检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2010年第2期26卷 135-139,172页

作者：张小花张磊田园园王丽英黄爱龙汤华重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

旨在探讨体外培养条件下HBx蛋白对TTRAP(TRAF and TNF receptor-associated protein)基因转录水平表达的影响。用RT-PCR及Real-time PCR检测TTRAP在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中的表达;构建TTRAP启动子虫荧光素酶报告质粒;分别与HBV、HBs、HBp、HBc、HBx表达质粒共转染HepG2细胞,比较虫荧光素酶活性。RT-PCR和Real-time PCR结果显示,TTRAP在HepG2.2.15细胞中的表达量分别是其在HepG2细胞中表达量的44.9%和27.8%(P<0.05)。TTRAP启动子虫荧光素酶报告质粒与HBV表达质粒共转染组的相对荧光素酶活性,与对照组相比下降了43.8%。转染HBx表达质粒组的相对荧光素酶活性与其对照组相比下降了35%,而转染HBc、HBs及HBp表达质粒组对相对荧光素酶活性没有影响。因此证实HBx蛋白能抑制TTRAP启动子活性。

关键词： HBx蛋白抑制 TTRAP 启动子活性 HepG2.2.15细胞 HepG2细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白受体结合域单链抗体的筛选及鉴定

引用

中国生物制品学杂志 2023年第3期36卷 295-305页

作者：金佳佩蔡雪飞重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的构建抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-Co V-2)刺突糖蛋白(spike protein,S)受体结合域(receptor-binding domain,RBD)的单链抗体(single-chain fragment variable,scFv)噬菌体展示文库,筛选特异性scFv,并进行功能鉴定。方法提取RBD蛋白免疫小鼠的脾细胞m RNA,逆转录为c DNA,以其为模板扩增scFv的重链可变区(hight chain fragment of variable,VH)和轻链可变区(light chain fragment of variable,VL)基因,经过重叠延伸PCR扩增(splicing overlap extension PCR,SOE-PCR)组装为scFv基因片段。将scFv基因片段插入噬菌体载体,构建scFv噬菌体展示文库。经4轮生物淘洗,筛选出与RBD结合能力较强的scFv基因,进行重组表达、纯化和生物活性鉴定。结果构建的scFv噬菌体文库滴度为6.0×10^(11)pfu/m L。经4轮生物淘选后,共筛选出4株与RBD结合较强的scFv,分别为scFv11、scFv12、scFv25、scFv28。scFv相对分子质量约为27 000,多以包涵体形式存在,纯化后可与HRP标记的鼠抗His单克隆抗体发生特异性结合,浓度达2.4 mg/m L,纯度约90%。4株scFv均可与RBD重组蛋白发生特异性结合;除scFv28外,其他3株scFv均可与野生型和多突变株S蛋白结合;与RBD均存在剂量依赖性相互作用,亲和力动态拟合解离常数(K_(D))分别为8.9、5.92、10.67、2.36 nmol/L,稳态拟合解离常数(K_(D))分别为5.3、6.5、8.7、5.8 nmol/L;scFv11、scFv12和scFv25可同时识别3个独立的RBD多肽,包括RBD2(S^(334~353))、RBD9(S^(439~458))和RBD13(S^(499~518));在线服务器SWISS-MODEL对scFv进行同源建模的模型质量良好,可用于分子对接;scFv11及人肺泡上皮细胞表面血管紧张素转换酶2(human angiotensin converting enzyme 2,ACE2)与RBD相互作用的界面仅部分重合,scFv12和scFv25与RBD的相互作用界面和ACE2与RBD相互作用界面存在较大差异。结论本研究通过构建抗SARS-Co V-2 RBD的scFv噬菌体文库,筛选并制备了可与SARS-Co V-2 RBD特异结合的scFv,为进一步抗SARS-Co V-2药物和检测试剂的研发提供了实验依据。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 单链抗体刺突糖蛋白受体结合域噬菌体文库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

NR6A1在HepG2细胞中抑制HBV转录与复制的初步研究

引用

重庆医科大学学报 2019年第3期44卷 289-295页

作者：魏强魏霞飞甘春杨张文露黄爱龙胡接力重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的:筛选核受体家族中对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)增强子或核心启动子转录活性有影响的基因,初步研究生殖细胞核因子(germ cell nuclear factor,NR6A1)对HBV转录与复制的调控作用。方法:克隆带有核受体家族基因的表达质粒,与海... 详细信息

