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激光杂志 2012年第1期33卷 69-71页

作者：刘嫒董志肖晓秋唐红王乐乐程玉洁重庆医科大学药学院药理学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学生命科学研究院重庆400016

目的:构建含有人二型大麻素受体(CB2)基因的真核表达载体,并实现其在HEK293细胞的表达。方法:首先采用PCR方法从含有CB2基因的质粒pcDNA3.1(+)-CB2中扩增获得人的CB2基因,再采用基因重组技术将CB2的DNA片段插入真核表达载体pIRES2-EGFP... 详细信息

目的:构建含有人二型大麻素受体(CB2)基因的真核表达载体,并实现其在HEK293细胞的表达。方法:首先采用PCR方法从含有CB2基因的质粒pcDNA3.1(+)-CB2中扩增获得人的CB2基因,再采用基因重组技术将CB2的DNA片段插入真核表达载体pIRES2-EGFP。将获得的pIRES2-EGFP-CB2重组子转染HEK293细胞,应用荧光显微镜观察EGFP的表达情况,RT-PCR和报告基因检测CB2的表达情况。结果:酶切和测序结果验证真核表达载体pIRES2-EGFP-GB2构建成功。可在荧光显微镜下观察到转染HEK293细胞表达的绿色荧光;RT-PCR和双荧光素酶报告基因法检测证明CB2蛋白在真核细胞中成功表达;CB2受体激动剂JWH-015能显著逆转腺苷酸环化酶激动剂forskolin诱发的荧光素酶活性增加。结论:成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-CB2,为进一步研究CB2基因的生理学和病理生理学功能及调控机制奠定了实验基础。

关键词： CB2受体转染报告基因

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环氧化酶2在铝负荷致大鼠海马神经元损伤中的作用

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中国病理生理杂志 2012年第9期28卷 1695-1698页

作者：吴柯万立华谢灵瑶杨俊卿重庆医科大学药学院重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016

目的:研究环氧化酶2(COX-2)在铝盐致大鼠海马神经元损伤中的作用。方法:原代海马神经元培养7 d,予以铝盐负荷(终浓度200μmol.L-1)建立大鼠海马神经元损伤模型,以COX-2特异性干扰腺病毒(MOI=100)转染神经元,Western blotting检测COX-2... 详细信息

目的:研究环氧化酶2(COX-2)在铝盐致大鼠海马神经元损伤中的作用。方法:原代海马神经元培养7 d,予以铝盐负荷(终浓度200μmol.L-1)建立大鼠海马神经元损伤模型,以COX-2特异性干扰腺病毒(MOI=100)转染神经元,Western blotting检测COX-2蛋白表达水平,酶化学法检测海马神经元超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率及MTT值,倒置荧光显微镜观察海马神经元病理形态变化。结果:COX-2特异性干扰腺病毒转染的神经元COX-2蛋白表达下降,SOD活性、MDA含量、LDH漏出率、MTT值以及大鼠海马神经元的形态和结构未见明显异常变化,但其明显提高了铝盐负荷基础上的海马神经元存活率和SOD活性,显著降低了LDH漏出率和MDA含量,并改善了铝盐负荷后神经元的病理学形态。结论:海马神经元COX-2表达的适度沉默,不会影响海马神经元的形态和功能,但对于铝负荷导致的神经元损伤有保护作用。

关键词：环氧化酶2 神经元损伤铝

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COX-2抑制剂对慢性铝过负荷大鼠海马5-脂氧酶表达的影响

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中国老年学杂志 2012年第14期32卷 2981-2983页

作者：苏强杨俊卿唐捷南充市中心医院药剂科四川南充637000 重庆医科大学药学院药理教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室

目的探讨COX-2抑制剂美洛昔康对慢性铝过负荷大鼠海马5-LO表达的影响。方法葡萄糖酸铝灌胃给予Wistar大鼠,1次/d,每周5 d,连续20 w,建立慢性铝过负荷致神经元退变大鼠模型。美洛昔康(1和3 mg/kg),在每次给予铝盐后30 min灌胃给予。RT-PC... 详细信息

