检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2009年第1期25卷 49-52页

作者：汪少华沈宜李静向自武范维珂陈黎重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测... 详细信息

目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测顺铂作用后H22细胞中Fas及exosomes免疫后脾淋巴细胞FasL的mRNA表达水平,Western blot检测顺铂对H22细胞Fas的蛋白表达水平的影响。以小鼠肝癌H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,观察顺铂联合exosomes治疗对小鼠生存期的影响。结果:顺铂抑制H22细胞生长呈量效关系;exosomes免疫小鼠可诱导产生针对H22细胞的CTL反应,经2.5mg/L顺铂预处理24h的H22细胞对CTL杀伤的敏感性增强(P<0.05)。顺铂在mRNA和蛋白水平,显著增强H22Fas的表达;exosomes免疫小鼠后,脾淋巴细胞FasL表达增加。顺铂联合exosomes组小鼠生存期较单独治疗组及对照组明显延长(P<0.05)。结论:顺铂与exosomes联合治疗有协同抑制肿瘤的作用,产生协同作用的机制与增强CTL活性有关。

关键词：顺铂 exosomes 联合治疗肿瘤疫苗

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当归多糖促进骨髓移植小鼠造血功能重建及其机制研究

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陆军军医大学学报 2022年第16期44卷 1621-1628页

作者：牛雪芳廖奎汪子铃侯吉颖曾娣肖含先之杜坤航王璐王亚平重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院放射治疗室重庆400016

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对接受供体骨髓细胞移植后受体小鼠的造血功能重建及其初步机制。方法取10只20~25 g雄性C57BL/6J小鼠作为供体小鼠,提取其骨髓细胞;将30只8~10周龄同系受体雌性小鼠经8.0 Gy的... 详细信息

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对接受供体骨髓细胞移植后受体小鼠的造血功能重建及其初步机制。方法取10只20~25 g雄性C57BL/6J小鼠作为供体小鼠,提取其骨髓细胞;将30只8~10周龄同系受体雌性小鼠经8.0 Gy的X射线(一次性致死剂量)全身辐射后,将供体小鼠的骨髓细胞通过尾静脉输入受体小鼠体内来构建小鼠骨髓移植模型,随后采用简单随机化法将受体小鼠分为3组,每组10只。对照组(Ctrl组):受体小鼠辐射后不移植骨髓细胞;骨髓移植组(BMT组):受体小鼠辐射后移植骨髓细胞(5×10^(6)个/只);骨髓移植+当归多糖组(TASP组):辐射剂量与移植骨髓细胞数同骨髓移植组,同时给受体小鼠腹腔注ASP(100 mg/kg×9 d)。期间动态测量受体小鼠体质量变化。移植骨髓细胞后第9天,PCR方法鉴定受体鼠脾集落细胞和骨髓细胞的Y染色体基因。采集受体小鼠眼眶血,检测白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)数量。取受体小鼠股骨,计数每只股骨有核细胞数,流式细胞术检测骨髓细胞周期。培养受体鼠骨髓基质细胞,观察基质细胞贴壁情况,EDU法检测骨髓基质细胞增殖能力,并计数成纤维细胞集落生成单位(CFU-F)。ELISA法检测受体鼠血清和骨髓基质细胞培养上清液中相关造血因子含量。结果对照组小鼠7 d内全部死亡,BMT组与TASP组小鼠全部存活。两个移植组的小鼠体质量5~6 d降至最低后开始恢复,TASP组恢复更快(P<0.05)。在雌性受体小鼠脾集落细胞和骨髓造血细胞中检测到Y染色体基因。TASP组小鼠外周血WBC、RBC、HGB数量与每只股骨有核细胞数均显著高于BMT组(P<0.05;P<0.01),且骨髓细胞G_(0)/G_(1)期细胞比例下降,S期和G_(2)/M期细胞比例增高(P<0.05)。TASP组受体小鼠的骨髓基质细胞贴壁数量、增殖能力和形成CFU-F集落数量也明显高于BMT组(P<0.05),且小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素3(IL-3)以及骨髓基质细胞培养上清液中GM-CSF和干细胞因子(SCF)含量显著增高(P<0.05)。结论ASP可促进移植骨髓细胞在受体小鼠体内造血功能的重建,其初步机制可能与改善造血微环境和促进造血因子分泌有关。

关键词：当归多糖骨髓移植造血功能重建造血微环境造血因子

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人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖的影响

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第三军医大学学报 2014年第21期36卷 2167-2172页

作者：李丹阳夏菁冯子强石庆强游智梅刘泽洪陈地龙李静重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、... 详细信息

