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第三军医大学学报 2007年第1期29卷 53-55页

作者：林雪梅汪维伟李芳菲重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室基础医学研究所重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016

目的研究胎鼠胃上皮细胞增殖、凋亡的时空规律及其与胃形态发生的关系。方法每间隔0．5d取E11～15．5d小鼠整胎，横断连续切片，观察胃形态发生，体视学法测量胃贲门、幽门、大弯、小弯上皮分裂细胞密度（DMC）、凋亡小体密度（DAB）... 详细信息

目的研究胎鼠胃上皮细胞增殖、凋亡的时空规律及其与胃形态发生的关系。方法每间隔0．5d取E11～15．5d小鼠整胎，横断连续切片，观察胃形态发生，体视学法测量胃贲门、幽门、大弯、小弯上皮分裂细胞密度（DMC）、凋亡小体密度（DAB）。结果①E11．5d胃开始发育，E12d胃底膨出，胃大、小弯出现。②上皮细胞DMC峰值均在DAB峰值之前。③贲门处DMC无明显峰值，DAB峰值在E11．5、12．5、13．5d；幽门处DMC峰值在E12．5d，DAB峰值在E14d；大弯DMC峰值在E11．5、12d时，DAB值持续较低；小弯DMC峰值在E11．5d，DAB峰值在E12．5d。结论胎鼠胃上皮细胞的增殖及凋亡与胃发生有密切的时空关系。

关键词：胎鼠胃增殖凋亡形态发生

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双波长分光光度法同时测定载硫酸长春新碱/姜黄素聚合物纳米粒中两种药物的含量

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光谱实验室 2011年第6期28卷 2820-2824页

作者：王海鸥袁佩滕永真贾运涛张良珂重庆医科大学药学院重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆市400016 重庆医科大学生命科学院重庆市400016 重庆医科大学附属儿童医院药剂科重庆市400010

以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-乙醇酸共聚物(m PEG-PLGA)为载体材料,制备同时载带硫酸长春新碱(VCR)和与之具有协同抗肿瘤作用的姜黄素(Cur)的m PEG-PLGA纳米粒(VCR/Cur-m PEG-PLGA-NP)。建立了以等吸收双波长紫外分光光度法同时测定纳米粒... 详细信息

以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-乙醇酸共聚物(m PEG-PLGA)为载体材料,制备同时载带硫酸长春新碱(VCR)和与之具有协同抗肿瘤作用的姜黄素(Cur)的m PEG-PLGA纳米粒(VCR/Cur-m PEG-PLGA-NP)。建立了以等吸收双波长紫外分光光度法同时测定纳米粒中VCR和Cur含量的方法,研究显示,VCR测定波长296.5nm,等吸收波长462nm;Cur测定波长414nm;VCR在4.0—36.0μ***-1范围内,浓度C与差值吸光度ΔA呈良好线性相关;Cur在0.5—8.0μ***-1范围内,浓度C与吸光度A具有良好的线性关系。该方法简便迅速,结果准确可靠,适用于VCR/Cur-m PEG-PLGA-NP中药物含量的同时测定。

关键词：双波长紫外分光光度法姜黄素硫酸长春新碱

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当归多糖动员的造血干/祖细胞移植重建小鼠造血功能的研究

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第三军医大学学报 2007年第23期29卷 2236-2239页

作者：胡晶冯敏杨慧吴宏重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室基础医学研究所重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

目的探讨当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)动员的造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitorcell,HSPC)对造血衰竭小鼠造血功能重建的作用。方法将APS动员的雄性BALB/c小鼠的外周血单个核细胞(periph-eral blood mononuclear cells,PBMC)静脉输注给受到8.5Gy60Coγ射线照射的雌性同系受体小鼠;观察受体小鼠外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)的变化及30d存活情况;采用PCR方法鉴定其造血重建的来源。结果APS组受体小鼠WBC、PLT、HGB、30d存活数均明显高于对照组和NS组(P<0.05);对APS组存活小鼠进行Y染色体PCR分析,证实雌性受体小鼠重建的造血细胞来自雄性供体。结论APS动员的小鼠外周血HSPC移植后能够重建造血衰竭小鼠长期造血。

