检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医科大学学报 2010年第8期35卷 1155-1159页

作者：李苏华邓华瑜郑维萍重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室、干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:研究ERK抑制在雌激素对乳腺癌细胞MCF-7促细胞周期转化、抗凋亡过程中核受体辅激活因子PCAF及野生型p53蛋白的表达、转录水平变化,探讨ERK通过PCAF对雌激素受体信号通路的作用和机理。方法:以雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7为研究... 详细信息

目的:研究ERK抑制在雌激素对乳腺癌细胞MCF-7促细胞周期转化、抗凋亡过程中核受体辅激活因子PCAF及野生型p53蛋白的表达、转录水平变化,探讨ERK通过PCAF对雌激素受体信号通路的作用和机理。方法:以雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,实验分组为17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)处理组、17β-E2+ERK抑制剂PD98059处理组和细胞对照组。流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期;Western blot检测P-ERK1/2、PCAF和野生型P53蛋白水平;RT-PCR检测野生型PCAFmRNA、p53mRNA水平。结果:应用ERK磷酸化抑制剂PD98059后,能抑制17β-E2抗MCF-7细胞凋亡的作用,使细胞早期凋亡率增加,其差异具有统计学意义(P<0.05);能抑制17β-E2促进MCF-7细胞周期转化作用,使G1期细胞增加,S期和G2期细胞减少,其差异具有显著统计学意义(P<0.01);PCAF和P-ERK1/2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),PCAFmRNA转录水平差异无统计学意义(P>0.05);野生型P53蛋白表达和p53mRNA转录水平升高(P<0.01)。结论:ERK在17β-E2抗乳腺癌细胞MCF-7凋亡、促细胞周期转化中的作用与PCAF增强雌激素受体信号及野生型p53蛋白表达和基因转录水平改变有关。

关键词： 17β-雌二醇 PD98059 ERK PCAF 野生型p53 乳腺癌

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TACE在着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其抗体对胚泡粘附的影响

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重庆医科大学学报 2010年第8期35卷 1133-1137页

作者：刘帅姜蓉郗强杨戎张文文重庆医科大学公共卫生学院生殖生理教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:通过检测肿瘤坏死因子α转换酶(Tumor necrosis factor α converting enzyme,TACE)在小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其在体外着床模型中对胚泡粘附的影响,初步探讨TACE在小鼠生殖中的作用以及其与胚胎着床的关系。方法:体外培养... 详细信息

目的:通过检测肿瘤坏死因子α转换酶(Tumor necrosis factor α converting enzyme,TACE)在小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其在体外着床模型中对胚泡粘附的影响,初步探讨TACE在小鼠生殖中的作用以及其与胚胎着床的关系。方法:体外培养孕4d(d4)小鼠子宫内膜上皮细胞和胚泡,构建胚泡体外着床模型;通过细胞免疫组化鉴定小鼠子宫内膜上皮细胞;运用RT-PCR和细胞免疫组化分别检测小鼠子宫内膜上皮细胞中TACE mRNA和蛋白的表达;向体外着床模型中添加不同浓度的TACE抗体,观察对胚泡体外着床的影响,并用细胞免疫化学检测抗体干预后各培养体系中TACE蛋白质的表达情况。结果:原代培养小鼠子宫内膜上皮细胞生长旺盛,鉴定结果显示:上皮细胞对角蛋白抗体有棕黄色阳性表达,对波形蛋白抗体为阴性表达。PCR结果显示TACE mRNA在共培养体系中有高表达,免疫组化结果与RT-PCR结果相一致;小鼠胚泡体外共培养具有较高的粘附率,添加TACE抗体后胚泡帖附率均显著低于对照组帖附率(P<0.05),且随着抗体浓度的降低胚泡粘附率随之升高,免疫化学检测结果也显示随着抗体浓度的降低TACE的表达量随之升高。结论:TACE可能参与了胚泡着床过程,有利于小鼠胚胎粘附、扩展,为胚胎的着床做准备。

关键词： TACE 小鼠体外着床子宫内膜上皮细胞原代培养

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甘利欣作用前后体外酒精性脂肪肝细胞模型甘油三酯水平变化及其可能作用机制

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重庆医科大学学报 2010年第2期35卷 179-182页

作者：李龙辉李龙江汤为学左国庆廖于重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆400010 重庆医科大学干细胞和组织工程研究室病理生理学教研室 400016 重庆医药高等专科学校基础部重庆400051

目的:研究甘利欣(Diammonium glycyrrhizinate,DIG)作用前后,体外诱导的酒精性脂肪肝(Alcoholic fatty liver,AFL)细胞模型甘油三酯(Triglyceride,TG)水平变化及其可能的作用机制。方法:MTT法筛选最佳作用浓度,透射电镜观察细胞超微结... 详细信息

