检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2013年第1期26卷 22-26页

作者：刘俊张先平蔡世忠徐春燕王亚平林雪梅重庆医科大学组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的分离白血病K562细胞株中CD34+细胞群,并分析其生物学特征,为从干细胞角度治疗白血病提供实验依据。方法采用免疫磁性分选法分离K562细胞中CD34+细胞群,台盼蓝拒染法检测细胞活性;流式细胞术检测CD34+细胞比例及细胞周期;单细胞克隆... 详细信息

目的分离白血病K562细胞株中CD34+细胞群,并分析其生物学特征,为从干细胞角度治疗白血病提供实验依据。方法采用免疫磁性分选法分离K562细胞中CD34+细胞群,台盼蓝拒染法检测细胞活性;流式细胞术检测CD34+细胞比例及细胞周期;单细胞克隆培养检测CD34+细胞自我更新能力;RT-PCR法检测CD34+细胞分化相关指标促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony stimulatingfactor,GM-CSF)基因mRNA的转录水平;并检测CD34+细胞耐药蛋白P-gp(P-glycoprotein)的表达。结果免疫磁性分选法可有效分离出CD34+细胞群,细胞活性为99%～100%;分离的CD34+细胞含量占细胞总数的78.5%～85.3%,细胞大部分处于静止状态,G0/G1期细胞比例达80%左右,显著高于分离前的K562细胞;CD34+细胞群具有形成混合集落的能力;与K562细胞相比,CD34+细胞EPO和GM-CSF基因mRNA的转录水平明显下降(P<0.01),P-gp表达阳性。结论成功从K562细胞株中分离了CD34+细胞群,其具有自我更新和多向分化的能力,表明其具有白血病干/祖细胞的生物学特点。

关键词： K562细胞 CD34+细胞细胞分离生物学特性

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曲古抑菌素对HepG2细胞增殖的影响及相关机制

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南方医科大学学报 2014年第7期34卷 917-922页

作者：石庆强左国伟冯子强赵绿翠罗念游智梅夏菁李丹阳李静陈地龙重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆400016

目的：研究曲古抑菌素（TSA）对HepG2细胞凋亡的影响及可能的机制。方法取对数生长期HepG2细胞，TSA（50-500 nmol/L）诱导，同时设空白对照组，用CCK-8检测细胞增殖影响；流式细胞术检测细胞周期；Annexin V-FTIC/PI双染细胞检测凋亡... 详细信息

目的：研究曲古抑菌素（TSA）对HepG2细胞凋亡的影响及可能的机制。方法取对数生长期HepG2细胞，TSA（50-500 nmol/L）诱导，同时设空白对照组，用CCK-8检测细胞增殖影响；流式细胞术检测细胞周期；Annexin V-FTIC/PI双染细胞检测凋亡；倒置显微镜观察细胞形态并采图；Western blot检测HepG2细胞中β-catenin、HDAC1、HDAC3、H3K9、CyclinD1、Bax等蛋白的表达。定量PCR方法检测HDAC1，HDAC3基因的表达。结果 CCK-8检测结果显示TSA对肝癌HepG2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性；流式细胞术检测细胞周期表明，药物组细胞G0/G1期所占比例增加，S期所占比例下降，G2/M所占比例增加；细胞凋亡检测表明，空白对照组凋亡率（6.22±0.25）%；250 nmol/L组凋亡率（7.17±0.20）%；500 nmol/L组凋亡率（18.14±0.42）%；倒置显微镜下观察可见，随着时间推移空白对照组细胞生长良好；而药物组细胞则出现变形，有大量漂浮细胞；Western blot检测结果显示β-catenin、H3K9和Bax蛋白表达水平均明显升高，CyclinD1、HDAC1、HDAC3的表达水平则呈下降趋势；定量PCR结果显示：HDAC1、HDAC3基因的表达无明显变化。结论 TSA可通过抑制HDAC的活性，促进组蛋白乙酰化，活化Wnt/β-catenin信号通路来发挥其抑制HepG2细胞增殖，诱导周期阻滞及凋亡的作用。

关键词： HepG2细胞曲古抑菌素凋亡 β-catenin 组蛋白乙酰化

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短期雌激素替代治疗对中老年卵巢切除大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维影响的体视学研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2014年第2期23卷 98-104页

作者：罗艳敏何琦吕福林肖倩张蕾仇玄晁凤蕾唐勇重庆医科大学:组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的运用体视学方法定量研究短期雌激素替代治疗(Estrogen replacement therapy,ERT)对中老年卵巢切除大鼠的大脑白质及白质内有髓神经纤维的作用。方法 19只中老年(10-12月龄)雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术(ovariectomised,OVX),恢复1m后... 详细信息