关键词：当归多糖造血干/祖细胞动员移植造血重建小鼠

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构建人乳头瘤病毒关键基因的原核重组载体

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中国现代医学杂志 2006年第21期16卷 3201-3204页

作者：潘巍巍赖国旗宋方洲易发平马永平左国伟重庆医科大学分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学动物实验中心重庆400016 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 教育部临床检验诊断学重点实验室重庆400016

目的构建HPV16E6/E7关键基因的原核载体pET-32(+)-E6/E7并将其转到大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,最后获得E6/E7基因表达产物。方法用PCR方法从含有HPV16全基因序列的质粒中扩增E6/E7基因,将E6/E7基因连接到pET-32a(+)质粒上,并转到大... 详细信息

目的构建HPV16E6/E7关键基因的原核载体pET-32(+)-E6/E7并将其转到大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,最后获得E6/E7基因表达产物。方法用PCR方法从含有HPV16全基因序列的质粒中扩增E6/E7基因,将E6/E7基因连接到pET-32a(+)质粒上,并转到大肠杆菌BL21(DE3)中。最后检测E6/E7基因。结果获得重组后的载体pET-32(+)-E6/E7。结论成功构建表达了含有E6E7的原核重组载体,并在大肠杆菌中表达。

关键词：人乳头瘤病毒 HPV16 E6/E7构建重组载体

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人宫颈癌Ca Ski细胞IL-24基因的克隆鉴定与真核表达

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第四军医大学学报 2007年第5期28卷 469-471页

作者：石华成海恩易发平杨俊霞张溢马永平宋方洲重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室临床检验诊断学教育部重点实验室重庆医科大学基础医学研究所重庆400016

目的:克隆人IL-24基因并构建真核表达载体,转染Ca Ski细胞进行真核表达.方法:利用RT-PCR技术扩增出Ca Ski细胞中的IL-24基因.将IL-24基因克隆入pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24.将重组质粒转染入CaSki细胞,利用Wester... 详细信息

目的:克隆人IL-24基因并构建真核表达载体,转染Ca Ski细胞进行真核表达.方法:利用RT-PCR技术扩增出Ca Ski细胞中的IL-24基因.将IL-24基因克隆入pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24.将重组质粒转染入CaSki细胞,利用Western blot检测hIL-24的表达.结果:PCR及测序结果均证实成功克隆了人IL-24基因,构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24,该质粒被转染入Ca Ski细胞中能表达出hIL-24蛋白.结论:成功构建了hIL-24基因的真核表达载体.

关键词：白细胞介素24 克隆真核表达 Ca Ski细胞

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从白介素受体相关激酶反馈平衡调节与清热解毒中药抗脓毒症相关作用机制

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中华中医药学刊 2019年第3期37卷 539-541页

作者：陈博万敬员浙江衢化医院中医科浙江衢州324004 重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016

天然免疫TLR信号是机体防御病原体第一道防线,但过度活化失控导致脓毒症,因此,寻找其平衡的分子靶标和有效药物就显得尤其重要。白介素-1受体相关激酶(IRAKs)是TLR信号关键分子,它连接受体和下游转录因子,决定天然免疫的信号流向,影响... 详细信息

天然免疫TLR信号是机体防御病原体第一道防线,但过度活化失控导致脓毒症,因此,寻找其平衡的分子靶标和有效药物就显得尤其重要。白介素-1受体相关激酶(IRAKs)是TLR信号关键分子,它连接受体和下游转录因子,决定天然免疫的信号流向,影响其结局。研究发现,这些信号激酶可发生多态性表达,产生正性和负性的分子异构体,平衡机体防御和炎症。无疑,调控正负IRAK激酶平衡将成为防控脓毒症的新靶标。清热解毒中药具有免疫调节和抗炎活性,现代医学用分子生物学、病理学和免疫学的方法,从调控IRAK激酶信号中确证平衡天然免疫的内源性机制,阐明了清热解毒中药的物质基础和分子机制,为中药现代化提供了新的思路。

关键词：脓毒症炎症白介素受体相关激酶中医药清热解毒

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用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶的抑制作用

