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现代医药卫生 2023年第18期39卷 3152-3156页

作者：徐晓丽廖涌蒲丹岚杨刚毅李伶重庆医科大学附属第二医院内分泌科重庆400010 武警重庆总队医院内分泌科重庆400061 重庆市渝北区人民医院内分泌科重庆401120 重庆医科大学检验医学院临床生化教研室/教育部临床检验诊断学重点实验室重庆400016

家族性白蛋白异常性高甲状腺素血症(FDH)是临床上甲状腺功能正常的高甲状腺素血症的常见原因之一,易被误诊为甲状腺毒症。若进一步给予不必要的相关治疗,可能导致一系列的后续疾病出现。因此加强对FDH的认识十分必要。该文就其发病机制... 详细信息

家族性白蛋白异常性高甲状腺素血症(FDH)是临床上甲状腺功能正常的高甲状腺素血症的常见原因之一,易被误诊为甲状腺毒症。若进一步给予不必要的相关治疗,可能导致一系列的后续疾病出现。因此加强对FDH的认识十分必要。该文就其发病机制、检测手段、鉴别诊断等方面进行综述,为认识FDH提供临床参考。

关键词：高甲状腺素血症白蛋白异常甲状腺功能正常

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JAZF1过表达对糖异生及胰岛素信号通路的影响

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重庆医科大学学报 2015年第7期40卷 965-969页

作者：王汉生李伶杨刚毅罗小河李敏燕代继桓任艳重庆医科大学检验医学院临床生化教研室教育部临床检验诊断学重点实验室重庆400010

目的:在课题组前期细胞研究结果的基础上构建锌指并列基因1(juxtaposed with another zinc finger gene 1,JAZF1)转基因动物模型并探讨JAZF1基因过表达对糖异生及胰岛素信号通路的影响。方法:将构建和制备的JAZF1基因片段,经显微注射到... 详细信息

目的:在课题组前期细胞研究结果的基础上构建锌指并列基因1(juxtaposed with another zinc finger gene 1,JAZF1)转基因动物模型并探讨JAZF1基因过表达对糖异生及胰岛素信号通路的影响。方法:将构建和制备的JAZF1基因片段,经显微注射到受精卵中,将受精卵移植入受体小鼠,产出后经鉴定和繁育得到较纯的JAZF1转基因小鼠。将8周龄转基因小鼠(Tg-JAZF1)和野生(wild type,WT)小鼠随机分为4组喂养:即普食(standard diet,SD)-WT组(n=6)、SD-Tg组(n=6)、高脂(high fat diet,HFD)-WT组(n=6)、HFD-Tg组(n=6)。各组小鼠喂养12周之后测定肝脏组织糖异生的关键基因葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)的m RNA和蛋白表达的变化。Western blot测定肝脏、肌肉、脂肪组织胰岛素信号通路蛋白磷酸化水平变化。结果:SD-Tg小鼠的m RNA和蛋白在肝脏、肌肉、脂肪组织中表达较SD-WT小鼠均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与WT小鼠比较,Tg-JAZF1小鼠肝脏PEPCK、G-6-Pase在SD喂养和HFD喂养条件下m RNA水平和蛋白表达水平均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);肝脏组织胰岛素信号通路蛋白磷酸化水平均增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:JAZF1转基因动物模型构建成功,JAZF1过表达能抑制肝脏糖异生关键基因表达,增加肝脏组织的胰岛素敏感性。

关键词：锌指并列基因1 转基因鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶葡萄糖-6-磷酸酶胰岛素信号

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KLF14过表达促进肝细胞糖摄取的机制研究

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中华内分泌代谢杂志 2015年第5期31卷 457-461页

作者：任艳李伶杨刚毅代继桓贾彦军罗小河冉文侠曾梦重庆医科大学检验医学院临床生化教研室和教育部临床检验诊断学重点实验室400016 重庆医科大学附属第二医院内分泌科

