检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2012年第3期25卷 294-299页

作者：毕娟娟何林余音郭倩叶秀峰重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的研究自噬在熊果酸(Ursolic acid,UA)抑制人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖中的作用,探讨UA抑制血管生长的机制。方法体外培养HUVECs,分别采用不同浓度的UA和自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-me... 详细信息

目的研究自噬在熊果酸(Ursolic acid,UA)抑制人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖中的作用,探讨UA抑制血管生长的机制。方法体外培养HUVECs,分别采用不同浓度的UA和自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)+UA联合处理,采用MTT法检测UA对HUVECs增殖的抑制作用及其联合3-MA对HUVECs存活率的影响;透射电镜观察细胞的超微结构;微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1-LC3)免疫荧光和流式细胞术检测UA对HUVECs自噬表达水平的影响;RT-PCR检测自噬相关基因Beclin1和MAP1-LC3B转录水平的变化。结果 UA可抑制HUVECs增殖,且呈剂量依赖性;HUVECs经UA处理后,自噬泡数量明显增加;经UA处理后,可上调HUVECs中MAP1-LC3蛋白的表达水平,MAP1-LC3阳性细胞的荧光强度较对照组明显增强;UA处理HUVECs不同时间可上调MAP1-LC3B及Beclin1 mRNA的转录水平;而UA联合3-MA处理后,HUVECs的增殖抑制作用明显增强。结论UA抑制HUVECs增殖,并诱导其发生自噬,自噬在此过程中起保护性作用,抑制自噬可明显增强UA诱导的HUVECs死亡。

关键词：熊果酸内皮细胞自噬细胞增殖

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过表达脑红蛋白通过激活PI3K/Akt信号通路防治AD的体外研究

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中国病理生理杂志 2014年第12期30卷 2166-2171页

作者：杨军戴颂阳向月张雄重庆医科大学神经科学研究中心、重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的:探索过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞的神经保护作用及机制。方法:成功构建过表达NGB的质粒p EGFP-NGB并转染入已预先转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞,MTT法检测过表达NGB对该细胞存活率的影响;JC-1法... 详细信息

目的:探索过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞的神经保护作用及机制。方法:成功构建过表达NGB的质粒p EGFP-NGB并转染入已预先转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞,MTT法检测过表达NGB对该细胞存活率的影响;JC-1法检测其对细胞线粒体膜电位的影响;流式细胞术检测过表达NGB对细胞凋亡的影响;Western blotting法检测其对细胞中p-Akt、Akt和caspase-3/9表达的影响;ELISA法检测其对细胞内Aβ42生成的影响。结果:MTT结果显示,与对照组和空质粒组比较,转染NGB后,p APPswe-SH-SY5Y细胞的存活率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。JC-1染色结果显示过表达NGB能够明显抑制转染p APPswe对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的降低作用(P<0.05)。流式细胞术结果显示过表达NGB能够抑制早、晚期细胞的凋亡。而Western blotting显示过表达NGB不仅能抑制细胞内caspase-3和caspase-9蛋白水平的表达,而且还能够促进细胞内p-Akt蛋白的表达,而这种促进作用能够被PI3K/Akt的抑制剂LY294002所抑制。ELISA结果显示过表达NGB能够明显抑制细胞内Aβ42的生成。结论:过表达NGB能够显著抑制p APPswe诱导的细胞损伤,而且还抑制与细胞凋亡密切相关的caspase-3和caspase-9等蛋白表达。NGB的神经保护作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。

关键词：脑红蛋白 SH-SY5Y细胞细胞凋亡 Caspase-3/9 PI3K/Akt信号通路

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抑郁易感性因素的神经机制

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科学通报 2016年第6期61卷 654-667页

作者：王康程王韬蒙杰谢鹏邱江西南大学心理学部重庆400715 西南大学认知与人格教育部重点实验室重庆400715 重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 神经生物学重庆市重点实验室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