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第四军医大学学报 2007年第13期28卷 1161-1163页

作者：陈虹程真莉左渝平廖飞重庆医科大学药学院重庆市生物化学与分子药理学重点实验室生物信息学与制药生物技术组重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:考察用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶抑制作用的可靠性.方法:测定碱性磷酸酶水解对硝基苯酚磷酸酯(PNPP)的产物生成初速度.用两个底物浓度下标定比活性计算米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),再据二者对抑制... 详细信息

目的:考察用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶抑制作用的可靠性.方法:测定碱性磷酸酶水解对硝基苯酚磷酸酯(PNPP)的产物生成初速度.用两个底物浓度下标定比活性计算米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),再据二者对抑制剂浓度的响应确定抑制剂类型和抑制常数.结果:双倒数分析法重复测定发现70%的Km和Vm随抑制剂浓度升高而同步下降,两动力学参数变化对应抑制常数的比值为(2.4±0.6,n=9).线性动力学方法所得参数精度稍高,Km和Vm随抑制剂浓度升高同时下降的出现率约80%,两抑制常数之比为(2.0±0.8,n=10),两参数变化对应的抑制常数及两抑制常数之比都与双倒数分析法一致.如允许两抑制常数之比在2.5倍内波动,则两种方法都表明L-苯丙氨酸为此碱性磷酸酶的反竞争性抑制剂.结论:此线性动力学方法可用于表征反竞争性抑制剂.

关键词： L-苯丙氨酸反竞争性抑制碱性磷酸酶线性动力学方法抑制常数

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壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面EGF和PDGF表达的影响

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中国药理学通报 2006年第11期22卷 1375-1378页

作者：廖红董志傅洁民朱毅朱丽霞刘全重庆医科大学药理教研室生物化学和分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医药工业研究院重庆400061 海南省药品检验所海南海口570216

目的研究壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子(EGF)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法W istar大鼠分为1%壳聚糖组(W/V)、2%壳聚糖组(W/V)、4%壳聚糖组(W/V)、成纤维细胞生长因子(贝复剂)组(阳性对照组)、自然愈合组(模型组)... 详细信息

目的研究壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子(EGF)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法W istar大鼠分为1%壳聚糖组(W/V)、2%壳聚糖组(W/V)、4%壳聚糖组(W/V)、成纤维细胞生长因子(贝复剂)组(阳性对照组)、自然愈合组(模型组),制备成大鼠Ⅲ度烧伤模型,采用免疫组织化学SABC法、原位杂交法及图像分析法检测大鼠Ⅲ度烧伤创面EGF和EGFmRNA的表达;PDGF的活性用L929细胞生物法测定。结果4%壳聚糖组(W/V)对烧伤后7、14 d创面EGF的表达、对烧伤后3、7 d创面EG-FmRNA的表达有明显的提高;对烧伤后3、7、14 d创面PDGF的活性有明显的提高,与自然愈合组相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面的EGF表达和PDGF活性有促进作用。

关键词：壳聚糖表皮生长因子血小板源性生长因子烧伤愈合

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盐酸小檗碱复合纳米乳对高脂血症大鼠的影响

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中国临床药理学杂志 2021年第15期37卷 2019-2022页

作者：秦红袁誉铭杨婕张景勍刘颖菊重庆医科大学药学院重庆药物高校工程研究中心重庆医科大学附属儿童医院科研处重庆市生物化学与分子药理学重点实验室

目的研究盐酸小檗碱复合纳米乳（BHNE）对高脂血症大鼠的降脂作用。方法按照体重将SD大鼠随机分为7组:正常组（0.5%羧甲基纤维素钠）,模型组（0.5%羧甲基纤维素钠）,辛伐他汀组(辛伐他汀2 mg·kg-1),低、高2个剂量盐酸小檗碱组(BEH-... 详细信息

