检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2016年第12期47卷 2123-2129页

作者：李晓朋冯子强石雪萍李静重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对白血病K562细胞及其耐药株K562/Adr的增殖、细胞周期及多药耐药性(MDR)的影响。方法用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测EVO和/或柔红霉素(DNR)对细胞增殖的影响,并计算耐药指数(RI)和逆转倍数(RF)... 详细信息

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对白血病K562细胞及其耐药株K562/Adr的增殖、细胞周期及多药耐药性(MDR)的影响。方法用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测EVO和/或柔红霉素(DNR)对细胞增殖的影响,并计算耐药指数(RI)和逆转倍数(RF);流式细胞仪检测EVO和/或DNR对K562及K562/Adr细胞周期的影响;流式细胞仪检测K562及K562/Adr细胞内DNR的荧光强度;定量PCR检测K562及K562/Adr细胞中MDR1基因的表达;Western blotting检测K562及K562/Adr细胞中MDR1、BCRP蛋白的表达。结果EVO、DNR作用于K562和K562/Adr细胞后,细胞增殖受到抑制,且呈剂量和时间依赖性;与K562细胞相比,K562/Adr细胞对DNR的RI为30.54,K562/Adr细胞对EVO的RI为19.09。当EVO(0.125 gmol/L)与不同浓度DNR联合作用后,能使DNR对K562/Adr细胞的IC_(50)明显下降,DNR+EVO对K562/Adr细胞的RF为12.07;EVO、DNR单独或联合作用于K562及K562/Adr细胞后,能够使K562/Adr细胞BCRP、MDR1蛋白及mRNA表达水平均明显下降。结论EVO能有效逆转白血病K562/Adr细胞对DNR的耐药现象,而这种作用可能与EVO通过减少细胞膜上多药耐药蛋白MDR1的表达有关。

关键词：吴茱萸碱 K562/Adr细胞多药耐药性 MDR1 BCRP

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D-半乳糖诱导大鼠骨髓基质细胞衰老及其机制

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基础医学与临床 2017年第3期37卷 307-312页

作者：侯吉颖陈雄斌陈粼波熊丽溶王璐黄国宁王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆市妇幼保健院重庆市遗传与生殖研究所重庆400013

目的构建大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)体外和体内衰老模型,观察BMSCs衰老生物学特性。方法体外对照组:常规培养大鼠骨髓BMSCs,取第三代(P3)细胞继续培养48 h;体外衰老组:在对照组基础上加入D-半乳糖(D-Gal,终浓度30 g/L),作用48 h;体内衰老... 详细信息

目的构建大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)体外和体内衰老模型,观察BMSCs衰老生物学特性。方法体外对照组:常规培养大鼠骨髓BMSCs,取第三代(P3)细胞继续培养48 h;体外衰老组:在对照组基础上加入D-半乳糖(D-Gal,终浓度30 g/L),作用48 h;体内衰老组:大鼠皮下注射D-Gal(120 mg/kg·d),qd×42 d;体内对照组:注射等时等量0.9%氯化钠溶液,模型完成第2天,分离培养BMSCs,取P3细胞进行实验。检测:CCK-8测定细胞增殖;流式细胞术分析周期和凋亡率;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察BMSCs衰老百分率;DCFH-DA荧光流式细胞术检测活性氧簇(ROS)水平,酶学法检测过氧化物丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot检测P16、P21、P53、CDK2和cyclin D表达。结果 D-Gal体外与体内致衰老组BMSCs增殖能力下降;细胞G0/G1期比例增高、S期比例降低(P<0.05);SA-β-Gal染色阳性百分率上升(P<0.05);胞内ROS、MDA上升,SOD下降(P<0.05);P16、P21、P53表达上调,CDK2、cyclin D下调(P<0.05)。结论 D-Gal在体内与体外均能构建BMSCs衰老模型,其机制与D-Gal诱导BMSCs氧化损伤和激活衰老信号途径相关。

关键词：骨髓基质细胞 D-半乳糖衰老生物学大鼠机制

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多学科交叉协同式培养妇产科科学学位研究生创新能力的研究

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继续医学教育 2018年第10期32卷 65-68页

作者：王智亮熊正爱曾飚周玮刘朝晖姚成果王嫣陈锦云王亚平重庆市重庆医科大学附属第二医院妇产科重庆400010 重庆市妇幼保健院产科重庆400021 北京市北京大学第一医院妇产科北京100034 重庆市重庆大学高电压与电工新技术教育部重点实验室重庆400044 重庆医科大学生物医学工程学院/省部共建国家重点实验室培育基地--重庆市超声医学工程重点实验室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

我国临床医学研究生教育工作恢复近四十年来,一直在不断进行调整,以使高层次卫生人才更好地为我国卫生事业做贡献。在新时代背景下,医学研究生培养工作面临新的形势,特别是实行专业学位"5+3"分流后,科学学位研究生与临床学位... 详细信息