目的观察Kruppel样因子14（KLFl4）基因过表达对肝细胞胰岛素信号通路以及AMP活化的蛋白激酶（AMPK）关键信号分子的影响，探讨KLFl4影响糖代谢的分子机制。方法建立KLFl4过表达的Hepal-6肝癌细胞模型，分为空载组、胰岛素组、KLFl4转... 详细信息

目的观察Kruppel样因子14（KLFl4）基因过表达对肝细胞胰岛素信号通路以及AMP活化的蛋白激酶（AMPK）关键信号分子的影响，探讨KLFl4影响糖代谢的分子机制。方法建立KLFl4过表达的Hepal-6肝癌细胞模型，分为空载组、胰岛素组、KLFl4转染组和胰岛素＋KLFl4处理组，采用[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法检测肝癌细胞对葡萄糖的摄取率。以Western印迹检测KLFl4过表达对胰岛素信号通路中各信号分子的磷酸化水平及磷酸烯醇式丙酮酸激酶（PEPCK）蛋白表达的影响。结果胰岛素处理Hepal-6细胞后，KLFl4转染组与未转染组相比，葡萄糖摄取率明显升高（P〈0．01）；胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物（IRS）1、蛋白激酶B（Akt）、AMPK、CREB转录共激活因子2（TORC2）的磷酸化水平均明显增加（P〈0．01）；而且，糖原合成酶激酶3B的磷酸化水平亦明显增加，而PEPCK的蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论KLFl4过表达可能通过活化胰岛素InsR／IRS／Akt经典通路，从而改善肝细胞的胰岛素抵抗，且可能通过AMPK／TORC2／PEPcK信号通路抑制肝糖异生，并促进糖摄取和肝糖原的合成，从而改善糖代谢。

关键词： Kruppel样因子14 胰岛素 AMP活化的蛋白激酶信号通路

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锌α2糖蛋白与胰岛素抵抗相关疾病关系的研究进展

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重庆医科大学学报 2015年第7期40卷 914-917页

作者：尹经霞廖涌李伶杨刚毅重庆医科大学检验医学院临床生化教研室教育部临床检验诊断学重点实验室重庆400016 武警重庆总队医院内分泌科重庆400061 重庆医科大学附属第二医院内分泌科重庆400010

随着现代生活方式及饮食习惯的改变,疾病谱的重心逐渐转变为慢性非感染性疾病。心血管疾病、糖脂代谢紊乱、肥胖、代谢综合征、多囊卵巢综合征等疾病均与胰岛素抵抗有关。胰岛素抵抗是慢性非感染性疾病的重要组成部分,患病人群众多,严... 详细信息

随着现代生活方式及饮食习惯的改变,疾病谱的重心逐渐转变为慢性非感染性疾病。心血管疾病、糖脂代谢紊乱、肥胖、代谢综合征、多囊卵巢综合征等疾病均与胰岛素抵抗有关。胰岛素抵抗是慢性非感染性疾病的重要组成部分,患病人群众多,严重影响其生活质量。锌α2糖蛋白(Zinc-α2-Glycoprotein,ZAG)是新近发现的一种具有调节体质量和改善胰岛素敏感性的脂肪因子,因其与胰岛素抵抗相关疾病关系密切逐渐受到人们的重视。近年来大量临床实验研究ZAG与胰岛素抵抗的关系,本文拟这些研究进展做一综述。

关键词：锌α2糖蛋白胰岛素抵抗高血压糖尿病肥胖

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JAZF1基因过表达对小鼠糖脂代谢及胰岛素敏感性的影响

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中国糖尿病杂志 2014年第4期22卷 353-357页

作者：徐成杨刚毅董靖瞿文娟郭芸松张利莉李志勇李伶重庆医科大学检验医学院临床生化教研室和教育部实验诊断重点实验室 400010 重庆医科大学附属第二医院内分泌科重庆医科大学附属永川医院内分泌科

目的探讨JAZF1基因过表达对高脂饮食诱导的IR小鼠糖脂代谢及IS的影响。方法 43只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为普食对照组(NF,n=10)和高脂组(n=26)。高脂组喂养12周后,再随机分为高脂+生理盐水组(HF,n=10)、高脂+空载组(GF,n=6)和高脂+JAZF... 详细信息