目的研究盐酸小檗碱复合纳米乳（BHNE）对高脂血症大鼠的降脂作用。方法按照体重将SD大鼠随机分为7组:正常组（0.5%羧甲基纤维素钠）,模型组（0.5%羧甲基纤维素钠）,辛伐他汀组(辛伐他汀2 mg·kg-1),低、高2个剂量盐酸小檗碱组(BEH-L,40,80 mg·kg-1),低、高2个剂量盐酸小檗碱复合纳米乳组(BHNE-L,40,80 mg·kg-1),每组6只;给药体积为10 mL·kg-1,每日1次,连续给药10周。除正常组外,其余各组均口服高脂饲料以诱导大鼠高脂血症模型。通过全自动生化分析仪测定高脂血症大鼠血清指标总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,用试剂盒测定血清超氧化物歧化酶（SOD）水平和丙二醛（MDA）含量。结果正常组、模型组、辛伐他汀组、BEH-L、BEH-H、BHNE-L和BHNE-H组的TC含量分别为（1.34±0.26）,（2.00±0.13）,（1.40±0.28）,（1.65±0.34）,（1.56±0.46）,（1.67±0.29）和（1.48±0.28） mmol·L-1;这7组的TG含量分别为（0.87±0.15）,（1.17±0.24）,（0.80±0.15）,（1.09±0.17）,（0.90±0.24）,（0.94±0.33）和（0.83±0.21） mmol·L-1;这7组的HDL-C含量分别为（1.44±0.20）,（0.61±0.15）,（0.99±0.14）,（0.81±0.23）,（0.83±0.18）,（0.87±0.26）和（0.86±0.23） mmol·L-1;这7组的LDL-C含量分别为（0.39±0.10）,（0.50±0.11）,（0.41±0.14）,（0.49±0.07）,（0.47±0.30）,（0.49±0.26）和（0.42±0.18） mmol·L-1;这7组的SOD水平分别为（183.19±19.00）,（150.76±6.30）,（161.34±5.64）,（138.05±10.00）,（154.55±13.10）,（145.96±13.92）和（163.68±10.06） U·mL-1;这7组的MDA水平分别为（5.38±0.66）,（9.87±0.64）,（8.32±0.36）,（9.90±0.71）,（9.04±1.23）,（9.76±0.40）和（8.46±0.74） nmol·mL-1。BHNE和BEH干预均能降低血清TC、TG和LDL-C水平,升高血清HDL-C的水平。BHNE的作用较等剂量的游离BEH更强。结论 BHNE可有效改善实验性高脂血症大鼠的脂质水平,且比游离的BEH效果更好。

关键词：盐酸小檗碱纳米乳复合物高脂血症血脂水平氧化应激

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QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健食品中21种非法添加化学药物

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色谱 2017年第12期35卷 1257-1265页

作者：郑佳郗存显曹淑瑞王国民唐柏彬王智母昭德重庆医科大学药学院重庆400016 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆出入境检验检疫局重庆市进出口食品安全工程技术研究中心重庆400020

建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱测定改善睡眠类和提高免疫力类保健食品中21种非法添加化学药物的分析方法。口服液、保健酒分别用乙腈和乙腈-水-甲酸(60∶39∶1,v/v/v)振荡提取,QuEChERS法净化;采用Acquity UPLCTMBEH C18色谱... 详细信息

建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱测定改善睡眠类和提高免疫力类保健食品中21种非法添加化学药物的分析方法。口服液、保健酒分别用乙腈和乙腈-水-甲酸(60∶39∶1,v/v/v)振荡提取,QuEChERS法净化;采用Acquity UPLCTMBEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以乙腈和2 mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%(v/v)甲酸)为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾离子源正离子模式(ESI+)下电离,多反应监测(MRM)模式检测。结果表明,21种化学药物在1~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(R2)均≥0.992,检出限(LOD)为0.07~3.41μg/kg,定量限(LOQ)为0.22~11.36μg/kg。3种加标水平(10、20和100μg/kg)下,21种化学药物在口服液和保健酒中的平均加标回收率分别为61.4%~116.5%和67.4%~98.4%;相对标准偏差(RSD)分别为0.2%~13.4%和0.2%~11.8%。该法简便,灵敏性高,实用性强,可用于改善睡眠和提高免疫力类保健食品中21种非法添加化学药物的检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱 QuEChERS 化学药物保健食品

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