我国临床医学研究生教育工作恢复近四十年来,一直在不断进行调整,以使高层次卫生人才更好地为我国卫生事业做贡献。在新时代背景下,医学研究生培养工作面临新的形势,特别是实行专业学位"5+3"分流后,科学学位研究生与临床学位研究生报考人数及招生层次发生了重大变化。本文以妇产科学学位研究生为例,总结分析了本课题组以创新能力为导向的多学科交叉协同式培养妇产科科学学位研究生的的思路与成果,以期为新形势、新背景下临床医学科学学位研究生的培养提供些许参考。

关键词：学科交叉协同培养创新能力科学学位研究生

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衰老模型骨髓基质细胞抑制造血细胞增殖分化

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基础医学与临床 2016年第1期36卷 12-18页

作者：景鹏伟胡文煦宋小英张岩岩贾道勇王亚平王璐重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016

目的研究衰老骨髓基质细胞对骨髓造血细胞增殖分化能力的影响,为阐述机体造血微环境衰老对造血干/祖细胞增殖的影响提供实验依据。方法全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓基质细胞,分为对照组和衰老组。衰老组:常规培养基内加入30 mg/m L D-... 详细信息

目的研究衰老骨髓基质细胞对骨髓造血细胞增殖分化能力的影响,为阐述机体造血微环境衰老对造血干/祖细胞增殖的影响提供实验依据。方法全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓基质细胞,分为对照组和衰老组。衰老组:常规培养基内加入30 mg/m L D-半乳糖作用48 h。CCK-8法测定BMSCs增殖;流式细胞术分析细胞周期;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老BMSCs百分率;Western blot检测P16、P21和P53蛋白表达。骨髓造血细胞与BMSCs共培养,集落计数检测髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)增殖分化。ELISA检测BMSCs培养上清液中IL-1β、GM-CSF和SCF含量;DCFH-DA流式荧光检测BMSC活性氧簇(ROS)水平;酶学法检测BMSCs内过氧化物丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与对照组相比,D-半乳糖诱导BMSCs衰老,细胞阻滞于G0/G1期(P<0.01),增殖能力显著下降,SA-β-Gal染色阳性率升高(P<0.01);衰老相关蛋白P16、P21和P53表达明显上调(P<0.01)。与衰老BMSCs共培养的骨髓造血细胞增殖分化能力减弱。衰老BMSCs内ROS、MDA氧化损伤指标上升,SOD抗氧化指标下降(P<0.01);BMSCs培养上清液IL-1β、GM-CSF和SCF含量明显下降(P<0.01)。结论衰老骨髓基质细胞抑制造血细胞增殖、分化能力,其机制可能与骨髓基质细胞氧化损伤,分泌活性因子改变有关。

关键词：衰老造血微环境骨髓基质细胞造血细胞,增殖分化

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SIRT1/NF-κB信号轴在人参皂苷Rg_1延缓D-半乳糖致衰老模型大鼠造血干/祖细胞衰老过程中的作用

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中草药 2016年第22期47卷 4016-4020页

作者：李渊周玥王亚平王建伟何颖红丁继超赵文珍杨勇琴王慧杰大理大学组织学与胚胎学教研室云南省细胞生物学重点实验室云南大理671000 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的探讨SIRT1／NF-κB信号轴在人参皂苷Rgl对抗衰老模型大鼠造血干／祖细胞衰老中的作用。方法6～8周雄性SD大鼠50只，随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rgl对照组、人参皂苷Rgl治疗组和人参皂苷Rg，预防组，每组10只。以连续42 d sc D... 详细信息

目的探讨SIRT1／NF-κB信号轴在人参皂苷Rgl对抗衰老模型大鼠造血干／祖细胞衰老中的作用。方法6～8周雄性SD大鼠50只，随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rgl对照组、人参皂苷Rgl治疗组和人参皂苷Rg，预防组，每组10只。以连续42 d sc D-半乳糖（D-gal）制备衰老动物模型，人参皂苷Rg1各组ip给药不同时间，药物注射完成第2天，免疫磁性分选法分离纯化各组Sca-1^＋造血干／祖细胞（HSC／HPC），衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色、流式细胞周期分析和造血祖细胞混合集落（CFU-Mix）培养观察人参皂苷Rg1对Sca-1^＋ HSC／HPC抗衰老的生物学作用。荧光定量PCR及Western blotting检测衰老调控分子SIRTl、NF-κB mRNA及蛋白的表达。结果与模型组比较，人参皂苷Rgl治疗组和预防组SA-β-Gal染色阳性率、G0／G1期细胞比例下降，生成CFU-Mix数增高，SIRTlmRNA及蛋白表达上调，NF-κB mRNA及蛋白表达下调；人参皂苷Rgl预防组各指标变化均较人参皂苷Rgl治疗组明显。结论SIRTl／NF-κB信号轴在人参皂苷Rgl对抗D-gal致衰老模型大鼠HSC／HPC衰老过程中发挥重要作用，人参皂苷Rgl具有抗HSC／HPC衰老作用。

