检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2014年第2期27卷 172-176页

作者：吴迪金戈刘钊张亮黄荣忠杨德雨谢鹏重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016

目的原核表达人内源性博尔纳样核蛋白-1(endogenous Borna-like N element-1,EBLN-1),并进行纯化及鉴定。方法以人工合成的EBLN-1基因为模板,PCR扩增EBLN-1基因,克隆至载体pET-41a中,构建重组表达质粒pET-41aEBLN-1,转化大肠埃希菌BL21(DE3)和Rosetta中,分别于18℃和37℃下进行IPTG诱导表达。采用包涵体稀释复性法对表达蛋白进行复性,经His亲和层析纯化后,SDS-GAGE和Western blot法鉴定纯化产物。结果重组表达质粒pET-41a-EBLN-1经菌落PCR及测序鉴定构建正确。重组表达蛋白相对分子质量约48 000,以包涵体形式表达。在大肠埃希菌Rosetta中37℃诱导时表达量最高,占菌体总蛋白的30%以上,纯化后蛋白纯度可达90%,可与HRP标记的His探针特异性结合。结论成功表达并纯化了重组EBLN-1蛋白,为后续深入研究EBLN-1在人体中的生理作用及其与精神疾病的相关性奠定了基础。

关键词：人内源性博尔纳样核蛋白-1 原核细胞基因表达纯化

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抗博尔纳病病毒磷蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

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中国生物制品学杂志 2013年第2期26卷 244-247页

作者：马丽华黄荣忠张亮徐晓艳曾粒刘钊邓婧李文娟谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的制备抗博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)重组磷蛋白(p24)多克隆抗体,并对其进行鉴定,为BDV血清免疫学检测方法的建立奠定基础。方法用本课题组前期制备的重组BDVp24蛋白经背腿部多点皮下注射免疫新西兰大白兔,共免疫4次,末次... 详细信息

目的制备抗博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)重组磷蛋白(p24)多克隆抗体,并对其进行鉴定,为BDV血清免疫学检测方法的建立奠定基础。方法用本课题组前期制备的重组BDVp24蛋白经背腿部多点皮下注射免疫新西兰大白兔,共免疫4次,末次免疫后第7天采血,分离血清,采用抗原亲和纯化法纯化抗血清,ELISA法测定抗血清效价;Western blot和免疫荧光鉴定其特异性。结果制备的抗BDV p24多克隆抗体的纯度为98%,ELISA效价达1∶128 000,该抗体与重组p24蛋白和BDV感染OL细胞表达的p24蛋白均能发生特异性反应。结论成功制备了灵敏性和特异性良好的抗BDV p24多克隆抗体,为研发相关的诊断试剂和研究该病毒的感染发病机制奠定了基础。

关键词：博尔纳病病毒磷蛋白类多克隆抗体

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博尔纳病病毒与细胞内信号转导通路

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重庆医科大学学报 2011年第7期36卷 772-776页

作者：刘霞 Djung Lilya Wati 谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

博尔纳病病毒（Borna disease virus,BDV）是一种嗜神经性RNA病毒,可以在温血动物神经系统内形成非细胞溶解性持续感染。根据宿主种类及感染途径不同,

关键词：博尔纳病病毒信号转导通路细胞内 RNA病毒细胞溶解性嗜神经性持续感染神经系统

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体外培养神经干细胞球的离散:一种安全有效的方法

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重庆医科大学学报 2010年第9期35卷 1295-1297页

作者：刘霞 Djung Lilya Wati 齐志国李雷雷房亮谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆医科大学神经科学研究中心神经生物学重庆市市级重点实验室重庆400016

目的:探讨一种安全有效地对体外培养神经干细胞球进行离散的方法。方法:采用常规胰蛋白酶消化、单纯巴斯德吸管吹打、滤网研磨、控制神经球体积的胰酶短时消化4种方法,比较其各自的离散效果和离散后细胞存活情况。结果:胰酶消化较长时... 详细信息

目的:探讨一种安全有效地对体外培养神经干细胞球进行离散的方法。方法:采用常规胰蛋白酶消化、单纯巴斯德吸管吹打、滤网研磨、控制神经球体积的胰酶短时消化4种方法,比较其各自的离散效果和离散后细胞存活情况。结果:胰酶消化较长时间虽然可以得到单细胞但是细胞难以存活,单纯巴斯德吸管吹打不能完全离散神经球,不锈钢滤网研磨细胞损伤大,存活率低下,而采用控制神经球体积结合胰蛋白酶短时消化可以轻易获得单细胞并且细胞存活率明显高于其他方法(93.2%,P<0.05)。结论:控制神经球体积的胰酶短时消化法是离散神经干细胞球的一种安全有效的方法。

关键词：神经干细胞神经球离散

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磁共振弥散加权对克-雅氏病早期诊断的意义

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中风与神经疾病杂志 2012年第8期29卷 726-728页

