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高糖抑制蛋白KIAA0753和CCSAP表达并通过钙信号阻断小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的成骨分化

中国药理学通报 2025年第3期41卷 456-465页

作者：王吉春钱正霞李梦雪汪长东重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院麻醉科重庆400016

目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blo... 详细信息

目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blot检测KIAA0753和CCSAP蛋白表达情况;转染过表达质粒进入人胚肾细胞(HEK-293T),免疫共沉淀检测蛋白KIAA0753和CCSAP相互作用;利用成骨培养基分别在不同葡萄糖浓度和不同诱导时间处理MC3T3-E1细胞,试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,Western blot检测KIAA0753、CCSAP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)等蛋白的表达情况,然后再设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-CCSAP组MC3T3-E1细胞,依次检测KIAA0753、OCN、OPN蛋白的表达情况以及ALP活性;利用高通量基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中糖尿病鼠模型数据集筛选差异基因进行生物信息学分析;对MC3T3-E1细胞分别设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-KIAA0753组,Western blot检测钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡbeta,CAMK2B)、受磷蛋白(phospholamban,PLN)蛋白的表达。结果与5.5 mmol·L^(-1)组相比,25 mmol·L^(-1)抑制成骨细胞中KIAA0753和CCSAP蛋白表达,且蛋白KIAA0753和CCSAP存在相互作用。同时25 mmol·L^(-1)也抑制成骨细胞ALP、OPN、OCN蛋白表达,在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达CCSAP上调KIAA0753、OCN、OPN、ALP的表达。糖尿病鼠模型的差异基因主要富集在“信号受体、信号调控”等方面。25 mmol·L^(-1)葡萄糖抑制成骨细胞中CAMK2B、PLN蛋白的表达,且在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达KIAA0753上调CAMK2B、PLN蛋白的表达。结论高糖抑制KIAA0753和CCSAP蛋白表达,抑制小鼠胚胎成骨细胞前体细胞成骨分化和钙信号传导,过表达CCSAP挽救高糖对成骨分化的抑制作用以及过表达KIAA0753逆转高糖对钙信号通路的抑制作用。

关键词：糖尿病 KIAA0753 CCSAP 蛋白相互作用成骨分化钙信号

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基于表面增强拉曼结合统计法分析鼻咽癌氧合血红蛋白

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光谱学与光谱分析 2025年第4期45卷 953-957页

作者：高飞张明孔德营张剑明遵义医科大学物理学教研室贵州遵义563000 遵义医科大学生理学教研室贵州遵义563000 遵义市第一人民医院输血科贵州遵义563000

近红外(NIR)表面增强拉曼散射(SERS)是一种极灵敏和高选择性的表面物质检测技术,能够利用人体血液中氧合血红蛋白探测出相对应的NIR-SERS光谱,联合多变量统计法对光谱数据进行检测分析。首先筛选出合格的30例健康人与30例鼻咽癌患者氧... 详细信息

近红外(NIR)表面增强拉曼散射(SERS)是一种极灵敏和高选择性的表面物质检测技术,能够利用人体血液中氧合血红蛋白探测出相对应的NIR-SERS光谱,联合多变量统计法对光谱数据进行检测分析。首先筛选出合格的30例健康人与30例鼻咽癌患者氧合血红蛋白的NIR-SERS光谱,经过比对光谱发现鼻咽癌患者氧合血红蛋白的平均NIR-SERS光谱在340、479、817、1127、1215、1347、1425和1587 cm^(-1)位置处,谱峰的面积以及谱峰的强度相对较小,尤其在479、817和1587 cm^(-1)位置上更为明显。此外,当健康人氧合血红蛋白NIR-SERS光谱峰在335、471、1338和1429 cm^(-1)位置处时,鼻咽癌患者分别蓝移至在340、479和1347 cm^(-1)处,红移至1425 cm^(-1)处。建立PCA-T(主成分分析与独立变量T检验联合)多变量统计算法诊断模型,获得最显著差异的3个PCA得分:PC1、PC3、PC7,并对这三个PCA得分作二维以及三维散点图,将健康人与鼻咽癌患者划分至不同区域,可以很好地辨别出健康人与患者。为验证所构建的PCA-T分析法是否可靠,使用工作特征曲线(ROC)进行评判,由ROC曲线下面积0.858得知PCA-T分析法具有较高的可靠性。经过谱峰归属表对照分析,发现鼻咽癌患者氧合血红蛋白分子吡咯环、乙烯基团等振动异常,硌氨酸和苯丙氨酸的变化也比较明显。很有可能是人体鼻咽部发生病变,导致病人身体内氨基酸的代谢比较旺盛,糖类的消耗升高等原因造成。综上所述,利用近红外激发表面增强拉曼散射光谱结合多元化统计分析法有可能准确、有效、快速地区分健康人与鼻咽癌氧合血红蛋白样本,为后续NIR-SERS光谱技术在鼻咽癌或其他医学研究提供初步的实验依据,同时可以成为临床早期癌症诊断的潜在高灵敏度和可靠的工具。

