检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2013年第11期26卷 1604-1609,1616页

作者：陈萃孙可耿珊刘俊周玥王璐王建伟黄国宁王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016

目的探讨人参皂苷Rg1对辐射致造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,HSC/HPC)衰老的影响及其机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为假照射组、照射组和照射+Rg1组,照射组与照射+Rg1组利用6.5 Gy的X射线全身一次性辐射小鼠。照射... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rg1对辐射致造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,HSC/HPC)衰老的影响及其机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为假照射组、照射组和照射+Rg1组,照射组与照射+Rg1组利用6.5 Gy的X射线全身一次性辐射小鼠。照射+Rg1组于照射前第7天起连续经腹腔注射人参皂苷Rg1 20 mg/(kg·d),照射后继续注射同剂量人参皂苷Rg1直至处死;照射组同时注射等剂量的生理盐水;假照射组小鼠处理同照射组,但不照射。辐射后不同时间点处死各组动物,改良免疫磁性吸附细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法分离、纯化骨髓Sca-1+HSC/HPC并计数;SA-β-gal染色检测衰老细胞百分率;流式细胞术分析细胞周期;造血祖细胞混合集落(colony forming unit-mixture,CFU-Mix)体外培养评价人参皂苷Rg1对辐射小鼠HSC/HPC衰老的影响;彗星试验测定细胞DNA损伤;并检测细胞内SOD活性和MDA含量。结果经MACS分离纯化后,Sca-1+HSC/HPC的纯度可达93.66%,活性可达99.4%。照射组Sca-1+HSC/HPC数量显著降低,且恢复缓慢,照射+Rg1组Sca-1+HSC/HPC数量下降在照射后第3天和第7天得到阻止,与照射组比较,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.001);照射组SA-β-gal阳性细胞率明显高于假照射组和照射+Rg1组(P<0.001);照射组Sca-1+HSC/HPC与假照射组相比出现G1期阻滞,照射+Rg1组第3和第7天G1期细胞比例较照射组降低(P<0.05或P<0.01);照射组Sca-1+HSC/HPC形成CFU-Mix的数量明显低于假照射组(P<0.001),照射+Rg1组形成CFU-Mix的数量较照射组明显增加(P<0.001);照射组DNA彗星尾长和Olive尾矩均明显大于假照射组和照射+Rg1组(P<0.001);与假照射组相比,照射组Sca-1+HSC/HPC的SOD活性明显降低(P<0.001),MDA含量明显升高(P<0.001),与照射组相比,照射+Rg1组Sca-1+HSC/HPC SOD活性明显升高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.001)。结论辐射损伤可导致HSC/HPC衰老;人参皂苷Rg1具有抗辐射致HSC/HPC衰老的作用,其机制可能与抑制辐射致HSC/HPC氧化应激反应,减少氧化应激介导的DNA损伤密切相关。本实验为人参皂苷抗辐射损伤致细胞衰老提供了实验依据。

关键词：人参皂苷Rgl 造血干细胞造血祖细胞细胞衰老电离辐射 DNA损伤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人参皂苷Rg1在造血干／祖细胞连续移植中对抗细胞衰老的作用研究

引用

中国中药杂志 2013年第17期38卷 2848-2853页

作者：周玥王建伟姜蓉姚欣杨斌蔡世忠刘俊刘典锋王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016 云南省大理学院组织胚胎学教研室云南大理671000

目的:探讨人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞(HSC/HPC)连续移植中对抗细胞衰老的作用。方法:免疫磁性分选法分离纯化的雄性供体小鼠Sca-1+HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。60Coγ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组:对照组、衰老... 详细信息

