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雌激素替代治疗对中老年卵巢切除大鼠白质及白质内有髓神经纤维髓鞘超微结构作用的研究

重庆医科大学学报 2014年第4期39卷 438-445页

作者：何琦罗艳敏吕福林肖倩晁凤蕾张琪娟肖晓秋唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室、干细胞与组织工程学研究室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院临床营养科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院脂糖代谢实验室重庆400016

目的：研究雌激素替代治疗（estrogen replacement therapy，ERT）对中老年卵巢切除雌性SD大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维髓鞘超微结构的作用，为以后进一步运用ERT疗延缓大脑衰老进程和防治脱髓鞘疾病提供科学依据。方法：选用40只1... 详细信息

目的：研究雌激素替代治疗（estrogen replacement therapy，ERT）对中老年卵巢切除雌性SD大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维髓鞘超微结构的作用，为以后进一步运用ERT疗延缓大脑衰老进程和防治脱髓鞘疾病提供科学依据。方法：选用40只10。12月龄中老年雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术，术后1月将成功去势的19只卵巢切除大鼠按完全随机设计方式分为实验组（n=10）与对照组（n=9），前者给予17β-雌二醇颈背部皮下注射4周，后者给予安慰剂颈背部皮下注射4周。然后采用Morris水迷宫测试2组大鼠的空间参考记忆能力，运用电镜技术及相应的体视学方法对2组大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维髓鞘超微结构进行定量研究。结果：实验组大鼠与对照组相比，其空间参考记忆能力明显增强（F=9．645，P=0．006）。与对照组大鼠相比，实验组大鼠大脑白质内有髓神经纤维髓鞘总体积和髓鞘内外周长之差均明显增加[（32．94±5．97）mm^3，（25．93±2．83）mm^3，t=2．391，P=0．040；（1．16±0．10）μm、（1．03±0．09）μm，t=2．325，P=0．045]。统计学相关分析发现，白质内有髓神经纤维髓鞘总体积与Morris水迷宫第1天潜伏期呈负相关（r=-0．744，P=-0．009）。结论：ERT对中老年卵巢切除大鼠的空间参考记忆能力及白质内有髓神经纤维髓鞘均有积极的保护作用。

关键词：中老年雌性大鼠白质髓鞘雌激素替代治疗体视学

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短期丰富生存环境干预下中老年大鼠海马结构有髓神经纤维的性别差异

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第三军医大学学报 2010年第6期32卷 546-549页

作者：黄春霞仇玄卢伟杨姝李琛夏磊唐勇重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的研究短期丰富生存环境干预下正常中老年大鼠海马结构有髓神经纤维的性别差异。方法将20只14月龄的SD大鼠(雌雄各10只)随机均分为丰富生存环境组与普通环境组,前者在丰富生存环境条件下饲养4个月,后者在普通环境中饲养4个月,运用透... 详细信息

目的研究短期丰富生存环境干预下正常中老年大鼠海马结构有髓神经纤维的性别差异。方法将20只14月龄的SD大鼠(雌雄各10只)随机均分为丰富生存环境组与普通环境组,前者在丰富生存环境条件下饲养4个月,后者在普通环境中饲养4个月,运用透射电子显微镜和体视学方法对两组大鼠海马结构有髓神经纤维进行定量研究。结果普通环境组雌性大鼠海马结构内有髓神经纤维的总体积、平均直径均显著大于雄性大鼠(P<0.05),而海马结构总体积、海马结构内有髓神经纤维的总长度雌雄两组之间不存在显著性差异(P>0.05)。丰富生存环境组雌性大鼠海马结构内有髓神经纤维的平均直径显著小于雄性大鼠(P<0.05),而海马结构总体积、海马结构内有髓神经纤维的总体积、总长度雌雄两组之间不存在显著性差异(P>0.05)。结论普通环境组和丰富环境组中老年大鼠海巴结构有髓神经纤维存在的性别差异,提示雌、雄性中老年大鼠对短期丰富生存环境干预的反应不同。

关键词：大鼠丰富生存环境海马结构有髓神经纤维性别差异体视学

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雌激素替代治疗对卵巢切除大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响

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重庆医科大学学报 2014年第4期39卷 425-432页

