检索结果-内蒙古大学图书馆

基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株及其表型研究

免疫学杂志 2024年第1期40卷 87-95页

作者：李雪银吴传新刘慧玲李丽程莎孙航重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所401336 重庆医科大学附属第二医院肝胆外科 401336

目的采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成... 详细信息

目的采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成Lenti-IDO1-gRNA慢病毒。利用Cas9慢病毒感染THP-1细胞获得稳定表达Cas9蛋白的细胞株,再经Lenti-IDO1-gRNA慢病毒感染敲除IDO1基因,有限稀释法获得单克隆细胞株。T7E1酶切检测gRNA打靶效率,PCR产物测序和Western blot鉴定IDO1基因敲除效果。CCK8法检测IDO1基因敲除对THP-1细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测对巨噬细胞标志物CD11b、CD68和CD14表达的影响,中性红法检测巨噬细胞吞噬功能。结果成功构建了3种IDO1-gRNA重组质粒,3条gRNA均能有效编辑IDO1基因,以gRNA2编辑效率最高。经PCR产物测序和Western blot验证获得了3株THP-1 IDO1-KO单克隆细胞株,并发现IDO1基因敲除可抑制THP-1细胞增殖,下调THP-1巨噬细胞CD11b、CD68表达,上调CD14表达,增强THP-1巨噬细胞吞噬功能。结论成功构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株;IDO1对THP-1细胞增殖活性、分化调节以及THP-1巨噬细胞吞噬功能调节有重要作用,为后续进一步探讨IDO1基因在巨噬细胞中的功能及机制研究奠定基础。

关键词： CRISPR/Cas9 吲哚胺-2,3-双加氧酶1 基因敲除 THP-1细胞巨噬细胞

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新型冠状病毒肺炎疫苗混合接种方案研究进展

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中华内科杂志 2022年第7期61卷 816-821页

作者：陈志伟胡鹏重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010

目前,全球新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情仍处于大流行阶段,疫苗接种是最有效的防控策略之一。同源接种是现阶段标准的COVID-19疫苗接种方案,但是由于疫苗可及性、保护效力下降等问题,疫苗混合接种方案的研... 详细信息

目前,全球新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情仍处于大流行阶段,疫苗接种是最有效的防控策略之一。同源接种是现阶段标准的COVID-19疫苗接种方案,但是由于疫苗可及性、保护效力下降等问题,疫苗混合接种方案的研究正逐步开展。本文综述疫苗混合接种的最新研究进展,探讨其安全性和有效性,为后续COVID-19疫情防控策略的制定提供新思路。

关键词：疫苗新型冠状病毒混合接种有效性安全性

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血管性血友病因子及VITRO评分评估HBV感染患者疾病进展的临床价值

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中华肝脏病杂志 2022年第3期30卷 309-315页

作者：关雅兰张大志杨轶轩万仁均唐璐琪曾维琼康娟重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆400010

目的:探讨血管性血友病因子(vWF)及VITRO评分(vWF/血小板计数数值的比值)评估乙型肝炎病毒(HBV)感染患者疾病进展的临床价值。方法:随机收集重庆医科大学附属第二医院2018年12月1日—2021年1月5日308例HBV感染患者(包括154例慢性乙型肝... 详细信息