目的:探讨人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞(HSC/HPC)连续移植中对抗细胞衰老的作用。方法:免疫磁性分选法分离纯化的雄性供体小鼠Sca-1+HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。60Coγ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组:对照组、衰老模型组、Rg1治疗衰老组、Rg1延缓衰老组。荧光定量PCR检测受体鼠骨髓细胞Y染色体(Sry基因)表达,确定受体鼠重建造血细胞来源;观察受体鼠存活时间及外周血血象指标的恢复,确定受体鼠造血功能重建情况及Rg1促进造血恢复情况;造血祖细胞混合性集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分析Sca-1+HSC/HPC衰老的生物学特点及Rg1体内调控Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。结果:雌性受体鼠重建造血细胞来源于雄性供体鼠;连续移植后受体鼠30 d存活率明显降低,外周血象恢复延缓,Sca-1+HSC/HPC出现细胞衰老特征:G0/G1期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高,CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比,Rg1治疗衰老组及Rg1延缓衰老组受体鼠30 d存活率,WBC,HCT,PLT增高,Sca-1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降,CFU-Mix数量升高。Rg1延缓衰老组变化较Rg1治疗衰老组明显。结论:人参皂苷Rg1在HSC/HPC连续移植过程中具有延缓和治疗Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。Rg1延缓衰老作用优于Rg1治疗衰老作用。

关键词：人参皂苷Rg1 造血干祖细胞抗衰老连续移植

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

白血病K562细胞株中CD34^+细胞群的分离及其生物学特性

引用

中国生物制品学杂志 2013年第1期26卷 22-26页

作者：刘俊张先平蔡世忠徐春燕王亚平林雪梅重庆医科大学组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的分离白血病K562细胞株中CD34+细胞群,并分析其生物学特征,为从干细胞角度治疗白血病提供实验依据。方法采用免疫磁性分选法分离K562细胞中CD34+细胞群,台盼蓝拒染法检测细胞活性;流式细胞术检测CD34+细胞比例及细胞周期;单细胞克隆... 详细信息

目的分离白血病K562细胞株中CD34+细胞群,并分析其生物学特征,为从干细胞角度治疗白血病提供实验依据。方法采用免疫磁性分选法分离K562细胞中CD34+细胞群,台盼蓝拒染法检测细胞活性;流式细胞术检测CD34+细胞比例及细胞周期;单细胞克隆培养检测CD34+细胞自我更新能力;RT-PCR法检测CD34+细胞分化相关指标促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony stimulatingfactor,GM-CSF)基因mRNA的转录水平;并检测CD34+细胞耐药蛋白P-gp(P-glycoprotein)的表达。结果免疫磁性分选法可有效分离出CD34+细胞群,细胞活性为99%～100%;分离的CD34+细胞含量占细胞总数的78.5%～85.3%,细胞大部分处于静止状态,G0/G1期细胞比例达80%左右,显著高于分离前的K562细胞;CD34+细胞群具有形成混合集落的能力;与K562细胞相比,CD34+细胞EPO和GM-CSF基因mRNA的转录水平明显下降(P<0.01),P-gp表达阳性。结论成功从K562细胞株中分离了CD34+细胞群,其具有自我更新和多向分化的能力,表明其具有白血病干/祖细胞的生物学特点。

关键词： K562细胞 CD34+细胞细胞分离生物学特性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人参多糖介导Wnt/β-catenin信号转导诱导人鼻咽癌细胞CNE-2的凋亡

引用

中国中药杂志 2013年第19期38卷 3332-3337页

作者：范家铭刘泽洪李静王亚平杨绿源黄江菊重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科重庆400016 重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,... 详细信息