抑郁症是一种常见的精神类疾病,导致其发病的影响因素众多,但其神经机制尚不清楚.本文首先回顾了与抑郁易感性有关的认知理论,包括Beck提出的认知模型理论以及Abramson提出的抑郁无望理论模型.其次,从遗传因素、外部环境因素以及个体心... 详细信息

抑郁症是一种常见的精神类疾病,导致其发病的影响因素众多,但其神经机制尚不清楚.本文首先回顾了与抑郁易感性有关的认知理论,包括Beck提出的认知模型理论以及Abramson提出的抑郁无望理论模型.其次,从遗传因素、外部环境因素以及个体心理因素3个方面阐述了易感性因素对抑郁影响及其作用的神经机制.最后,基于认知神经科学的现状和局限性并结合抑郁研究现状,提出了抑郁研究可能面临的挑战和对未来研究展望.具体而言,未来研究应从统计建模的角度出发,整合基因-脑影像-行为大数据,先从横向研究角度比较探讨和分析抑郁形成的各种影响因素,建立有效的因素模型;再从纵向跟踪的角度探明各种易感因素在抑郁发生中的作用机制,建立抑郁的预测模型;最终实现基于基因-脑影像-行为大数据的融合,从而对抑郁的发生和发展进行有效的预测和早期干预,降低抑郁症的发病率.

关键词：抑郁易感性因素神经机制预测模型

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Wnt/β-catenin和NF-κB信号通路对肿瘤血管生成中VEGFs/VEGFRs的调控作用

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生理科学进展 2013年第1期44卷 72-74页

作者：高敏娜李昱重庆医科大学病理教研室重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors,VEGFs)及其受体(vascular endothelialgrowth factor receptors,VEGFRs)在肿瘤的发生、发展、转移等过程中发挥了重要的作用,尤其是在肿瘤血管生成方面。而对其抑制剂的研究已经成为肿瘤防治的热点和发展方向,Wnt/β-catenin和NF-κB信号通路对肿瘤血管生成中也起着重要作用。本文就这两条信号通路对肿瘤血管生成中VEGF/VEGFRs的调控作用作一综述。

关键词： Wnt β-catenin NF—κB VEGFs VEGFRs 血管生成

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新疆伊犁地区牧羊犬脑内亨德拉病毒感染情况

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中国生物制品学杂志 2011年第2期24卷 133-136,145页

作者：王嘉佳冯裕星谢亮张亮何丰孙后超牟君展群岭胡永波朱丹李雷雷谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的分析新疆伊犁地区草原放养牧羊犬脑内亨德拉病毒(Hendravirus,HeV)的感染情况。方法采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV核蛋白(N)基因片段,并验证该方法的敏感性和特异性。采用该方法对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种HeV疫苗的... 详细信息

目的分析新疆伊犁地区草原放养牧羊犬脑内亨德拉病毒(Hendravirus,HeV)的感染情况。方法采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV核蛋白(N)基因片段,并验证该方法的敏感性和特异性。采用该方法对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种HeV疫苗的101例牧羊犬脑组织进行HeV N基因片段检测。结果建立的一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV N基因的最低检出浓度为2.6×102 copies/μl;与其他单股负链RNA病毒,如同属且高度同源的尼帕病毒(Nipah virus,NiV)和博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)等无交叉反应;101份牧羊犬脑组织样本HeV N基因的检测结果均为阴性。结论尚未发现我国新疆伊犁地区天然牧场放养牧羊犬中存在HeV感染的证据,该地区短时间内爆发HeV感染的危险性不大。

关键词：亨德拉病毒一步法荧光定量RT-PCR N基因新疆伊犁地区牧羊犬

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博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达及纯化

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中国生物制品学杂志 2011年第10期24卷 1148-1151页