目的:筛选核受体家族中对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)增强子或核心启动子转录活性有影响的基因,初步研究生殖细胞核因子(germ cell nuclear factor,NR6A1)对HBV转录与复制的调控作用。方法:克隆带有核受体家族基因的表达质粒,与海肾荧光素酶报告质粒pcore-Rluc共转染,转染后检测荧光素酶活性,筛选对增强子或核心启动子转录活性有影响的核受体基因。然后在Hep G2细胞中共转染HBV1.3倍体质粒与NR6A1表达质粒;通过Southern blot检测细胞内复制的HBV DNA;Northern blot检测HBV RNA的转录情况。结果:筛选出对HBV增强子/核心启动子有明显影响的基因NR6A1,其作用与对照组(空载和pcore-Rluc共转染)相比,Rluc活性下降约80%,对照组为1.000±0.319,NR6A1组为0.198±0.009(P=0.000)。NR6A1过表达时,BCP(核心启动子,PCH9-1744-Rluc)实验组荧光素酶活性相对值(0.504±0.023)较对照组(空载和PCH9-1744-Rluc共转染,1.000±0.099)下降约50%(t=6.534,P=0.0226),BCP(核心启动子)+EnhⅡ(PCH9-1636-Rluc)实验组荧光素酶活性相对值(0.089±0.002)比对照组(空载和PCH9-1636-Rluc共转染,1.000±0.042)下降约92%(t=31.59,P=0.001)。NR6A1N(NR6A1DBD+Hinge)荧光素酶活性相对值相对于阳性对照组(NR6A1和pcore-Rluc共转染,1.150±0.141)无统计学差异,其荧光素酶活性相对值为(1.000±0.170)(P>0.05)。NR6A1C(NR6A1LBD+Hinge)荧光素酶活性相对值相对于阳性对照组(NR6A1和pcore-Rluc共转染,1.150±0.141)无统计学差异,其荧光素酶活性相对值为(1.160±0.078)(P>0.05)。结论:过表达NR6A1通过抑制核心启动子和增强子II的活性能够显著抑制乙肝病毒的复制。

关键词：乙肝病毒核受体生殖细胞核因子(NR6A1) 启动子增强子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于CRISPR-Cas9系统构建GSTZ1基因敲除模型并探索其对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响

引用

重庆医科大学学报 2020年第9期45卷 1302-1307页

作者：雷冲王秋杰李晶晶杨帆梁利汪凯唐霓重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的:通过CRISPR/Cas9系统在HepG2肝癌细胞系中构建人谷胱甘肽S-转移酶ζ1(glutathione S-transferase zeta,GSTZ1基因敲除模型并探索GSTZ1敲除对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:设计并合成长度20 bp的靶向GSTZ1的sgRNA寡核苷酸序... 详细信息

目的:通过CRISPR/Cas9系统在HepG2肝癌细胞系中构建人谷胱甘肽S-转移酶ζ1(glutathione S-transferase zeta,GSTZ1基因敲除模型并探索GSTZ1敲除对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:设计并合成长度20 bp的靶向GSTZ1的sgRNA寡核苷酸序列,退火后克隆到LentiCRISPR-V2载体上,与慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,包装慢病毒并感染HepG2细胞,用合适浓度的嘌呤霉素筛选阳性细胞株,有限稀释法获得单克隆细胞。所有实验均分成3组:parental组、KO1组和KO2组,采用MTS实验、克隆形成实验和划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力。结果:Western blot和DNA测序鉴定GSTZ1敲除的单克隆细胞构建成功;MTS检测不同时间点下各组HepG2细胞的增殖能力变化情况。结果显示,48 h时,KO1组[(24.758±1.508)%]相比亲本组[(20.185±0.720)%],增殖能力明显增强,差异有统计学意义(P=0.002)。72 h时,相比亲本组[(23.903±0.840)%],KO1组[(28.634±1.848)%]增殖能力明显增强(P=0.014)。96 h和120 h时,KO1组相比亲本对照组,其增殖能力也明显增强(P<0.05)。在KO2细胞中观察到同样现象,说明敲除GSTZ1后能够促进Hep G2细胞的增殖能力。克隆形成实验表明,GSTZ1敲除细胞株(KO1和KO2)克隆形成数(73.330±1.528、82.330±4.163)相比亲本细胞克隆形成数(42.330±2.517)增多,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000),提示GSTZ1基因敲除可以明显促进肝癌细胞的增殖能力。划痕实验结果显示,GSTZ1敲除细胞株KO1和KO2在48 h的迁移相对比分别为0.327±0.041、0.371±0.013,与亲本细胞(0.184±0.045)相比明显增加(P=0.003,P=0.001),提示GSTZ1基因敲除可明显促进肝癌细胞的迁移能力。结论:GSTZ1缺失明显促进肝癌细胞的增殖和迁移能力,提示GSTZ1可能作为抑癌基因调控肝癌的发生和进程。