目的运用体视学方法定量研究短期雌激素替代治疗(Estrogen replacement therapy,ERT)对中老年卵巢切除大鼠的大脑白质及白质内有髓神经纤维的作用。方法 19只中老年(10-12月龄)雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术(ovariectomised,OVX),恢复1m后,随机分为雌激素替代治疗组(OVX+E组)(n=10)和安慰剂治疗组(OVX+Veh组)(n=9)。雌激素替代治疗1m后,运用Morris水迷宫方法检测大鼠的空间记忆能力。随后每组大鼠随机选取5只,运用透射电子显微镜和体视学方法比较两组大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的改变。结果 OVX+E组大鼠的空间记忆能力显著强于OVX+Veh组(P<0.05),但是两组大鼠的大脑白质总体积、白质内有髓神经纤维总长度、总体积、平均直径及髓鞘总体积均没有显著性差异(P>0.05)。结论为期1m的雌激素替代治疗可显著提高中老年卵巢切除大鼠的空间记忆能力,但是对中老年卵巢切除大鼠的大脑白质及白质内有髓神经纤维均没有显著影响。

关键词：大脑白质有髓神经纤维中老年大鼠雌激素替代治疗体视学

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大鼠胼胝体体积和胼胝体额区有髓神经纤维老年改变

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解剖学杂志 2009年第2期32卷 135-139,173页

作者：徐瑲杨姝李琛张伟卢伟唐勇重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程学研究室重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016

目的:探讨老年大鼠大脑胼胝体体积及胼胝体额区有髓神经纤维的改变。方法:运用透射电子显微镜和新的体视学方法分别对年轻组、中老年组和老年组雌性Long-Evans大鼠胼胝体体积及胼胝体额区有髓神经纤维进行定量研究。结果:与年轻组比较,... 详细信息

目的:探讨老年大鼠大脑胼胝体体积及胼胝体额区有髓神经纤维的改变。方法:运用透射电子显微镜和新的体视学方法分别对年轻组、中老年组和老年组雌性Long-Evans大鼠胼胝体体积及胼胝体额区有髓神经纤维进行定量研究。结果:与年轻组比较,中老年和老年的胼胝体体积和胼胝体额区体积均存在显著性降低,胼胝体额区体积的老年性改变出现更早,老年改变程度更大。老年大鼠胼胝体额区有髓神经纤维总体积较年轻大鼠有下降趋势;有髓神经纤维总长度较年轻大鼠下降19.5%,直径在0.4～0.6μm范围的有髓神经纤维长度下降28.1%。结论:胼胝体存在显著性老年萎缩,老年胼胝体额区具有选择易损性,胼胝体额区的老年改变可能与老年大脑额叶功能下降有关。

关键词：胼胝体胼胝体额区有髓神经纤维老年改变体视学

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Sca-1^+造血干/祖细胞重建致死剂量辐射小鼠造血功能的作用

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第32期14卷 6015-6019页

作者：周玥杨斌姚欣王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆市400016

背景:近年来,造血干细胞移植在国内外已广泛开展,移植的造血干细胞能否有效重建造血成为造血干细胞移植领域的研究热点问题之一。目的:观察Sca-1+造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,Sca-1+HSC/HPC)对造血衰竭小鼠造血... 详细信息

背景:近年来,造血干细胞移植在国内外已广泛开展,移植的造血干细胞能否有效重建造血成为造血干细胞移植领域的研究热点问题之一。目的:观察Sca-1+造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,Sca-1+HSC/HPC)对造血衰竭小鼠造血功能重建的作用。方法:雌性C57BL/6受体鼠给予致死剂量60Coγ射线照射后分2组,对照组:输注无菌PBS;移植组:移植免疫磁性分选法分离纯化的同系雄性C57BL/6小鼠Sca-1+HSC/HPC;检测受体鼠生存时间;外周血白细胞、红细胞比容、血小板的变化;脾湿质量及脾集落数;PCR检测Y染色体(Sry基因)表达确定受体小鼠重建造血的细胞来源。结果与结论:移植组受体鼠30d存活率、白细胞、红细胞比容、血小板、脾湿质量及脾集落数均明显高于对照组(P<0.05);Y染色体PCR分析,证实雌性受体小鼠重建造血的细胞来源于雄性供体。提示Sca-1+HSC/HPC移植后能重建造血衰竭小鼠造血功能。

关键词：造血功能 Sca-1+造血干/祖细胞分离纯化重建造血小鼠

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TRPC3参与糖氧剥夺致培养的少突胶质细胞凋亡

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中国生物工程杂志 2015年第4期35卷 23-29页

作者：孟赞徐丹李真李静李刚刘永刚刘兆雨吴宏唐勇彭彦重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:研究瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential channel 3,TRPC3)是否参与糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)少突胶质细胞的凋亡。方法:以原代培养的新生SD大鼠少突胶质细胞为对照组,以OGD2h的少突胶质细胞为... 详细信息