目的:探讨血管性血友病因子(vWF)及VITRO评分(vWF/血小板计数数值的比值)评估乙型肝炎病毒(HBV)感染患者疾病进展的临床价值。方法:随机收集重庆医科大学附属第二医院2018年12月1日—2021年1月5日308例HBV感染患者(包括154例慢性乙型肝炎、66例乙型肝炎肝硬化代偿期、88例乙型肝炎肝硬化失代偿期)的相关临床数据,vWF数值均采用统一的光学法测定,所有数据均使用统一标准纳入,并分析血浆vWF水平及VITRO评分在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化代偿期及失代偿期各组中的差别及意义。结果:慢性乙型肝炎组的血浆vWF水平及VITRO评分数值分别为(139.47%±76.44%、0.86±0.8),乙型肝炎肝硬化代偿期组分别为(164.95%±67.12%和1.44±1.14)、乙型肝炎肝硬化失代偿期组分别为(317.48%±103.32%和6.81±4.98);血浆vWF水平及VITRO评分随HBV感染患者疾病进展而增高,差异有统计学意义(F值分别为133.669、137.598,P值均<0.001)。乙型肝炎肝硬化患者中血浆vWF水平及VITRO评分数值在Child-Pugh A级组分别为(185.65%±85.07%和2.3±2.37)、B级组为(304.74%±105.81%和6.37±5.19)、C级组为(369.48%±73.23%和8.28±5.38);乙型肝炎肝硬化患者中血浆vWF水平及VITRO评分随着Child-Pugh分级等级的增高而增高,差异有统计学意义(F值分别为60.236、32.854,P值均<0.001)。血浆vWF水平及VITRO评分诊断乙型肝炎肝硬化失代偿期的曲线下面积(AUC)分别为0.897[95%可信区间(CI):0.855~0.940,P<0.01]、0.949[95%CI:0.916~0.982,P<0.01]。vWF水平及VITRO评分分别取界值为238.5%和1.65时,诊断乙型肝炎肝硬化失代偿期的敏感度分别为79.5%和94.3%,特异度为92.3%和87.7%,阳性预测值为80.5%和94.3%,阴性预测值为91.9%和97.5%,诊断准确率为88.6%和89.3%。乙型肝炎肝硬化失代偿期患者中,有消化道出血组vWF水平为367.24%±68.29%显著高于无消化道出血组的286.15%±109.69%,差异有统计学意义(P<0.001);有消化道出血组VITRO评分为9.12±5.4明显高于无消化道出血组的5.36±4.13,差异有统计学意义(P<0.01)。有自发性腹膜炎组vWF水平为341.73%±87.92%高于无自发性腹膜炎组的296.32%±111.74%,差异有统计学意义(P<0.05),而VITRO评分在两组中比较,差异无统计意义。结论:血浆vWF水平及VITRO评分可评估HBV感染患者肝脏疾病进展程度及肝硬化失代偿期程度,且对肝硬化失代偿后各种并发症有预测作用,对尽早作出干预措施有一定指导意义。

关键词：慢性乙型肝炎肝硬化血管性血友病因子 VITRO评分消化道出血

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评估免疫检查点抑制剂为基础的联合治疗在原发性肝癌患者中肝损伤发生情况的真实世界研究

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中华肝脏病杂志 2022年第1期30卷 57-62页

作者：胡亚秋汪妮冉锡萍蔡大川重庆医科大学附属第二医院感染病科重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010

目的在原发性肝癌患者中评估以免疫检查点抑制剂为基础的联合治疗引起的肝功能损伤发生情况。方法回顾性分析2018年1月1日至2021年3月31日在重庆医科大学附属第二医院感染病科住院,并接受程序性死亡蛋白其配体(PD-1/PD-L1)抗体治疗的65... 详细信息

目的在原发性肝癌患者中评估以免疫检查点抑制剂为基础的联合治疗引起的肝功能损伤发生情况。方法回顾性分析2018年1月1日至2021年3月31日在重庆医科大学附属第二医院感染病科住院,并接受程序性死亡蛋白其配体(PD-1/PD-L1)抗体治疗的65例原发性肝癌患者的临床资料。根据CTCAE V5.0标准评估治疗前后肝损伤的级别。根据性别、年龄段、是否有肝硬化、基线Child-Pugh评分、BCLC分期和治疗方案对患者进行分组,比较不同情况下患者肝损伤的发生率。多组间比较采用χ^(2)检验或秩和检验。结果根据CTCAE V5.0标准,46例(70.77%)患者在治疗观察期间发生了任意级别的肝损伤,规范化抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗的6例患者均发生肝损伤;10例(15.38%)患者发生1级肝损伤,15例(23.08%)患者发生2级肝损伤,19例(29.23%)患者发生3级肝损伤,2例(3.08%)患者发生4级肝损伤。男性患者与女性患者的肝损伤发生率差异无统计学意义(发生率分别为68.33%和100%,P=0.180);肝损伤的发生率在各年龄组间差异无统计学意义(P=0.245);肝硬化组患者的肝损伤发生率为72.22%,非肝硬化组发生率为63.64%(P=0.370);基线Child-Pugh评分为A级、B级和C级的患者肝损伤发生率分别为71.43%、61.11%和100%,差异无统计学意义(P=0.878);肝损伤发生率在不同的BCLC分期下差异无统计学意义(P=1.000);PD-1/PD-L1抗体单药治疗组肝损伤发生率为60.00%,PD-1/PD-L1抗体联合靶向药物治疗组为67.85%,PD-1/PD-L1抗体联合经肝动脉栓塞化疗术/射频消融治疗组为86.67%,各治疗方案之间肝损伤发生率差异无统计学意义(P=0.480)。结论在原发性肝癌患者中,免疫检查点抑制剂治疗引起的肝功能损伤较为常见,严重危及患者生命安全的肝损伤罕见;患者的性别、年龄、是否合并肝硬化、基线肝功能、BCLC分期和免疫治疗方案对免疫相关性肝损伤的发生率尚无影响。