目的探讨COX-2抑制剂美洛昔康对慢性铝过负荷大鼠海马5-LO表达的影响。方法葡萄糖酸铝灌胃给予Wistar大鼠,1次/d,每周5 d,连续20 w,建立慢性铝过负荷致神经元退变大鼠模型。美洛昔康(1和3 mg/kg),在每次给予铝盐后30 min灌胃给予。RT-PCR检测大鼠海马5-LO mRNA的表达变化,Western印迹方法检测5-LO蛋白表达情况。结果慢性铝过负荷致大鼠海马5-LO mRNA和蛋白表达明显增加。美洛昔康能明显阻遏慢性铝过负荷诱导的大鼠海马5-LO mRNA和蛋白表达的增加。结论 COX-2抑制剂明显下调慢性铝过负荷大鼠海马5-LO表达。

关键词： 5-LO mRNA和蛋白慢性铝过负荷神经元退变美洛昔康

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溴吡斯的明口腔崩解片的研制及质量控制

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四川大学学报（医学版） 2012年第3期43卷 458-461,477页

作者：张梨谭群友程训官王红胡霓霓张景勍重庆医科大学药物高校工程研究中心和生物化学与分子药理学重点实验室 400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所胸外科重庆400042 重庆医科大学药物化学与生物材料研究室 400016

目的制备口感良好的溴吡斯的明口腔崩解片,并优化处方。方法采用溶剂蒸发-沉积法制备固体分散体掩盖药物苦味,以崩解时间为指标,采用星点设计-效应面法优化处方。结果制备的口腔崩解片表面完整光洁,口感良好,能在30s内崩解完全。在水中0... 详细信息

目的制备口感良好的溴吡斯的明口腔崩解片,并优化处方。方法采用溶剂蒸发-沉积法制备固体分散体掩盖药物苦味,以崩解时间为指标,采用星点设计-效应面法优化处方。结果制备的口腔崩解片表面完整光洁,口感良好,能在30s内崩解完全。在水中0.5min内的药物溶出率约为8.5%,释药量约为2.5mg,低于苦味阈值(约3mg);在0.1mol/L盐酸介质中,2min累积溶出率大于95%。结论制备的口腔崩解片处方合理,工艺可行,方便患者服用。

关键词：溴吡斯的明星点设计效应面法口腔崩解片

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吴茱萸碱磷脂复合物的制备、表征及体外抗肿瘤活性的研究

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中国药学杂志 2012年第7期47卷 517-523页

作者：柳珊谭群友王红廖红张景勍重庆医科大学药物高校工程研究中心和生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所胸外科重庆400042

目的制备吴茱萸碱磷脂复合物,表征其理化性质,并初步考察其体外抗肿瘤活性。方法采用溶剂挥发法制备吴茱萸碱磷脂复合物,用星点设计-效应面法优化其制备工艺,并考察其表观溶解度、粒径和Zeta电位,用红外光谱仪和综合热分析仪了复合物的... 详细信息

目的制备吴茱萸碱磷脂复合物,表征其理化性质,并初步考察其体外抗肿瘤活性。方法采用溶剂挥发法制备吴茱萸碱磷脂复合物,用星点设计-效应面法优化其制备工艺,并考察其表观溶解度、粒径和Zeta电位,用红外光谱仪和综合热分析仪了复合物的形成机制,MTT实验考察其体外抗肿瘤活性。结果优化的磷脂复合物制备工艺为:以体积分数为50%的乙醇和四氢呋喃的混合溶液作为反应溶剂,磷脂与吴茱萸碱的投药分子比为2∶1,吴茱萸碱的反应浓度为2.5 ***-1,反应温度和反应时间分别为60℃和3 h,复合率可达94.15%,吴茱萸碱磷脂复合物在水中的溶解度提高到原料药的3.4倍,其粒径和Zeta电位分别为243.4 nm和-44.21 mV,IR和DSC分析结果提示,吴茱萸碱和磷脂之间存在非极性相互作用,MTT实验表明,制备成复合物后EVO的体外抗肿瘤活性有所降低,表现出折中效应。结论本实验成功制备了吴茱萸碱磷脂复合物,工艺简单、可行,复合率高,制剂水溶性有所改善,为吴茱萸碱的制剂学研究提供了参考。

关键词：吴茱萸碱磷脂复合物抗肿瘤活性星点设计

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塞来昔布对人乳腺癌SKBR-3细胞生长的影响

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中国现代应用药学 2012年第8期29卷 669-673页