关键词：鼻咽癌氧合血红蛋白统计诊断

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基于网络药理学和实验验证白藜芦醇通过HIF-1α通路减轻脓毒症脑病血管内皮损伤

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中国中药杂志 2025年第4期50卷 1087-1097页

作者：李蓉吴越朱文选秦萌孙思宇王丽娅田美慧于影蚌埠医科大学生理学教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学心脑血管疾病基础与临床重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学流行病与卫生统计学教研室安徽蚌埠233000

基于网络药理学与动物实验探究白藜芦醇(resveratrol,RES)治疗脓毒症相关脑病(sepsis associated encephalopathy,SAE)脑血管内皮损伤的作用机制.通过网络药理学收集RES和SAE的共有靶点与基因,构建蛋白质相互作用网络,使用基因本体论(Ge... 详细信息

基于网络药理学与动物实验探究白藜芦醇(resveratrol,RES)治疗脓毒症相关脑病(sepsis associated encephalopathy,SAE)脑血管内皮损伤的作用机制.通过网络药理学收集RES和SAE的共有靶点与基因,构建蛋白质相互作用网络,使用基因本体论(Gene Ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Gene and Genomes,KEGG)通路富集分析筛选关键信号通路,并进行分子对接验证.动物实验部分采用盲肠结扎穿孔法(cecum ligation and puncture,CLP)制备脓毒症脑病模型.将小鼠随机分为假手术组,CLP组和RES中、高剂量组.假手术组仅开腹而不进行盲肠结扎和穿孔,CLP组术后给予等体积的0.9%氯化钠溶液腹腔注射.RES中、高剂量组在造模后分别腹腔注射40、60 mg·kg^(-1)的RES,并在12 h后取材.实验结束后,对小鼠进行神经功能评分;检测脑组织湿干重比;氧化应激试剂盒测定血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;HE染色观察脑组织病理变化;透射电镜观察脑血管内皮细胞紧密连接和线粒体超微结构改变;Western blot检测紧密黏连蛋白1(zonula occluden1,ZO-1)、闭合蛋白(occludin)、紧密连接蛋白5(claudins-5)、视神经萎缩蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)、线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn 2)、线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,Drp1)、线粒体分裂蛋白1(fission 1,Fis1)、缺氧诱导因子-1α(hypox-ia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白表达.网络药理学结果显示,共获得RES和SAE的76个交集靶点,其中核心靶点排名前五位的是EGFR、PTGS2、ESR1、HIF-1α、***富集分析发现RES通过氧化应激反应参与SAE机制过程;KEGG富集分析表明RES通过HIF-1α、Rap1等信号通路参与SAE治疗;分子对接结果显示RES与HIF-1α等关键靶点具有良好的结合活性.动物实验结果表明,与假手术组相比,CLP组小鼠神经反射下降,脑组织含水量增加、血清SOD、CAT活力降低,MDA含量增高,大脑皮层内皮紧密连接结构破坏,线粒体形态出现明显异常,脑组织中Drp1、Fis1和HIF-1α蛋白表达升高,ZO-1、occludin、claudin-5、Mfn2和OPA1蛋白表达降低.与CLP组相比,RES中、高剂量组的小鼠神经功能有所恢复,脑组织含水量和SOD、CAT活力升高,MDA含量降低,脑组织细胞形态、内皮细胞间紧密连接和线粒体结构得到改善,Drp1、Fis1和HIF-1α蛋白表达降低,ZO-1、occludin、claudin-5、Mfn2和OPA1蛋白表达升高.研究表明,RES通过抑制SAE损伤后的氧化应激反应,改善脑血管内皮屏障功能,维持线粒体稳态,其机制可能与调节HIF-1α信号通路有关.