关键词：原发性肝癌免疫治疗免疫检查点抑制剂 PD-1/PD-L1抗体免疫相关不良反应肝损伤

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中国西部地区丙型肝炎危害消除模式的探讨

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中华肝脏病杂志 2024年第S2期32卷 63-67页

作者：吴虓杨嫣曹青甘立松吴国辉蔡大川重庆市南岸区阳光健康服务中心重庆400060 重庆市疾病预防控制中心重庆400707 重庆医科大学附属第二医院感染病科重庆400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010

丙型肝炎病毒感染作为一种对人类健康构成重大威胁的传染病,其防控工作在全球范围内引起了广泛关注。特别是在中国西部地区,由于地理环境的复杂性、经济发展水平的相对滞后以及文化背景的多样性,丙型肝炎的防控形势显得尤为严峻。该文... 详细信息

丙型肝炎病毒感染作为一种对人类健康构成重大威胁的传染病,其防控工作在全球范围内引起了广泛关注。特别是在中国西部地区,由于地理环境的复杂性、经济发展水平的相对滞后以及文化背景的多样性,丙型肝炎的防控形势显得尤为严峻。该文的主要目的是深入探讨中国西部地区丙型肝炎的危害消除模式,通过对当前丙型肝炎流行现状的详细分析、对其危害性的深入探讨以及防治策略的综合评估,结合中国西部地区的具体特点,提出切实可行的消除模式和具体措施。以期通过这些研究和建议,能够为西部地区乃至全国的丙型肝炎防控工作提供有价值的参考和借鉴,从而有效减轻丙型肝炎对人类健康的威胁。

关键词：丙型肝炎病毒预防消除治疗

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靶向第二代测序技术在病原体检测中的作用

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临床医学进展 2024年第1期14卷 727-735页

作者：罗宁何泰瑜康娟张大志重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆

病原学的早期准确识别对于感染性疾病的诊治至关重要。随着基因检测技术的发展,第二代测序技术正被逐步应用于临床病原体的检测。作为第二代测序技术的一个分类,靶向第二代测序技术能选择性地扩增或富集感兴趣的基因组区域,再进行大规... 详细信息

病原学的早期准确识别对于感染性疾病的诊治至关重要。随着基因检测技术的发展,第二代测序技术正被逐步应用于临床病原体的检测。作为第二代测序技术的一个分类,靶向第二代测序技术能选择性地扩增或富集感兴趣的基因组区域,再进行大规模测序,快速准确地检出目标病原体。本文对靶向第二代测序技术在感染性病原体检测中的应用现状进行综述,讨论靶向第二代测序技术作为感染性疾病诊断工具的应用前景。

关键词：靶向第二代测序感染性疾病病原体诊断

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代谢功能障碍相关脂肪性肝病与心血管疾病:病理生理学机制

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临床医学进展 2024年第3期14卷 1429-1436页

作者：范家亮任红重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆

代谢功能障碍相关脂肪性肝病(metabolic dysfunction-associated fatty liver disease, MAFLD)是最普遍的慢性肝病之一,但MAFLD患者死于心血管疾病(cardiovascular disease, CVD)的频率高于肝脏疾病本身。与MAFLD相关的病理生理研究表明存在与CVD相关的潜在机制,涉及全身炎症、氧化应激、胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)、糖脂代谢、肾素–血管紧张素系统(rein-angiotensin system, RAAS)和交感神经系统(sympathetic nervous system, SNS)、肠道微生物群以及遗传,促进CVD事件的发生。这篇综述分析了MAFLD和CVD之间的关系,概述了可能将MAFLD与CVD联系起来的潜在病理生理机制。

关键词：代谢功能障碍相关脂肪性肝病心血管疾病病理生理学

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经颈静脉肝内门体分流术的临床研究进展

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西南医科大学学报 2025年第2期48卷 144-150页

