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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞增殖的动态观察

中国病原生物学杂志 2009年第12期4卷 904-906页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 遵义医学院寄生虫学教研室贵州遵义563003

目的动态观察细粒棘球绦虫（Eg）重组双歧杆菌（Bb）-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾淋巴细胞增殖的变化。方法将5×108克隆形成单位（CFU）和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种方法免疫BALB/c鼠,免疫后0、2、4、6、8、10... 详细信息

目的动态观察细粒棘球绦虫（Eg）重组双歧杆菌（Bb）-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾淋巴细胞增殖的变化。方法将5×108克隆形成单位（CFU）和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种方法免疫BALB/c鼠,免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原（EgAg）或刀豆素A（ConA）刺激培养,四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖反应,同时设有MRS对照。结果口服灌胃组脾淋巴细胞增殖水平在免疫后410周升高,在免疫后6周达最高水平;鼻腔内接种组脾淋巴细胞增殖水平在免疫后48周升高,在免疫后6周达最高水平。结论细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞增殖。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗脾淋巴细胞增殖 MTT法

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细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95-EgA31的构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达

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中国病原生物学杂志 2009年第5期4卷 350-354页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 遵义医学院寄生虫学教研室贵州遵义563003

目的构建细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95-EgA31,研究该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法超声粉碎细粒棘球蚴组织,提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Eg95和EgA31,得到Eg... 详细信息

目的构建细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95-EgA31,研究该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法超声粉碎细粒棘球蚴组织,提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Eg95和EgA31,得到Eg95-EgA31融合基因,克隆至原核表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Eg95-EgA31,转化大肠埃希菌BL21,经异丙基硫代--βD-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Westernblot对表达产物进行分析和鉴定。结果基因拼接法扩增出约1 016 bp的Eg95-EgA31融合基因;双酶切证实Eg95-EgA31融合基因成功插入pGEX-1λT中,SDS-PAGE分析显示表达产物为分子质量单位约为62.5 ku的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的18%;Western blot鉴定重组蛋白能被细粒棘球蚴感染鼠血清识别。结论成功构建了细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95-EgA31,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。

关键词：细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95-EgA31 大肠埃希菌表达

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猪带绦虫六钩蚴TSO18基因研究进展

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国际医学寄生虫病杂志 2009年第6期36卷 417-420页

作者：周必英陈雅棠李文桂重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所 400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室 563003

猪囊尾蚴病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病，疫苗是预防控制猪囊尾蚴病的重要手段。TSO18基因是猪带绦虫六钩蚴阶段重要的免疫原基因，被认为是最具有前途的疫苗候选基因。该文综述了猪带绦虫六钩蚴TSO18基因的分子生物学及... 详细信息

猪囊尾蚴病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病，疫苗是预防控制猪囊尾蚴病的重要手段。TSO18基因是猪带绦虫六钩蚴阶段重要的免疫原基因，被认为是最具有前途的疫苗候选基因。该文综述了猪带绦虫六钩蚴TSO18基因的分子生物学及其疫苗开发的研究进展。

关键词：猪带绦虫六钩蚴 TSO18基因疫苗

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猪带绦虫六钩蚴TSO45W基因工程疫苗研究进展

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中国病原生物学杂志 2009年第2期4卷 141-144页

作者：周必英陈雅棠李文桂重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室贵州遵义563003

囊虫病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病。研制有保护性作用的疫苗将是控制和消灭该病的有效方法,猪带绦虫保护性抗原的研究是猪囊虫病免疫的基础。45W蛋白是猪带绦虫六钩蚴时期的重要抗原,但天然45W抗原来源有限,限制了其应用,而基因... 详细信息

囊虫病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病。研制有保护性作用的疫苗将是控制和消灭该病的有效方法,猪带绦虫保护性抗原的研究是猪囊虫病免疫的基础。45W蛋白是猪带绦虫六钩蚴时期的重要抗原,但天然45W抗原来源有限,限制了其应用,而基因工程重组抗原的应用可解决质量控制和抗原来源的问题。本文就近年来国内外对猪带绦虫六钩蚴TSO45W基因工程疫苗的研究进展作一综述。