关键词：白藜芦醇脓毒症脑病血管内皮损伤线粒体动力学 HIF-1α

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《神经生理学》知识点融入《神经系统疾病与精神疾病》整合课程的教学探索

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继续医学教育 2025年第1期39卷 1-4页

作者：黄春霞李英博申晶晶涂柳陈显军武向梅重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

医学教育的进步与提升离不开持续的探索与改革。传统医学教育模式存在诸多问题,教育模式的改革已成为当前高等医学教育改革的重点,而合理整合课程教学内容则是改革的趋势。近年来,国内外各大医学院校逐步推进器官系统整合课程体系的改... 详细信息

医学教育的进步与提升离不开持续的探索与改革。传统医学教育模式存在诸多问题,教育模式的改革已成为当前高等医学教育改革的重点,而合理整合课程教学内容则是改革的趋势。近年来,国内外各大医学院校逐步推进器官系统整合课程体系的改革与实践。重庆医科大学自2010年起,在全国率先实施“以器官系统为主线”的整合课程教学改革探索,实现基础和临床课程的全面融合。经过10余年的实践,该课程改革已取得一定成果。其中,重庆医科大学将《神经生理学》与相关基础、临床学科融合,构建了《神经系统疾病与精神疾病》整合课程,并从教学内容、教学理念与方法、教学队伍建设、教学评价等方面对《神经生理学》课程进行改革。该整合课程已在多个年级的学生中开展教学,实践效果良好。

关键词：神经生理学生理学器官系统整合课程医学教育教学改革

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孤束核参与高血压中枢调控的研究进展

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生理学报 2025年第1期77卷 85-94页

作者：田雨李娜张翼王红杰河北大学基础医学院保定071000 河北医科大学生理学教研室石家庄050017 河北大学临床医学院保定071000 河北省慢性肾脏病骨骼代谢生理学重点实验室保定071000

孤束核是接收并整合心血管调节信号传入的第一级中枢,其通过参与心血管反射,在维持正常自主神经活动及血压调节中发挥重要作用。孤束核内的神经元之间形成复杂的突触连接,并与其他脑区相互作用。孤束核通过压力感受器反射、交感神经活... 详细信息

孤束核是接收并整合心血管调节信号传入的第一级中枢,其通过参与心血管反射,在维持正常自主神经活动及血压调节中发挥重要作用。孤束核内的神经元之间形成复杂的突触连接,并与其他脑区相互作用。孤束核通过压力感受器反射、交感神经活动、肾素-血管紧张素-醛固酮系统和氧化应激等多种途径调节自主神经活动及血压。孤束核功能异常可能导致高血压。研究孤束核在血压中枢调控的作用,以及干预孤束核相关的神经递质和信号通路,可为高血压的防治提供新思路。本文总结了迄今为止有关孤束核调节自主神经活动及血压的研究结果和亟待解决的问题,旨在为今后研究提供参考和借鉴。

关键词：孤束核自主神经高血压压力反射交感神经传出氧化应激

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胺碘酮长期作用对hKv1.5电流及其细胞内转运和蛋白表达的研究

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中国心脏起搏与心电生理杂志 2025年第1期39卷 54-59页

作者：谢宇北华大学基础医学院吉林132013 滋贺医科大学生理教研室日本滋贺520-2192

目的研究胺碘酮长期作用对超快速延迟整流钾通道(hKv1.5)的作用并探讨其相关机制。方法以人胚肾细胞系(HEK)为宿主细胞,构建稳定表达hKv1.5的HEK细胞系,以1μmol/L胺碘酮细胞外给药3 min或与细胞共培养48 h进行急性或长期干预,采用膜片... 详细信息