作者：陈永清张大志蔡大川詹柱李虎康娟重庆医科大学附属第二医院感染病科重庆400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010

经颈静脉肝内门体分流术(transjugular intrahepatic portosystemic shunt,TIPS)是治疗肝硬化门静脉高压并发症的一种重要手段,已有近40年的临床应用历史,其在急性食管胃底静脉曲张出血、顽固性腹水、门静脉血栓形成及肝肾综合征等的诊... 详细信息

经颈静脉肝内门体分流术(transjugular intrahepatic portosystemic shunt,TIPS)是治疗肝硬化门静脉高压并发症的一种重要手段,已有近40年的临床应用历史,其在急性食管胃底静脉曲张出血、顽固性腹水、门静脉血栓形成及肝肾综合征等的诊治中显示出独特优势。尽管已取得了不错的进展,但对于如何筛选最佳患者进行TIPS仍然没有统一标准。此外,TIPS术后并发症如肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)和肝衰竭等的预防和管理仍然不理想。因此本文拟从手术简介、适应证、并发症和预后等方面对TIPS作一评述,以期指导临床医师更好地掌握适应证、筛选获益人群和选取最佳治疗时机,促进TIPS在门静脉高压患者中的广泛应用。

关键词：经颈静脉肝内门体分流术门静脉高压肝硬化进展

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慢性乙型肝炎患者低病毒血症的研究现状及挑战

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诊断学理论与实践 2024年第1期23卷 23-29页

作者：王娇娇蔡大川重庆医科大学附属第二医院感染病科重庆401336 重庆医科大学病毒性肝炎研究所·感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010

虽然新生儿普遍接种慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)疫苗,HBV的感染率开始大幅下降,但2016年我国慢性HBV感染者仍有8600万例。2019年,全球有2.96亿例慢性HBV感染者,且每年约有82万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化或肝细胞癌... 详细信息

虽然新生儿普遍接种慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)疫苗,HBV的感染率开始大幅下降,但2016年我国慢性HBV感染者仍有8600万例。2019年,全球有2.96亿例慢性HBV感染者,且每年约有82万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化或肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)等相关疾病。多数慢性乙型肝炎患者经恩替卡韦、替诺福韦、丙酚替诺福韦等规范抗病毒治疗后,可以取得抑制病毒复制、延缓疾病进展的疗效。但随着人们对疾病更深层次的认识及检测技术的提升,临床发现部分患者经规范治疗48周后,血清HBV DNA低于2000 IU/mL,但持续或间歇地高于检测下限,即为低病毒血症状态。低病毒血症的发生机制目前尚不明确。相关研究已经表明,HBV低病毒血症影响患者的临床预后,主要表现为促进肝脏炎症、肝纤维化的进展及发生肝硬化失代偿、肝细胞癌、耐药的风险升高。对于HBV低病毒血症患者的治疗方案也尚未有明确建议。本文将对HBV低病毒血症的定义、可能的发生机制、临床意义及临床管理策略等方面进行介绍,为临床医师提供参考。

关键词：乙型肝炎病毒感染低病毒血症核苷(酸)类似物

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生物标志物对肝衰竭合并细菌感染诊断的研究进展

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肝脏 2024年第1期29卷 133-137页

作者：王莹蔡大川重庆医科大学附属第二医院感染病科 401336 重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室400010

细菌感染是肝衰竭最常见并发症之一。细菌感染可能会导致肝衰竭患者更容易发生多器官功能障碍甚至死亡。由于肝衰竭合并细菌感染患者临床表现不典型、病原微生物培养阳性率较低、周期长,其识别和诊断存在困难,故积极寻找其有效的生物标... 详细信息

细菌感染是肝衰竭最常见并发症之一。细菌感染可能会导致肝衰竭患者更容易发生多器官功能障碍甚至死亡。由于肝衰竭合并细菌感染患者临床表现不典型、病原微生物培养阳性率较低、周期长,其识别和诊断存在困难,故积极寻找其有效的生物标志物具有重要临床意义,这不仅有助于早期识别,还可早期启动抗感染治疗,从而改善患者预后。本文主要介绍生物标志物在诊断肝衰竭合并感染中的最新进展,旨在为该病的早期诊断提供参考依据。

关键词：肝功能衰竭感染生物标志物

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