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中国老年学杂志 2012年第21期32卷 4655-4658页

作者：孔渝菡秦新月郭振委重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的观察几种不同的缺血后处理(IPC)方式对大鼠缺血再灌注(I/R)后神经损伤影响,为缺血性脑损伤的保护策略提供依据。方法 SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组、大脑中动脉I/R模型组I/R、IPC(颈总动脉10 s×6次循环)(IPC-S组)、IPC(... 详细信息

目的观察几种不同的缺血后处理(IPC)方式对大鼠缺血再灌注(I/R)后神经损伤影响,为缺血性脑损伤的保护策略提供依据。方法 SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组、大脑中动脉I/R模型组I/R、IPC(颈总动脉10 s×6次循环)(IPC-S组)、IPC(颈总动脉5 min×3次循环)(IPC-M组)、远隔IPC(股动脉5min×3次循环)(RIPC组)、延迟后处理(缺血24 h后颈总动脉5 min×3次循环)(DIPC组)。I/R 48 h用TTC染色测量脑梗死体积,RT-PCR检测缺血侧皮质及海马排斥导向分子a(RGMa)mRNA表达,免疫组织化学法检测缺血皮质及海马RGMa蛋白表达。结果 IPC-S、IPC-M、RIPC组相比I/R组脑梗死体积、RGMa mRNA和蛋白表达均有不同程度下降(P<0.05)。但DIPC组较模型组各相应指标变化不明显(P>0.05)。结论使用早期、近端、短暂的缺血后处理能减少大鼠脑缺血性损伤后梗死体积,缺血后处理的脑保护机制可能与降低RGMa这一轴突生长负性分子的表达有关。

关键词：脑梗死缺血后处理排斥导向分子

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1,25二羟基维生素D_3联合5-氟尿嘧啶对人食管癌Eca-109细胞移植瘤的影响

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南方医科大学学报 2012年第4期32卷 575-579页

作者：李钢蒋迎九吴庆琛李强余敏汤为学重庆医科大学附属第一医院胸心外科重庆400016 重庆市北碚区中医院重庆400711 重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的探讨1,25二羟基维生素D3、5-氟尿嘧啶单独或联合作用对人食管癌Eca-109细胞裸鼠移植瘤胰岛素生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的影响。方法体外培养人食管癌Eca-109细胞,BALB/c裸小鼠皮下接种荷瘤后随机分为对照组(A)、1,25二羟基维生... 详细信息

目的探讨1,25二羟基维生素D3、5-氟尿嘧啶单独或联合作用对人食管癌Eca-109细胞裸鼠移植瘤胰岛素生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的影响。方法体外培养人食管癌Eca-109细胞,BALB/c裸小鼠皮下接种荷瘤后随机分为对照组(A)、1,25二羟基维生素D3组(B)、5-氟尿嘧啶组(C)、联合用药组(D),2.5μg/kg 1,25二羟基维生素D3、25 mg/kg 5-氟尿嘧啶单独或联合腹腔注射,对照组用等体积生理盐水腹腔注射,观察瘤体生长情况,运用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中IGFBP-3蛋白表达,全自动生化分析仪检测血清钙离子水平、Von kossa染色观察肾脏钙沉积情况。结果与A组比较,B、C、D组移植瘤生长缓慢,体积较小,IGFBP-3阳性蛋白染色较深,且表达量较多(P<0.05);而D组较B、C组移植瘤IGFBP-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。B、C、D组血清钙离子水平较A组稍有升高,但肾脏组织切片Von kossa染色未见钙沉积。结论 1,25二羟基维生素D3、5-氟尿嘧啶均能抑制移植瘤生长,且联合用药效果更为显著,可能与上调移植瘤组织IGFBP-3蛋白表达有关。肾脏Von kossa染色未见钙沉积。

关键词：食管癌 1,25二羟基维生素D3 5-氟尿嘧啶胰岛素生长因子结合蛋白-3 钙沉积

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肾癌ACHN细胞exosome对自身细胞增殖和凋亡的影响

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南方医科大学学报 2012年第10期32卷 1498-1502页

作者：杨林吴小候罗春丽何云锋张尧陈雄张龙陈力学重庆医科大学附属第一医院泌尿外科重庆400016 重庆医科大学检验医学院实验诊断教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心//重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的探讨肾癌ACHN细胞来源的exosome对肾癌ACHN细胞自身增殖和凋亡的影响及机制。方法用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome;采用CCK-8法评价exosome对肾癌ACHN细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染... 详细信息

