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中国细胞生物学学报 2020年第3期42卷 435-443页

作者：齐嵘嘉肖含先之汪子铃邓方芳吴奇王亚平王璐重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

该实验探讨当归多糖(ASP)对改善5-氟尿嘧啶(5-FU)所致人骨髓基质细胞成骨与成脂分化失衡的作用。人骨髓基质细胞株HS-5体外培养分为:对照组、ASP组、5-FU组、5-FU+ASP组和5-FU+LiCl组。CCK-8检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡;成... 详细信息

该实验探讨当归多糖(ASP)对改善5-氟尿嘧啶(5-FU)所致人骨髓基质细胞成骨与成脂分化失衡的作用。人骨髓基质细胞株HS-5体外培养分为:对照组、ASP组、5-FU组、5-FU+ASP组和5-FU+LiCl组。CCK-8检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡;成骨与成脂诱导分化实验检测细胞成骨与成脂分化能力,Western blot检测Runx2、PPARγ和β-catenin蛋白表达,RT-PCR检测Runx2、OCN、BMP-2、Osterix、PPARγ和β-catenin mRNA表达。结果表明,与对照组相比5-FU作用HS-5细胞后细胞增殖抑制、凋亡率增加,成骨分化能力减弱、成脂分化能力增强,分化相关信号β-catenin蛋白和mRNA表达降低;相比5-FU组,ASP预处理可减少细胞凋亡;恢复细胞成骨分化能力,成骨相关因子Runx2、OCN、BMP-2和Osterix表达升高;降低细胞成脂分化能力,成脂相关因子PPARγ表达减少;β-catenin信号分子表达增加。结果提示,当归多糖可维持5-FU作用后骨髓基质细胞朝成骨方向分化的能力,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词： 5-氟尿嘧啶骨髓基质细胞成骨分化 Wnt/β-catenin信号通路当归多糖

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人参皂苷Rg_(1)对移植性白血病模型小鼠的作用

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药物评价研究 2021年第12期44卷 2571-2577页

作者：李渊顾守美刘小虎周雯周玥王亚平大理护理职业学院云南大理671000 大理大学第一附属医院呼吸内科云南大理671000 大理大学组织胚胎学教研室云南省细胞生物学重点实验室云南大理671000 重庆医科大学组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的研究人参皂苷Rg_(1)对移植性白血病模型小鼠的作用。方法采用免疫磁性分选法(MACS)从K562细胞中分离、纯化CD34^(+)CD38^(-)人白血病干细胞(CD34^(+)CD38^(-)LSCs),流式细胞术检测分选细胞纯度,台盼蓝染色测定分选细胞活性。将6~8... 详细信息

目的研究人参皂苷Rg_(1)对移植性白血病模型小鼠的作用。方法采用免疫磁性分选法(MACS)从K562细胞中分离、纯化CD34^(+)CD38^(-)人白血病干细胞(CD34^(+)CD38^(-)LSCs),流式细胞术检测分选细胞纯度,台盼蓝染色测定分选细胞活性。将6~8周雌性NOD/SCID小鼠27只随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg_(1)(200 mg/kg)组,每组9只,模型组和人参皂苷Rg_(1)组通过尾iv移植CD34^(+)CD38^(-)LSCs构建白血病小鼠模型,ip给药30 d。观察各组小鼠一般情况及腹部包块变化;全自动血常规检测仪检测外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板水平;免疫组化法检测肝、脾脏病理学变化;流式细胞仪分析骨髓细胞周期;CCK-8法检测各组骨髓细胞的增殖能力;细胞免疫荧光染色鉴定骨髓细胞CD34阳性表达情况。结果分选前K562细胞中CD34^(+)CD38^(-)LSCs细胞群百分比为(9.64±1.14)%,分选后CD34^(+)CD38^(-)LSCs纯度可达(96.45±1.63)%;台盼蓝染色显示分选后细胞活性为(95.26±2.16)%。与对照组比较,模型组小鼠腹部包块明显,生存情况较差,体质量显著下降(P<0.05);白细胞数显著增高,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著下降(P<0.05);肝、脾脏结构被破坏,有大量白细胞浸润;骨髓细胞周期检测显示G;/G;期比例显著下降(P<0.05),S期比例显著升高(P<0.05);骨髓细胞增殖活力显著升高(P<0.05)。与模型组比较,人参皂苷Rg_(1)组小鼠腹部包块明显减小,生存情况好转,体质量显著增加(P<0.05);白细胞总数显著下降(P<0.05),红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著升高(P<0.05);肝、脾脏结构明显恢复;骨髓细胞G_(0)/G_(1)期比例显著升高(P<0.05),G_(0)/M期和S期比例显著下降(P<0.05)。细胞免疫荧光检测显示,模型组和人参皂苷Rg_(1)组中小鼠的骨髓细胞中存在大量的人源白血病细胞。结论 NOD/SCID小鼠尾iv移植CD34^(+)CD38^(-)LSCs可成功构建急性髓系白血病小鼠模型,人参皂苷Rg_(1)能有效缓解NOD/SCID小鼠的白血病症状。