目的:研究甘利欣(Diammonium glycyrrhizinate,DIG)作用前后,体外诱导的酒精性脂肪肝(Alcoholic fatty liver,AFL)细胞模型甘油三酯(Triglyceride,TG)水平变化及其可能的作用机制。方法:MTT法筛选最佳作用浓度,透射电镜观察细胞超微结构改变,全自动生化仪检测细胞内甘油三酯水平,免疫细胞化学(Immunocyto-chemistry,ICC)方法观察PPARγ、SREBP-1、SCAP的表达。结果:(1)MTT法筛选出2.273μg/ml为甘利欣最佳作用浓度。(2)透射电镜观察Ld30细胞发现胞浆内存在大量脂滴(3)全自动生化仪测得Ld30细胞内甘油三酯浓度为(1.84±0.16)mmol/L,甘利欣处理组为(1.05±0.12)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。(4)与Ld30组相比较,甘利欣处理组PPARγ、SREBP-1、SCAP表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:甘利欣有减轻体外诱导的酒精性脂肪肝细胞脂肪变的作用,其作用机制可能是通过下调PPARγ、SREBP-1、SCAP表达,从而抑制了细胞内脂肪生成。

关键词：甘利欣甘油三酯酒精性脂肪肝

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人参皂苷Re对K562细胞向红系分化的作用

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第49期14卷 9216-9220页

作者：雷翠蓉姜蓉王红宁何轩左国伟陈地龙官涛王建伟重庆医科大学组织胚胎教研室干细胞与组织工程研究室重庆市400016 重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市400016 重庆医科大学生理教研室重庆市400016

背景:既往研究表明,人参皂苷既能促进正常血细胞生成,又能抑制白血病细胞的增殖,人参皂苷Re是人参皂苷的一类主要有效成分,有多种活性,但是对白血病细胞的作用及机制尚不清楚。目的:观察人参皂苷Re对人慢性粒细胞白血病细胞株(K562细胞... 详细信息

背景:既往研究表明,人参皂苷既能促进正常血细胞生成,又能抑制白血病细胞的增殖,人参皂苷Re是人参皂苷的一类主要有效成分,有多种活性,但是对白血病细胞的作用及机制尚不清楚。目的:观察人参皂苷Re对人慢性粒细胞白血病细胞株(K562细胞)分化的影响。方法:取对数生长期的K562细胞,调整细胞浓度为7×108L-1。空白对照组予以RPMI1640培养基常规培养;人参皂苷Re组予以含人参皂苷Re的RPMI1640培养基培养,终浓度分别为30,60,90,120,150μmol/L。Wright’s染色、联苯胺染色、血红蛋白测定检测K562细胞向红系细胞分化的特征,流式细胞术测定细胞表面标志物表达。结果与结论:人参皂苷Re90μmol/L可以诱导K562细胞向早期红系细胞分化,表现为:①K562细胞形态学上可见细胞体积缩小,核直径减小,胞浆丰富,核浆比例降低。②人参皂苷Re在体外对K562细胞有诱导血红蛋白生成的作用。③细胞膜表面CD13阳性率增加。

关键词：人参皂苷Re K562细胞诱导分化联苯胺染色白血病

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宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究

宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究

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中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：孙迪沈宜重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室

目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclin E)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blotting检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情... 详细信息

目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclin E)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blotting检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情况。结果:RT-PCR及Western blotting显示,UO-126作用后HeLa细胞cyclin E mRNA表达水平无明显变化,cyclin E蛋白表达水平明显下降,FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞均明显增高。结论:宫颈癌HeLa细胞中FBW7异常表达与MAPK信号通路激活密切相关。UO-126阻断MAPK信号通路可下调cyclin E表达,上调FBW7表达。

关键词：宫颈癌 cyclinE 抑癌蛋白机制研究

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宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究

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中国病理生理杂志 2010年第A10期26卷 2015-2015页

作者：孙迪沈宜重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

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顺铂联合exosomes抗小鼠肝癌效应的实验研究

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第1期25卷 49-52页

作者：汪少华沈宜李静向自武范维珂陈黎重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测... 详细信息

目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测顺铂作用后H22细胞中Fas及exosomes免疫后脾淋巴细胞FasL的mRNA表达水平,Western blot检测顺铂对H22细胞Fas的蛋白表达水平的影响。以小鼠肝癌H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,观察顺铂联合exosomes治疗对小鼠生存期的影响。结果:顺铂抑制H22细胞生长呈量效关系;exosomes免疫小鼠可诱导产生针对H22细胞的CTL反应,经2.5mg/L顺铂预处理24h的H22细胞对CTL杀伤的敏感性增强(P<0.05)。顺铂在mRNA和蛋白水平,显著增强H22Fas的表达;exosomes免疫小鼠后,脾淋巴细胞FasL表达增加。顺铂联合exosomes组小鼠生存期较单独治疗组及对照组明显延长(P<0.05)。结论:顺铂与exosomes联合治疗有协同抑制肿瘤的作用,产生协同作用的机制与增强CTL活性有关。