目的探讨肾癌ACHN细胞来源的exosome对肾癌ACHN细胞自身增殖和凋亡的影响及机制。方法用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome;采用CCK-8法评价exosome对肾癌ACHN细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡的变化;RT-PCR和Western blotting检测CyclinD1、caspase-3 mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测p-Akt、p-ERK1/2的变化。结果成功使用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome。exosome可促进肾癌ACHN细胞增殖,抑制其凋亡;在此过程中,CyclinD1 mRNA和蛋白的表达均上调,而caspase-3 mRNA表达无明显变化,caspase-3蛋白表达下调;同时p-Akt和p-ERK1/2的表达也上调。结论 exosome可促进肾癌ACHN细胞生长和增殖,抑制细胞凋亡。筛除肾癌微环境中的exosome或抑制其功能,可能成为肾癌治疗的有效新方法。

关键词： exosome 肾癌增殖凋亡 ACHN细胞

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蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的改善作用

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第三军医大学学报 2012年第19期34卷 1940-1943页

作者：张刘平陈志雄安昌勇寇耀唐华汤为学重庆医科大学附属第一医院胃肠外科重庆2400016 重庆医科大学附属第一医院重庆市神经病学重点实验室重庆2400016

目的研究不同剂量蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的预防和治疗作用。方法采用小鼠结肠腺癌C26细胞接种BALB/c小鼠诱导的肿瘤恶病质模型。分为对照组(HC),肿瘤恶病质组(CC),MG132预防的低浓度组(PL),中浓度组(PM)和高浓度组(PH),MG132... 详细信息

目的研究不同剂量蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的预防和治疗作用。方法采用小鼠结肠腺癌C26细胞接种BALB/c小鼠诱导的肿瘤恶病质模型。分为对照组(HC),肿瘤恶病质组(CC),MG132预防的低浓度组(PL),中浓度组(PM)和高浓度组(PH),MG132治疗的低浓度组(TL)、中浓度组(TM)和高浓度组(TH)。每天监测小鼠体质量、饮食量和肿瘤体积,预防组和治疗组分别于接种后第5、12天开始每天腹腔注射MG132(0.01、0.1、0.5 mg/kg)。第19天各组处死8只小鼠,称量肿瘤、左侧腓肠肌和附睾脂肪组织质量,检测血清葡萄糖(Glu)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平。CC、PM和TM组剩余8只小鼠继续原治疗至其死亡,观察生存时间。结果与CC组相比,MG132预防和治疗组小鼠自发活动量、去瘤体质量、腓肠肌纤维横切面积、腓肠肌和附睾脂肪质量增加,Glu和ALB水平升高,TG水平降低,生存时间延长,均以PM和TM组效果最好,且两组间以上指标差异均有统计学意义(P<0.05);PH组最显著地抑制了肿瘤生长(P<0.05)。结论 MG132的中浓度剂量能较好地改善恶病质,延长生存时间,且预防效果更明显。

关键词：蛋白酶体抑制剂 MG132 肿瘤恶病质

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VCTDSA联合CT灌注成像对急性缺血性脑卒中影像诊断价值

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中风与神经疾病杂志 2012年第3期29卷 217-220页

作者：魏有东吕发金李琦邹德智谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的探讨容积CT数字减影血管造影VCTDSA联合CT灌注成像在急性缺血性脑卒中的诊断价值。方法对30例临床诊断为急性缺血性脑卒中的患者于发病后24h内行VCTDSA联合CT灌注成像,观察CT平扫表现及灌注图像、VCTDSA重建图像结果。测定相应区域... 详细信息

目的探讨容积CT数字减影血管造影VCTDSA联合CT灌注成像在急性缺血性脑卒中的诊断价值。方法对30例临床诊断为急性缺血性脑卒中的患者于发病后24h内行VCTDSA联合CT灌注成像,观察CT平扫表现及灌注图像、VCTDSA重建图像结果。测定相应区域脑血流量(CBF),脑血容量(CBV),平均通过时间(MTT)和达峰时间(TTP)。结果 25例急性缺血性脑卒中患者头部CT平扫未发现与临床症状相对应的脑缺血区,CT灌注图上可发现与临床症状相对应的脑缺血区。CT灌注成像表现为CBF下降、CBV下降、MTT延长、TTP延长或无TTP出现。VCTDSA可见23例患者相应责任血管的不同程度的狭窄,其余7例患者未检出相应责任血管狭窄。结论 CT灌注成像在急性缺血性脑卒中的早期诊断中有很重要的价值。VCTDSA能发现缺血病变的原因,为临床进一步治疗提供确切依据。

关键词：容积CT数字减影血管造影 CT灌注成像缺血性脑卒中

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下调PTEN基因对偏头痛大鼠三叉神经节NMDAR1和一氧化氮的影响

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中国疼痛医学杂志 2012年第3期18卷 163-168页

作者：冉丽申崇标陈力学谭戈桂蓓周冀英张和重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:利用RNAi重组腺病毒下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphata-se and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)的表达,探讨PTEN基因是否参与偏头痛的病理过程及其对三叉神经节内N-甲基-D-天冬氨酸受体1亚... 详细信息