关键词：猪带绦虫囊虫病六钩蚴重组45W抗原疫苗综述

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粪肠球菌类毒力基因sprE功能的动物实验研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第2期27卷 155-159页

作者：吴利先黄文祥孙小平重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病学重点实验室 400016 大理学院微生物学及免疫学教研室

目的构建粪肠球菌丝氨酸蛋白酶基因（sprE）突变株，通过动物实验来研究sprE基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价粪肠球菌sprE基因的突变株（sprEmutant）的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数... 详细信息

目的构建粪肠球菌丝氨酸蛋白酶基因（sprE）突变株，通过动物实验来研究sprE基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价粪肠球菌sprE基因的突变株（sprEmutant）的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数致死量（LD50）提高了7倍，小鼠的存活率明显高于野生株感染组，引起的兔心内膜炎的病理改变也较野生株轻微。结论 sprE基因在粪肠球菌致病中起着重要的作用，可能是粪肠球菌的毒力因子之一。

关键词：粪肠球菌丝氨酸蛋白酶基因毒力腹膜炎模型心内膜炎模型

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巴洛沙星对泌尿道病原菌的体外抗菌活性

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中国新药与临床杂志 2007年第12期26卷 921-923页

作者：刘成伟余登高李崇智郑行萍钱元恕重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆市传染病寄生虫病学重点实验室重庆400016 汕头大学医学院药理教研室广东汕头515031

目的:评价巴洛沙星对泌尿道病原菌的体外抗菌活性。方法:收集泌尿道感染病人尿液中所分离到的249株病原菌,其中革兰阳性菌90株(金黄色葡萄球菌30株、表皮葡萄球菌27株、粪肠球菌18株、B溶血性链球菌15株)、革兰阴性菌159株(大肠埃希菌8... 详细信息

目的:评价巴洛沙星对泌尿道病原菌的体外抗菌活性。方法:收集泌尿道感染病人尿液中所分离到的249株病原菌,其中革兰阳性菌90株(金黄色葡萄球菌30株、表皮葡萄球菌27株、粪肠球菌18株、B溶血性链球菌15株)、革兰阴性菌159株(大肠埃希菌84株、肺炎克雷伯菌20株、肠杆菌属25株、奇异变形杆菌15株、铜绿假单胞菌15株),采用琼脂二倍稀释法,测定巴洛沙星与左氧氟沙星对该249株泌尿道病原菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果:巴洛沙星对革兰阳性菌的MIC_(90)(2～8 mg·L^(-1))是左氧氟沙星MIC_(90)(2～16 mg·L^(-1))的1/4～1/2或相等,对革兰阴性菌的MIC_(90)(4～32 mg·L^(-1))是左氧氟沙星MIC_(90)(2～16 mg·L^(-1))的2～4倍或相等。结论:巴洛沙星对革兰阳性菌和革兰阴性菌均具有抗菌活性,其中对革兰阳性菌的作用稍强于或等于左氧氟沙星,对革兰阴性菌的作用等于或稍弱于左氧氟沙星。

关键词：巴洛沙星左氧氟沙星抗生素类泌尿道感染体外抗菌活性

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改革传染病学教学方法的探索

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中华医学教育杂志 2004年第2期25卷 28-29页

作者：袁喆黄文祥重庆医科大学附属第一医院传染病学教研室重庆400016

传染病学是一门重要的临床学科,具有较独特的学科特点。本文根据传染病学的学科特点,从授课技巧、教学方法、教学内容和临床能力培养四个方面探讨了提高传染病学临床教学质量的主要途径。

关键词：传染病学学科特点教学方法

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日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠保护力的观察

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中国地方病学杂志 2004年第4期23卷 300-303页

作者：李文桂石佑恩重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所 400016 华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室

目的探讨日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护作用。方法采用106和108CFU疫苗皮下接种免疫BALB/C鼠,免疫后8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,观察肝脏病理变化,测量虫卵... 详细信息