目的探讨JAZF1基因过表达对高脂饮食诱导的IR小鼠糖脂代谢及IS的影响。方法 43只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为普食对照组(NF,n=10)和高脂组(n=26)。高脂组喂养12周后,再随机分为高脂+生理盐水组(HF,n=10)、高脂+空载组(GF,n=6)和高脂+JAZF1质粒组(JAZF1,n=10)。质粒于钳夹前48h经颈静脉注射。扩展胰岛素钳夹技术评价IS。结果肝组织JAZF1mRNA及蛋白表达HF组和GF组较NF组降低,而JAZF1组高于HF、GF组(P均<0.05)。JAZF1组FBG、TC、FIns和肝脏TC水平较HF、GF组降低(P<0.05)。钳夹稳态时,JAZF1组葡萄糖输注率(GIR)(26.39±1.65)mg/(kg·min)高于HF组(21.37±0.49)mg/(kg·min)和GF组(22.01±0.89)mg/(kg·min)(P<0.05)。钳夹结束时,葡萄糖清除率(GRd)JAZF1组(32.23±2.12)mg/(kg·min)高于HF组(29.66±0.87)mg/(kg·min)和GF(30.13±1.15)mg/(kg·min)组(P均<0.05),而肝糖输出率(HGP)JAZF1组(5.84±0.88)mg/(kg·min)低于HF组(8.29±0.39)mg/(kg·min)和GF组(8.13±0.76)mg/(kg·min)(P均<0.05)。结论高脂诱导的IR小鼠JAZF1基因表达下调,而JAZF1基因过表达可改善高脂诱导的糖脂代谢异常和IR。

关键词： JAZF1基因糖代谢异常胰岛素抵抗扩展高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术

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JAZF1基因表达上调对脂肪变性肝脏促炎因子的影响及其机制研究

JAZF1基因表达上调对脂肪变性肝脏促炎因子的影响及其机制研究

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中华医学会第十三次全国内分泌学学术会议

作者：贾彦军李伶杨刚毅重庆医科大学检验医学院临床生化教研室和教育部实验诊断学重点实验室重庆医科大学附属第二医院内分泌科

目的探讨JAZF1表达上调对饱和脂肪酸诱导的肝细胞或高脂喂养的肝脏促炎因子产生的影响及其可能的分子机制。方法体外细胞实验:通过利用一定浓度饱和脂肪酸作用大鼠源性正常肝细胞,构建肝细胞脂肪变性模型;运用JAZF1过表达腺病毒载体Ad-J... 详细信息

目的探讨JAZF1表达上调对饱和脂肪酸诱导的肝细胞或高脂喂养的肝脏促炎因子产生的影响及其可能的分子机制。方法体外细胞实验:通过利用一定浓度饱和脂肪酸作用大鼠源性正常肝细胞,构建肝细胞脂肪变性模型;运用JAZF1过表达腺病毒载体Ad-JAZF1上调肝细胞JAZF1表达;体内动物实验:健康雄性野生C57BL/6J小鼠及JAZF1转基因过表达小鼠,分别适应性喂养1周后,分别给

关键词：基因表达促炎因子 JAZF1 饱和脂肪酸肝细胞 ERK 高脂喂养机制研究

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TIP27表达上调对小鼠胰岛素敏感性和糖代谢的影响及其机制研究

TIP27表达上调对小鼠胰岛素敏感性和糖代谢的影响及其机制研究

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中华医学会第十三次全国内分泌学学术会议

作者：袁磊张颖杨刚毅李伶重庆医科大学附属第二医院内分泌科重庆医科大学检验医学院临床生化教研室和教育部实验诊断学重点实验室

目的近来多项GWAS研究表明,TIP27与2型糖尿病的发生发展密切相关。然而,目前关于TIP27在代谢相关疾病方面的作用及其相关机制研究较少。因此,本研究拟探讨TIP27过表达对普食及高脂喂养的TIP27转基因小鼠糖代谢和胰岛素敏感性的影响及其... 详细信息