关键词： GSTZ1 HepG2细胞肝癌细胞迁移细胞增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

顺铂通过ROS促进乙型肝炎病毒复制的实验研究

引用

重庆医科大学学报 2020年第9期45卷 1294-1301页

作者：陈雪梅胡杰潘娥梁利汪凯黄爱龙唐霓重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的:探索顺铂(cisplatin)促进乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的分子机制。方法:采用不同浓度的顺铂处理稳定表达HBV的Hep AD38细胞,台盼蓝染色检测细胞活力,筛选出顺铂最适浓度,分别采用Real-time PCR和Southern blot检测HBV... 详细信息

目的:探索顺铂(cisplatin)促进乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的分子机制。方法:采用不同浓度的顺铂处理稳定表达HBV的Hep AD38细胞,台盼蓝染色检测细胞活力,筛选出顺铂最适浓度,分别采用Real-time PCR和Southern blot检测HBV DNA水平,Western blot检测HBsAg和HBcAg蛋白表达。在顺铂诱导组加或者不加氧化应激抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC),采用CellROX Orange Reagent染料在激光共聚焦显微镜下检测细胞内ROS水平,并且检测HBV DNA水平、HBsAg及HBcAg的蛋白水平。结果:台盼蓝染色筛选出顺铂的最适浓度为6μmol/L。Real-time PCR实验结果显示,PBS组,0.5、2.0、6.0μmol/L顺铂处理后HBV DNA拷贝数/细胞分别为515.152±18.924、1 215.758±49.001(P=0.000)、1 678.182±117.223(P=0.000)、2 110.606±143.640(P=0.000);Southern blot结果与Real-time PCR结果一致,顺铂以剂量依赖方式增加HBV DNA水平。Western blot结果表明,与PBS组相比,6.0μmol/L顺铂组HBsAg、HBcAg蛋白相对表达量分别为3.102±0.099(P=0.000)、4.001±0.200(P=0.000);顺铂可以促进HBV复制和病毒蛋白的表达。进一步采用NAC与顺铂联合处理HepAD38细胞,Real-time PCR实验结果表明,顺铂组、顺铂+NAC组HBV DNA拷贝数/细胞分别为2 180.444±82.573(P=0.000)、1 041.778±50.918(P=0.000),2组差异具有统计学意义。Western blot实验结果表明,顺铂组HBsAg、HBcAg蛋白相对表达量分别为3.139±0.061(P=0.000)、3.812±0.109(P=0.000),顺铂+NAC组HBsAg、HBcAg蛋白相对表达量分别为2.101±0.088(P=0.000)、1.613±0.073(P=0.000),2组之间HBsAg、HBcAg蛋白差异均具有统计学意义。结论:顺铂通过增强细胞内ROS水平,促进HBV复制,而NAC可以部分抑制顺铂刺激的HBV复制作用。

关键词：顺铂乙型肝炎病毒病毒复制活性氧 N-乙酰-L-半胱氨酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

通过自诱导方法对乙型肝炎病毒聚合酶TP区进行可溶性表达及鉴定

引用

中国生物制品学杂志 2017年第1期30卷 25-28,33页

作者：陈可代娟甘春扬刘亚罗英英胡接力蔡雪飞重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的构建包含乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)聚合酶TP区段的重组原核表达质粒,转化表达型大肠埃希菌,以自诱导培养方法获得可溶性表达,并对其进行鉴定。方法分析HBV(A型)聚合酶N-末端1-192 AA区域的DNA序列,通过网络工具(http://*... 详细信息

目的构建包含乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)聚合酶TP区段的重组原核表达质粒,转化表达型大肠埃希菌,以自诱导培养方法获得可溶性表达,并对其进行鉴定。方法分析HBV(A型)聚合酶N-末端1-192 AA区域的DNA序列,通过网络工具(http://***/)在线优化,并在5′和3′端分别添加NdeⅠ和XhoⅠ限制性内切酶位点后,送英潍捷基(上海)贸易有限公司进行人工合成;将人工合成的TP-DNA双酶切后,插入pET32a(+)原核表达载体,构建重组原核表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS进行自诱导表达。结果重组原核表达质粒pET32a(+)/POL-TP-Opt经双酶切及测序证明构建正确;在表达菌的破菌上清中有特异性表达的蛋白,相对分子质量约20 000,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,为可溶性的重组TP蛋白。结论通过自诱导培养方法,直接成功获得可溶性的重组TP蛋白,改变了长期以来依靠包涵体复性对TP蛋白相关功能进行研究的状况。