目的探讨日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护作用。方法采用106和108CFU疫苗皮下接种免疫BALB/C鼠,免疫后8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,观察肝脏病理变化,测量虫卵肉芽肿周长和面积,测定血清中CAg、IgG及其亚类水平,同时设有PBS和BCG对照。结果疫苗接种组的减虫率为16.64%～46.20%,减卵率为55.75%～60.50%,肝组织病变明显减轻,虫卵肉芽肿的平均周长和平均面积显著减少,血清IgG和IgG2a水平明显升高,108CFU组CAg升高。结论日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗是一种新型比较理想的疫苗,值得进一步深入研究。

关键词：日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫接种小鼠保护力

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乙型肝炎病毒S基因变异与临床

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实用肝脏病杂志 2004年第1期7卷 54-56页

作者：左维泽田群张跃新 832008 新疆石河子大学医学院第一附属医院传染科 830054 新疆医科大学第一临床学院传染病学教研室

变异是生物界普遍存在的现象 ,是物种适应生存压力的结果。乙型肝炎病毒 (hepatitisBvirus ,HBV)与其它DNA病毒相比具有很高的变异率。随着研究的深入 ,表明乙型肝炎病毒S基因变异与乙肝疫苗预防接种失败、HBIG预防移植后肝脏再感染、HB... 详细信息

变异是生物界普遍存在的现象 ,是物种适应生存压力的结果。乙型肝炎病毒 (hepatitisBvirus ,HBV)与其它DNA病毒相比具有很高的变异率。随着研究的深入 ,表明乙型肝炎病毒S基因变异与乙肝疫苗预防接种失败、HBIG预防移植后肝脏再感染、HBsAg( -)的HBV感染及疾病严重性等均有密切关系。本文就HBVS基因变异及其在临床中的意义作一综述。一、HBVS基因结构与功能特点。HBV基因组为闭合环状双股DNA ,长度为 3 2 0 0个碱基对 ,由正负 2条链组成 ,负链上有 4个开放读码框 (OpenReadingFrameORF)即S区、C区、P区、X区 ,各区间存在重叠现象。S

关键词：乙型肝炎病毒 S基因基因变异 P基因检测基因型

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重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠体液免疫应答的动态观察

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免疫学杂志 2002年第1期18卷 24-26,36页

作者：李文桂石佑恩重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 同济医科大学寄生虫学教研室湖北武汉430030

目的　检测日本血吸虫重组BCG Sj2 6GST疫苗免疫小鼠不同时间后的血清IgG及其亚类和循环抗原 (circulat ingantigen ,CAg)反应。方法　 1× 10 6克隆形成单位 (colony formingunit,CFU)疫苗皮下和静脉注射免疫BALB/c鼠 ,分别于免疫... 详细信息

目的　检测日本血吸虫重组BCG Sj2 6GST疫苗免疫小鼠不同时间后的血清IgG及其亚类和循环抗原 (circulat ingantigen ,CAg)反应。方法　 1× 10 6克隆形成单位 (colony formingunit,CFU)疫苗皮下和静脉注射免疫BALB/c鼠 ,分别于免疫后 0、4、8、10、14和 16周各剖杀 4只 ,收集血清 ,常规ELISA法检测IgG及其亚类和CAg ,同时设PBS皮下注射对照组。结果皮下注射组IgG在免疫后 10周 ,IgG1在免疫后 14～ 16周 ,IgG2a在免疫后 4周和IgG2b在免疫后 16周达最高水平 ,未能测到CAg ;静脉注射组IgG在免疫后 10周 ,IgG1和IgG2a在免疫后 8周以及IgG2b在免疫后 16周达最高水平 ,CAg在免疫后 14周升高。结论　日本血吸虫重组BCG Sj2 6GST疫苗能诱导宿主产生高水平的IgG、IgG2a和IgG2b 。

关键词：日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗 IgG IgG亚类 CAg 免疫应答小鼠

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