减少了24.4%(P<0.05),老年组直径在0.4～0.5(不含0.5,以下类推)、0.5～0.6、0.7～0.8μm范围的有髓神经纤维髓鞘厚度较青年组均有明显增大(P<0.05)。结论正常老年大脑海马结构内有髓神经纤维存在细小直径纤维脱髓鞘改变的同时,还存在中等直径的有髓神经纤维继续髓鞘化。

关键词：有髓神经纤维髓鞘海马大鼠老年改变体视学

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二甲双胍减轻对乙酰氨基酚诱导的中毒性肝炎

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基因组学与应用生物学 2016年第7期35卷 1633-1637页

作者：刘怡青代洁胡凯蔡璐林玲葛璞张力重庆医科大学病理生理学教研室重庆400016 重庆文理学院校医院重庆402160 重庆医科大学病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

二甲双胍(metformin,MET)除具降糖效应外,还可发挥抗氧化及抗炎等药理效应,本研究探讨了MET在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的中毒性肝炎中的潜在保护效应。由于MET的部分效应依赖于腺苷酸活化蛋白激酶(AMP activated protein k... 详细信息

二甲双胍(metformin,MET)除具降糖效应外,还可发挥抗氧化及抗炎等药理效应,本研究探讨了MET在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的中毒性肝炎中的潜在保护效应。由于MET的部分效应依赖于腺苷酸活化蛋白激酶(AMP activated protein kinase,AMPK),本研究也尝试采用AMPK抑制剂dorsomorphin阻断MET在APAP模型中的效应,采用AMPK激活剂A-769662模拟MET的效应。结果显示:MET处理可显著抑制APAP诱导的血浆中天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)与丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与白介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度的上升,明显减轻APAP导致的肝组织病理学异常。AMPK抑制剂共同处理不能阻断MET对APAP模型中ALT及AST水平上升的抑制效应,AMPK激活剂处理不能模拟MET对ALT及AST水平的抑制效应。本研究结果提示:MET可有效减轻APAP诱导的中毒性肝炎,这一效应不依赖于AMPK。

关键词：对乙酰氨基酚中毒性肝炎二甲双胍对氧化氢酶腺苷酸活化蛋白激酶

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人参皂苷Rg1对白消胺诱导细胞衰老的延缓作用

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中国生物制品学杂志 2012年第10期25卷 1340-1343页

作者：王红宁闫玲玲李春莉官涛姜蓉左国伟陈地龙龙轩王建伟重庆医科大学组织胚胎教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学分子诊断中心重庆400016 重庆医科大学生理教研室重庆400016 重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆400016

目的探讨人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)对白消胺(Busulfan,BU)诱导的人胚肺成纤维细胞衰老的延缓作用。方法将人胚肺成纤维细胞(<24代)随机分为空白对照组(常规培养)、BU组(以120μmol/L BU处理复制细胞衰老模型)、BU+Rg1组(120... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)对白消胺(Busulfan,BU)诱导的人胚肺成纤维细胞衰老的延缓作用。方法将人胚肺成纤维细胞(<24代)随机分为空白对照组(常规培养)、BU组(以120μmol/L BU处理复制细胞衰老模型)、BU+Rg1组(120μmol/L BU+10μmol/L Rg1)、Rg1预+BU组(10μmol/L Rg1预处理后加入120μmol/L BU)和Rg1预+BU+Rg1组(10μmol/L Rg1预处理后加入120μmol/L BU,再加入10μmol/L Rg1),通过倒置显微镜观察细胞形态的变化,细胞增殖试验检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期的分布;半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察细胞衰老情况。结果 BU组细胞胞体扁平、宽大、不规则,出现空泡,而Rg1处理各组细胞的衰老表型出现一定程度的改善,以Rg1预+BU+Rg1组效果最佳,但未完全恢复;BU组细胞增殖能力较空白对照组明显降低,Rg1处理组细胞增殖能力有所恢复,且随着时间的延长效果越明显,其中以Rg1预+BU+Rg1组最佳;Rg1预+BU组和Rg1预+BU+Rg1组G2/M期比例较BU组显著降低(P<0.05),其中以Rg1预+BU+Rg1组降低最明显;Rg1预+BU组和Rg1预+BU+Rg1组衰老细胞数较BU组显著降低(P<0.05)。结论 Rg1能有效对抗BU诱导的细胞早衰,其具体作用机制有待进一步深入研究。

关键词：成纤维细胞衰老延缓作用人参皂苷人胚肺成纤维细胞细胞增殖能力细胞衰老模型细胞增殖情况细胞增殖试验

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人胚胎生殖细胞饲养层的制备

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重庆医科大学学报 2011年第12期36卷 1440-1444页

作者：姜蓉黎晓莉吴宏王璐重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:建立稳定高效的人包皮成纤维细胞(Human foreskin fibroblasts,HFF)饲养层培养体系,用于培养人胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells,EGCs)。方法:取4～5岁小儿包皮,采用机械法和组织消化法分离、培养成纤维细胞,倒置相差显微镜观察... 详细信息

目的:建立稳定高效的人包皮成纤维细胞(Human foreskin fibroblasts,HFF)饲养层培养体系,用于培养人胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells,EGCs)。方法:取4～5岁小儿包皮,采用机械法和组织消化法分离、培养成纤维细胞,倒置相差显微镜观察细胞生长状况,免疫细胞化学法、MTT法、流式细胞术检测细胞纯度、生长曲线及细胞周期,筛选丝裂霉素C作用的最佳浓度和时间。分离5～11周人胚胎原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)并培养于经丝裂霉素C处理的HFF饲养层上,观察人EGCs生长情况。结果:机械法和组织消化法结合分离HFF方法可靠,纯度高,细胞生长活性好,能快速进入对数生长期,细胞周期与细胞生长曲线保持一致,细胞可以传60代以上,P3～P30代均适宜作饲养层;丝裂霉素C抑制细胞增殖的适宜浓度及时间为12.5 mg/L作用2.5 h;分离的人PGCs在该饲养层上培养可形成典型的EGCs集落,体外连续培养超过3代。结论:HFF饲养层能有效地支持人EGCs的生长。

关键词：人胚胎生殖细胞包皮成纤维细胞饲养层

来源：评论

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