目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1分别作用48 h后,流式细胞术检测其对CNE-2细胞凋亡的诱导作用;Hoechst-33258染色和电镜观察细胞的形态改变。Real-time PCR检测细胞β-catenin mRNA的表达。采用免疫荧光染色检测细胞中β-catenin,TCF4蛋白定位及表达量的变化。Western blot检测细胞中β-catenin,Bcl-2,Bax蛋白的变化。结果:CCK8法测得人参多糖能明显抑制CNE-2细胞的增殖,其抑制作用呈剂量、时间依赖性,GPS处理细胞48 h的IC50为0.39 g·L-1;质量浓度分别为0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1的GPS作用人鼻咽癌CNE-2细胞48 h后细胞凋亡率分别为(5.69±0.29)%,(10.3±0.63)%,(15.4±0.74)%,(35.7±1.86)%,与对照组(2.08±0.11)%比较均有显著性差异(P<0.05);Hoechst-33258染色结果显示细胞凋亡特征。电镜下可见0.4 g·L-1GPS诱导48 h后可使CNE-2细胞出现凋亡小体。Real-time PCR显示β-catenin mRNA表达明显降低。激光共聚焦结果显示人参多糖作用48 h后β-catenin和TCF4在胞核中表达明显减少,β-catenin表达区域由胞核向胞膜转移。Western blot结果显示经浓度梯度增加的人参多糖作用CNE-2细胞48 h后,β-catenin和抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱;而促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.05)。结论:人参多糖可明显抑制CNE-2细胞增殖促进细胞凋亡。Wnt/β-catenin信号通路的受阻可能是GPS诱导人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡的一个重要机制。

关键词：人参多糖 CNE-2细胞细胞增殖凋亡 Wnt β-catenin

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

当归多糖对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞的影响

引用

第三军医大学学报 2013年第8期35卷 779-783页

作者：关雪晶吴宏何晓莉姜蓉重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016

目的研究当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromalcell,BMSC)的保护作用。方法 BALB/c小鼠按随机数字表法分为10组,每组24只,共计240只。正常组不作任何处理,其余9组经X射线照射后分别... 详细信息

目的研究当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromalcell,BMSC)的保护作用。方法 BALB/c小鼠按随机数字表法分为10组,每组24只,共计240只。正常组不作任何处理,其余9组经X射线照射后分别给予生理盐水(NS)、2 mg/kg APS和8 mg/kg APS,给药至第7、14、21天计数小鼠外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)及骨髓单个核细胞(BMNC);观察BMSC生长达80%贴壁所需时间及形成的成纤维细胞集落(CFU-F)数量;流式细胞术检测BMSC细胞周期、凋亡率及表面黏附分子CD54、CD106的表达水平。结果与正常组比较,NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数明显减少(P<0.05);BMSC达80%贴壁所需时间明显延长,CFU-F数明显减少(P<0.05);G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例显著降低(P<0.05);BMSC细胞凋亡率明显增高(P<0.05);CD54、CD106表达明显降低(P<0.05)。2 mg/kg APS、8 mg/kg APS组与NS组相比,外周血各指标、BMNC数及CFU-F数明显增加(P<0.05);BMSC达80%融合时间显著缩短(P<0.05);G0/G1期比例明显降低,S期比例显著增加(P<0.05);凋亡率显著降低(P<0.05);CD54、CD106表达明显增高(P<0.05)。第21天8 mg/kg APS组各指标均恢复正常。结论 APS可能是通过提高BMSC贴壁及增殖能力,加速BMSC由G0/G1期向S期转换,降低BMSC凋亡率,上调CD54、CD106表达来促进辐射损伤后小鼠造血功能的恢复。

关键词：当归多糖辐射损伤骨髓基质细胞凋亡率黏附分子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人PGI基因siRNA慢病毒质粒的构建及对白血病细胞增殖的影响

引用

第三军医大学学报 2013年第1期35卷 20-23页

作者：赵亮李静魏强游智梅夏菁李丹阳陈地龙重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法 RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562... 详细信息