作者：曹笃魏有东李琦谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的探讨克-雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)早期的磁共振弥散加权成像(DWI)表现。方法回顾性分析和总结3例CJD患者的临床症状及体征、影像学、脑电图和脑脊液中14-3-3蛋白的改变等资料。结果 3例患者脑部MRI均表现为皮质不同程... 详细信息

目的探讨克-雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)早期的磁共振弥散加权成像(DWI)表现。方法回顾性分析和总结3例CJD患者的临床症状及体征、影像学、脑电图和脑脊液中14-3-3蛋白的改变等资料。结果 3例患者脑部MRI均表现为皮质不同程度的DWI"缎带样"高信号,脑电图均出现周期性尖慢波或三相波,脑脊液14-3-3蛋白2例(+),1例(-)。结论对于绝大部分CJD患者,无论脑电图和脑脊液中14-3-3蛋白是否改变,DWI即可先于前两者出现异常改变,对于临床上出现早期相应症状及体征的患者,若DWI有此特征性改变,应高度疑诊CJD,故应考虑将DWI的异常改变纳入CJD的临床诊断标准中。

关键词：克-雅氏病磁共振弥散加权成像诊断

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多克隆及单克隆P24抗体在石蜡组织切片上检测BDV-P24蛋白质的应用

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重庆医科大学学报 2014年第7期39卷 1005-1009页

作者：张鸿志李丹雷阳邓婧陈世刚黄华李文娟陈建军王啸张亮黄荣忠刘霞谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科、重庆医科大学神经科学研究中心、重庆市神经生物学重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

目的:验证本课题组前期制备的多克隆及单克隆P24抗体能否在石蜡组织切片上检测博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白(P24蛋白质)以及探索其运用的条件。方法:选择出生24 h内的SD大鼠20只为实验组颅内注射BDV病毒液,对照组大鼠2... 详细信息

目的:验证本课题组前期制备的多克隆及单克隆P24抗体能否在石蜡组织切片上检测博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白(P24蛋白质)以及探索其运用的条件。方法:选择出生24 h内的SD大鼠20只为实验组颅内注射BDV病毒液,对照组大鼠20只在相同部位注射磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS),未经注射的SD大鼠和C57小鼠各40只作为阴性实验对照,饲养到60 d取脑石蜡包埋制片;免疫组化染色用Envision两步法,一抗为多克隆或单克隆P24抗体,以PBS代替一抗作为空白对照,P24抗体的稀释浓度分别从1∶50、1∶100、1∶200、1∶400直到1∶5 000;以高倍镜下神经细胞细胞质呈棕黄色或棕褐色颗粒为阳性,将每张切片阳性细胞比例评分乘以阳性强度评分计算总分。结果:多克隆P24和单克隆P24抗体分别在BDV感染大鼠实验组与阴性对照组的染色评分差异有统计学意义(多克隆抗体Z=-3.108,P=0.000;单克隆抗体Z=-4.605,P=0.000);在多克隆P24抗体稀释度中,1∶200、1∶400的敏感性好而背景着色较轻,在单克隆P24抗体稀释度中,1∶100、1∶200、1∶400的敏感性好而无背景着色。结论:多克隆及单克隆P24抗体在石蜡组织切片上能检测出BDV P24蛋白质;并且多克隆P24抗体推荐的浓度为1∶200和1∶400,单克隆P24抗体的推荐浓度为1∶100、1∶200和1∶400。

关键词：多克隆P24抗体单克隆P24抗体博尔纳病病毒免疫组化染色

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重性抑郁患者血浆双向电泳图谱的构建

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激光杂志 2013年第6期34卷 91-92页

作者：杨涌涛房亮詹远彭扬吴波周林科陈亮谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的:建立稳定的重性抑郁血浆双向凝胶电泳技术体系。方法:从血浆蛋白质样品制备、等电聚焦和水化方式等方面对双向凝胶电泳分离技术进行优化。结果:建立了稳定的抑郁症血浆双向凝胶电泳图谱,达到了较好的血浆蛋白分离效果。结论:成功... 详细信息

目的:建立稳定的重性抑郁血浆双向凝胶电泳技术体系。方法:从血浆蛋白质样品制备、等电聚焦和水化方式等方面对双向凝胶电泳分离技术进行优化。结果:建立了稳定的抑郁症血浆双向凝胶电泳图谱,达到了较好的血浆蛋白分离效果。结论:成功的血浆图谱构建,为进一步开展重性抑郁诊断和机制研究奠定基础。

关键词：蛋白质组学双向电泳血浆

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442例不同年龄段抑郁症患者的临床特征及治疗回顾性分析

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重庆医科大学学报 2010年第9期35卷 1298-1300页

作者：谢亮赵兰房亮王嘉佳冯裕星展群岭李雷雷牟君谢鹏胡华重庆医科大学附属第一医院精神卫生中心重庆医科大学神经科学研究中心神经生物学重庆市市级重点实验室重庆400016