目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组。培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达。用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性。结果人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100μmol/L为最适作用浓度,7 d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7 d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-EPOR表达明显下调,Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调,而Bax、Cleaved Caspase-3表达增高,P53及P16无变化;然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加,Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3的表达没有变化。结论 TSPG能下调细胞内由EPOR介导的Jak-STAT通路相关蛋白的表达,并降低EPOR的活性,进而下调Bcl-2、上调Bax和Cleaved Caspase-3来促进细胞凋亡;而添加了EPO后这种作用被拮抗,抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。

关键词：人参总皂苷 KG1-α细胞促红细胞生成素细胞凋亡细胞衰老

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人参皂苷Rg1对D-半乳糖所致小鼠心肌损伤的保护作用

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第三军医大学学报 2021年第11期43卷 1074-1079页

作者：李赓汪子铃候吉颖黄彩虹肖含先之曾娣姜蓉王璐王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的探讨人参皂苷Rg1对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)所致小鼠心肌损伤的保护作用和射D-gal(200 mg·kg^(-1)·d^(-1)×42 d);Rg1干预模型组:按D-gal损伤模型组小鼠处理,从建模第16天起腹腔注射Rg1(40 mg·kg^(-1)·... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rg1对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)所致小鼠心肌损伤的保护作用和射D-gal(200 mg·kg^(-1)·d^(-1)×42 d);Rg1干预模型组:按D-gal损伤模型组小鼠处理,从建模第16天起腹腔注射Rg1(40 mg·kg^(-1)·d^(-1)×26 d);对照组:腹腔注射等量生理盐水42 d;Rg1对照组:按对照组处理小鼠16 d,再腹腔注射Rg1(剂量同Rg1干预模型组)。各组处理完成后第2天,取心脏测定脏器指数;石蜡切片,HE染色观察心肌组织病理学,透射电镜观察心肌纤维超微结构;酶标比色法检测心肌组织匀浆中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)表达量;Western blot检测心肌组织中Nrf2、Keap1、HO-1蛋白表达。结果D-gal损伤模型组小鼠心脏指数明显升高(P<0.01);心肌纤维间胶原纤维沉积量增加;肌原纤维束排列紊乱,心肌纤维直径显著增大,线粒体形态异常伴有肿胀;心肌组织的AST、LDH活力显著升高,T-SOD、CAT活性显著降低,MDA表达量显著升高(P<0.05);Nrf2、HO-1蛋白表达量显著降低(P<0.05),Keap1蛋白表达量无显著变化。Rg1干预模型组小鼠心脏指数明显降低(P<0.01);胶原纤维沉积量减少,肌原纤维束排列较为整齐,心肌纤维直径与正常对照组相比无统计学差异,线粒体形态基本正常,无明显肿胀;AST、LDH活力显著降低,T-SOD、CAT活性显著升高,MDA表达量显著降低(P<0.05);Nrf2、HO-1蛋白表达量显著升高,Keap1蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论Rg1能有效拮抗D-gal对小鼠心肌组织结构和超微结构的损伤,其机制可能与抑制氧化应激和上调Nrf2抗氧化信号通路有关。

关键词：人参皂苷Rg1 D-半乳糖心肌氧化应激损伤 Nrf2信号通路

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结缔组织对人胎骨髓间充质干细胞向上皮分化的诱导作用

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解剖学报 2011年第1期42卷 119-123页

作者：田静段江洁张建华姜蓉汪维伟重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学临床学院产科重庆400016

目的探讨结缔组织诱导人胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为上皮细胞的机制。方法取20例孕16～20周因故引产胎儿,10例选择性剖宫产妇羊膜,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测去上皮羊膜和胎儿肠壁结缔组织中表皮生长因子(EGF)的含量;分离、... 详细信息

目的探讨结缔组织诱导人胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为上皮细胞的机制。方法取20例孕16～20周因故引产胎儿,10例选择性剖宫产妇羊膜,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测去上皮羊膜和胎儿肠壁结缔组织中表皮生长因子(EGF)的含量;分离、培养、扩增胎儿BMSCs;将4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记的第3代BMSCs(P3-BMSCs)种植于羊膜上,分别加入肠壁结缔组织上清液、羊膜上清液(均含EGF 30μg/L)、外源性EGF 30ug/L、30ng/L、完全培养基(1～5组)中。培养7d后,免疫组织化学和激光扫描共焦显微镜检测BMSCs表达的细胞角蛋白(CK)及CK20。结果每100mg肠壁结缔组织及羊膜中EGF含量分别为(320.22±0.257)pg、(299.20±0.994)pg。羊膜与肠壁结缔组织上清液或羊膜上清液联合诱导BMSCs后,其CK和CK20阳性细胞率均明显强于羊膜与外源性EGF诱导组以及单纯羊膜诱导组,P<0.01。羊膜与肠壁结缔组织上清液诱导后BMSCs表达CK20高于羊膜与羊膜上清液组,P<0.05。羊膜诱导组与外源性EGF联合诱导组间的差异无统计学意义。结论直接接触可能是羊膜结缔组织诱导BMSCs向上皮细胞分化的机制之一。肠壁结缔组织上清液和羊膜上清液均能联合羊膜诱导BMSCs向上皮细胞及具有肠上皮细胞表型的细胞分化。

