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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议暨第八届全军定量病理学学术会议

作者：周其全杨有利杨磊唐萃第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆400038 解放军第十医院检验科甘肃武威733000 解放军第十医院检验科甘肃武威733000 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的：了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的改变. 方法：对参加玉树(海拔3700m)抗震救灾116天后返回平原的613名官兵(设为观察组)和未参加救灾的140名官兵(设为对照组)在返回后的第2天,第15天和第30天分别采取清晨空腹静脉血,... 详细信息

目的：了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的改变. 方法：对参加玉树(海拔3700m)抗震救灾116天后返回平原的613名官兵(设为观察组)和未参加救灾的140名官兵(设为对照组)在返回后的第2天,第15天和第30天分别采取清晨空腹静脉血,采用放射免疫竞争法分析其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度. 结果：高原短期暴露男性，返回平原第2天组、第15天组测得T含量略高于对照组，返回平原第30天组T含量略低于对照组，均无统计学差异(P>0.05)。E2的浓度一直呈下降趋势，与对照组相比，返回平原第2天组、返回平原第15天组及返回平原第30天组的E2含量明显降低，有显著差异(P<0.05);返回平原第30天E2含量低于返回平原后第2天和15天的含量，并明显低于对照组(P<0.05);返回第15天组与返回平原第2天组比较无统计学差异(P>0.05)。返回第2、15、30天组E2异常率明显高于对照组，正常率明显低于对照组。结论：成年男性高原短期暴露返回低海拔地区后，血清T水平呈先增高后降低趋势，并出现矫枉过正现象，E2水平呈持续下降趋势。E2缺乏与骨质疏松密切相关，提示应当重视高原暴露官兵返回平原后的低雌激素水平和骨质疏松，避免因过度训练引发的骨损伤发生。

关键词：高原短期暴露低海拔地区性激素脱适应期

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高原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化及意义

高原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者：周其全杨有利杨磊唐萃第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室解放军第十医院检验科重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心

目的了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的改变。方法对参加玉树(海拔3700m)抗震救灾116天后返回平原的613名官兵(设为观察组)和未参加救灾的140名官兵(设为对照组)在返回后的第2天,第15天和第30天分别采取清晨空腹静脉血,采用放... 详细信息

目的了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的改变。方法对参加玉树(海拔3700m)抗震救灾116天后返回平原的613名官兵(设为观察组)和未参加救灾的140名官兵(设为对照组)在返回后的第2天,第15天和第30天分别采取清晨空腹静脉血,采用放射免疫竞争法分析其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度。结果高原短期暴露男性,返回平原第2天组、第15天组测得T含量略高于对照组,

关键词：短期暴露性激素水平低海拔地区动态变化

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尿微量蛋白联合检测对高原短期暴露人群返回低海拔地区后肾脏脱适应损伤的判定

尿微量蛋白联合检测对高原短期暴露人群返回低海拔地区后肾脏脱适...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

目的:了解平原人高原短期暴露再返回平原后尿微量蛋白变化规律,进一步探讨高原脱适应对肾脏的影响。方法:对参加高原军事任务116天的738名官兵分别在返回平原后的第2天、第15天和第30天采集晨起中段尿20mL,使用全自动化学发光免疫分析仪... 详细信息

目的:了解平原人高原短期暴露再返回平原后尿微量蛋白变化规律,进一步探讨高原脱适应对肾脏的影响。方法:对参加高原军事任务116天的738名官兵分别在返回平原后的第2天、第15天和第30天采集晨起中段尿20mL,使用全自动化学发光免疫分析仪,对尿液中的α-1微球蛋白(α1-MG),β2-微球蛋白(β2-MG),尿微量白蛋白(MAlb)进行检测,并对结果进行统计学

关键词：尿微量蛋白暴露人群联合检测低海拔地区

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原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化及意义

原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化及...

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中华医学会第七次全国高原医学学术会议暨中国病理生理学会第九次全国缺氧和呼吸病理生理学术会议

作者：杨磊杨有利唐萃周其全解放军第十医院检验科甘肃武威 733000 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆 400016 第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆 400038

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Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

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第二军医大学学报 2013年第11期34卷 1166-1170页

作者：胡代曦张锡峰张超钟沁冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定... 详细信息

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析分别检测14-19细胞中上皮标记物和间质标记物的表达改变。结果显微镜下可见高表达wnt3的14-19细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验和细胞迁移实验结果显示,高表达wnt3的14-19细胞迁移能力明显提高,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,间质标记物N-cadherin、vimentin和twist1的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E-cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。

关键词： wnt3 肝前体细胞上皮-间质转化肝硬化

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带有HPV-16 E6/E7基因的DC疫苗抑制裸鼠宫颈癌生长的机制

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中国老年学杂志 2013年第10期33卷 2299-2302页