作者：张丽黄家君重庆医科大学药学院药理学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016

目的探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对乳腺癌SKBR-3细胞生长的影响及机制。方法用不同浓度的塞来昔布处理SKBR-3细胞后,采用CCK-8法检测塞来昔布对SKBR-3细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测细胞周期;酶联免疫吸附试验(ELISA... 详细信息

目的探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对乳腺癌SKBR-3细胞生长的影响及机制。方法用不同浓度的塞来昔布处理SKBR-3细胞后,采用CCK-8法检测塞来昔布对SKBR-3细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测细胞周期;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测前列腺素E2(PGE2)的释放水平;Western Blot法测定各浓度塞来昔布刺激SKBR-3细胞后Caspase-3被酶解激活情况。结果塞来昔布对SKBR-3细胞的增殖抑制作用呈剂量-时间依赖性;随着塞来昔布浓度的增加,G0/G1期细胞阻滞,S期细胞比例明显减少;塞来昔布明显减少PGE2的释放水平;Caspase-3在细胞凋亡早期被激活,在凋亡晚期则无表达。结论塞来昔布能有效抑制乳腺癌SKBR-3细胞的增殖,诱导其凋亡;其作用机制可能与COX-2表达下调、抑制PGE2水平和促进Caspase-3的活化有关。

关键词：乳腺癌 SKBR-3 塞来昔布环氧化酶-2(COX-2)

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家兔多剂量口服溴吡斯的明缓释片的药动学和生物利用度评价

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第二军医大学学报 2012年第1期33卷 109-111页

作者：熊华蓉谭群友廖红滕永真王睿张景勍重庆医科大学药物高校工程研究中心和生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所胸外科重庆400042

目的以溴吡斯的明普通片为对照,通过多剂量口服给药后,评价溴吡斯的明缓释片在兔体内的药动学和生物利用度。方法 6只新西兰兔随机分成两组,采用自身交叉对照实验,多剂量口服溴吡斯的明缓释制片(90mg/次,2次/d)或普通片(60mg/次,3次/d)... 详细信息

目的以溴吡斯的明普通片为对照,通过多剂量口服给药后,评价溴吡斯的明缓释片在兔体内的药动学和生物利用度。方法 6只新西兰兔随机分成两组,采用自身交叉对照实验,多剂量口服溴吡斯的明缓释制片(90mg/次,2次/d)或普通片(60mg/次,3次/d)后,采用高效液相色谱法测定血浆中溴吡斯的明浓度。计算药动学参数和相对生物利用度。结果家兔体内血浆中药物浓度随时间的变化符合血管外给药二室模型。溴吡斯的明普通片与缓释片给药药动学参数如下:tmax分别为(2.00±0)h和(4.00±0)h;Cmax分别为(25.48±0.18)mg/L和(19.24±0.45)mg/L;AUC0-∞分别为(321.42±5.00)mg.h.L-1和(370.08±12.23)mg.h.L-1。与普通片相比,缓释片的相对生物利用度为119.15%。结论溴吡斯的明缓释片具有缓释动力学特征,与普通片生物等效。

关键词：溴吡斯的明迟效制剂药动学生物利用度

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美斯地浓磷脂复合物大鼠体内药代动力学研究

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四川大学学报（医学版） 2012年第6期43卷 873-876页

作者：胡霓霓谭群友张梨尹华峰张景勍重庆医科大学药物高校工程研究中心和生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所胸外科重庆400042

目的研究美斯地浓磷脂复合物在大鼠体内药代动力学特征。方法健康SD雄性大鼠12只,分为2组,采用双周期交叉随机实验,分别灌胃给予美斯地浓磷脂复合物混悬液(含美斯地浓1.5mg/kg)和美斯地浓原料药(含美斯地浓1.5mg/kg),于不同时间点眼底... 详细信息

目的研究美斯地浓磷脂复合物在大鼠体内药代动力学特征。方法健康SD雄性大鼠12只,分为2组,采用双周期交叉随机实验,分别灌胃给予美斯地浓磷脂复合物混悬液(含美斯地浓1.5mg/kg)和美斯地浓原料药(含美斯地浓1.5mg/kg),于不同时间点眼底静脉丛取血,采用高效液相色谱法测定各时间点血药浓度。采用DAS 2.1.1药动学程序对有关参数进行分析。结果美斯地浓磷脂复合物的药代动力学参数为:达峰时间(Tmax)2h,峰浓度(Cmax)22.79μg/mL,药时曲线下面积(AUC0-∞)7128.21μ***/mL,而美斯地浓原料药为:Tmax2h,Cmax6.00μg/mL,AUC0-∞1772.36μ***/mL,美斯地浓磷脂复合物相对生物利用度是原料药的410.98%。结论美斯地浓磷脂化后能明显提高其口服生物利用度。