作者：金戈张亮徐晓艳黄荣忠马丽华邓婧李文娟房亮谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的构建博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白(p24蛋白)基因重组表达质粒,原核表达p24蛋白,并进行纯化。方法通过RT-PCR法从BDV感染的少突胶质细胞株(Oligodendrocyte,OL)中扩增p24基因片段,构建重组表达质粒pET-41a-p24,转化... 详细信息

目的构建博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白(p24蛋白)基因重组表达质粒,原核表达p24蛋白,并进行纯化。方法通过RT-PCR法从BDV感染的少突胶质细胞株(Oligodendrocyte,OL)中扩增p24基因片段,构建重组表达质粒pET-41a-p24,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达的重组蛋白进行亲和层析纯化。结果经双酶切鉴定和测序证实,重组表达质粒pET-41a-p24构建正确;表达的重组p24蛋白相对分子质量约24 000,表达量占菌体总蛋白的30%以上,主要以可溶形式表达;纯化的重组蛋白纯度达85%左右,可与鼠抗BDV p24单克隆抗体特异性结合。结论已成功原核表达并纯化了重组BDV p24蛋白,为进一步建立BDV相关免疫学检测方法奠定了基础。

关键词：博尔纳病病毒磷蛋白类原核细胞基因表达纯化

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合并脑干钙化Fahr病一家系报告

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第三军医大学学报 2013年第7期35卷 617-617,621页

作者：董美学李琦谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

Fahr病又称特发性基底节钙化（idiopathicbasalgangliacalcification，IBGC），是神经系统退行性疾病的一种。本病多呈家族性聚集发病，散发少见，以脑组织，特别是基底节及齿状核对称性钙盐沉积为特征。其钙化分布广泛，好发部位依次... 详细信息

Fahr病又称特发性基底节钙化（idiopathicbasalgangliacalcification，IBGC），是神经系统退行性疾病的一种。本病多呈家族性聚集发病，散发少见，以脑组织，特别是基底节及齿状核对称性钙盐沉积为特征。其钙化分布广泛，好发部位依次为苍白球、尾状核、壳核、丘脑、额顶叶脑回，钙化也偶见于小脑齿状核及小脑皮质”，合并脑干钙化者在以往病例报告中罕见。现报告Fahr病一家系如下。

关键词： Fahr病脑干家系基底节钙化

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博尔纳病病毒对人少突胶质细胞增殖与凋亡的影响

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第三军医大学学报 2012年第5期34卷 401-405页

作者：邓婧李丹张亮黄荣忠李文娟马丽华房亮谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染对人少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)增殖与凋亡的影响。方法用BDV感染OL细胞,免疫荧光检测OL细胞中博尔纳病病毒P40蛋白的表达,CCK8测定法观察细胞的生长增殖情况,用流式细胞技... 详细信息

目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染对人少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)增殖与凋亡的影响。方法用BDV感染OL细胞,免疫荧光检测OL细胞中博尔纳病病毒P40蛋白的表达,CCK8测定法观察细胞的生长增殖情况,用流式细胞技术检测细胞的凋亡情况和周期变化,Western blot检测凋亡指标Bax、Bcl-2的相对表达量。结果与阴性对照组细胞比较,感染组在博尔纳病病毒感染少突胶质细胞第3天时,免疫荧光能够检测到P40蛋白的表达。随着感染时间的增加,BDV感染的OL细胞增殖能力下降(P<0.05),且通过流式细胞仪检测到病毒感染3 d后,细胞出现凋亡增多。流式细胞仪检测结果显示,与对照组比较,感染细胞周期G2期延迟(P<0.05),细胞增殖指数降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与对照组比较,感染细胞促凋亡蛋白Bax表达量增加(P<0.05),抑凋亡蛋白Bcl-2表达量下降(P<0.05)。结论 BDV感染可以抑制OL细胞增殖,并能通过上调Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白表达量,诱导细胞凋亡的发生。