关键词：人参皂苷Rgl 去乙酰化酶沉默调节因子1 核转录因子-κB 造血干／祖细胞衰老

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D-半乳糖诱导衰老小鼠睾丸结构与功能变化及其氧化应激相关机制

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中国组织化学与细胞化学杂志 2016年第6期25卷 476-481,500页

作者：汪子铃邱竹陈雄斌陈粼波侯吉颖姚辉向玥宋小英熊丽溶夏婕妤王璐王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的建立D-半乳糖(D-gal)致小鼠衰老模型,探讨睾丸结构与功能变化及相关机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为衰老组和对照组。衰老组小鼠皮下注射D-gal;对照组等时等量注射生理盐水。模型复制完成第2d,采集小鼠内眦静脉血测定血清睾酮水平... 详细信息

目的建立D-半乳糖(D-gal)致小鼠衰老模型,探讨睾丸结构与功能变化及相关机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为衰老组和对照组。衰老组小鼠皮下注射D-gal;对照组等时等量注射生理盐水。模型复制完成第2d,采集小鼠内眦静脉血测定血清睾酮水平;取小鼠睾丸测定睾丸指数;石蜡切片HE染色观察睾丸组织形态学;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测生精细胞衰老;TUNEL法检测生精细胞凋亡;制备睾丸组织匀浆上清,ELISA检测TNF-α、IL-1β、和IL-6的水平;硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量;酶学法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性;ABTS法检测总抗氧化能力(TAC);Western blotting检测衰老相关蛋白p21与p53表达水平。结果衰老模型组小鼠血清睾酮水平显著下降,睾丸脏器指数无明显差异,生精小管结构紊乱,生精细胞病理损伤明显,SA-β-Gal染色阳性的生精细胞百分率上升,细胞凋亡指数上升,睾丸匀浆上清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著上升,SOD活性、TAC能力显著降低,MDA含量上升,睾丸组织中衰老相关蛋白:p21与p53表达水平显著提高。结论 D-gal建立的衰老动物模型可见睾丸形态结构与功能出现衰老的生物学表现,其机制可能与氧化应激损伤及p21/p53通路激活有关。

关键词： D-半乳糖衰老睾丸细胞凋亡氧化应激 p21 p53

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N^ω硝基左旋精氨酸甲酯对大鼠海马CA1区毛细血管的影响

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第三军医大学学报 2016年第12期38卷 1385-1391页

作者：綦英强王三荣晁凤蕾张蕾马晶况超陈林木张毅梁芯唐静张杨朱殷青罗艳敏唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响。方法内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham... 详细信息

目的探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响。方法内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham组)每日给予5μL生理盐水侧脑室注射,持续4周。然后用Morris水迷宫测试大鼠空间学习和记忆能力,用试剂盒检测海马组织中NOS活性及NO含量,用体视学方法测定海马和海马CA1区总体积、海马CA1区毛细血管总长度、总表面积和总体积。结果水迷宫实验中L-NAME组的潜伏期显著长于Sham组(P=0.006);L-NAME组海马组织中的NOS活性及NO含量均显著低于Sham组(P<0.01);L-NAME组海马体积、CA1区体积与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05);L-NAME组CA1区毛细血管总长度、毛细血管总表积、毛细血管总体积均较Sham组显著减少(P<0.05)。结论 L-NAME可以导致大鼠空间学习、记忆能力下降和大鼠海马CA1区毛细血管总长度、总表面积以及总体积减少。

关键词： Nω硝基左旋精氨酸甲酯内源性一氧化氮海马CA1区毛细血管体视学

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衰老调控因子SIRT6在人参皂苷Rg1延缓造血干/祖细胞衰老中的作用

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基础医学与临床 2016年第2期36卷 179-185页

作者：周玥王亚平王建伟丁继超大理学院组织胚胎学教研室云南大理671000 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨SIRT6在人参皂苷Rg1延缓造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老中的作用。方法三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导Sca-1+HSC/HPC衰老,构建HSC/HPC衰老体外模型,Sca-1+HSC/HPC连续移植3代,构建HSC/HPC衰老体内模型。给予体内外衰老模型Rg1预防和治... 详细信息