关键词：美斯地浓磷脂复合物药代动力学

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每日1次美斯地浓缓释片体内药代动力学与生物等效性研究

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中国药理学通报 2012年第6期28卷 818-822页

作者：罗文谭群友熊华蓉王睿赵春景张景勍重庆医科大学药物高校工程研究中心和生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所胸外科重庆400042 重庆医科大学附属第二医院药剂科重庆400010

目的研究美斯地浓缓释片在兔体内单剂量和多剂量的药代动力学和生物等效性,为临床研究提供参考和依据。方法 6只兔采用自身交叉给药方案,分别单剂量及多剂量口服美斯地浓缓释片和普通片后,采用高效液相色谱法(HPLC)测定血浆中美斯地浓... 详细信息

目的研究美斯地浓缓释片在兔体内单剂量和多剂量的药代动力学和生物等效性,为临床研究提供参考和依据。方法 6只兔采用自身交叉给药方案,分别单剂量及多剂量口服美斯地浓缓释片和普通片后,采用高效液相色谱法(HPLC)测定血浆中美斯地浓浓度。结果单次口服缓释片和普通片后主要药动学参数为:Tmax分别为(6±0)和(2±0)h;Cmax分别为(14.446±0.279)和(17.944±0.919)μg.L-1;T 12分别为(5.449±2.779)和(2.733±0.652)h;AUC0-t分别为(231.076±4.408)和(196.127±4.009)μg.h.L-1;AUC0-∞分别为(254.644±6.49)和(198.385±3.934)μg.h.L-1,相对生物利用度F为(117.3±11.0)%。多次口服缓释片和普通片达稳态后主要药动学参数:Cmax分别为(18.391±0.16)和(25.477±0.177)μg.L-1;Cmin分别为(3.421±0.186)和(6.612±0.254)μg.L-1;Cav分别为(12.99±0.055)和(16.088±0.132)μg.L-1;AUCss分别为(155.881±0.655)和(193.057±1.591)μg.h.L-1;DF分别为(1.152±0.012)和(1.173±0.019),相对生物利用度F为(106.7±6.4)%。结论美斯地浓缓释片与普通片两种制剂生物等效,且美斯地浓缓释片具有明显的缓释特征。

关键词：美斯地浓缓释片高效液相色谱法药代动力学生物等效性体内释放

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柚皮素同hPPARs的亲和力与内在活性研究

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中国药房 2012年第31期23卷 2891-2894页

作者：罗映李苌清周岐新林勤重庆医科大学药理学教研室/重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属儿童医院综合病房重庆400014

目的:测定柚皮素同过氧化物酶体增殖物激活受体(hPPARs)的亲和力与内在活性,确定柚皮素是否为hPPARs的天然配体。方法:采取放射性标记配基结合试验(RBCA)鉴定柚皮素与hPPARs LBD的配体结合功能,并采用反式激活报道基因试验测定筛出柚皮... 详细信息

目的:测定柚皮素同过氧化物酶体增殖物激活受体(hPPARs)的亲和力与内在活性,确定柚皮素是否为hPPARs的天然配体。方法:采取放射性标记配基结合试验(RBCA)鉴定柚皮素与hPPARs LBD的配体结合功能,并采用反式激活报道基因试验测定筛出柚皮素的功能活性。结果:RBCA法测得柚皮素与hPPARα的半数抑制率(IC50)为(2.11±0.35)μmol·L-1,抑制常数(Ki)为0.47μmol·L-1;反式激活报道基因试验测得柚皮素对hPPARα、hPPARβ/δ的半数有效剂量(EC50)和最大活性倍数(Emax)分别为11.4μmol·L-1、18.1,对hPPARγ1的EC50和Emax分别为10.3μmol·L-1、16.4。结论:柚皮素能与hPPARs结合,对hPPARα、hPPARγ1、hPPARβ/δ有一定程度的内在活性,是hPPARs的天然配体。

关键词：柚皮素过氧化物酶体增殖物激活受体配体

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