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中国药理学会第十一届全国化疗药理学术研讨会

作者：赵启全贾蓓简丽黄文祥袁喆朱卫民李崇智刘成伟重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病学重点实验室

目的调查我院2011年临床分离病原菌对抗菌药物的耐药性。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验,根据CLSI2011采用WHONET5.5软件进行数据分析。结果临床分离的2535株病原菌中,革兰阳性菌占27.5%,革兰阴性菌占72.5%;耐甲氧西林金黄色... 详细信息

目的调查我院2011年临床分离病原菌对抗菌药物的耐药性。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验,根据CLSI2011采用WHONET5.5软件进行数据分析。结果临床分离的2535株病原菌中,革兰阳性菌占27.5%,革兰阴性菌占72.5%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌检出率分别为43.5%和77.6%:发现2株耐利奈唑胺的粪肠球菌,未发现对万古霉素或替考拉宁耐药的屎肠球菌、葡萄球菌和粪肠球菌菌株。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍然敏感率高,总耐药率<1%,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率在65%以上。结论细菌的耐药性仍呈增长趋势,对临床构成严重威胁,规范临床合理使用抗菌药物具有重要意义。

关键词：细菌耐药抗菌药物敏感性

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金黄色葡萄球菌外排蛋白QacA的优化表达研究

金黄色葡萄球菌外排蛋白QacA的优化表达研究

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中国药理学会第十一届全国化疗药理学术研讨会

作者：夏晓影贾蓓重庆医科大学附属第一医院感染科、重庆市传染病寄生虫病学重点实验室

目的提高金葡菌外排基因qacA在大肠埃希菌中的表达水平,为深入研究其结构功能、设计有效外排抑制剂奠定基础。方法以重组质粒pBluescriptⅡSK(+)/qacA为模板,通过PCR方法扩增出带有AatⅡ和NheⅠ酶切位点的qacA基因,经相应酶切、纯化后... 详细信息

目的提高金葡菌外排基因qacA在大肠埃希菌中的表达水平,为深入研究其结构功能、设计有效外排抑制剂奠定基础。方法以重组质粒pBluescriptⅡSK(+)/qacA为模板,通过PCR方法扩增出带有AatⅡ和NheⅠ酶切位点的qacA基因,经相应酶切、纯化后将目的基因分别与同样进行酶切的质粒pET-cocol在T连接酶的作用下连接;同时根据大肠埃希菌偏爱密码子,由公司对qacA基因进行密码子优化,将合成的基因插入到pET-coco1载体中。重组表达质粒pET-coco1/qacA及密码子优化的pET-coco1/qacA转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达情况,Western B1otting试验鉴定表达蛋白。结果①酶切鉴定证实qacA基因及密码子优化的qacA基因已插入原核表达载体pET-cocol,重组表达质粒pET-cocol/qacA及密码子优化的pET-cocol/qacA已构建成功;②重组质粒pET-coco1/qacA转化大肠埃希菌BL21(DE3)后经IPTG诱导成功地表达了QacA蛋白,其分子量约为55 ku;优化后重组载体pET-coco1/qacA在大肠埃希菌中得到高效表达;③Western Blotting试验显示QacA表达蛋白与合成的兔抗呈特异性免疫反应。结论优化后的pET-coco1/qacA在大肠埃希菌中得到高效表达,为进一步研究qacA生物学功能奠定了物质基础。

关键词：金黄色葡萄球菌外排蛋白 QacA 表达

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耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌流行特征及耐药基因分析

耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌流行特征及耐药基因分析

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中国药理学会第十一届全国化疗药理学术研讨会

作者：杨均均黄文祥史芳静刘成伟李崇智重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病重点实验室

目的调查分析我院2009年医院获得性鲍曼不动杆菌对各种抗菌药物的耐药性,研究耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌感染的克隆流行情况以及碳青霉烯酶基因型。方法用琼脂稀释法进行药敏试验,按CLSI 2009年标准判断细菌耐药性,并用PFGE法对200... 详细信息