关键词：顺铂 exosomes 联合治疗肿瘤疫苗

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神经调节因子对MDA-MB-231细胞mtp53和HIF-1α的影响及意义

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中国病理生理杂志 2009年第5期25卷 877-882页

作者：赵婷婷邓华瑜赵敬重庆医科大学病理生理学教研室干细胞和组织工程研究室重庆400016

目的:探讨在ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231中,神经调节因子(NRGs)/ErbB2信号通路对突变型p53(mtp53)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及意义。方法:免疫细胞化学法和Western blotting检测MDA-MB-231细胞中神经调节因子(NRG)的表... 详细信息

目的:探讨在ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231中,神经调节因子(NRGs)/ErbB2信号通路对突变型p53(mtp53)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及意义。方法:免疫细胞化学法和Western blotting检测MDA-MB-231细胞中神经调节因子(NRG)的表达。应用ErbB2受体功能抑制剂AG825处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Western blotting检测mtp53、HIF-1α蛋白表达;RT-PCR检测HIF-1α mRNA的表达。结果:神经调节因子在乳腺癌细胞MDA-MB-231呈显著表达,Western blotting实验可见分子量44kD的NRG抗体阳性反应条带。应用ErbB2受体功能抑制剂AG825后,MDA-MB-231细胞生长受到抑制,作用呈时效、量效依赖关系(P<0.01);细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞凋亡增加(P<0.05);mtp53、HIF-1α蛋白表达减少(P<0.05);HIF-1α mRNA表达减少(P<0.05)。结论:ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA-MB-231存在神经调节因子分泌,可能通过神经调节因子自分泌或旁分泌配体作用方式使ErbB2受体信号转导处于激活状态,上调mtp53和HIF-1α的表达,促进肿瘤细胞的增殖、存活能力和抑制凋亡。

关键词： ErbB2通路神经调节蛋白类突变型p53 缺氧诱导因子-1α

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As_2O_3联合H_(22)源exosome的抗肿瘤作用研究

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激光杂志 2009年第4期30卷 82-84页

作者：沈宜向自武陈国庆谢莹珊郑维萍重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合小鼠肝癌(H22)源exosome对小鼠皮下种植性肝癌(H22)模型的抗瘤作用。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosome,Bradford法蛋白定量;建立BALB/c小鼠皮下荷瘤模型,实验分4组:空白成瘤对照组、As2O3组、As... 详细信息

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合小鼠肝癌(H22)源exosome对小鼠皮下种植性肝癌(H22)模型的抗瘤作用。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosome,Bradford法蛋白定量;建立BALB/c小鼠皮下荷瘤模型,实验分4组:空白成瘤对照组、As2O3组、As2O3联合exosome组和exosome组。观察As2O3、exosome、及其联合应用的体内抗瘤效应;监测在体肿瘤的生长情况;计算抑瘤率、生存率:免疫组织化学法检测肿瘤组织中浸润的CD4+、CD8+T淋巴细胞。结果:与空白成瘤对照组比较,As2O3组、及其与exosome联合组的肿瘤生长明显放缓(P<0.05)。其抑瘤率分别为44.58%、66.27%。As2O3组及As2O3联合exosome组肿瘤组织中浸润的CD4+、CD8+T淋巴细胞明显增加(P<0.05)。结论:As2O3与exosome联合应用对小鼠皮下种植性实体性肝癌(H22)有协同治疗效应。

关键词：肿瘤免疫 As2O3 小鼠肝癌细胞H22 exosome

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H_(22)源exosomes瘤苗在小鼠体内的抗肿瘤及免疫调节作用

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重庆医科大学学报 2009年第4期34卷 417-420页

作者：汪少华沈宜李静向自武范维珂孙迪重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响。方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组。15d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,... 详细信息

目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响。方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组。15d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,计算抑瘤率;分别称取脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞毒活性;酶连免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞产生IL-2、INF-γ的能力。结果:接种exosomes瘤苗能显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达42.26%;与对照组比较,实验组荷瘤鼠胸腺指数、脾指数显著提高(P<0.05);exosomes促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,同时脾淋巴细胞培养上清中IL-2、INF-γ的水平升高。结论:exosomes瘤苗可能通过增强小鼠的免疫功能抑制小鼠肝癌移植瘤生长。

关键词： exosomes 肝细胞癌抗肿瘤免疫肿瘤疫苗

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