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SIRT1/NF-κB信号轴在人参皂苷Rg_1延缓D-半乳糖致衰老模型大鼠造血干/祖细胞衰老过程中的作用

中草药 2016年第22期47卷 4016-4020页

作者：李渊周玥王亚平王建伟何颖红丁继超赵文珍杨勇琴王慧杰大理大学组织学与胚胎学教研室云南省细胞生物学重点实验室云南大理671000 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的探讨SIRT1／NF-κB信号轴在人参皂苷Rgl对抗衰老模型大鼠造血干／祖细胞衰老中的作用。方法6～8周雄性SD大鼠50只，随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rgl对照组、人参皂苷Rgl治疗组和人参皂苷Rg，预防组，每组10只。以连续42 d sc D... 详细信息

目的探讨SIRT1／NF-κB信号轴在人参皂苷Rgl对抗衰老模型大鼠造血干／祖细胞衰老中的作用。方法6～8周雄性SD大鼠50只，随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rgl对照组、人参皂苷Rgl治疗组和人参皂苷Rg，预防组，每组10只。以连续42 d sc D-半乳糖（D-gal）制备衰老动物模型，人参皂苷Rg1各组ip给药不同时间，药物注射完成第2天，免疫磁性分选法分离纯化各组Sca-1^＋造血干／祖细胞（HSC／HPC），衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色、流式细胞周期分析和造血祖细胞混合集落（CFU-Mix）培养观察人参皂苷Rg1对Sca-1^＋ HSC／HPC抗衰老的生物学作用。荧光定量PCR及Western blotting检测衰老调控分子SIRTl、NF-κB mRNA及蛋白的表达。结果与模型组比较，人参皂苷Rgl治疗组和预防组SA-β-Gal染色阳性率、G0／G1期细胞比例下降，生成CFU-Mix数增高，SIRTlmRNA及蛋白表达上调，NF-κB mRNA及蛋白表达下调；人参皂苷Rgl预防组各指标变化均较人参皂苷Rgl治疗组明显。结论SIRTl／NF-κB信号轴在人参皂苷Rgl对抗D-gal致衰老模型大鼠HSC／HPC衰老过程中发挥重要作用，人参皂苷Rgl具有抗HSC／HPC衰老作用。

关键词：人参皂苷Rgl 去乙酰化酶沉默调节因子1 核转录因子-κB 造血干/祖细胞衰老

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人参皂苷Rg1通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬延缓小鼠脑衰老的研究

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中国药理学通报 2022年第7期38卷 987-993页

作者：张进王顺和汪兰胡玲汪子铃曾娣侯吉颖黄彩虹杜坤航王璐王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学病理学教研室重庆400016 重庆医科大学组织胚胎学教研室重庆400016

目的探讨人参皂苷Rg1通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬延缓小鼠脑衰老的机制。方法C57BL/6J♂小鼠随机分为4组:脑衰老模型组、对照组、Rg1抗衰老组、自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)抗衰老组。建模完成后于次日进行各实验指标的检测。... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rg1通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬延缓小鼠脑衰老的机制。方法C57BL/6J♂小鼠随机分为4组:脑衰老模型组、对照组、Rg1抗衰老组、自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)抗衰老组。建模完成后于次日进行各实验指标的检测。水迷宫实验检测小鼠学习与记忆能力;制备脑海马区石蜡切片,进行HE、Nissl染色与免疫组化染色,分别观察海马区神经元形态并计数神经元和Nissl小体数量与检测海马区神经元自噬相关蛋白p62、ATG5、ULK1;制备脑组织匀浆,检测脑组织乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,CEAh)的活性;Western blot检测脑组织自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62、Beclin1、p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR与凋亡蛋白p53。结果水迷宫实验表明Rg1与Rap使脑衰老小鼠的学习与记忆能力明显提升;HE、Nissl染色表明Rg1与Rap使脑衰老小鼠海马区神经元变性、坏死细胞减少,Nissl小体数量增多;免疫组化显示Rg1与Rap使海马区神经元自噬蛋白p62表达下降、ATG5与ULK1表达上升;Rg1与Rap使脑衰老小鼠AhCE活性下降;Western blot表明Rg1与Rap使脑衰老小鼠的自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1、p-AMPK/AMPK表达增加、p-mTOR/mTOR、p62、p53表达减少。结论人参皂苷Rg1能有效拮抗D-gal对小鼠脑的致衰老作用,其机制与Rg1通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬途径有关。

关键词：人参皂苷Rg1 D-半乳糖脑神经元衰老 AMPK/mTOR信号通路自噬

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人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖的影响