关键词：人参皂苷Rg_(1) NOD/SCID小鼠急性髓系白血病模型移植白血病干细胞

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大麻素受体1通过调控星形胶质细胞参与抑郁症发病机制的研究进展

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中国体视学与图像分析 2021年第4期26卷 370-381页

作者：黄杜娟罗艳敏唐静肖倩梁芯秦露唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学生理学教研室重庆400016 重庆医科大学放射医学教研室重庆400016 重庆医科大学病理学与病理生理学教研室重庆400016

抑郁症是常见的神经精神疾病之一,因其高患病率、复发率和自杀率而受到广泛关注。以往研究认为,星形胶质细胞在抑郁症病理生理过程中发挥重要功能,但星形胶质细胞参与抑郁症发病的具体机制尚不完全清楚。内源性大麻素系统与神经精神疾... 详细信息

抑郁症是常见的神经精神疾病之一,因其高患病率、复发率和自杀率而受到广泛关注。以往研究认为,星形胶质细胞在抑郁症病理生理过程中发挥重要功能,但星形胶质细胞参与抑郁症发病的具体机制尚不完全清楚。内源性大麻素系统与神经精神疾病密切相关,尤其是在焦虑和抑郁等情感障碍的治疗中发挥着重要作用。大麻素受体1(cannabinoid receptor type 1,CB1R)作为内源性大麻素系统中的重要组成部分,其在抑郁症中的作用受到广泛关注。研究发现,CB1R可表达于星形胶质细胞,其可能通过调节星形胶质细胞的功能活动来参与抑郁症的发生、发展。因此,本文旨在回顾内源性大麻素系统的组成、CB1R和星形胶质细胞在治疗抑郁症中的作用、CB1R参与调节星形胶质细胞功能的研究进展进行综述。

关键词：抑郁症大麻素受体1 星形胶质细胞

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APP/PS1转基因小鼠海马内少突胶质细胞变化的体视学研究

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神经解剖学杂志 2020年第1期36卷 1-8页

作者：吴燕莉张毅晁凤蕾蒋林周春妮杨浩唐勇重庆医科大学组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程学研究室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院检验科重庆400016 重庆医科大学实验教学中心重庆400016

目的:定量研究APP/PS1转基因小鼠海马内少突胶质细胞(OLG)的改变,探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对OLG的影响。方法:随机选取10月龄雄性APP/PS1转基因小鼠(AD组)和10月龄同窝生雄性野生型小鼠(WT组)各13只,运用Morris水迷宫检测各组小鼠的空间... 详细信息