目的调查分析我院2009年医院获得性鲍曼不动杆菌对各种抗菌药物的耐药性,研究耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌感染的克隆流行情况以及碳青霉烯酶基因型。方法用琼脂稀释法进行药敏试验,按CLSI 2009年标准判断细菌耐药性,并用PFGE法对2009年的102株对碳青霉烯耐药菌进行同源性分析,多重PCR扩增碳青霉烯酶基因OXA-511ike,OXA-23like,OXA-241ike,OXA-58like。结果药敏试验结果显示鲍曼不动杆菌对米诺环素、替加环素、多黏菌素B耐药率较低,对碳青霉烯类抗生素耐药高。PFGE结果显示我院存在A/B/C克隆株流行,主要分布于呼吸科以及ICU等病房,时间上呈散发流行。102株耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌产OXA-23型碳青霉烯酶率为71.6%,产OXA-51型碳青霉烯酶率为84.3%,另外仅2株检出OXA-24型碳青霉烯酶,3株检出OXA-58型碳青霉烯酶。结论我院在呼吸科以及ICU等病房存在A/B/C克隆株流行,碳青霉烯酶基因型以OXA-23、OXA-51型为主,由于对多种抗菌药物尤其是碳青霉烯类抗生素耐药性的增强和克隆株的流行,应积极采取有效措施预防和控制鲍曼不动杆菌感染。

关键词：鲍曼不动杆菌耐药性克隆流行碳青霉烯酶医院感染

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2009年重庆医科大学附属第一医院细菌耐药监测

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中国抗生素杂志 2011年第9期36卷 693-698页

作者：魏晓宇贾蓓常李军黄文祥李崇智郑行萍重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病学重点实验室重庆400016

目的调查我院2009年临床分离病原菌对抗菌药物的耐药性。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感实验,采用WHONET5.4软件及SPSS13.0软件进行数据分析。结果临床分类的1608株病原菌中,革兰阳性菌占25.1%,革兰阴性菌占74.9%;耐甲氧西林金黄... 详细信息

目的调查我院2009年临床分离病原菌对抗菌药物的耐药性。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感实验,采用WHONET5.4软件及SPSS13.0软件进行数据分析。结果临床分类的1608株病原菌中,革兰阳性菌占25.1%,革兰阴性菌占74.9%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌株检出率分别为63.7%和93.7%;未发现对万古霉素或替考拉宁中介或耐药的葡萄球菌和肠球菌菌株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为57.2%、56.8%,肺炎克雷伯菌ESBLs的菌株高于2008年监测比例,且差别具有统计学意义(P<0.05)。鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率在55%以上。结论革兰阳性细菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺均敏感;肠杆菌对碳青霉烯类敏感性高;铜绿假单胞菌对阿米卡星敏感、头孢哌酮/舒巴坦相对敏感,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药率高,对头孢哌酮/舒巴坦敏感性高。未发现泛耐药菌株。

关键词：细菌耐药监测耐药率

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泛耐药鲍曼不动杆菌医院感染流行病学研究

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第三军医大学学报 2011年第21期33卷 2244-2248页

作者：王振黄文祥辛小娟杨均均史方静刘成伟李崇智重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病重点实验室重庆400016

目的调查分析我院院内获得性鲍曼不动杆菌感染的流行特征及耐药性变迁,分析泛耐药鲍曼不动杆菌感染爆发流行的原因和规律。方法对我院2006-2009年4年间591例医院内获得性鲍曼不动杆菌感染的分布及耐药谱变迁进行系统性研究。用脉冲物凝... 详细信息

目的调查分析我院院内获得性鲍曼不动杆菌感染的流行特征及耐药性变迁,分析泛耐药鲍曼不动杆菌感染爆发流行的原因和规律。方法对我院2006-2009年4年间591例医院内获得性鲍曼不动杆菌感染的分布及耐药谱变迁进行系统性研究。用脉冲物凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)法对2009年包括对碳青霉烯耐药的102株泛耐药菌进行同源性分析,并用琼脂稀释法进行药敏试验,按CLSI(2009)标准判断细菌耐药性。结果我院鲍曼不动杆菌医院感染主要集中于呼吸科、ICU、神经内科、胸心外科、神经外科。药敏试验结果显示鲍曼不动杆菌对常用抗生素耐药率逐年增加,其中对米诺环素、多西环素、多粘菌素耐药率较低,分别为43.7%、32.9%、2.5%。对碳青霉烯耐药上升较快,同时伴随该类药物用量明显上升。PFGE结果显示在ICU和呼吸科等病房存在A和B克隆株流行。结论碳青霉烯类不合理应用和克隆株流行,导致院内泛耐药鲍曼不动杆菌感染率逐年增加;其应对措施应加强医院感染控制,合理使用抗生素。