目的构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法 RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562、KG1-α、HL-60细胞中PGI mRNA和蛋白表达水平,筛选高表达PGI的白血病细胞系;构建人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照,经293T细胞包装后,获得可表达人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照;分别使用重组病毒(干扰组)、原始病毒(阴性对照组)和等量PBS(空白对照组)转染白血病KG1-α细胞,筛选稳定转染细胞株。RT-PCR和Western blot检测干扰组、阴性对照组及空白对照组KG1-α细胞PGI基因表达水平;CCK-8检测各组细胞增殖情况并作生长曲线。结果 PGI基因在白血病KG1-a细胞中高表达;成功构建了稳定低表达PGI的白血病细胞株(KG1-α-siPGI);低表达PGI基因的KG1-α细胞增殖能力较空白对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了低表达PGI基因的白血病KG1-α细胞株,干扰PGI基因的表达能够抑制KG1-α细胞的生长。

关键词：白血病慢病毒载体 RNA干扰细胞增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

体外磁铁定向迁移SPIO标记的间充质干细胞对大鼠脑缺血治疗的影响

引用

基础医学与临床 2013年第10期33卷 1302-1308页

作者：郑洁陈晓丹郑希王顺和重庆医科大学基础医学院病理学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨外加磁场定向迁移SPIO标记的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对移植治疗大鼠脑缺血的影响。方法体外培养BMSCs,SPIO标记BMSCs,用普鲁士蓝染色测定标记率;锥虫蓝染色测定细胞存活率;CCK法检测磁场对标记干细胞的增殖活力。建立大鼠... 详细信息

目的探讨外加磁场定向迁移SPIO标记的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对移植治疗大鼠脑缺血的影响。方法体外培养BMSCs,SPIO标记BMSCs,用普鲁士蓝染色测定标记率;锥虫蓝染色测定细胞存活率;CCK法检测磁场对标记干细胞的增殖活力。建立大鼠脑缺血模型,用尾静脉注射移植细胞;对移植后大鼠进行神经学评估;普鲁士蓝染色观察脑组织内标记细胞;TTC染色观察脑缺血面积;分光光度计检测脑组织铁含量。结果细胞标记率接近100%,普鲁士蓝染色观察磁性标记BMSCs静脉移植并加外加磁场组(ICSM组)脑组织内BMSCs明显多于未磁性标记BMSCs静脉移植组(ICS组)(P<0.05),移植7 d后ICSM组动物神经系统行为学评分明显改善(P<0.05),ICSM组脑组织内铁含量明显多于ICS组(P<0.05)。结论在体内和体外使用外加磁铁均可以定向迁移标记的BMSCs,明显的提高经尾静脉移植标记SPIO的BMSCs成功率。

关键词：磁场骨髓间充质干细胞超顺次氧化铁脑缺血迁移

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

MK-801诱导的精神分裂症小鼠行为学和胼胝体髓鞘的改变

引用

中国神经精神疾病杂志 2013年第11期39卷 641-645页

作者：修芸张蕾仇玄陈林卢伟彭超程国华晁凤蕾唐勇重庆医科大学生命科学研究院重庆医科大学基础医学院组织胚胎教研室重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室

目的探讨白质/髓鞘损伤在N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D aspartate,NMDA)受体阻断致精神分裂症(schizophrenia,SZ)中的作用。方法雄性C57 BL/6J小鼠(8周龄)48只,随机分为地卓西平马来酸盐(dizocilpine,MK-801)慢性给药M1组(0.25mg/kg)、M2组(0.50mg/kg)和M3组(1.00mg/kg)及对照组(生理盐水)。以Morris水迷宫、探孔和转棒测试检验小鼠行为学改变,运用免疫组化、透射电镜及体视学方法观察其胼胝体内髓鞘的改变。结果各模型组小鼠与对照组比较,空间学习记忆能力无明显下降(均P>0.05),M1和M3组小鼠较对照组表现出对新环境探索减少的SZ阴性症状;大脑胼胝体区MBP染色M1组(179±10)%、M2组(235±7)%、M3组(152±9)%小鼠较对照组(288±18)%均降低(均P<0.01),其内有髓神经纤维髓鞘出现板层分离、节段性脱髓鞘等病变,M3组小鼠胼胝体内损伤有髓神经纤维比例高于对照组[(22.42±4.24)%vs.(3.84±1.35)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论胼胝体脱髓鞘改变可能是MK-801慢性给药诱导SZ的病因之一。