目的:定量研究APP/PS1转基因小鼠海马内少突胶质细胞(OLG)的改变,探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对OLG的影响。方法:随机选取10月龄雄性APP/PS1转基因小鼠(AD组)和10月龄同窝生雄性野生型小鼠(WT组)各13只,运用Morris水迷宫检测各组小鼠的空间学习和记忆能力;运用体视学方法计数各组小鼠海马CA1、CA2-3和齿状回(DG)内Olig2+细胞和2',3'-环核苷酸3'-磷酸二酯酶(CNPase)阳性细胞总数;体外培养小鼠少突胶质前体细胞(MOPC),给予Aβ1-42,运用real time RT-PCR和Western Blot检测OLG相关蛋白的表达水平和含量。结果:AD小鼠逃避潜伏期显著性长于WT小鼠(P<0.05),穿台次数显著性少于WT小鼠(P<0.05);AD小鼠海马各区Olig2+细胞总数均较WT小鼠显著性增加(P<0.05),且与逃避潜伏期呈正相关,与穿台次数呈负相关,而各区CNPase+细胞总数均较WT小鼠显著性减少(P<0.05),且与逃避潜伏期呈负相关;Aβ1-42干预后MOPC的NG2及CNPase的mRNA水平显著性降低(P<0.05),Olig2含量也显著性降低(P<0.05)。结论:APP/PS1转基因小鼠海马内存在成熟OLG丢失、少突胶质细胞系异常增殖;Aβ可能引起OLG损伤和发育异常;保护海马成熟OLG以及调控OLG发育可能是防治AD的有效策略。

关键词： AD 空间学习记忆海马少突胶质细胞体视学 APP/PS1转基因小鼠

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人参皂苷Rg1拮抗D-半乳糖致睾丸间质细胞雄激素分泌障碍的机制研究

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中国细胞生物学学报 2021年第7期43卷 1437-1445页

作者：向叶舟汪子铃肖含先之侯吉颖向玥姜蓉王璐黄国宁王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆市妇幼保健院生殖与遗传研究所重庆400013

该文重点探讨人参皂苷Rg1拮抗D-半乳糖(D-gal)致小鼠睾丸间质细胞分泌雄激素障碍的机制。采用D-gal构建小鼠衰老模型,体内注射Rg1干预衰老过程,观察睾丸组织细胞衰老的病理学改变;体外构建D-gal致睾丸间质细胞(TM3细胞株)衰老模型,在培... 详细信息

该文重点探讨人参皂苷Rg1拮抗D-半乳糖(D-gal)致小鼠睾丸间质细胞分泌雄激素障碍的机制。采用D-gal构建小鼠衰老模型,体内注射Rg1干预衰老过程,观察睾丸组织细胞衰老的病理学改变;体外构建D-gal致睾丸间质细胞(TM3细胞株)衰老模型,在培养体系加入Rg1拮抗D-gal的致衰老作用。衰老相关半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察小鼠睾丸组织细胞和体外培养TM3细胞的衰老情况;ELISA法检测TM3细胞分泌睾酮水平和细胞氧化应激损伤水平;荧光探针DCFH-DA检测细胞活性氧(ROS)水平;Western blot检测TM3细胞合成睾酮的关键酶和Nrf2/ARE抗氧化通路相关蛋白表达;qRT-PCR法检测相关炎症因子及睾酮合成关键酶基因的mRNA表达。结果显示,注射Rg1拮抗D-gal致小鼠衰老过程,衰老的睾丸间质细胞数量明显减少。Rg1体外拮抗D-gal致TM3细胞衰老作用后,细胞分泌睾酮水平无显著降低;IL-1、IL-6、IL-8等炎症因子的基因表达受到抑制;细胞内GSH-Px和CAT表达活性提高同时细胞产生丙二醛(MDA)与活性氧(ROS)能力受到抑制;StAR、3β-HSD及P450scc等睾酮合成关键酶基因及蛋白表达上调;Nrf2、HO-1等抗氧化蛋白表达上调,Keap1蛋白表达下调。研究提示,Rg1可能通过激活Nrf2/ARE抗氧化信号通路,拮抗D-gal对睾丸间质细胞的氧化应激损伤,进而调控睾丸雄激素的分泌功能。