作者：吕福林肖倩罗艳敏何琦晁凤蕾陈林仇玄张蕾张琪娟肖晓秋唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室、干细胞与组织工程学研究室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院临床营养科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院脂糖代谢实验室重庆400016

目的：探讨雌激素替代治疗（estrogen replacement treatment，ERT）对卵巢切除（ovariectomy，ovx）大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响。方法：对10～11月龄的雌性SD大鼠进行双侧卵巢切除术，术后1月将成功切除卵巢的大鼠随机... 详细信息

目的：探讨雌激素替代治疗（estrogen replacement treatment，ERT）对卵巢切除（ovariectomy，ovx）大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响。方法：对10～11月龄的雌性SD大鼠进行双侧卵巢切除术，术后1月将成功切除卵巢的大鼠随机分为安慰剂对照组（OVX＋O组）和雌激素替代治疗组（OVX＋E组），前者给予连续4周安慰剂（芝麻油）处理，后者给予连续4周17β-雌二醇替代治疗，4周后采用Morris水迷宫对2组大鼠的空间学习能力进行测试，用化学发光法测定2组大鼠体内循环雌激素浓度．用透射电子显微镜和体视学方法对两组大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘进行定量研究。结果：OVX＋E组大鼠体内循环雌激素浓度明显高于OVX＋O组（t=5．688，P=-0．000）；OVX＋E组大鼠空间学习能力明显提高（F=9．645，P=-0．006）。2组大鼠CA1区体积（t=1．451，P=0．181）、有髓神经纤维体积（t=-1．158，P=0．294）、有髓神经纤维髓鞘体积（u=-0．642，P=0．521）、有髓神经纤维平均直径（t=0．630，P=0．545）和有髓神经纤维髓鞘厚度（u=-1．746，P=-0．081）均不存在统计学差异，但是OVX＋E组直径在0．6．0．7μm的有髓神经纤维髓鞘厚度比OVX＋O组大鼠增加14．1％（t=2．428，P=0．038），OVX＋E组直径在0．8-0．9μm的有髓神经纤维直径与轴突直径差比OVX＋O组大鼠增加18．2％（t=2．432，P=-0．038）。结论：短期雌激素替代治疗可以改善大鼠空间学习能力并对海马CA1区有髓神经纤维髓鞘具有保护作用。

关键词：有髓神经纤维髓鞘海马卵巢切除雌激素替代治疗体视学

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骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠溃疡性结肠炎(英文)

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中国组织工程研究 2012年第32期16卷 6025-6031页

作者：汪维伟徐艳华姜蓉段征陈晓云重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆市400016

背景:近年已有干细胞移植修复慢性肠炎受损组织的报道,但其治疗机制尚不明确。目的:观察移植骨髓间充质干细胞在溃疡性结肠炎大鼠结肠的分布及分化情况,及对大鼠结肠黏膜的修复作用。方法:取经鉴定的第3代大鼠骨髓间充质干细胞1×10... 详细信息

背景:近年已有干细胞移植修复慢性肠炎受损组织的报道,但其治疗机制尚不明确。目的:观察移植骨髓间充质干细胞在溃疡性结肠炎大鼠结肠的分布及分化情况,及对大鼠结肠黏膜的修复作用。方法:取经鉴定的第3代大鼠骨髓间充质干细胞1×106个,应用Hoechst 33342进行荧光标记,并将其经尾静脉移植入溃疡性结肠炎大鼠体内,分别于移植后3,7,14d取材。结果与结论:骨髓间充质干细胞移植后3d,大鼠结肠即可见荧光标记的细胞,移植后14d,大鼠结肠荧光标记细胞仍较多,此时可见部分标记细胞表达细胞角蛋白。同时骨髓间充质干细胞移植后14d,溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜白细胞介素10表达增高,肿瘤坏死因子α表达降低,结肠黏膜的病理损伤明显好转。说明移植的骨髓间充质干细胞可迁移至结肠溃疡部位并分化为上皮细胞,同时可通过调节炎性因子的表达促进溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜损伤的修复。

关键词：骨髓间充质干细胞移植溃疡性结肠炎细胞角蛋白肿瘤坏死因子α 白细胞介素10

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天然生物材料支架的应用

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解剖科学进展 2009年第2期15卷 246-249页

作者：段江洁汪维伟重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016

天然生物材料支架具有与细胞外基质结构相似,生物相容性好等特点,在组织工程中作为细胞培养的支架材料具有明显的优势。羊膜取材容易,易于加工处理,无毒无刺激性,具有抗微生物的特性和促进组织修复的生物学作用;小肠粘膜下层无免疫性,... 详细信息