关键词：羊膜结缔组织骨髓间充质干细胞诱导分化免疫组织化学人胎

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骨髓间充质干细胞移植对大鼠溃疡性结肠炎的修复

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第四军医大学学报 2009年第23期30卷 2761-2764页

作者：段征陈晓云徐艳华姜蓉汪维伟重庆医科大学组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:观察移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠病变的修复.方法:分离培养、荧光标记SD大鼠BMSCs.A,B,C组大鼠制作UC模型,D组为非模型组.4组大鼠均经尾静脉注射1 mL液体:A组为生理盐水;B,D组为BMSCs;C组为加表皮生长... 详细信息

目的:观察移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠病变的修复.方法:分离培养、荧光标记SD大鼠BMSCs.A,B,C组大鼠制作UC模型,D组为非模型组.4组大鼠均经尾静脉注射1 mL液体:A组为生理盐水;B,D组为BMSCs;C组为加表皮生长因子(EGF)的BMSCs.移植后3,7,14 d各处死5只大鼠,荧光显微镜下观察荧光标记BMSCs在结肠的分布,光镜观察结肠病变以及TNF-α和IL-10的表达.结果:移植第3日各组均可见BMSCs分布于结肠黏膜,病灶处多于正常结肠黏膜.移植第14日,B,C组结肠BMSCs高于D组(P<0.05);与A组比较,B,C组结肠黏膜高表达IL-10,低表达TNF-α,其黏膜损伤修复程度也明显优于A组.B,C组间差异不明显(P>0.05).结论:移植BMSCs可促进UC大鼠结肠损伤的修复.单次给予EGF不能促进BMSCs向病灶的迁移和损伤的修复.

关键词：骨髓间充质干细胞移植溃疡性结肠炎

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人参总皂苷对PC12细胞突起生长及GAP-43表达的影响

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中国生物制品学杂志 2012年第1期25卷 47-49页

作者：李晗宇王顺和郑娟姜蓉重庆医科大学病理学教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的探讨人参总皂苷(Total saponin of panax ginseng,TSPG)对神经细胞PC12突起生长以及生长相关蛋白-43(Growth-associated protein-43,GAP-43)表达的影响。方法以0、10、20、40、80 mg/L TSPG作用于体外培养的PC12细胞,相差显微镜观察细胞的形态学改变,透射电镜观察细胞突触连接情况,显微镜测微尺测量突起长度,免疫组织化学和Western blot法检测GAP-43的表达。结果与对照组相比,TSPG处理组分化的PC12细胞直径明显增大,突起长度明显增长,并形成突触连接,GAP-43表达水平增加,以40 mg/L组最为明显。结论 TSPG可诱导PC12细胞发生分化、突起生长延伸,并可上调GAP-43的表达水平。

关键词：人参总皂苷神经元突起生长 GAP＊43蛋白

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人参皂苷Rg1缓解D-半乳糖致衰老大鼠脾损伤

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基础医学与临床 2015年第10期35卷 1308-1313页

作者：张晶邵月张力恒冉瑞图孙嘉政张岩岩贾道勇张梦思王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016

目的探讨人参皂苷Rg1对D-半乳糖致衰老大鼠脾组织结构与功能的影响及其机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、衰老模型组(D-半乳糖120 mg/kg,qd×42 d)、Rg1干预组(建模,第15天起Rg1 20 mg/kg,qd×28 d)、Rg1对照组(0.9%氯化... 详细信息