关键词：人参皂苷Rg1 睾丸间质细胞 Nrf2/ARE信号通路 D-半乳糖

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二甲双胍激活AMPK/p53调节尿素循环抑制结肠癌HCT116细胞增殖

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中国药理学通报 2020年第10期36卷 1361-1367页

作者：张滔胡玲唐加峰徐航田宽黄世莹杜玉梅杨周倩李静陈地龙冉建华重庆医科大学基础医学院解剖教研室神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校重庆404120 重庆医科大学公共卫生与管理学院重庆400016

目的探讨二甲双胍(metformin,Met)对HCT116细胞增殖的抑制作用及机制。方法采用CCK-8法检测细胞增殖情况;细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成的能力;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期和凋亡率;免疫荧光染色观察磷酸化腺苷酸... 详细信息

目的探讨二甲双胍(metformin,Met)对HCT116细胞增殖的抑制作用及机制。方法采用CCK-8法检测细胞增殖情况;细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成的能力;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期和凋亡率;免疫荧光染色观察磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶(p-AMPK)的定位情况,Western blot检测p-AMPK、AMPK、p53、p-p53、精氨酸酶1(ARG1)、鸟氨酸转氨甲酰酶(OTC)和鸟氨酸脱羧酶(ODC)的表达情况。结果 CCK-8结果显示:Met呈浓度和时间依赖性抑制细胞的增殖;FCM结果显示:Met能诱导细胞发生凋亡,将细胞周期阻滞于G1期;克隆形成实验显示:Met可以抑制细胞的克隆形成能力;经免疫荧光染色可知:Met处理组细胞胞质及胞核内p-AMPK的表达增加;Western blot结果显示:p-AMPK、p53、p-p53蛋白的表达上调,ARG1、OTC、ODC蛋白的表达下调。结论 Met可抑制结肠癌细胞HCT116的增殖,诱导G1期细胞周期阻滞,促进细胞凋亡;其可能的机制与激活AMPK、p53信号,抑制尿素循环ARG1、OTC和多胺生成限速酶ODC的表达有关。

关键词：二甲双胍 HCT116 p53 ARG1 OTC ODC 增殖

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AMPK抑制剂减轻脂多糖诱导的急性肺损伤

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基因组学与应用生物学 2019年第10期38卷 4668-4672页

作者：罗义胜张力重庆医科大学病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

本研究通过观察腺苷酸活化蛋白激酶(AMP activated protein kinase,AMPK)抑制剂Compound C对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)发生发展的影响,来探讨AMPK在ALI中的病理生理意义。研究中采取脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)腹腔注射诱导小鼠ALI,Compound C在腹腔注射LPS前30 min经腹腔注入。在LPS注射后18 h,处死动物、采集肺组织和血浆标本,通过HE染色观察肺组织病理学改变,用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素6(interleukin 6,IL-6)水平以评估炎症反应程度,检测肺组织中伊文斯蓝的渗出情况以评估微血管通透性,以及检测血浆中乳酸(lactic acid,LA)以评估代谢紊乱程度。Compound C干预可减轻LPS诱导的肺组织病变,下调血浆中TNF-α、IL-6水平,抑制伊文斯蓝渗出,降低乳酸含量。采用AMPK抑制剂Compound C干预可抑制肺内炎症反应、降低肺血管通透性、减轻代谢紊乱,从而缓解肺组织损伤。

关键词：腺苷酸活化蛋白激酶 Compound C 急性肺损伤 LPS

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跑步锻炼延缓APP/PS1双转基因小鼠内侧前额叶皮质树突棘数量的丢失

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第三军医大学学报 2019年第14期41卷 1328-1335页

作者：范金花周春妮蒋林晁凤蕾张毅罗艳敏吴永鑫杨浩张蕾唐勇吴宏重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室