目的:调查分析重庆地区不同年龄段抑郁症患者的临床特征及治疗药物特点,探寻在不同年龄段抑郁症患者临床特征及治疗是否存在差异。方法:采取回顾性分析方法,调阅2006～2009年重庆医科大学附属第一医院585例抑郁症患者住院病历,选择其中... 详细信息

目的:调查分析重庆地区不同年龄段抑郁症患者的临床特征及治疗药物特点,探寻在不同年龄段抑郁症患者临床特征及治疗是否存在差异。方法:采取回顾性分析方法,调阅2006～2009年重庆医科大学附属第一医院585例抑郁症患者住院病历,选择其中病历资料完整并符合本研究要求的442例进行分析,青少年组37例,中青年组338例,老年组67例,应用抑郁症病历回顾资料调查表,采用SPSS13.0软件统计分析。结果:3组患者在年龄、文化程度及婚姻差异有统计学意义,在性别、性格及家族史阳性差异无统计学意义;青少年组生活事件发生率高于老年组(χ2=5.63,P<0.05);老年组合并躯体疾病发生率高于中青年组(χ2=20.17,P<0.01),中青年组合并躯体疾病比率高于青少年组(χ2=5.12,P<0.05);老年组焦虑症状发生率高于青少年组和中青年组(χ2=12.43,P<0.01;χ2=15.23,P<0.01),3组患者在药物治疗方面差异无统计学意义。结论:不同年龄段的抑郁症患者在发生诱因上有差异,随着年龄的增长,以躯体疾病为诱因引发抑郁症的比例会增大。不同年龄段抑郁症患者在临床症状也存在差异,相对青少年患者及中青年患者,老年期患者有更多的焦虑症状。不同年龄段患者在抗抑郁药物选择上差异无统计学意义。

关键词：抑郁症临床特征治疗药物回顾分析

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抗博尔纳病病毒核蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

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免疫学杂志 2012年第3期28卷 247-250页

作者：徐晓艳金戈张亮李文娟邓婧马丽华黄荣忠房亮谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室 400016 三峡医药高等专科学校基础医学部重庆404002

目的制备并鉴定鼠抗博尔纳病病毒核蛋白单克隆抗体。方法重组核蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤并进行有限稀释法克隆和亚克隆,建立分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯... 详细信息

目的制备并鉴定鼠抗博尔纳病病毒核蛋白单克隆抗体。方法重组核蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤并进行有限稀释法克隆和亚克隆,建立分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化单克隆抗体并进行效价测定和特异性鉴定。结果建立了1株能稳定分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2F6E8,重链为IgG2a,轻链为κ。ELISA法测得腹水的效价高达1∶32 000以上。Western-blot和间接免疫荧光实验证实该单克隆抗体能特异性结合重组核蛋白及天然核蛋白。结论成功制备了效价高、特异性好的抗核蛋白单克隆抗体,为建立博尔纳病病毒血清免疫学检测方法奠定了基础。

关键词：博尔纳病病毒核蛋白单克隆抗体鉴定

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米氮平辅助治疗精神分裂症阴性症状疗效与安全性的Meta分析

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第三军医大学学报 2013年第18期35卷 1984-1988页

作者：郭菁李雷雷黄婷曹笃谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物学重点实验室重庆400016 中国疾控预防控制中心卫生应急中心监测预警与风险评估办公室北京102206

目的探索米氮平联合常规抗精神病药物治疗精神分裂症阴性症状的疗效与安全性。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Controlled Trials Register(CCTR)、EBSCO、web of knowledge、psycINFO、中国知网(CNKI)、万方、中国生物医学数据... 详细信息

目的探索米氮平联合常规抗精神病药物治疗精神分裂症阴性症状的疗效与安全性。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Controlled Trials Register(CCTR)、EBSCO、web of knowledge、psycINFO、中国知网(CNKI)、万方、中国生物医学数据库(CBM)以及维普(VIP)数据库,选择已发表的关于米氮平合并使用抗精神病药物治疗精神分裂症患者阴性症状的临床随机对照试验进行Meta分析,纳入文献截止时间为2012年10月11日。结果共纳入8项随机对照试验,米氮平联合抗精神病药物治疗精神分裂症阴性症状的有效率[OR(95%CI)=3.75(2.73,5.16)]和痊愈率[OR(95%CI)=2.21(1.23,3.99)]与单用抗精神病药物治疗有明显统计学差异,有效率与痊愈率均高于单用抗精神病药物治疗组(P<0.01)。米氮平联合抗精神病药物组的失眠与恶心的发生率明显低于单用抗精神病药物组(P<0.05),而嗜睡的发生率要高于单用抗精神药物组(P<0.05),其他不良反应的发生率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论米氮平联合抗精神病药物能显著改善精神分裂症的阴性症状,同时并未增加抗精神病药物的常见副反应发生率。

关键词：米氮平精神分裂症阴性症状 Meta分析

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