目的:利用RNAi重组腺病毒下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphata-se and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)的表达,探讨PTEN基因是否参与偏头痛的病理过程及其对三叉神经节内N-甲基-D-天冬氨酸受体1亚基(N-methyl-D-aspartate receptor1,NMDAR1,简写NR1)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响。方法:SD大鼠分成4组:假手术组(Sham组,n=12);硝酸甘油模型组(NTG组,n=12);PTEN基因下调组(AdR-siPTEN组,n=12);Ad-RFP非特异siRNA处理空载体对照组(Ad-RFP组,n=12)。将重组腺病毒立体定向注射入大鼠三叉神经节内,一周后通过皮下注射NTG建立偏头痛大鼠模型,分别于NTG注射前及注射后15分钟、30分钟、1、2、4小时观察大鼠痛阈变化,同时检测各组大鼠三叉神经节NR1和NO的差异。结果 :AdR-siPTEN腺病毒可下调三叉神经节PTEN基因的表达。与Ad-RFP组相比,AdR-siPTEN组的偏头痛大鼠痛阈明显增高,并且三叉神经节内NR1表达及NO合成明显减少。结论 :PTEN基因参与调节偏头痛的病理过程,下调PTEN基因可减轻NTG诱导的偏头痛大鼠模型对机械性刺激的反应,其机制可能是下调PTEN引起NR1表达量减低,继而引起NO含量降低所致。

关键词：偏头痛第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因 N-甲基-D-天门冬氨酸受体1亚基一氧化氮

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siRNA沉默B7-H4表达对人肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2012年第2期19卷 143-147页

作者：孟凡珍江涛汤为学重庆医科大学附属第一医院呼吸内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:探讨靶向B7-H4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移的影响。方法:体外化学合成B7-H4特异性siRNA(B7-H4-siRNA),转染A549细胞,MTT法、流式细胞术、Western blotting分别检测A549细胞的增殖、细胞周期,以及B7-H4和Cyclin D1蛋白的水平;Transwell实验检测A549细胞体外侵袭和迁移能力。结果:B7-H4-siRNA成功转染入A549细胞,Western blotting结果显示,B7-H4-siRNA转染抑制A549细胞中B7-H4和Cy-clin D1蛋白的表达。B7-H4-siRNA转染后A549细胞增殖活性明显下降,B7-H4-siRNA组A549细胞的倍增时间明显长于未转染组、Ctrl-siRNA组和转染试剂对照组[(33.78±0.26)h vs(28.69±0.18)、(27.32±0.13)、(26.93±0.19)h,P<0.05]。B7-H4-siRNA转染使A549细胞阻滞在G1期。B7-H4-siRNA组A549细胞的侵袭细胞数明显少于未转染组[(89.80±0.99)个vs(186.20±1.33)个,P<0.05]。B7-H4-siRNA组A549细胞的迁移细胞数明显少于未转染组、Ctrl-siRNA组和转染试剂对照组[(60.20±0.37)个vs(102.57±0.52)、(100.72±0.31)、(98.65±0.21)个,P<0.05〗。结论:B7-H4-siRNA能沉默A549细胞中B7-H4的表达,抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移,B7-H4可能成为肺癌基因治疗的候选靶点。

关键词：肺癌 B7-H4基因 siRNA 增殖侵袭迁移

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pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗对鱼藤酮慢性帕金森病小鼠的治疗作用

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中国神经精神疾病杂志 2012年第2期38卷 87-91页

作者：杨旭杨云鹏马英周长青张玉平陈中美彭国光重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016 南充川北医学院附属医院神经内科

目的探讨优化人α-突触核蛋白(humanα-synuclein,hα-syn)核酸疫苗pVAX1-IL4/SYN-B对鱼藤酮慢性帕金森病小鼠的治疗效果。方法采用鱼藤酮1 mg/kg给予背部皮下注射,1次/d,连续注射40 d,建立慢性帕金森病小鼠模型。建模后小鼠随机分为3组... 详细信息