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第三军医大学学报 2014年第21期36卷 2167-2172页

作者：李丹阳夏菁冯子强石庆强游智梅刘泽洪陈地龙李静重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、... 详细信息

目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组。培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达。用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性。结果人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100μmol/L为最适作用浓度,7 d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7 d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-EPOR表达明显下调,Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调,而Bax、Cleaved Caspase-3表达增高,P53及P16无变化;然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加,Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3的表达没有变化。结论 TSPG能下调细胞内由EPOR介导的Jak-STAT通路相关蛋白的表达,并降低EPOR的活性,进而下调Bcl-2、上调Bax和Cleaved Caspase-3来促进细胞凋亡;而添加了EPO后这种作用被拮抗,抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。

关键词：人参总皂苷 KG1-α细胞促红细胞生成素细胞凋亡细胞衰老

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人参皂苷Rg1对D-半乳糖所致小鼠心肌损伤的保护作用

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第三军医大学学报 2021年第11期43卷 1074-1079页

作者：李赓汪子铃候吉颖黄彩虹肖含先之曾娣姜蓉王璐王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的探讨人参皂苷Rg1对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)所致小鼠心肌损伤的保护作用和射D-gal(200 mg·kg^(-1)·d^(-1)×42 d);Rg1干预模型组:按D-gal损伤模型组小鼠处理,从建模第16天起腹腔注射Rg1(40 mg·kg^(-1)·... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rg1对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)所致小鼠心肌损伤的保护作用和射D-gal(200 mg·kg^(-1)·d^(-1)×42 d);Rg1干预模型组:按D-gal损伤模型组小鼠处理,从建模第16天起腹腔注射Rg1(40 mg·kg^(-1)·d^(-1)×26 d);对照组:腹腔注射等量生理盐水42 d;Rg1对照组:按对照组处理小鼠16 d,再腹腔注射Rg1(剂量同Rg1干预模型组)。各组处理完成后第2天,取心脏测定脏器指数;石蜡切片,HE染色观察心肌组织病理学,透射电镜观察心肌纤维超微结构;酶标比色法检测心肌组织匀浆中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)表达量;Western blot检测心肌组织中Nrf2、Keap1、HO-1蛋白表达。结果D-gal损伤模型组小鼠心脏指数明显升高(P<0.01);心肌纤维间胶原纤维沉积量增加;肌原纤维束排列紊乱,心肌纤维直径显著增大,线粒体形态异常伴有肿胀;心肌组织的AST、LDH活力显著升高,T-SOD、CAT活性显著降低,MDA表达量显著升高(P<0.05);Nrf2、HO-1蛋白表达量显著降低(P<0.05),Keap1蛋白表达量无显著变化。Rg1干预模型组小鼠心脏指数明显降低(P<0.01);胶原纤维沉积量减少,肌原纤维束排列较为整齐,心肌纤维直径与正常对照组相比无统计学差异,线粒体形态基本正常,无明显肿胀;AST、LDH活力显著降低,T-SOD、CAT活性显著升高,MDA表达量显著降低(P<0.05);Nrf2、HO-1蛋白表达量显著升高,Keap1蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论Rg1能有效拮抗D-gal对小鼠心肌组织结构和超微结构的损伤,其机制可能与抑制氧化应激和上调Nrf2抗氧化信号通路有关。

关键词：人参皂苷Rg1 D-半乳糖心肌氧化应激损伤 Nrf2信号通路

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人参皂苷Rg1对大鼠脾细胞功能的影响

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解剖学杂志 2015年第4期38卷 392-392,449页

作者：孙嘉政张晶邵月张力恒冉瑞图贾道勇张梦思张岩岩王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室

目的:探讨人参皂苷Rg1对大鼠脾结构与功能的影响及其初步机制.方法:Rg1注射组取脾,测定脾指数;石蜡切片H-E染色观察脾组织结构,计算脾白髓占脾组织切片的比例;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脾细胞衰老情况;分离脾细胞,CCK-... 详细信息

目的:探讨人参皂苷Rg1对大鼠脾结构与功能的影响及其初步机制.方法:Rg1注射组取脾,测定脾指数;石蜡切片H-E染色观察脾组织结构,计算脾白髓占脾组织切片的比例;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脾细胞衰老情况;分离脾细胞,CCK-8检测其对刀豆蛋白A刺激的增殖能力;流式细胞术检测脾细胞增殖周期和细胞凋亡;ELISA检测脾细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-2(IL-2)与白细胞介素-6(IL-6)的能力和晚期糖基化终产物(AGEs)、细胞活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫印迹检测细胞衰老相关蛋白p53、p21、Rb的变化.结果:注射人参皂苷Rg1可使大鼠脾指数增加,脾白髓面积增加,脾细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力提高,脾细胞S期比例提高,G1期及G2/M期比例相对下降,细胞凋亡减少,ROS、MDA水平降低,脾细胞分泌TNF-α、GM-CSF、IL-2与IL-6的能力增加,SOD活性提高,P21、P53、Rb蛋白表达下调.结论:人参皂苷Rg1具有保护脾结构和激活脾细胞功能的作用.