作者：符少月焦庆昉黄启彬易发平重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的观察由携带HPV-16 E6/E7基因的树突细胞(dendritic cell,DC)疫苗免疫得到的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在裸鼠体内对宫颈癌的抑制作用及相关机制。方法诱导培养C57BL/6小鼠骨髓的未成熟DC(imDC),将已经成功构建的携带人乳头状瘤病毒(HPV... 详细信息

目的观察由携带HPV-16 E6/E7基因的树突细胞(dendritic cell,DC)疫苗免疫得到的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在裸鼠体内对宫颈癌的抑制作用及相关机制。方法诱导培养C57BL/6小鼠骨髓的未成熟DC(imDC),将已经成功构建的携带人乳头状瘤病毒(HPV)-16 E6/E7基因的重组腺病毒感染imDC,Western印迹检测E7蛋白的表达;构建裸鼠宫颈癌细胞移植瘤模型,应用DC疫苗诱导的CTL处理后,观察裸鼠肿瘤的体积变化;CCK8(cell counting kit8)法检测经DC疫苗免疫的BALB/c小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖;免疫组化法检测裸鼠脾脏组织CD4+T淋巴细胞的表达。结果成功培养出DC并制备出DC疫苗;第28天各组裸鼠肿瘤体积pAd-E6E7-DC-CTL-CaSki组与对照组pAd-mock-DC-CTL-CaSki组、DC-CTL-CaSki组、CaSki组相比较,pAd-E6E7-DC-CTL-CaSki组裸鼠肿瘤体积最小(P<0.05);CCK8法检测经DC疫苗免疫的BALB/c小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖,结果 pAd-E6/E7-DC组淋巴细胞OD值明显高于pAd-mock-DC组、DC组和PBS组(P<0.01);免疫组化检测各组裸鼠脾脏组织CD4 T淋巴细胞的表达结果显示,pAd-E6E7-DC-CTL-CaSki组CD4表达量最高,pAd-mock-DC-CTL-CaSki组和DC-CTL-CaSki组CD4表达量次之,CaSki组CD4表达量最低。结论带有HPV-16 E6/E7基因修饰的DC疫苗,能够促进小鼠体内T淋巴细胞的增殖,诱导CTL抑制裸鼠宫颈癌移植瘤的生长。

关键词：树突细胞人乳头瘤病毒16 T淋巴细胞 CaSki细胞

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17β-雌二醇对人甲状腺滤泡状癌WRO细胞侵袭能力的影响及其机制

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中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1264-1268,1272页

作者：杨俊艳吴婷婷刘智敏刘小花王旎董超然重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对人甲状腺滤泡状癌WRO细胞侵袭能力的影响及其机制。方法用10-8mol/L的E2处理WRO细胞不同时间(0、24、48 h),倒置显微镜下观察细胞形态的变化;RT-PCR和Western blot法检测细胞中G蛋白偶联雌激... 详细信息

目的探讨17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对人甲状腺滤泡状癌WRO细胞侵袭能力的影响及其机制。方法用10-8mol/L的E2处理WRO细胞不同时间(0、24、48 h),倒置显微镜下观察细胞形态的变化;RT-PCR和Western blot法检测细胞中G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)、CXCR1、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)和MMP9基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平;ELISA法检测细胞中IL-8的含量;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力。结果随着E2处理时间的延长,WRO细胞间的间隙变大,逐渐离散成单个细胞,形态呈长梭形、纺锤形;细胞中GPER、CXCR1、MMP2和MMP9基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平及分泌IL-8的水平均逐渐升高(P<0.05或P<0.01);细胞的侵袭能力明显增强(P<0.05)。结论 E2可通过上调GPER、CXCR1、MMP2、MMP9和IL-8的表达,促进WRO细胞的侵袭。

关键词：甲状腺滤泡状癌 17β-雌二醇白细胞介素-8 细胞侵袭

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带有HPV-16 E6/E7基因的树突状细胞疫苗对裸鼠人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的抗肿瘤作用

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重庆医科大学学报 2013年第5期38卷 512-516页

作者：符少月焦庆昉黄启彬刘潇淇易发平宋方洲重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:探索带有HPV-16 E6/E7基因的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗对裸鼠人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的抗肿瘤作用。方法:体外诱导培养C57BL/6小鼠骨髓的未成熟DC(immature DC,imDC),将已经成功构建的携带人乳头状瘤病毒(human papillom... 详细信息