关键词：鲍曼不动杆菌抗生素耐药性医院感染

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腹腔感染革兰阴性细菌耐药性临床分析

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第三军医大学学报 2011年第21期33卷 2235-2239页

作者：田文广黄文祥贾蓓辛小娟李崇智郑行萍史方静重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病学重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属永川医院感染科重庆402160

目的调查我院2008-2010年临床分离的非重复腹腔感染革兰阴性菌的流行病学特点,对常用抗菌药物的耐药性以及产ESBLs比例,为指导临床治疗提供支持。方法药敏试验采用琼脂稀释法测定MIC;用WHONET 5.4软件及SPSS 13.0软件进行数据分析。结... 详细信息

目的调查我院2008-2010年临床分离的非重复腹腔感染革兰阴性菌的流行病学特点,对常用抗菌药物的耐药性以及产ESBLs比例,为指导临床治疗提供支持。方法药敏试验采用琼脂稀释法测定MIC;用WHONET 5.4软件及SPSS 13.0软件进行数据分析。结果临床分离的290株革兰阴性菌病原菌中,肠杆菌科细菌占82.07%;非发酵菌为17.93%。常见细菌有6种,其中大肠埃希菌占55.3%,鲍曼不动杆菌复合群所占比例明显升高(7.96%)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率分别为74.38%和55.56%。大肠埃希菌对碳青霉烯类、派拉西林/他唑巴坦和阿米卡星高度敏感,但第3代头孢菌素和头孢吡肟耐药率很高。非ESBLs产酶肺炎克雷伯菌对常见12种抗G-细菌抗菌药物都很敏感,产ESBL菌株则对阿米卡星、派拉西林/他唑巴坦和碳青霉烯类比较敏感。铜绿假单胞菌对亚胺培南、派拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的其敏感率均在90%以上;其次是头孢吡肟和2个氟喹诺酮类、其敏感率均在80%～90%之间;头孢拉定的敏感性下降到80%以下。鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率在80%以上。多重耐药菌占32%,主要菌种为鲍曼不动杆菌复合群和铜绿假单胞菌,80%MDR几乎对所有临床常用抗菌药物耐药。结论本地区腹腔感染革兰阴性菌对常用抗菌药物耐药性明显上升,产ESBLs肠杆菌细菌比例较高。鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药性很严重,泛耐药菌株比例上升。

关键词：腹腔感染耐药监测革兰阴性菌抗感染治疗

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高脂诱导的NAFLD大鼠模型血清IL-6、TNF-α等的变化

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重庆医科大学学报 2011年第1期36卷 31-34页

作者：敬晓琴袁喆重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病学重点实验室重庆400016

目的:白细胞介素-6(Interleukin-6I,L-6)和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)在非酒精性脂肪肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的形成中具有重要作用。我们探讨在大鼠NAFLD发生发展过程中IL-6血清浓度的变化及与TNF-α、胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)的关系,从而更好地了解非酒精性脂肪肝病的发病机理。方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和NAFLD模型组,正常对照组采用普通饲料喂养,NAFLD模型组采用高脂饲料喂养,并于第2、4、6、10周末分批处死各组大鼠6只,并检测其血清ALT、AST、TG、TC、空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(Fastinginsulin,FINS)I、L-6、TNF-α等指标,计算肝指数及胰岛素抵抗指数(Insulin resistance index,IRI),观察肝脏病理变化。结果:模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC、FINSI、RII、L-6、TNF-α均较对照组升高,其中TNF-α自第4周起高于对照组(P<0.05)I,L-6第6周起高于对照组(P<0.05)I,L-6与TNF-α(r=0.931,P<0.05)I、RI(r=0.946,P<0.05)呈高度正相关。结论:脂肪因子IL-6与TNF-αI、RI密切相关,与NAFLD的形成发展有重要关联。

关键词：非酒精性脂肪肝脂肪因子白细胞介素-6

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2008年重庆医科大学附属第一医院细菌耐药性监测

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中国抗生素杂志 2010年第10期35卷 779-783,792页

作者：常李军贾蓓黄文祥李崇智郑行萍刘成伟重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病重点实验室重庆400016

目的了解我院2008年临床常见分离病原菌对常用抗菌药物的耐药情况。方法药敏实验使用纸片扩散法,数据分析采用WHONET5.4软件。结果在临床分离的1315株细菌中,革兰阳性菌占22.2%,革兰阴性菌占77.8%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌... 详细信息