关键词：人参皂苷Rg1 脾结构功能大鼠

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吴茱萸碱对人结肠癌细胞周期阻滞及凋亡的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2014年第6期28卷 863-869页

作者：赵绿翠张景勍游智梅李科琼罗念李静重庆医科大学药物高校工程研究中心重庆400016 重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程实验室重庆400016

目的探讨吴茱萸碱对人结肠癌细胞周期阻滞及凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养人结肠癌HCT-116细胞分别加入吴茱萸碱1.5,3.0,6.0和12μmol·L-1继续培养24,48和72 h,CCK-8法检测吴茱萸碱对HCT-116细胞存活的影响;用流式细胞术... 详细信息

目的探讨吴茱萸碱对人结肠癌细胞周期阻滞及凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养人结肠癌HCT-116细胞分别加入吴茱萸碱1.5,3.0,6.0和12μmol·L-1继续培养24,48和72 h,CCK-8法检测吴茱萸碱对HCT-116细胞存活的影响;用流式细胞术检测吴茱萸碱对HCT-116细胞凋亡和细胞周期的影响;倒置显微镜镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜观察Hoechst染色后细胞凋亡的形态学改变;Western蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白A1的表达及凋亡相关蛋白P53,Bax,Bcl-2,激活型胱天蛋白酶3的表达。结果吴茱萸碱1.5,3.0和6.0μmol·L-1作用24,48和72 h后,HCT-116细胞增殖受到抑制(P<0.05),且呈时间(r时间=0.744,P<0.05)和浓度(r浓度=0.953,P<0.01)依赖性。吴茱萸碱作用HCT-116细胞48 h后,S期细胞由正常对照组的(13.9±7.0)%增加至(39.7±11.7)%(P<0.05);细胞凋亡率由正常对照组的(4.2±3.0)%增加至(14.9±5.8)%(P<0.05)。光学显微镜下可见,随着药物浓度的增加,细胞的形态发生改变,胞膜破裂,产生细胞碎片,并出现大量漂浮细胞;Hoechst染色可见部分细胞出现细胞核固缩、核发白、染色质凝集等凋亡变化;P53、Bax和激活型胱天蛋白酶3蛋白表达增加,Bcl-2、细胞周期蛋白A1蛋白表达下降。结论吴茱萸碱能够通过下调细胞周期蛋白A1的表达;激活P53信号通路,下调Bcl-2、上调Bax,破坏Bcl-2/Bax的比例;激活胱天蛋白酶3,共同促进人结肠癌HCT-116细胞的凋亡。

关键词：吴茱萸碱 HCT-116细胞细胞凋亡细胞周期细胞周期蛋白A1 胱天蛋白酶3

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当归多糖促进骨髓移植重建受体小鼠造血功能

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解剖学报 2024年第5期55卷 556-564页

作者：杨婷廖奎黄彩虹魏晗王程杜坤航汪子铃王璐王亚平重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆医科大学第一附属医院肿瘤科重庆400016

目的探讨当归多糖(ASP)调控骨髓基质细胞(BMSCs)促进供体骨髓移植(BMT)重建受体小鼠造血功能的机制。方法分离纯化8~10周龄雄性C57BL/6J小鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs),移植给同龄同种雌性受体小鼠,第9天取受体鼠BMMNCs,再次移植给雌性受... 详细信息