关键词：自诱导乙型肝炎病毒聚合酶 TP区原核细胞基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙肝病毒核心相关抗原检测试剂盒的研发及临床检测

引用

重庆医科大学学报 2023年第7期48卷 798-804页

作者：马家秀卢卉双张津李亚兰杜薇安娅欣蔡雪飞重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的:研发一种检测乙肝病毒核心相关抗原(hepatitis B core-related antigen,HBcrAg)的定量检测试剂盒并评价其性能。方法:通过研究原材料抗体、优化制备工艺和调整反应体系建立HBcrAg化学发光免疫检测方法,组装成试剂盒后利用重组HBcrA... 详细信息

目的:研发一种检测乙肝病毒核心相关抗原(hepatitis B core-related antigen,HBcrAg)的定量检测试剂盒并评价其性能。方法:通过研究原材料抗体、优化制备工艺和调整反应体系建立HBcrAg化学发光免疫检测方法,组装成试剂盒后利用重组HBcrAg和临床血清进行检测性能评估,数据处理使用IBM SPSS Statistics 20软件。结果:该试剂盒标准曲线为y=143.37x+344.91,R^(2)=0.9998;检测灵敏度为1.43 pg/mL;健康人参考区间≤25.595 pg/mL;检测208例慢性乙型肝炎患者血清,所有(18/18)乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA10^(8)~10^(4)IU/mL血清HBcrAg检出值都在这个临界值以上;92.31%(24/26)HBV DNA10^(3)~10^(2)IU/mL血清HBcrAg检出阳性;44.51%(73/164)HBV DNA低于检出限血清HBcrAg检出阳性。结论:本试剂盒能较好地检测慢性乙型肝炎患者血清中的HBcrAg水平,在辅助慢性乙型肝炎患者治疗效果监测和正确判断治疗终点方面具有重要应用价值。

关键词：乙肝病毒核心相关抗原化学发光免疫分析法试剂盒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

己糖胺生物合成途径代谢酶与OGT介导的O-GlcNAc修饰在肿瘤中的研究进展

引用

重庆医科大学学报 2023年第11期48卷 1290-1295页

作者：杨佳瑶唐霓汪凯重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

细胞代谢异常和能量失调被认为是癌症的重要标志。己糖胺生物合成途径(hexosamine biosynthetic pathway,HBP)在多数肿瘤中异常激活。葡萄糖、脂肪酸、氨基酸和谷氨酰胺等是肿瘤生长的重要营养物质,并作为HBP的底物用于合成尿苷二磷酸N... 详细信息

细胞代谢异常和能量失调被认为是癌症的重要标志。己糖胺生物合成途径(hexosamine biosynthetic pathway,HBP)在多数肿瘤中异常激活。葡萄糖、脂肪酸、氨基酸和谷氨酰胺等是肿瘤生长的重要营养物质,并作为HBP的底物用于合成尿苷二磷酸N-乙酰氨基葡萄糖胺(uridine diphosphate N-acetylglucosamine,UDP-GlcNAc)。UDP-GlcNAc是蛋白质发生氧连接的氮乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰的供体底物,其被认为在细胞中扮演着“营养感受器”的角色。近年来,HBP代谢酶在癌症病理生理学中的作用被广泛研究,HBP介导的O-GlcNAc糖基化修饰与癌细胞的增殖、存活和转移密切相关。本文对HBP及其在肿瘤中的重要作用进行了综述,并且讨论了靶向HBP治疗癌症的潜在策略。

关键词：己糖胺生物合成途径肿瘤氧连β-N-乙酰葡糖胺修饰糖基化修饰

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

阿托伐他汀不依赖降血脂的肾脏保护作用

引用

第二军医大学学报 2010年第7期31卷 734-738页

作者：徐珍娥闫凤阮雄中陈压西李秋重庆医科大学附属儿童医院肾脏内科重庆400014 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室脂质中心重庆400016

目的探讨阿托伐他汀不依赖降血脂的肾脏保护作用的可能机制。方法雄性C57BL小鼠给予普通饮食作为对照组,CD36/SR-A/ApoE三敲小鼠随机分为高脂组和治疗组(高脂+阿托伐他汀)。实验满14周后处死取标本。采用酶法检测血清脂质水平;油红"... 详细信息