目的近来多项GWAS研究表明,TIP27与2型糖尿病的发生发展密切相关。然而,目前关于TIP27在代谢相关疾病方面的作用及其相关机制研究较少。因此,本研究拟探讨TIP27过表达对普食及高脂喂养的TIP27转基因小鼠糖代谢和胰岛素敏感性的影响及其相关分子机制。方法利用雄性TIP27转基因小鼠(TIP27-Tg)及野生C57BL/6J小鼠作为研究对象。将40只雄性C57BL/6J和TIP27-Tg小鼠随机分成4组:普食喂养野生C57小鼠组(CN组,n=10);普食喂养TIP27-Tg小鼠组(TN组,n=10);高

关键词：胰岛素敏感性 TIP27 糖代谢机制研究

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成纤维细胞生长因子21表达下调对ApoE-/-小鼠肝糖异生相关基因及JAK2／STAT3信号转导通路的影响

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中华内分泌代谢杂志 2013年第6期29卷 520-524页

作者：贾彦军李伶杨刚毅徐胜男罗小河冉文侠罗妤张亚丽重庆医科大学检验医学院临床生化教研室和教育部临床检验诊断学重点实验室400010 重庆医科大学附属第二医院内分泌科

目的探讨成纤维细胞生长冈子21（FGF-21）基因表达下调对ApoE基因敲除（ApoE-/-）小鼠肝脏糖异生相关基因表达的影响及其可能的分子机制。方法24只鼠龄8周的雄性ApoE。小鼠随机分为普食对照组（Nc组，n=6），普食＋pAd—shFGF-21组（NF... 详细信息

目的探讨成纤维细胞生长冈子21（FGF-21）基因表达下调对ApoE基因敲除（ApoE-/-）小鼠肝脏糖异生相关基因表达的影响及其可能的分子机制。方法24只鼠龄8周的雄性ApoE。小鼠随机分为普食对照组（Nc组，n=6），普食＋pAd—shFGF-21组（NF组，n=6），高脂对照组（HC，n=6）和高脂＋pAd—swGF-21组（HF，n=6），各组小鼠均喂养16周。NC、HC组于15周末尾静脉注射Ad—shGFP空载腺病毒（浓度：1×^9／100μl／鼠），NF、HF组注射pad—shFGF-21重组腺病毒（浓度1×^9／100μl／鼠）。16周后取小鼠血浆和肝脏样本，测定空腹血糖、血浆胰岛素（Pins）和血脂水平；采用荧光定量PCR和Western印迹方法检测各组小鼠肝脏组织糖异生相关基因及JAK2／STA33信号通路mRNA和蛋白水平的变化。结果NF和HF组的空腹血糖、血浆胰岛素（Pins）、甘油三酯、总胆同醇及低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平均显著高于NC和HC组（P〈0．05或P〈O．01），而高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）水平显著下降（P〈0．05或P〈0．01）．．在普食与高脂饮食喂养条件下，FGF-21抑制组与相应对照组相比肝脏FGF-21mRNA水平分别降低76．6％和40．9％（均P〈0．05）；蛋白表达水平分别降低67．8％和49．6％（均P〈O．05）；B—klotho、FGFRI和FGFR3mRNA水平显著降低（均P〈O．05），糖异生相关基因葡萄糖-6-磷酸酶（G6pase）和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）mRNA和蛋白表达水平较对照组明显升高（P〈0．05），肝脏中SOCS3表达水平降低（P〈0．05）和磷酸化的STAT3、SOCS3蛋白表达量降低（P〈0．05）。结论FGF-21抑制ApoE。小鼠糖异生相关基因表达：其调控机制可能与JAK2／STAT3信号通路相关。

关键词：成纤维细胞生长因子21 糖异生 JAK2 STAT3信号通路胰岛素抵抗

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小鼠FGF-21 siRNA腺病毒载体的构建与鉴定

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中国老年学杂志 2012年第23期32卷 5173-5175页

作者：杨小敏杨刚毅李伶胡文静叶菲重庆医科大学检验医学院临床生化教研室教育部实验诊断重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院内分泌科