目的研究胺碘酮长期作用对超快速延迟整流钾通道(hKv1.5)的作用并探讨其相关机制。方法以人胚肾细胞系(HEK)为宿主细胞,构建稳定表达hKv1.5的HEK细胞系,以1μmol/L胺碘酮细胞外给药3 min或与细胞共培养48 h进行急性或长期干预,采用膜片钳技术观察胺碘酮对hKv1.5电流的作用,均根据有无胺碘酮干预分为胺碘酮组(Amiodarone组)和对照组(Control组);以不同浓度胺碘酮(0.01,0.1,1,10和20μmol/L)分别加入培养液共培养48 h,分为各浓度胺碘酮组和对照组(Control组)。采用细胞分级分离和蛋白印记法检测胺碘酮对hKv1.5蛋白细胞内转运及表达的影响,采用免疫荧光法检测hKv1.5蛋白的细胞内分布;以糖基化抑制剂Tunicamycin(0.5μg/ml)预处理24 h后再分别以普通培养液(Control组)、含hKv1.5抑制剂4-aminopyridine(4-AP,100μmol/L)培养液(4-AP组)和含1μmol/L胺碘酮(Amiodarone组)的培养液继续培养48 h,采用蛋白印记法检测hKv1.5蛋白糖基化情况。结果胺碘酮急性干预抑制hKv1.5电流,Amiodarone组较Control组hKv1.5电流密度显著降低(P<0.05),而胺碘酮长期干预时,与Control组相比Amiodarone组hKv1.5电流密度显著增加(P<0.05)。不同浓度胺碘酮长期干预中,1μmol/L胺碘酮组较Control组hKv1.5蛋白表达水平显著上调(P<0.05),hKv1.5蛋白在细胞膜上分布增加及细胞内转运加快(P<0.05)。与Control组相比Amiodarone组hKv1.5蛋白糖基化加快。结论胺碘酮长期作用加快hKv1.5通道蛋白的糖基化水平,促进其转运至细胞膜表面从而增加hKv1.5功能。

关键词：胺碘酮超快速延迟整流钾通道心房颤动膜片钳蛋白转运糖基化

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唯物辩证法理论在产科学教学中的应用

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医学理论与实践 2025年第4期38卷 703-706页

作者：张强彭金芝王东红李权遵义医科大学附属医院妇产科贵州省遵义市563000 遵义医科大学生理学教研室

唯物辩证法是马克思主义的灵魂,是科学的世界观和方法论。而产科学作为重要的临床医学学科,其内容蕴含着丰富的唯物辩证法理论。因此,将唯物辩证法理论应用于产科学的课堂教学及临床实践,对提高教学效果和学生的政治素养,帮助学生树立... 详细信息

唯物辩证法是马克思主义的灵魂,是科学的世界观和方法论。而产科学作为重要的临床医学学科,其内容蕴含着丰富的唯物辩证法理论。因此,将唯物辩证法理论应用于产科学的课堂教学及临床实践,对提高教学效果和学生的政治素养,帮助学生树立正确的世界观、人生观和价值观,培养学生的家国情怀以及临床诊疗思维和创新能力具有非常重要的现实意义。

关键词：唯物辩证法产科学教学临床实践

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c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗免疫对小鼠白色脂肪的调节作用

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中国人兽共患病学报 2025年

作者：董梦娟常宇骁宁唤唤路延之康健徐铭泽代婷李嘉玲郝乐冉张琳娜柏银兰宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学军事医学创新中心延安大学生命科学学院