目的运用无偏体视学方法精确定量研究跑步锻炼对中老年APP/PS1双转基因模型小鼠内侧前额叶皮质树突棘的作用。方法 12月龄的雄性APP/PS1转基因小鼠分为对照组和跑步组,并将同窝生野生型小鼠作为野生组,每组10只,共30只。对跑步组小鼠进... 详细信息

目的运用无偏体视学方法精确定量研究跑步锻炼对中老年APP/PS1双转基因模型小鼠内侧前额叶皮质树突棘的作用。方法 12月龄的雄性APP/PS1转基因小鼠分为对照组和跑步组,并将同窝生野生型小鼠作为野生组,每组10只,共30只。对跑步组小鼠进行4个月的跑步锻炼;运用Morris水迷宫方法测试3组小鼠的空间学习记忆能力;运用无偏体视学方法精确定量3组小鼠内侧前额叶皮质树突棘的数量。结果在隐藏平台实验中,对照组平均逃避潜伏期明显大于跑步组和野生组(F=15.738,P<0.001),在空间探索实验中,3组小鼠穿台次数、目标象限游泳时间、目标象限游泳距离百分比差异都有统计学意义(P<0.001);对照组内侧前额叶皮质的树突棘总数显著小于跑步组和野生组(P=0.029,P=0.005)。结论跑步锻炼可以延缓APP/PS1双转基因AD模型小鼠内侧前额叶皮质树突棘的丢失。

关键词： APP/PS1转基因小鼠内侧前额叶皮质树突棘体视学

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大脑GABA能中间神经元在抑郁症发病及抗抑郁治疗中的作用

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中国体视学与图像分析 2020年第1期25卷 31-44页

作者：王瑾罗艳敏黎悦祝佩林肖凯唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室、干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学生理学教研室重庆400016

抑郁症已经成为一类严重影响公共卫生健康的疾病,然而其具体的发病机制仍不清楚。γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)能中间神经元是一类抑制性中间神经元,在大脑抑制和兴奋的平衡中起到重要的调节作用。越来越多的研究发现,抑郁... 详细信息

抑郁症已经成为一类严重影响公共卫生健康的疾病,然而其具体的发病机制仍不清楚。γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)能中间神经元是一类抑制性中间神经元,在大脑抑制和兴奋的平衡中起到重要的调节作用。越来越多的研究发现,抑郁症的发病涉及兴奋性谷氨酸能系统和抑制性氨基丁酸能系统之间的失衡,并且一些抗抑郁药物也通过GABA能中间神经元起效。本文将从抑郁症相关的重要脑区中GABA能中间神经元的改变、抗抑郁治疗对GABA能中间神经元的影响等方面进行综述。

关键词：抑郁症大脑 GABA能中间神经元抗抑郁治疗综述

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AMPK激活剂抗炎保护效应研究进展

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生理学报 2019年第2期71卷 319-326页

作者：彭先稳周虹宏代洁张力重庆医科大学病理生理学教研室重庆400016 重庆文理学院校医院重庆402160 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)是细胞能量调节的关键激酶,近期研究表明AMPK也在炎症这一高耗能分子反应中发挥重要调控作用。目前常用的AMPK激活剂有5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(5-aminoimidazole-4-carboxami... 详细信息

腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)是细胞能量调节的关键激酶,近期研究表明AMPK也在炎症这一高耗能分子反应中发挥重要调控作用。目前常用的AMPK激活剂有5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide, AICAR)和A-769662,此外二甲双胍及脂联素发挥生物活性也与激活AMPK密切相关。大量研究表明,这些激活剂可在急性肺损伤、哮喘、结肠s炎、肝炎、动脉粥样硬化等多种炎症相关性疾病动物模型中发挥有效的保护作用。因而,AMPK激活剂在炎症相关性疾病的防治中具有广阔的研发和应用前景。

关键词：腺苷酸活化蛋白激酶 AICAR A-769662 二甲双胍脂联素

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