目的探讨优化人α-突触核蛋白(humanα-synuclein,hα-syn)核酸疫苗pVAX1-IL4/SYN-B对鱼藤酮慢性帕金森病小鼠的治疗效果。方法采用鱼藤酮1 mg/kg给予背部皮下注射,1次/d,连续注射40 d,建立慢性帕金森病小鼠模型。建模后小鼠随机分为3组:核酸疫苗组、空质粒组、PBS组(n=8)。于小鼠双侧后肢胫前肌部位,分别注射pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗,空质粒pVAX1,PBS各100μL,共免疫3次,每次间隔3周。末次免疫后2周,观察小鼠行为学变化;免疫组化方法检测小鼠脑黑质致密部α-syn表达和酪氨酸羟化酶阳性细胞数目变化;RT-PCR检测α-syn mRNA表达情况。结果行为学观察各组小鼠自由活动实验显示,核酸疫苗组与空质粒组及PBS组小鼠移动格子数和下肢站立次数均有明显改善(P<0.05)。免疫组化检测发现核酸疫苗组小鼠与空质粒组、PBS组相比,TH阳性细胞数增加51.43%、59.00%(P<0.05),α-syn表达减少45.64%、43.28%,(P<0.05)。RT-PCR检测发现核酸疫苗组α-syn mRNA表达水平(0.37±0.17)较空质粒组(0.80±0.01)及PBS组(0.74±0.05)明显减少(P<0.05)。结论 hα-syn核酸疫苗有较强改善帕金森病小鼠行为学的作用;能有效改善鱼藤酮神经毒素对黑质多巴胺能神经元的损害,能对帕金森病小鼠产生较好的免疫治疗作用。

关键词：帕金森病 α-突触核蛋白核酸疫苗鱼藤酮免疫治疗

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骨髓间充质干细胞改善糖尿病大鼠勃起功能障碍的研究

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重庆医科大学学报 2012年第10期37卷 854-858页

作者：聂永华肖明朝苟欣汤为学陈力学蔡贤福重庆医科大学附属第一医院泌尿外科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心、重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:探讨骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)移植到大鼠阴茎海绵体组织后对勃起功能的影响。方法:体外分离培养BMMSCs并利用形态学及流式细胞术进行鉴定证实。用腹腔注射链脲左菌素(Streptozotocin,STZ)建... 详细信息

目的:探讨骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)移植到大鼠阴茎海绵体组织后对勃起功能的影响。方法:体外分离培养BMMSCs并利用形态学及流式细胞术进行鉴定证实。用腹腔注射链脲左菌素(Streptozotocin,STZ)建立糖尿病性大鼠模型,并用阿扑吗啡(Apomorphine,APO)筛选出糖尿病勃起功能障碍(Diabetes mellitus induced erectiledysfunction,DMED)大鼠模型,成模后将BMMSCs(2×106个)移植于大鼠阴茎海绵体内。2周后,分别对正常组、糖尿病组及治疗组进行海绵体内压(Intracorporeal pressure,ICP)及平均动脉压(Mean arterial blood pressure,MAP)测定并取大鼠阴茎海绵体组织,荧光显微镜下观察BMMSCs的局部存活情况,苏木素-伊红染色(Hematoxylin and eosin,HE)观察阴茎海绵体组织中血管。结果:荧光显微镜观察提示BMMSCs能在糖尿病大鼠体内存活;勃起功能测定结果表明治疗组大鼠ICP/MAP比值明显高于糖尿病组;HE染色结果显示在治疗组大鼠阴茎海绵体中血管数目[(12.75±1.89)根/HP]多于糖尿病组[(8.05±1.43)根/HP]。结论:BMMSCs能够有效改善糖尿病性大鼠勃起功能。

关键词：骨髓间充质干细胞勃起功能障碍糖尿病

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粉防己碱对血管性痴呆大鼠齿状回S1000B蛋白表达的研究

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激光杂志 2012年第1期33卷 72-73页

作者：陈连连陈力学曾照芳重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室400016 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心、重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:探讨粉防己碱(Tet)对血管性痴呆(VaD)大鼠齿状回S1000B蛋白表达的影响以及在血管性痴呆发病中的作用。方法:运用双侧颈总动脉永久性结扎(2-VO法)建立VaD大鼠模型,Nissl染色观察海马齿状回(DG)神经元内的尼氏小体的变化,免疫荧光观... 详细信息

目的:探讨粉防己碱(Tet)对血管性痴呆(VaD)大鼠齿状回S1000B蛋白表达的影响以及在血管性痴呆发病中的作用。方法:运用双侧颈总动脉永久性结扎(2-VO法)建立VaD大鼠模型,Nissl染色观察海马齿状回(DG)神经元内的尼氏小体的变化,免疫荧光观察海马DG区S100B的表达情况,F1uo-3/AM探针负载后检测各组大鼠海马内〔Ca2+〕i浓度变化,探讨Tet改善VaD大鼠神经功能的分子机制。结果:Nissl染色后,Tet干预组大鼠海马DG区尼氏小体较模型组显著增多;免疫标记发现Tet干预组大鼠DG区神经元内S100B蛋白的表达量明显增多;Tet干预组大鼠海马〔Ca2+〕i浓度显著下降(p<0.05)。结论:Tet可改善大鼠脑缺血损伤引起的学习记忆能力障碍,可能与Tet下调S100B蛋白,抑制钙离子有关。

关键词：血管性痴呆粉防己碱 S100B 钙离子双侧颈总动脉结扎

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