目的构建含FGF-21 siRNA基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法首先用BamHⅠ+HindⅢ双酶切本课题组前期构建的质粒pSi-lencer1.0-shFGF-21,得到0.3 bp的目的片段,并将目的片段亚克隆入穿梭质粒(pShuttle-shFGF-21,),用I-CeuI和I-SceI双酶切... 详细信息

目的构建含FGF-21 siRNA基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法首先用BamHⅠ+HindⅢ双酶切本课题组前期构建的质粒pSi-lencer1.0-shFGF-21,得到0.3 bp的目的片段,并将目的片段亚克隆入穿梭质粒(pShuttle-shFGF-21,),用I-CeuI和I-SceI双酶切处理pAdxsi组腺病载体及pShuttle-shFGF-21,连接,转化DH5α感受态细胞,筛选、鉴定、测序后,最后在293细胞内包装扩增为重组腺病毒。结果设计并构建了小鼠FGF-21基因特异性siRNA腺病毒载体,并经酶切和测序鉴定。空斑形成实验测得腺病毒滴度为1×1010PFU/ml。结论成功构建了小鼠FGF-21基因特异性siRNA腺病毒载体。

关键词： RNA干扰腺病毒载体 FGF-21 脂联素

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成纤维细胞生长因子21表达抑制对ApoE基因敲除小鼠糖脂代谢的影响

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中华内分泌代谢杂志 2011年第12期27卷 1004-1008页

作者：罗妤邓广江杨刚毅李伶张莉莉王波 Gunther Boden 李钶李生兵重庆医科大学检验系临床生化教研室和教育部实验诊断重点实验室400010 重庆医科大学附属第二医院内分泌科美国Temple大学医学院附属医院一般临床研究中心

目的探讨抑制成纤维细胞生长因子21（FGF-21）基因表达抑制对ApoE基因敲除（ ApoE-/-）小鼠糖脂代谢的影响.方法采用C57 BL/6J为对照组（n=10）,ApoE-/-小鼠随机分为普食组（NF组,n=10）；普食＋pAd-shFGF-21组（NFG组,n=9）；高脂饲... 详细信息

目的探讨抑制成纤维细胞生长因子21（FGF-21）基因表达抑制对ApoE基因敲除（ ApoE-/-）小鼠糖脂代谢的影响.方法采用C57 BL/6J为对照组（n=10）,ApoE-/-小鼠随机分为普食组（NF组,n=10）；普食＋pAd-shFGF-21组（NFG组,n=9）；高脂饲料组（HF组,n=10）；高脂＋pAd-shFGF-21组（ HFG,n=10）；高脂＋空载体组（GFP,n=6）,均喂养16周,NFG和HFG组于15周末予尾静脉注射pAd-shFGF-21.采用3-[3H]葡萄糖为示踪剂的扩展高胰岛素钳夹技术评价各组小鼠胰岛素敏感性和糖脂代谢变化.结果 NFG和HFG组血浆FGF-21水平较相应对照组降低20％～27％（均P＜0.05）.基础状态下,NFG和HFG组空腹血糖、血浆胰岛素、游离脂肪酸、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均显著高于NF和HF组（P＜0.05或P＜0.01）,而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）则显著低于NF和HF组（P＜0.01）.钳夹稳态时,NFG和HFG组游离脂肪酸虽被抑制,但分别明显高于NF和HF组（P＜0.01或P＜0.05）.在相同胰岛素浓度输注下,NFG和HFG组葡萄糖输注率（GIR）分别明显低于NF和HF组（P＜0.01）.钳夹结束时,NFG和HFG组的葡萄糖清除率（GRd）分别明显低于NF和HF组（均P＜0.01）,而肝糖输出率（HGP）则分别明显高于NF和HF组,仅被抑制49％和20％（均P＜0.01）.结论 FGF-21表达抑制和血浆FGF-21水平降低加重了机体糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗.

关键词：成纤维细胞生长因子21 RNA干扰胰岛素抵抗糖脂代谢

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