天然生物材料支架具有与细胞外基质结构相似,生物相容性好等特点,在组织工程中作为细胞培养的支架材料具有明显的优势。羊膜取材容易,易于加工处理,无毒无刺激性,具有抗微生物的特性和促进组织修复的生物学作用;小肠粘膜下层无免疫性,含有多种生长因子,具有促进细胞黏附、增殖和分化等作用。血管、膀胱、软骨等脱细胞基质分别用于相应的组织缺损修补,易达到结构再生和功能的恢复。本文就上述支架材料在组织工程中的应用进行综述。

关键词：天然生物材料支架材料组织工程小肠粘膜下层细胞外基质生物相容性生物学作用脱细胞基质

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人参皂苷Rg_(1)对移植性白血病模型小鼠的作用

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药物评价研究 2021年第12期44卷 2571-2577页

作者：李渊顾守美刘小虎周雯周玥王亚平大理护理职业学院云南大理671000 大理大学第一附属医院呼吸内科云南大理671000 大理大学组织胚胎学教研室云南省细胞生物学重点实验室云南大理671000 重庆医科大学组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的研究人参皂苷Rg_(1)对移植性白血病模型小鼠的作用。方法采用免疫磁性分选法(MACS)从K562细胞中分离、纯化CD34^(+)CD38^(-)人白血病干细胞(CD34^(+)CD38^(-)LSCs),流式细胞术检测分选细胞纯度,台盼蓝染色测定分选细胞活性。将6~8... 详细信息

目的研究人参皂苷Rg_(1)对移植性白血病模型小鼠的作用。方法采用免疫磁性分选法(MACS)从K562细胞中分离、纯化CD34^(+)CD38^(-)人白血病干细胞(CD34^(+)CD38^(-)LSCs),流式细胞术检测分选细胞纯度,台盼蓝染色测定分选细胞活性。将6~8周雌性NOD/SCID小鼠27只随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg_(1)(200 mg/kg)组,每组9只,模型组和人参皂苷Rg_(1)组通过尾iv移植CD34^(+)CD38^(-)LSCs构建白血病小鼠模型,ip给药30 d。观察各组小鼠一般情况及腹部包块变化;全自动血常规检测仪检测外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板水平;免疫组化法检测肝、脾脏病理学变化;流式细胞仪分析骨髓细胞周期;CCK-8法检测各组骨髓细胞的增殖能力;细胞免疫荧光染色鉴定骨髓细胞CD34阳性表达情况。结果分选前K562细胞中CD34^(+)CD38^(-)LSCs细胞群百分比为(9.64±1.14)%,分选后CD34^(+)CD38^(-)LSCs纯度可达(96.45±1.63)%;台盼蓝染色显示分选后细胞活性为(95.26±2.16)%。与对照组比较,模型组小鼠腹部包块明显,生存情况较差,体质量显著下降(P<0.05);白细胞数显著增高,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著下降(P<0.05);肝、脾脏结构被破坏,有大量白细胞浸润;骨髓细胞周期检测显示G;/G;期比例显著下降(P<0.05),S期比例显著升高(P<0.05);骨髓细胞增殖活力显著升高(P<0.05)。与模型组比较,人参皂苷Rg_(1)组小鼠腹部包块明显减小,生存情况好转,体质量显著增加(P<0.05);白细胞总数显著下降(P<0.05),红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著升高(P<0.05);肝、脾脏结构明显恢复;骨髓细胞G_(0)/G_(1)期比例显著升高(P<0.05),G_(0)/M期和S期比例显著下降(P<0.05)。细胞免疫荧光检测显示,模型组和人参皂苷Rg_(1)组中小鼠的骨髓细胞中存在大量的人源白血病细胞。结论 NOD/SCID小鼠尾iv移植CD34^(+)CD38^(-)LSCs可成功构建急性髓系白血病小鼠模型,人参皂苷Rg_(1)能有效缓解NOD/SCID小鼠的白血病症状。