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血... 详细信息

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血管基质成分（SVFs）数量。制备小鼠脂肪组织切片，HE染色后显微镜下观察和比较各组小鼠eWAT脂肪细胞大小、数量和形态以及冠状结构（CLS）形成等变化。qRT-PCR检测各组小鼠脂肪代谢相关因子、细胞因子和衰老相关基因的转录水平。结果BCG和rBCG免疫小鼠体重随时间逐渐增加，rBCG免疫诱导eWAT比重增加，SVFs数量降低。HE染色结果显示，BCG免疫促进eWAT脂肪细胞增生和rBCG免疫促进脂肪细胞肥大，BCG和rBCG免疫均可诱导eWAT中CLS形成。qRT-PCR检测结果显示，rBCG免疫可抑制eWAT脂肪分解和能量消耗相关基因表达。BCG免疫对细胞因子转录作用影响不大，而rBCG显著诱导IFN-γ和IL-1Ra，抑制IL-15和IL-2的转录，但不诱导衰老相关基因的表达。结论 rBCG免疫可诱导eWAT脂肪细胞肥大，其机制与抑制eWAT脂肪分解及调节细胞因子表达有关。

关键词：卡介苗重组卡介苗环二腺苷酸白色脂肪脂肪代谢细胞因子

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CRISPR/Cas13技术作为病毒核酸检测工具的研究进展

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热带医学杂志 2025年第2期25卷 282-288页

作者：冯文杰王芳应旗康古天乐董宇航张俊梅李冬静贺晓龙吴兴安延安大学生命科学学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710068 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

病毒感染性疾病一直是人类生命健康所面临的威胁之一,建立一个快速、精准的病毒核酸检测平台对于控制病毒的传播以及应对重大公共卫生安全事件具有重要意义。基于成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)以及CRISPR相关蛋白Cas13组成的CRISP... 详细信息

病毒感染性疾病一直是人类生命健康所面临的威胁之一,建立一个快速、精准的病毒核酸检测平台对于控制病毒的传播以及应对重大公共卫生安全事件具有重要意义。基于成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)以及CRISPR相关蛋白Cas13组成的CRISPR/Cas13系统开发出的核酸检测技术可以特异性识别特定的病毒核酸序列,激活Cas13蛋白活性,顺式切割靶标RNA的同时反式切割RNA检测探针实现检测结果的可视化,达到检测的目的。本文综述了基于CRISPR/Cas13开发出多种高特异性和高灵敏度的核酸检测技术,并且总结了这些检测技术在人类、动物以及植物感染性病毒中的应用;同时介绍了基于这些检测技术开发出的简便样品处理方法和高效的结果判读方法,实现在较短的时间内获得准确的结果。CRISPR/Cas13检测技术的不断改进和完善有助于在病毒大流行期间提供可行方案遏制病毒传播。

关键词：基于成簇规律间隔短回文重复序列 Cas13 切割活性病毒核酸检测

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小胶质细胞极化调控糖尿病神经病变的发病机制及治疗研究进展

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中国病理生理杂志 2025年第04期 766-774页

作者：张莉杨洪敏胡娇姚思睿徐浩然罗文迪徐陶黄波遵义医科大学第三附属医院儿童重症医学科遵义医科大学生理学教研室遵义医科大学第五附属(珠海)医院

糖尿病神经病变(diabetic neuropathy, DN)是糖尿病最常见的慢性并发症之一，其发病机制复杂，涉及多种细胞类型和分子途径。研究表明，小胶质细胞作为中枢神经系统的固有免疫细胞，在DN的发病过程中扮演了关键角色。近年来，随着对糖... 详细信息

糖尿病神经病变(diabetic neuropathy, DN)是糖尿病最常见的慢性并发症之一，其发病机制复杂，涉及多种细胞类型和分子途径。研究表明，小胶质细胞作为中枢神经系统的固有免疫细胞，在DN的发病过程中扮演了关键角色。近年来，随着对糖尿病神经病变发病机制认识的深入，以小胶质细胞极化为靶点治疗糖尿病神经病变成为新的研究热点。本文通过对小胶质细胞极化的调控机制、小胶质细胞极化在DN中的作用以及靶向小胶质细胞极化改善DN的治疗策略等方面的研究现状进行概述，旨在揭示小胶质细胞在DN发病机制中的中心地位，并评估针对小胶质细胞的现有和新型治疗方法的效果与局限，以期为DN的未来研究和临床治疗提供了新的视角。

关键词：糖尿病神经病变小胶质细胞极化发病机制

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