目的探讨SIRT6在人参皂苷Rg1延缓造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老中的作用。方法三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导Sca-1+HSC/HPC衰老,构建HSC/HPC衰老体外模型,Sca-1+HSC/HPC连续移植3代,构建HSC/HPC衰老体内模型。给予体内外衰老模型Rg1预防和治疗衰老。造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色,分析Rg1体内外调控Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。荧光定量PCR及Western blot检测衰老调控因子SIRT6 mRNA及蛋白的表达。结果与体内外衰老模型组相比,Rg1治疗及预防衰老处理后Sca-1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降(P<0.05),CFU-Mix数量升高(P<0.05);SIRT6 mRNA及蛋白表达上调(P<0.05);Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论Rg1在体内外均可通过调控SIRT6发挥其延缓Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。

关键词： SIRT6 Sca-1+HSC/HPC 衰老人参皂苷Rg1

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去乙酰化酶1在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞衰老中的作用

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解剖学杂志 2016年第1期39卷 5-9页

作者：周玥王亚平王建伟丁继超大理大学组织学与胚胎学教研室大理671000 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的：探讨去乙酰化酶1（SIRT1）在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞（HSC/HPC）衰老中的作用。方法：免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠Sca-1^＋HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。^60Co γ射线致死剂量辐射雌性受体... 详细信息

目的：探讨去乙酰化酶1（SIRT1）在人参皂苷Rg1体内正向调控造血干/祖细胞（HSC/HPC）衰老中的作用。方法：免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠Sca-1^＋HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。^60Co γ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组，照射对照组、衰老模型组、Rg1治疗衰老组和Rg1预防衰老组。衰老相关β半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色、造血祖细胞混合集落（CFU-Mix）培养和细胞周期分析检测Rg1体内调控Sca-1^＋HSC/HPC衰老的作用。荧光定量PCR及免疫印迹检测衰老调控分子SIRT1、核因子-κB（NF-κB）mRNA及蛋白的表达。结果：连续移植后受体鼠Sca-1^＋HSC/HPC出现细胞衰老特征，随移植代数的增加，Sca-1^＋HSC/HPC G0/G1期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高，CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比，Rg1治疗衰老组及Rg1预防衰老组受体鼠Sca-1^＋HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降，CFU-Mix数量升高；SIRT6 mRNA及蛋白表达上调，NF-κB mRNA及蛋白表达下调；Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论：Rg1可能通过调控SIRT1/NF-κB信号轴发挥其在连续移植过程中抗Sca-1^＋HSC/HPC衰老的作用。

关键词：人参皂苷Rg1 去乙酰化酶1 核因子-κB Sca-1^+造血干/祖细胞衰老

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构建糖氧剥夺模型大鼠少突胶质细胞体外培养与分离纯化

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神经解剖学杂志 2016年第5期32卷 601-606页

作者：孟赞唐勇彭彦乐山职业技术学院人体解剖学与组织胚胎学教研室重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:对原有少突胶质细胞祖细胞培养与分离纯化方法进行改进,以简单、高效获得少突胶质细胞并建立少突胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。方法:取SD乳鼠脑皮质,采用两种不同的细胞增殖法和两种不同的分离纯化法分... 详细信息

目的:对原有少突胶质细胞祖细胞培养与分离纯化方法进行改进,以简单、高效获得少突胶质细胞并建立少突胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。方法:取SD乳鼠脑皮质,采用两种不同的细胞增殖法和两种不同的分离纯化法分四组培养,分别为细胞因子增殖联合摇床震荡分离纯化法组,B104CM增殖联合摇床震荡分离纯化法组,细胞因子增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组,B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组。倒置显微镜下观察神经细胞形态学变化并进行细胞计数。A2B5和髓鞘碱性蛋白鉴定少突胶质细胞并分析其纯度。纯化后的少突胶质细胞祖细胞分化培养3 d后分四组培养,正常组正常培养,低氧组分三组,换无糖DMEM培养基,OGD 1、2、3 h。然后采用MTT比色法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞的凋亡率。结果:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法较其他3种培养方法收获的少突胶质细胞祖细胞数量多(P<0.05)。(2)A2B5和MBP特异性标记,细胞纯度可达到95%。(3)MTT结果显示:OGD 1 h少突胶质细胞的细胞活力即降低(P<0.05),随着缺氧时间延长细胞活力呈降低的趋势更加明显(P<0.05)。(4)流式细胞测细胞凋亡的结果显示:OGD 1 h、2 h、3 h,细胞的凋亡率分别为14.43%±0.20%,21.99%±0.42%和44.71%±0.20%,均高于正常对照组(6.86%±0.05%,P<0.05)。结论:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化培养法与其他三种方法比较实验操作简单,收获的少突胶质细胞祖细胞数量最多,可用于少突胶质细胞的培养。(2)OGD可致少突胶质细胞损伤,且与OGD持续时间密切相关,实验成功的建立OGD损伤模型。

关键词：少突胶质细胞原代培养细胞增殖细胞纯化 B104CM EDTA 糖氧剥夺模型

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