目的:研究瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential channel 3,TRPC3)是否参与糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)少突胶质细胞的凋亡。方法:以原代培养的新生SD大鼠少突胶质细胞为对照组,以OGD2h的少突胶质细胞为模型组,将模型组+Pyr3阻断设为处理组。采用蛋白质免疫印迹法检测TRPC3蛋白的表达水平,MTT试剂盒比色法检测各组细胞存活率,Annexin V-FITC试剂盒染色后经流式细胞仪检测细胞凋亡,fluo-3染色后经流式细胞仪和激光共聚焦显微镜测定胞内游离钙的变化。结果:少突胶质细胞A2B5和MBP特异性标记阳性,细胞纯度可达到95%以上;少突胶质细胞OGD2h成功建立OGD模型;OGD组TRPC3蛋白表达增加;OGD组细胞活性为(54.34±6.55)%,凋亡率为(24.24±0.86)%,与对照组有显著差异(P<0.05),Pyr处理组细胞存活率为(72.26±5.41)%,凋亡率为(14.82±0.28)%,与OGD组有显著差异(P<0.05);OGD组胞内游离钙浓度显著升高,而Pyr3阻断以后可以部分抑制其升高。结论:TRPC3表达增加介导胞内游离钙离子水平的升高可能是OGD少突胶质细胞凋亡的重要原因之一。

关键词：少突胶质细胞 OGD TRPC3 凋亡钙离子

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当归多糖对K562细胞EpoR介导的信号转导通路研究

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生物技术 2009年第2期19卷 15-18页

作者：宋姝丹华自森王亚平王建伟重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆大学组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的:研究当归多糖(APS)对K562细胞中EpoR介导的JAK2/STAT5信号转导通路的影响。方法:实验分为APS组(200mg/L APS)及阴性对照组(常规培养) ,两组细胞培养24h加入5×103IU/L Epo刺激,Western blot法检测Epo刺激不同时间后K562细胞核... 详细信息

目的:研究当归多糖(APS)对K562细胞中EpoR介导的JAK2/STAT5信号转导通路的影响。方法:实验分为APS组(200mg/L APS)及阴性对照组(常规培养) ,两组细胞培养24h加入5×103IU/L Epo刺激,Western blot法检测Epo刺激不同时间后K562细胞核、浆蛋白中JAK2、STAT5的表达变化;免疫沉淀法检测其活性改变;采用免疫细胞化学技术和荧光显微镜观察其分布。结果:两组细胞培养24h加入Epo继续刺激对JAK2的表达影响不大,但APS组JAK2的活性较阴性对照组增强;Epo继续刺激K562细胞核中STAT5的表达及活性APS组都较阴性对照组增强。结论:APS在促进正常造血过程中,可能在EpoR介导的信号转导过程中增强JAK2、STAT5的酪氨酸磷酸化发挥重要作用。

关键词：当归多糖 K562 信号转导 JAK STAT

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当归多糖对D-半乳糖致小鼠肾脏亚急性损伤的保护作用及机制

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中国中药杂志 2015年第21期40卷 4229-4233页

作者：樊艳玲夏婕妤贾道勇张梦思张岩岩王璐黄国宁王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆市妇幼保健院生殖与遗传研究所重庆400016

探讨当归多糖(ASP)对D-半乳糖诱导致小鼠肾脏亚急性损伤的保护作用及机制。雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,每组10只。模型组:小鼠皮下注射D-半乳糖(120 mg·kg-1),qd×42;ASP组:从D-半乳糖模型复制的第8天起,腹腔注射ASP(100 mg&... 详细信息

探讨当归多糖(ASP)对D-半乳糖诱导致小鼠肾脏亚急性损伤的保护作用及机制。雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,每组10只。模型组:小鼠皮下注射D-半乳糖(120 mg·kg-1),qd×42;ASP组:从D-半乳糖模型复制的第8天起,腹腔注射ASP(100 mg·kg-1),qd×35;正常对照组:小鼠皮下注射等时与等量生理盐水。药物注射完成第2天,采外周血检测尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、尿酸(UA)、胱抑素C(Cys-C)含量;取肾脏制备石蜡切片,HE染色观察肾脏组织形态学,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察肾组织中染色阳性细胞相对光密度(ROD),透射电镜观察肾脏超微结构变化;制备肾脏组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和丙二醛(MDA)的含量;ELISA方法检测肾脏晚期糖基化终产物(AGEs)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OH-d G)的含量。结果表明与模型组相比较,ASP组小鼠血清中BUN,Crea,UA,Cys-C,AGEs和8-OH-d G含量显著下降;肾小球数目增多,硬化肾小球减少,肾小囊腔与肾小管管腔扩张不明显;SA-β-Gal染色阳性细胞的相对光密度降低且颗粒小;超微病理呈现肾小球系膜细胞减少,基底膜变薄,足细胞核糖体和粗面内质网明显增多,足细胞次级突起融合减少;SOD与GSH-PX活性显著增加;MDA含量下降。综上所述,当归多糖能拮抗D-半乳糖致小鼠肾脏亚急性损伤,其保护肾脏机制可能与抑制氧化应激损伤有关。