关键词：人参皂苷Rg_(1) NOD/SCID小鼠急性髓系白血病模型移植白血病干细胞

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抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞作用的研究

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重庆医科大学学报 2019年第4期44卷 508-514页

作者：杨春茂唐静梁芯綦英强张钐钐吴永鑫范金花罗艳敏蒋林周春妮张毅黄春霞晁凤蕾高原张蕾唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院老年科重庆400016

目的:探讨抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)区少突胶质细胞的作用。方法:4～6周清洁级雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(10只)和建模组(60只),建立慢性不可预知性应激(chronic unpredictable ... 详细信息

目的:探讨抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)区少突胶质细胞的作用。方法:4～6周清洁级雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(10只)和建模组(60只),建立慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)抑郁症模型,为期4周。利用糖水偏好实验筛选出成模大鼠(23只),随机分为CUS组(12只)及Anti-Lingo-1组(11只)。运用Morris水迷宫评估对照组,CUS组和Anti Lingo-1组的行为学水平,采用体视学方法计算各组大鼠海马DG区的少突胶质细胞数量。结果:应激4周和Anti Lingo-1抗体治疗3周后,Morris水迷宫实验中,与对照组(3.4±0.2)相比,CUS组(2.4±0.2)大鼠Morris水迷宫第6天穿越平台次数明显降低(F=20.049,P=0.004);与CUS组比较,抗Lingo-1组(4.3±0.3)大鼠穿台次数明显增加(F=20.049,P=0.000)。体视学研究结果表明,与对照组[(4.9±1.1)×10~4]比较,CUS组[(3.1±1.3)×10~4]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显减少(F=8.747,P=0.026);与CUS组比较,Anti-Lingo-1组[(6.1±1.1)×10~4]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显增加(F=8.747,P=0.001)。结论:抗Lingo-1抗体可以改善抑郁症大鼠的认知障碍,抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞的作用可能是抗Lingo-1抗体改善抑郁症大鼠认知障碍的重要形态学基础之一。

关键词：抑郁症认知障碍海马少突胶质细胞抗Lingo-1抗体体视学

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氧化低密度脂蛋白可促进小鼠造血干细胞衰老

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解剖学报 2013年第2期44卷 189-193页

作者：张先平张贵海文坤明刘俊徐春燕王璐姜蓉王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程学研究室、组织学与胚胎学教研室重庆400016 遵义医学院附属医院肿瘤科贵州遵义563003 遵义医学院附属医院胃肠外科贵州遵义563003

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对造血干细胞(HSCs)细胞周期调控基因p16、p21、CDK2、CDK4及细胞周期蛋白(cyclinD)表达的影响,探讨ox-LDL诱导HSCs衰老的可能分子机制。方法采用免疫磁性分选法分离纯化小鼠Sca-1+HSCs,并与ox-LDL共培... 详细信息

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对造血干细胞(HSCs)细胞周期调控基因p16、p21、CDK2、CDK4及细胞周期蛋白(cyclinD)表达的影响,探讨ox-LDL诱导HSCs衰老的可能分子机制。方法采用免疫磁性分选法分离纯化小鼠Sca-1+HSCs,并与ox-LDL共培养,通过衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老HSCs,四唑氮盐(MTS)比色法与多向造血祖细胞(CFU-Mix)混合集落培养检测HSCs自我更新能力和多向分化潜能,流式细胞术分析细胞周期分布,荧光定量PCR及Western blotting检测HSCs p16、p21、CDK2、CDK4及cyclinD表达。结果与对照组比较,ox-LDL能增加HSCs SA-β-Gal染色阳性细胞率;促进HSCs停滞于G1期,G0/G1期细胞增多、S期细胞减少,减弱HSCs自我更新与多向分化能力;ox-LDL能上调HSCs p16和p21 mRNA及蛋白表达水平,下调CDK4及cyclinD蛋白表达,而对CDK2蛋白表达无影响。结论 ox-LDL能通过上调p16、p21表达及下调CDK4、cyclinD表达,在体外促进HSCs衰老。