关键词：博尔纳病病毒少突胶质细胞细胞增殖细胞凋亡

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博尔纳病病毒荧光定量PCR试剂盒扩增缓冲液的优化

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第三军医大学学报 2011年第13期33卷 1323-1327页

作者：金戈徐晓艳张亮马丽华黄荣忠邓婧李文娟房亮谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的选择并优化博尔纳病病毒荧光定量PCR TaqMan探针法反应体系中的扩增缓冲液,使PCR反应体系对该病毒p24模板基因的扩增效率得到明显提高。方法通过常规PCR比较选择3种常用酸(盐酸、磷酸和硫酸)所滴定的缓冲液体系,在其基础上选择适合... 详细信息

目的选择并优化博尔纳病病毒荧光定量PCR TaqMan探针法反应体系中的扩增缓冲液,使PCR反应体系对该病毒p24模板基因的扩增效率得到明显提高。方法通过常规PCR比较选择3种常用酸(盐酸、磷酸和硫酸)所滴定的缓冲液体系,在其基础上选择适合浓度的硫酸铵配制TSS buffer,在TSS buffer中分别加入四甲基氯化铵、TritonX-100、二甲亚砜和甜菜碱这4种常用的PCR添加剂,并确定各自的最佳工作浓度,选择扩增效果较好的添加剂与其他添加剂进行依次组合,寻找最佳的添加剂组合,最后用荧光定量PCR进行对比验证。结果在滴定酸上选择了效果最好的硫酸,配制TSS buffer硫酸铵的最佳终浓度为6 mmol/L。在添加剂的优化组合上,1.5 mol/L甜菜碱、0.15%Triton X-100、8 mmol/L四甲基氯化铵和TSS buffer组合成的TBTT buffer效果最佳,在其与TaKaRa PCR buffer的对比中,TBTT buffer效果明显好于后者。结论成功研制优化出适合扩增博尔纳病病毒p24模板基因的扩增缓冲液。

关键词： PCR扩增缓冲液 PCR试剂盒博尔纳病病毒

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结核分枝杆菌PPE68蛋白的表达、鉴定及抗血清的制备

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免疫学杂志 2011年第9期27卷 803-806页

作者：佘茜徐蕾何永林靳志栋张丹杨春重庆医科大学病原生物学教研室神经科学研究中心重庆神经生物学重点实验室 400016

目的在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,鉴定并纯化重组rPPE68蛋白后免疫新西兰大白兔,制备兔抗PPE68多克隆抗体。方法将已经过鉴定的重组原核表达质粒pET32a(+)-PPE68转化至大肠杆菌BL21中,IPTG诱导大量表达PPE68蛋白。对表达蛋... 详细信息

目的在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,鉴定并纯化重组rPPE68蛋白后免疫新西兰大白兔,制备兔抗PPE68多克隆抗体。方法将已经过鉴定的重组原核表达质粒pET32a(+)-PPE68转化至大肠杆菌BL21中,IPTG诱导大量表达PPE68蛋白。对表达蛋白进行鉴定后利用亲和层析法进行纯化。以纯化后重组rPPE68为免疫抗原,与弗氏不完全佐剂等体积混合,采用皮下多点注射法免疫新西兰大白兔,于第3次免疫后的第7天采血。用凝集实验与Western-blot检测抗血清的特异性,并用双向免疫扩散法测定抗血清效价。结果在大肠杆菌中表达的目的产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量57 000处可见特异性条带,免疫印迹分析证实表达的目的蛋白可与结核分枝杆菌H37Rv株感染小鼠的血清发生反应。纯化的rPPE68蛋白免疫新西兰大白兔后,凝集反应与Western-blot证实了抗血清的特异性,双向免疫扩散法测得血清效价为1∶16。结论已成功表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,制备了特异性兔抗PPE68多克隆抗体,对结核病的早期诊断提供了一种新的思路。

关键词：结核分枝杆菌 PPE68 原核表达抗血清

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