关键词：当归多糖 D-半乳糖肾损伤保护机制

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短期丰富生存环境增加中老年雄性大鼠海马结构内有髓神经纤维的总长度

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解剖学报 2010年第2期41卷 175-179页

作者：黄春霞卢伟杨姝李琛夏磊仇玄杨俊卿唐勇重庆医科大学生理学教研室重庆400016 重庆医科大学组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程学研究室重庆400016 重庆医科大学药理学教研室重庆400016

目的探讨短期丰富生存环境干预对正常中老年雄性大鼠海马结构及海马内有髓神经纤维的影响。方法将20只14月龄的雄性SD大鼠随机分为丰富生存环境组与空白对照组,前者在丰富生存环境条件下饲养4个月,后者在普通环境中饲养4个月后,采用Mor... 详细信息

目的探讨短期丰富生存环境干预对正常中老年雄性大鼠海马结构及海马内有髓神经纤维的影响。方法将20只14月龄的雄性SD大鼠随机分为丰富生存环境组与空白对照组,前者在丰富生存环境条件下饲养4个月,后者在普通环境中饲养4个月后,采用Morris水迷宫测试两组大鼠的空间学习能力;运用透射电子显微镜和体视学方法对两组大鼠海马结构及海马内有髓神经纤维进行定量研究。结果丰富生存环境组大鼠空间学习能力与空白对照组之间不存在显著性差异;丰富生存环境组与空白对照组相比较,海马结构总体积两组间无显著性差异。丰富生存环境组海马结构内有髓神经纤维的总体积、有髓神经纤维总长度、有髓神经纤维平均直径显著增加。结论短期丰富生存环境干预对14月龄雄性大鼠海马有髓神经纤维具有显著性影响。这一研究结果为将来寻找延缓大脑衰老进程的行为学手段提供了重要的理论依据。

关键词：空间学习能力丰富生存环境海马结构有髓神经纤维 Morris水迷宫体视学雄性大鼠

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去上皮羊膜及其浸提液体外诱导骨髓间充质干细胞的分化

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中国生物制品学杂志 2012年第9期25卷 1147-1151页

作者：段江洁田静姜蓉汪维伟重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的观察去上皮羊膜及其浸提液体外诱导骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向上皮细胞的分化,并探讨其机制。方法从胎儿四肢长骨分离BMSCs,扩增后采用流式细胞术分析第3代(P3)细胞表面抗原(CD29、CD34、CD71和... 详细信息

目的观察去上皮羊膜及其浸提液体外诱导骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向上皮细胞的分化,并探讨其机制。方法从胎儿四肢长骨分离BMSCs,扩增后采用流式细胞术分析第3代(P3)细胞表面抗原(CD29、CD34、CD71和HLA-DR)的表达,并用4,6-乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)标记第4代BMSCs(P4-BMSCs)。机械法去除正常胎盘羊膜上皮,制成去上皮羊膜,并制备去上皮羊膜浸提液。将DAPI标记的BMSCs接种于羊膜上,设加或不加表皮细胞生长因子(Epidermal growth factor,EGF)、类胰岛素1号生长因子(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)、羊膜浸提液诱导组及细胞爬片对照组,体外诱导培养后,采用免疫荧光组织(细胞)化学染色学法检测各组细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)、EGF-R和IGF-1-R的表达,并于诱导后第10天计算CK阳性细胞率。结果原代BMSCs呈典型旋涡状生长,P3细胞表达CD29和CD71,不表达CD34和HLA-DR。羊膜组和细胞爬片组BMSCs在加入EGF或IGF-1诱导后,表达EGF-R和IGF-1-R的时间较未加生长因子的对照组提前2～4 d,表达CK的时间提前2～6 d,单用羊膜组或羊膜浸提液组的表达时间差异无统计学意义(P>0.05);诱导第10天,单用羊膜或羊膜浸提液诱导组的CK阳性细胞表达率明显高于细胞爬片对照组(P<0.05);羊膜与EGF、IGF-1联合诱导组高于单用羊膜组(P<0.05);EGF诱导组高于IGF-1诱导组(P<0.05)。结论羊膜及羊膜浸提液、外源性EGF和IGF-1在体外均可诱导BMSCs向上皮细胞分化,羊膜可能主要通过其所含的细胞因子诱导BMSCs向上皮分化。

关键词：羊膜骨髓间充质干细胞诱导细胞分化

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