目的探讨当归多糖(ASP)调控骨髓基质细胞(BMSCs)促进供体骨髓移植(BMT)重建受体小鼠造血功能的机制。方法分离纯化8~10周龄雄性C57BL/6J小鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs),移植给同龄同种雌性受体小鼠,第9天取受体鼠BMMNCs,再次移植给雌性受体小鼠。移植受体鼠分为对照组:假照射;辐射组:8.0 Gy X射线全身一次性照射;骨髓移植组:照射同辐射组,经尾静脉移植雄性供体BMMNCs(5×10^(6)个细胞);骨髓移植ASP组:同骨髓移植组,从移植的第1天起连续腹腔注射ASP[100 mg/(kg·d)×9]。模型构建期间记录小鼠体重与生存变化,模型构建结束后采集受体小鼠BMMNCs检测Y染色体性别决定区(SRY)基因,测定外周血血常规指标,计算股骨BMMNCs数,观察骨髓组织病理学;分离培养受体鼠BMSCs,观察细胞贴壁生长,5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)法检测BMSCs增殖;分析细胞内活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;检测BMSCs培养上清液中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干细胞因子(SCF)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平,检测BMMNCs与各组BMSCs共培养48 h,形成造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)数量;Real-time PCR分析受体BMMNCs的Notch信号通路相关基因(Notch1、Jagged1、Hes1)表达。结果单纯辐射组小鼠全部死亡,骨髓移植ASP组受体鼠体重下降不明显;在受体雌鼠BMMNCs中检测到SRY基因;骨髓移植ASP组受体鼠外周血血常规和BMMNCs总数下降幅度不显著,骨髓组织病理学损伤减轻;ASP能促进BMSCs增殖,降低BMSCs中ROS、MDA含量,提高SOD活性;促进BMSCs分泌SCF、GM-CSF及IGF-1,提高BMMNCs与受体BMSCs共培养后的CFU-Mix产率;提高受体小鼠BMMNCs中Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA表达。结论ASP促进受体小鼠造血功能重建机制与减轻造血微环境氧化应激损伤,提高BMSCs分泌造血生长因子,调控Notch信号通路有关。

关键词：当归多糖 X射线辐射骨髓移植造血重建骨髓微环境免疫荧光实时定量聚合酶链反应小鼠

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人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞连续移植中对延缓细胞衰老的作用与去乙酰化酶6/核因子-κB信号轴的关系

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解剖学报 2015年第5期46卷 623-628页

作者：周玥王亚平王建伟丁继超云南省大理学院组织学胚胎学教研室云南大理671000 重庆医科大学干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的探讨人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞(HSC/HPC)连续移植中对抗细胞衰老的作用与去乙酰化酶6/核因子-κB(SIRT6/NF-κB)信号轴的关系。方法免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠干细胞抗原阳性(Sca-1+)HSC/HPC,连续移植3代构建HSC/HPC衰... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞(HSC/HPC)连续移植中对抗细胞衰老的作用与去乙酰化酶6/核因子-κB(SIRT6/NF-κB)信号轴的关系。方法免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠干细胞抗原阳性(Sca-1+)HSC/HPC,连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。60Coγ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组,照射对照组;衰老模型组;Rg1治疗衰老组;Rg1预防衰老组。造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分析Rg1体内调控Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。实时定量PCR及Western blotting检测衰老调控分子SIRT6、NF-κB mRNA及蛋白的表达。结果连续移植后受体鼠Sca-1+HSC/HPC出现细胞衰老特征,随移植代数的增加,Sca-1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高,CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比,Rg1治疗衰老组及Rg1预防衰老组受体鼠Sca-1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降,CFU-Mix数量升高;SIRT6 mRNA及蛋白表达上调,NF-κB mRNA及蛋白表达下调;Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论 Rg1可能通过调控SIRT6/NF-κB信号轴发挥其对抗连续移植过程中Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。

关键词：人参皂苷Rg1 去乙酰化酶6 核因子-κB 干细胞抗原阳性造血干/祖细胞衰老实时定量PCR 免疫印迹法小鼠

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MiR-320a在肝癌中的表达及对SMMC-7721肝癌细胞凋亡和迁移的影响

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基因组学与应用生物学 2018年第5期37卷 2305-2311页

作者：吕晓婷熊伟宋丹石雪萍李海星郭珮陈地龙李静重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

本研究以mi R-320a在肝癌组织中的表达水平及其对肝细胞肝癌SMMC-7721细胞株凋亡和迁移的影响为目的。通过收集18例肝癌及癌旁组织用定量逆转录-聚合酶链反应（quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,q RT-PCR... 详细信息