目的探讨人参皂苷Rg1对D-半乳糖致衰老大鼠脾组织结构与功能的影响及其机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、衰老模型组(D-半乳糖120 mg/kg,qd×42 d)、Rg1干预组(建模,第15天起Rg1 20 mg/kg,qd×28 d)、Rg1对照组(0.9%氯化钠注射液+Rg1)。取脾脏测定脾指数,石蜡切片观察脾脏显微形态,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脾细胞衰老,CCK-8检测脾细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力,ELISA检测IL-2、IL-6和晚期糖基化终产物(AGEs)含量,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS),酶法检测丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,Western blot检测细胞衰老相关蛋白P53、P21及Rb的表达。结果与衰老模型组比较,Rg1干预组大鼠脾指数、脾脏白髓面积比及脾细胞增殖能力提高(P<0.05);脾细胞分泌IL-2、IL-6水平和SOD活性明显增强(P<0.01);脾细胞的SA-β-Gal阳性率、ROS和MDA含量下降(P<0.01);AGEs下降(P<0.05);P53、P21及RB蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论人参皂苷Rg1能缓解D-半乳糖致衰大鼠脾损伤,其机制可能与抑制氧化损伤和下调P53-P21-RB信号通路有关。

关键词：人参皂苷Rg1 衰老模型脾脏大鼠

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人参皂苷Rg1对大鼠脾细胞功能的影响

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解剖学杂志 2015年第4期38卷 392-392,449页

作者：孙嘉政张晶邵月张力恒冉瑞图贾道勇张梦思张岩岩王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室

目的:探讨人参皂苷Rg1对大鼠脾结构与功能的影响及其初步机制.方法:Rg1注射组取脾,测定脾指数;石蜡切片H-E染色观察脾组织结构,计算脾白髓占脾组织切片的比例;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脾细胞衰老情况;分离脾细胞,CCK-... 详细信息

目的:探讨人参皂苷Rg1对大鼠脾结构与功能的影响及其初步机制.方法:Rg1注射组取脾,测定脾指数;石蜡切片H-E染色观察脾组织结构,计算脾白髓占脾组织切片的比例;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脾细胞衰老情况;分离脾细胞,CCK-8检测其对刀豆蛋白A刺激的增殖能力;流式细胞术检测脾细胞增殖周期和细胞凋亡;ELISA检测脾细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-2(IL-2)与白细胞介素-6(IL-6)的能力和晚期糖基化终产物(AGEs)、细胞活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫印迹检测细胞衰老相关蛋白p53、p21、Rb的变化.结果:注射人参皂苷Rg1可使大鼠脾指数增加,脾白髓面积增加,脾细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力提高,脾细胞S期比例提高,G1期及G2/M期比例相对下降,细胞凋亡减少,ROS、MDA水平降低,脾细胞分泌TNF-α、GM-CSF、IL-2与IL-6的能力增加,SOD活性提高,P21、P53、Rb蛋白表达下调.结论:人参皂苷Rg1具有保护脾结构和激活脾细胞功能的作用.

关键词：人参皂苷Rg1 脾结构功能大鼠

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衰老模型骨髓基质细胞抑制造血细胞增殖分化

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基础医学与临床 2016年第1期36卷 12-18页

作者：景鹏伟胡文煦宋小英张岩岩贾道勇王亚平王璐重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016

目的研究衰老骨髓基质细胞对骨髓造血细胞增殖分化能力的影响,为阐述机体造血微环境衰老对造血干/祖细胞增殖的影响提供实验依据。方法全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓基质细胞,分为对照组和衰老组。衰老组:常规培养基内加入30 mg/m L D-... 详细信息

目的研究衰老骨髓基质细胞对骨髓造血细胞增殖分化能力的影响,为阐述机体造血微环境衰老对造血干/祖细胞增殖的影响提供实验依据。方法全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓基质细胞,分为对照组和衰老组。衰老组:常规培养基内加入30 mg/m L D-半乳糖作用48 h。CCK-8法测定BMSCs增殖;流式细胞术分析细胞周期;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老BMSCs百分率;Western blot检测P16、P21和P53蛋白表达。骨髓造血细胞与BMSCs共培养,集落计数检测髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)增殖分化。ELISA检测BMSCs培养上清液中IL-1β、GM-CSF和SCF含量;DCFH-DA流式荧光检测BMSC活性氧簇(ROS)水平;酶学法检测BMSCs内过氧化物丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与对照组相比,D-半乳糖诱导BMSCs衰老,细胞阻滞于G0/G1期(P<0.01),增殖能力显著下降,SA-β-Gal染色阳性率升高(P<0.01);衰老相关蛋白P16、P21和P53表达明显上调(P<0.01)。与衰老BMSCs共培养的骨髓造血细胞增殖分化能力减弱。衰老BMSCs内ROS、MDA氧化损伤指标上升,SOD抗氧化指标下降(P<0.01);BMSCs培养上清液IL-1β、GM-CSF和SCF含量明显下降(P<0.01)。结论衰老骨髓基质细胞抑制造血细胞增殖、分化能力,其机制可能与骨髓基质细胞氧化损伤,分泌活性因子改变有关。

关键词：衰老造血微环境骨髓基质细胞造血细胞,增殖分化

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