目的:探索带有HPV-16 E6/E7基因的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗对裸鼠人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的抗肿瘤作用。方法:体外诱导培养C57BL/6小鼠骨髓的未成熟DC(immature DC,imDC),将已经成功构建的携带人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)-16 E6/E7基因的重组腺病毒感染imDC,Western blot检测E7蛋白的表达;构建裸鼠的人宫颈癌CaSki细胞移植瘤模型,应用DC疫苗诱导的BALB/c小鼠脾脏的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)处理后,观察裸鼠肿瘤体积变化,肿瘤长出第28天后处死裸鼠,小心剥下肿瘤组织,石蜡包埋,HE染色观察各组肿瘤的细胞形态,免疫组织化学技术法检测肿瘤组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果:成功培养出DC并制备出DC疫苗;第28天各组裸鼠肿瘤体积pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组与pAd-mock-DC-CTL-CaSki组、DC-CTL-CaSki组、CaSki组相比较,pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组裸鼠肿瘤体积最小(P<0.05);免疫组化检测肿瘤组织中Bax蛋白的表达结果显示pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组最高,而CaSki组表达最低;免疫组化检测肿瘤组织中Bcl-2蛋白的表达结果显示pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组最低,而CaSki组表达最高。结论:带有HPV-16 E6/E7DC疫苗能够诱导CTL抑制裸鼠人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的生长。

关键词：树突状细胞人乳头瘤病毒16 T淋巴细胞 CaSki细胞

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Wnt/β-catenin信号途径抑制Raw264.7分化

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基础医学与临床 2013年第9期33卷 1155-1159页

作者：李红丽芦永良申利红冯涛黄佳祎重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的了解Wnt/β-catenin信号途径对小鼠单核/巨噬细胞Raw264.7的分化调控。方法将细胞分为4组:阴性对照组(即空Raw264.7组)、实验对照组(即感染Ad-GFP组)、阳性对照组(即50 ng/mL RANKL诱导组)和实验组(即感染Ad-β-catenin组)。分别给... 详细信息

目的了解Wnt/β-catenin信号途径对小鼠单核/巨噬细胞Raw264.7的分化调控。方法将细胞分为4组:阴性对照组(即空Raw264.7组)、实验对照组(即感染Ad-GFP组)、阳性对照组(即50 ng/mL RANKL诱导组)和实验组(即感染Ad-β-catenin组)。分别给予上述4组处理因素后常规细胞培养3、6和9 d提取细胞总RNA,荧光定量real-time(RT-PCR)检测核因子受体(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、组织蛋白酶K(Cathepsin K)及金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表达,再于同样处理因素培养6 d通过酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)染色观察Raw264.7的分化情况;Western blot检测TRAP、Cathepsin K蛋白的表达。结果 RT-PCR检测Ad-β-catenin组能下调RANK、TRAP、Cathepsin K和MMP-9 mRNA的表达;TRAP染色显示50 ng/mL RANKL诱导组能成功诱导Raw264.7成多核细胞,空白组和Ad-GFP组有个别多核细胞,Ad-β-catenin组为单核细胞;Westernblot检测显示Ad-β-catenin组TRAP、Cathepsin K蛋白表达降低(P<0.05)。结论 Wnt/β-catenin信号途径能抑制RAW264.7分化成熟为破骨细胞。

关键词： Wnt β-catenin Raw264 7 RANKL TRAP

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烯醇化酶ENO1抑制非小细胞肺癌细胞上皮间质转换

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中国肺癌杂志 2013年第5期16卷 221-226页

作者：周鑫张莹韩廼珺郭素萍肖汀程书钧高燕宁张开泰北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室癌发生及预防分子机理北京市重点实验室北京100021 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室医学分子肿瘤研究中心重庆400016

背景与目的已有的研究表明:上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是非小细胞肺癌发展和转移的一个重要过程,受到众多信号通路的精细调节。经典的丝裂原活化激酶(mitogen activatedprotein kinase,MAPK)信号通路是转化... 详细信息

背景与目的已有的研究表明:上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是非小细胞肺癌发展和转移的一个重要过程,受到众多信号通路的精细调节。经典的丝裂原活化激酶(mitogen activatedprotein kinase,MAPK)信号通路是转化生长因子(transforming growth factor β,TGFβ)诱导EMT发生的必要条件。本研究以非小细胞肺癌细胞系A549为模型,对烯醇化酶(enolase-1,ENO1)影响细胞EMT过程的分子机制进行了初步研究。方法建立稳定过表达ENO1的A549细胞,用划痕实验检测细胞运动能力;用Western blot技术检测EMT过程相关分子标志物的变化;通过TGFβ-1诱导实验检测ENO1过表达对EMT的影响;通过上皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导实验和Western blot检测ENO1过表达引起胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated protein kinase,ERK)磷酸化的改变。结果 ENO1过表达抑制A549细胞侧向迁移能力。ENO1过表达还会引起上皮样标志物E-cad-herin表达上调,同时间质样标志物N-cadherin和Vimentin表达下降;TGFβ-1诱导实验也证实了ENO1对EMT进程的抑制作用。EGF活化实验显示ENO1对ERK磷酸化的抑制作用。结论在非小细胞肺癌细胞中,ENO1具有抑制细胞EMT的作用,且很可能是通过抑制MAPK通路来实现。

关键词： ENO1 肺肿瘤上皮间质转换 ERK1 2

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