关键词：衰老造血干细胞氧化低密度脂蛋白细胞周期流式细胞术小鼠

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D-半乳糖致小鼠胰腺损伤

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 912-917页

作者：黄杰董照瀛许梦雄晏红陈粼波王璐王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的探讨D-半乳糖(D-gal)对小鼠胰腺的损伤及其机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组和D-gal组(D-gal 120 mg/kg,qd×42 d)。注射完成第2天,采外周血测定空腹血糖(FBG)与空腹胰岛素(FINS)水平;称小鼠体质量(g)与胰腺湿重(mg)计算... 详细信息

目的探讨D-半乳糖(D-gal)对小鼠胰腺的损伤及其机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组和D-gal组(D-gal 120 mg/kg,qd×42 d)。注射完成第2天,采外周血测定空腹血糖(FBG)与空腹胰岛素(FINS)水平;称小鼠体质量(g)与胰腺湿重(mg)计算胰腺脏器指数;HE染色观察胰腺组织形态学;透射电镜观察胰腺细胞超微结构;制备冷冻切片,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测胰岛内染色阳性细胞的相对吸光度(RA)值;免疫组织化学法观察胰腺组织晚期糖基化终产物(AGEs)的RA值;制备胰腺组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量。结果 D-gal组小鼠FBG显著升高(P<0.05),FINS水平降低;胰腺湿重和胰腺脏器指数明显升高(P<0.01);胰腺光镜结构无显著损伤,但胰岛内单个有核细胞所占面积增加(P<0.05);胰腺内外分泌部显示细胞超微结构损伤,脂褐素明显沉积;胰腺SA-β-gal染色阳性细胞的RA值增加(P<0.05);AGEs阳性表达区域RA值升高(P<0.01);SOD与T-AOC含量降低(P<0.05),MDA含量升高(P<0.01)。结论 D-gal复制衰老小鼠模型可致胰腺损伤,发生机制可能与D-gal致胰腺细胞氧化应激损伤有关。

关键词： D-半乳糖衰老模型胰腺氧化损伤小鼠

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人参多糖对鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及其可能的机制

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中国生物制品学杂志 2014年第4期27卷 538-543页

作者：范家铭李静姜蓉王亚平李春莉黄江菊重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科重庆400016 重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学生命科学研究院重庆400016

目的探讨人参多糖（ginseng polysaccharide，GPS）对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及可能的机制。方法取对数生长期的鼻咽癌CNE-2细胞，经裸鼠背部皮下注射，1×10^7个／（0.2ml·只），待瘤体最大径为4～6mm时... 详细信息

目的探讨人参多糖（ginseng polysaccharide，GPS）对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及可能的机制。方法取对数生长期的鼻咽癌CNE-2细胞，经裸鼠背部皮下注射，1×10^7个／（0.2ml·只），待瘤体最大径为4～6mm时，取20只模型裸鼠，随机分为4组：对照组（经腹腔注射生理盐水）、放疗组（每次每只裸鼠经肿瘤局部给予5GyX射线照射，每3d照射1次，共3次）、GPS组（经腹腔注射GPS，30mg／kg，每次0.3ml，每72h给药1次，共5次）和GPS联合放疗组（经腹腔注射GPS，30mg／kg，每次0.3ml，每72h给药1次，共5次；末次给药48h后开始放疗，每只每次经肿瘤局部给予5Gy X射线照射，每3d照射1次，共3次）。开始给药3周后处死裸鼠，取瘤体，称重，测量肿瘤的长、短径，计算肿瘤体积及抑制率；HE染色观察移植瘤组织病理学改变；Real-time PCR检测移植瘤组织中β-eatenin基因mRNA的转录水平；免疫组织化学和Western blot法检测移植瘤组织中β-catenin蛋白的表达水平。结果与对照组相比，GPS组、放疗组和GPS联合放疗组的肿瘤体积及瘤重均明显下降（P〈0.05），抑制率分别为29.87％、52.60％和74.68％；镜下观察可见，GPS联合放疗组细胞凋亡明显，多数细胞核完全溶解，细胞结构消失，坏死的肿瘤组织呈现均质红染表现；GPS联合放疗组移植瘤中β-cateninmRNA及蛋白的表达水平均显著下降（P均〈0.05）。结论GPS可抑制CNE-2细胞在裸鼠体内的生长，且对鼻咽癌的放疗具有增敏作用，其机制可能与抑制β-catenin的表达有关。

关键词：人参多糖鼻咽癌 CNE-2细胞放疗敏感性 β-catenin

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