关键词：精神分裂症 MK-801 NMDA阻断胼胝体脱髓鞘

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

miRNA-155对人乳腺癌MCF-7细胞TP53INP1表达及其增殖的影响

引用

中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1273-1277页

作者：张春梅邓华瑜重庆医科大学病理生理学教研室重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨miRNA-155对人乳腺癌MCF-7细胞TP53INP1表达及其增殖的影响。方法采用LipofectamineTM2000将miRNA-155 mimics(或带荧光无关序列阴性对照FAM-NC)转染雌激素受体(Estrogen receptor,ER)阳性人乳腺癌MCF-7细胞,并设空白对照组;RT-PCR法检测转染后miRNA-155的表达水平;CCK-8法检测miRNA-155对MCF-7细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测MCF-7细胞的凋亡率和增殖周期;Western blot法检测TP53INP1、Caspase-3及p21蛋白的表达水平。结果与空白对照组和阴性对照组相比,转染组miRNA-155的表达量明显增高;随着时间的延长,MCF-7细胞增殖活力逐渐增加;G1期细胞明显减少,S和G2期细胞增多,凋亡率明显降低;TP53INP1、Caspase-3激活型及p21蛋白的表达水平均明显降低。结论 miRNA-155能够抑制人乳腺癌MCF-7细胞TP53INP1蛋白的表达,进而抑制肿瘤细胞凋亡、促进细胞增殖,在乳腺癌发生发展中具有重要作用。

关键词： miRNA-155 TP53INP1 MCF-7细胞细胞增殖细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

ERK途径可能参与抗坏血酸诱导的神经干细胞向多巴胺能细胞分化

引用

第三军医大学学报 2013年第22期35卷 2430-2434页

作者：邓小兰晋贞超王健郑敏重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010

目的探讨抗坏血酸（ascorbic acid，AA）诱导神经干细胞（neural stem cells，NSCs）向多巴胺能神经元方向分化的作用并初步探索其机制。方法从12.5 d胚胎大鼠中脑获得NSCs，培养扩增后分为对照组和分别加入1、10、50、100、200 μmol/L... 详细信息

目的探讨抗坏血酸（ascorbic acid，AA）诱导神经干细胞（neural stem cells，NSCs）向多巴胺能神经元方向分化的作用并初步探索其机制。方法从12.5 d胚胎大鼠中脑获得NSCs，培养扩增后分为对照组和分别加入1、10、50、100、200 μmol/L AA处理组，比较NSCs向多巴胺能神经元分化结果；采用免疫细胞化学对NSCs以及分化后神经元进行鉴定和检测，RT-PCR检测酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）、多巴胺转运子（dopamine transporter，DAT）、SHH、Nurr1、Ptx3 mRNA表达；在AA诱导分化中加入ERK阻断剂 PD98059，以探讨ERK通路在分化中的作用。结果获得大量的神经球并且表达nestin强阳性；AA处理组比对照组表现出较强的多巴胺能分化，其中100 μmol/L AA诱导组表达TH和DAT阳性细胞数量比对照组明显增加（P〈0.05），增加30～50倍；AA诱导增加了Nurr1、TH、DAT、SHH mRNA的表达，ERK抑制剂PD98059能抑制AA诱导后Nurr1、TH、DAT mRNA的表达而不影响SHH mRNA表达（P〈0.05 ）。结论抗坏血酸能诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元，ERK途径可能是AA诱导过程中参与多巴胺能分化的途径之一，Nurr1基因可能参与到ERK途径中或者是其下游基因。

关键词：神经干细胞分化促分裂原活化蛋白激酶细胞外信号调节激酶通路信号转导

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：