本研究以mi R-320a在肝癌组织中的表达水平及其对肝细胞肝癌SMMC-7721细胞株凋亡和迁移的影响为目的。通过收集18例肝癌及癌旁组织用定量逆转录-聚合酶链反应（quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,q RT-PCR）方法检测mi R-320a在癌组织和癌旁组织中的差异性表达。提取正常肝细胞HL-7702与肝癌细胞SMMC-7721,Hep3B的RNA,用q RT-PCR检测mi R-320a在正常肝细胞与肝癌细胞中的表达差异性。SMMC-7721细胞株进行mi R-320a agomir特殊化学修饰激动剂转染,用q RT-PCR检测细胞转染效率。用划痕实验检测转染前后的SMMC-7721细胞株的迁移能力。用流式细胞学技术检测mi R-320a对SMMC-7721细胞凋亡和周期的影响。用Western blotting检测过表达mi R-320a对肝癌细胞凋亡和迁移机制的研究。从而发现在肝癌标本中,与癌旁组织比较mi R-320a表达下调;正常肝细胞作为对照,mi R-320a在SMMC-7721细胞株中表达下调明显;划痕实验显示过表达mi R-320a可明显抑制肝癌细胞的迁移;流式细胞术分析,过表达mi R-320a通过将细胞阻滞在G0期/G1期从而明显促进肝癌细胞的凋亡。得到了mi R-320a在肝癌细胞及肝癌标本中表达水平较低;上调肝癌细胞内mi R-320a水平能通过下调周期蛋白Cyclin D1的表达,将细胞周期阻滞在G0期/G1期,同时下调凋亡相关蛋白Caspase3及Bcl-2、上调Bax,破坏Bcl-2/Bax的比例,促进肝癌细胞的凋亡,并通过下调基质金属蛋白酶MMP9的表达抑制肝癌细胞的迁移能力的结论。

关键词：肝细胞肝癌 microRNA-320a 迁移凋亡

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过氧化损伤及抗氧化能力时间动态变化与造血干/祖细胞衰老的相关性

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中国老年学杂志 2013年第5期33卷 1061-1063页

作者：耿珊张琛徐春燕姜蓉王璐王建伟王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016

目的探讨增龄过程中小鼠Sca-1+造血干/祖细胞(Sca-1+HSC/HPC)过氧化损伤及抗氧化能力的动态变化与其衰老的关系。方法 C57BL/6J雄性小鼠分为幼年组(3～4周龄),青年组(2月龄),中年组(6月龄),中老年组(12月龄),老年组(18月龄)。提取各组... 详细信息

目的探讨增龄过程中小鼠Sca-1+造血干/祖细胞(Sca-1+HSC/HPC)过氧化损伤及抗氧化能力的动态变化与其衰老的关系。方法 C57BL/6J雄性小鼠分为幼年组(3～4周龄),青年组(2月龄),中年组(6月龄),中老年组(12月龄),老年组(18月龄)。提取各组小鼠骨髓单个核细胞,免疫磁性吸附细胞分选法(MACS)分离纯化Sca-1+细胞群,WST法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)含量,TNB显色法检测细胞总谷胱甘肽(GSSG+GSH)含量,WST-1法检测超氧化物含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察各年龄组阳性细胞百分比,造血祖细胞混合集落培养比较各年龄组Sca-1+细胞形成集落能力。结果总SOD活力值、GSSG+GSH含量、超氧化物含量吸光度、MDA含量、SA-β-Gal阳性细胞百分比及混合集落形成率分别在幼年组为(27.51±1.11)U/g、(28.78±0.77)μmol/L、(0.114±0.005)、(2.06±0.54)nmol/mg、(2.26±0.65)%、(8.79±0.56);青年组为(38.23±3.50)U/g、(31.48±2.03)μmol/L、(0.109±0.005)、(0.81±0.35)nmol/mg、(9.08±2.74)%、(9.48±0.74);中年组为(28.85±0.65)U/g、(47.62±4.93)μmol/L、(0.133±0.002)、(2.69±0.62)nmol/mg、(11.58±0.89)%、(5.14±0.89);中老年组(12.67±0.89)U/g、(25.63±1.23)μmol/L、(0.151±0.009)、(11.44±1.19)nmol/mg、(35.34±2.50)%、(1.56±0.23);老年组为(17.52±1.27)U/g、(39.10±2.19)μmol/L、(0.141±0.005)、(7.06±0.95)nmol/mg、(15.76±1.23)%、(0.98±0.50)。结论随年龄增加Sca-1+HSC/HPC的SA-β-Gal阳性细胞百分比逐渐增高,混合集落形成能力下降,SOD活性、GSSG+GSH含量逐步降低,而超氧化物、MDA含量逐渐增加,提示在增龄过程Sca-1+HSC/HPC过氧化损伤,抗氧化能力逐渐降低是造血干细胞衰老的可能机制之一。

关键词： Sca-1+造血干祖细胞超氧化物歧化酶谷胱甘肽超氧化物丙二醛

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