目的探讨阿托伐他汀不依赖降血脂的肾脏保护作用的可能机制。方法雄性C57BL小鼠给予普通饮食作为对照组,CD36/SR-A/ApoE三敲小鼠随机分为高脂组和治疗组(高脂+阿托伐他汀)。实验满14周后处死取标本。采用酶法检测血清脂质水平;油红"O"染色检测肾组织内脂质沉积情况,H-E、PAS、Masson染色观察肾脏形态学改变;定量PCR技术与免疫组化检测肾组织转化生长因子(TGF-β)、纤维连接蛋白(fibronectin)、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、α肌动蛋白(α-SMA)表达。结果阿托伐他汀能够减少三敲小鼠肾脏组织脂质沉积,但血清中的脂质水平无明显降低。阿托伐他汀可以减少高脂饮食诱导的肾脏组织系膜细胞的增生、系膜基质的沉积,肾小管间质炎症细胞的浸润、肾小管的变性扩张,细胞外基质的沉积。阿托伐他汀不但可以明显降低肾脏组织TGF-β的基因与蛋白表达,还降低纤维化相关因子的基因与蛋白表达。结论阿托伐他汀可不依赖降血脂,独立于SR-A、CD36受体途径而发挥肾脏保护作用;这种作用可能是通过降低TGF-β的表达而实现的。

关键词：阿托伐他汀高脂血症肾小球硬化症转化生长因子β A类清道夫受体 CD36抗原

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新生大鼠肝细胞脾内移植联合鼠肝再生增强因子治疗大鼠急性肝衰竭的疗效与免疫学机制

引用

中华肝脏病杂志 2007年第5期15卷 378-382页

作者：陈曜袁刚孙航刘杞重庆医科大学病毒性肝炎研究所、教育部感染性疾病分子生物学重点实验室 400010

目的探讨新生大鼠肝细胞脾内移植联合重组鼠肝再生增强因子（rALR）治疗大鼠急性肝衰竭的疗效与免疫学机制。方法采用D-氨基半乳糖（1．2 g／kg）诱导并建立大鼠急性肝衰竭模型,36 h后随机分为6组：Ⅰ组：模型对照组;Ⅱ组：经脾脏注射... 详细信息

目的探讨新生大鼠肝细胞脾内移植联合重组鼠肝再生增强因子（rALR）治疗大鼠急性肝衰竭的疗效与免疫学机制。方法采用D-氨基半乳糖（1．2 g／kg）诱导并建立大鼠急性肝衰竭模型,36 h后随机分为6组：Ⅰ组：模型对照组;Ⅱ组：经脾脏注射等渗盐水1 ml,腹腔注射等渗盐水1 ml／d;Ⅲ组：经脾脏注射rALR 1 ml（50μg／kg）,腹腔注射rALR 1 ml（50μg·kg^-1·d^-1）;Ⅳ：经脾脏移植2×10^7同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射等渗盐水1 ml／d;Ⅴ组：经脾脏移植2×10^7同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射rALR 1 ml（50μg·kg^-1·d^-1）;Ⅵ组：经脾脏移植2×10^7同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射环孢菌素1 ml（10 mg·kg^-1·d^-1）。观察大鼠每天存活率;术后第1、5天及2周处死大鼠以获取肝、脾组织,观察脾内移植肝细胞的组织学改变;在术前、术后第1、2、5、12天采集静脉血,采用放射免疫法测定血清IL-1β和TNFα的浓度。结果Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组大鼠存活时间差异无统计学意义,Ⅳ组有部分大鼠长期存活,2周存活率为33％,Ⅴ组大鼠2周存活率显著高于Ⅳ组,而与Ⅵ组大鼠2周存活率比较差异无统计学意义。Ⅳ、Ⅵ组脾内移植的肝细胞可存活5～7 d,Ⅴ组脾内移植肝细胞可存活至2周以上。术后第1天,Ⅳ组血清IL-1β水平显著高于Ⅴ组和Ⅵ组（P〈0．05）;术后第5天,Ⅳ组血清IL-1β水平仅与Ⅵ组差异有统计学意义（P〈0．05）。术后第1天,TNFα的浓度在Ⅱ组显著高于Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组（P〈0．05）。结论新生大鼠肝细胞脾内移植与rALR联合治疗大鼠急性肝衰竭有一定疗效,可提高D-氨基半乳糖诱导肝衰竭大鼠的存活率;移植肝细胞在脾脏可存活2周以上,其机制可能与促进肝细胞再生、预防移植肝细胞凋亡及轻微抑制细胞免疫有关。

关键词：大鼠肝功能衰竭,急性肝细胞肝再生增强因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：