目的了解我院2008年临床常见分离病原菌对常用抗菌药物的耐药情况。方法药敏实验使用纸片扩散法,数据分析采用WHONET5.4软件。结果在临床分离的1315株细菌中,革兰阳性菌占22.2%,革兰阴性菌占77.8%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林株分别占56.8%和81.3%。葡萄球菌或肠球菌均未发现万古霉素或替考拉宁中介株或耐药株。大肠埃希菌和克雷伯菌产ESBLs株检出率分别为51.1%和27.8%。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为44.8%和32.6%,不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率为36.5%和35.6%。结论 ICU比非ICU耐药性严重,不动杆菌属对碳青霉烯类耐药率明显上升,监测到泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,加强细菌耐药监测对抗菌药物的临床应用和控制细菌耐药性传播具有重要意义。

关键词：细菌耐药抗菌药物细菌药敏实验

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2006—2008年我院金黄色葡萄球菌耐药监测

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中国抗生素杂志 2010年第6期35卷 472-476页

作者：魏晓宇贾蓓常李军周庭权黄文祥李崇智郑行萍重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病学重点实验室重庆400016

目的了解我院2006年1月至2008年12月分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性。方法采用K-B法进行药敏试验,以CLSI2008年判断标准分析临床分离株,分析采用WHONET5.4及SPSS13.0统计软件。结果分别从ICU和非ICU分离出金黄色葡萄球菌5... 详细信息

目的了解我院2006年1月至2008年12月分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性。方法采用K-B法进行药敏试验,以CLSI2008年判断标准分析临床分离株,分析采用WHONET5.4及SPSS13.0统计软件。结果分别从ICU和非ICU分离出金黄色葡萄球菌54株和145株。ICU内标本主要来自于痰液(85.2%),非ICU标本来主要自于痰液(38.6%)、分泌物(29.0%)及脓液标本(17.9%)。ICU内金黄色葡萄球菌对β内酰胺类、大环内酯类、克林霉素类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类耐药率均高于非ICU。ICU内金黄色葡萄球菌对头孢菌素类耐药率高(>73.1%)。ICU和非ICU金黄色葡萄球菌对利福平均较为敏感(敏感率>50%)。近3年来,ICU内金黄色葡萄球菌的耐药率无显著变化(P>0.05)。ICU内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌耐药率均高于非ICU,差异具有统计学意义(P<0.05)。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的金黄色葡萄球菌株。结论通过分析金黄色葡萄球菌耐药率的变迁,有利于采取措施控制ICU内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的流行和指导临床用药。

关键词：金黄色葡萄球菌耐药性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌重症监护室

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β-内酰胺酶抑制肽的活性研究

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中国抗生素杂志 2010年第4期35卷 300-304页

作者：李勇湧黄文祥朱卫民李崇智张德梅重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病重点实验室重庆400016 重庆市开县生殖健康中心重庆405400

目的通过合成和筛选具有一定抑酶作用的β-内酰胺酶抑制肽,考察其抑制活性及抑制动力学生化特征,以用于产β-内酰胺酶耐药菌所致感染的临床治疗。方法固相合成法在计算机上三维模拟设计合成β-内酰胺酶抑制肽。选取我院08年临床分离鉴... 详细信息

目的通过合成和筛选具有一定抑酶作用的β-内酰胺酶抑制肽,考察其抑制活性及抑制动力学生化特征,以用于产β-内酰胺酶耐药菌所致感染的临床治疗。方法固相合成法在计算机上三维模拟设计合成β-内酰胺酶抑制肽。选取我院08年临床分离鉴定的产酶菌8株,测定临床常用抗生素对8株细菌的MIC值,采用试管稀释法进行β-内酰胺酶抑制肽活性初步筛选。分光光度法研究抑制肽对8株产酶菌所产β-内酰胺酶的抑酶效力,Dixon作图法求取抑制常数K_i,计算相关抑制动力学参数。结果合成了6段系列短肽分子,筛选得到3段具有抑制活性的抑制肽,抑制底物动力学研究验证3段β-内酰胺酶抑制肽具有一定抑制活性,但抑制常数均较大,其抑制方式均为竞争性抑制。结论3段具有抑制活性的β-内酰胺酶抑制肽的抑制活性均较弱。

关键词： β-内酰胺酶酶动力学 β-内酰胺酶抑制肽

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