检索结果-内蒙古大学图书馆

qAnti-HBc与慢性乙型肝炎儿童抗病毒疗效的相关性分析及可能免疫机制探索

中华肝脏病杂志 2021年第9期29卷 837-843页

作者：周英芝常宇南何怡王慧敏彭小蓉陈敏彭明利胡鹏任红许红梅重庆医科大学附属儿童医院感染科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童感染免疫重庆市重点实验室400014 重庆医科大学附属第二医院感染科教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所400010

目的﹑比较行抗病毒治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患儿无应答组和应答组间基线乙型肝炎核心抗体定量(qAnti-HBc)水平的差异,以探讨不同qAnti-HBc水平患儿外周血CD_(8)^(+)记忆T细胞亚群比例及其功能活性。方法︰回顾性检测2018年6月... 详细信息

目的﹑比较行抗病毒治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患儿无应答组和应答组间基线乙型肝炎核心抗体定量(qAnti-HBc)水平的差异,以探讨不同qAnti-HBc水平患儿外周血CD_(8)^(+)记忆T细胞亚群比例及其功能活性。方法︰回顾性检测2018年6月至2020年12月于重庆医科大学附属儿童医院感染科就诊的85例HBeAg阳性CHB患儿基线qAnti-HBc水平。分析其中37例抗病毒治疗患儿基线qAnti-HBc水平与HBeAg血清学应答的关系。流式细胞检测59例患儿基线外周血CD_(8)^(+)记忆T细胞亚群比例及干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α分泌水平,分析qAnti-HBc水平与CD_(8)^(+)记忆T细胞亚群比例及其功能活性间的关系。计数资料比较采用Pearson's Chi-square检验,两组或多组间计量资料比较采用Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis检验,连续性变量间的相关性采用Spearman秩相关分析。结果﹐在37例接受恩替卡韦(ETV,21/37)或聚乙二醇干扰素)(Peg-IFN,16/37)治疗的患儿中,有18例发生HBeAg血清学转换(ETV组10/21,Peg-IFN组8/16),应答组患儿基线qAnti-HBc水平[4.71(4.64~4.81)log_(10)IU/ml]显著高于无应答组[4.54(4.45~4.64)log_(10)IU/ml,Z=-3.316,P=0.001]。高qAnti-HBc组CD8^(+)Tem,CD38^(+)CD8^(+)Tem、CD38^(+)CD8^(+)Temra细胞比例及CD8^(+)T细胞分泌的IFN-γ、TNF-α水平显著高于低qAnti-HBc组(P<0.05);ALT>1×正常值上限(ULN)组CD8^(+)Tem、CD38^(+)CD8^(+)Tem,CD38^(+)CD8^(+)Temra细胞比例显著高于ALT≤1×ULN组(P<0.05),但两组CD8T细胞分泌的IFN-γ、TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关分析显示,qAnti-HBc与CD8^(+)Tem、CD38^(+)CD8^(+)Tem、CD38^(+)CD8^(+)Temra细胞比例及CD8^(+)T细胞分泌的IFN-γ水平呈正相关(P<0.05),ALT仅与CD38^(+)CD8^(+)Tem、CD38^(+)CD8^(+)Temra细胞比例呈正相关(P<0.05)。结论﹑较高的基线qAnti-HBc水平与CHB儿童患者抗病毒治疗HBeAg血清学应答相关﹔qAnti-HBc较高的CHB患儿外周血效应CD8T细胞表现出更强的表型及功能活化特点,此研究可能对CHB儿童抗病毒治疗疗效相关的潜在免疫机制作出一定阐释。

关键词：慢性乙型肝炎乙型肝炎核心抗体定量 CD8阳性T细胞儿童

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IRF-7在急性HBV感染小鼠模型肝脏中的表达变化分析

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免疫学杂志 2015年第7期31卷 572-575页

作者：王磊常琳彭辉陈敏重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学省部共建教育部重点实验室 400016 重庆医科大学附属第二医院检验科 400010

目的本文拟通过构建急性乙型肝炎病毒(HBV)感染小鼠模型,观察干扰素调节因子-7(IRF-7)的mRNA及蛋白表达水平在急性HBV感染小鼠模型中的变化,以期探讨IRF-7在HBV急性感染清除机制中的作用。方法用高压水动力法经小鼠尾静脉注射HBV基因组... 详细信息

目的本文拟通过构建急性乙型肝炎病毒(HBV)感染小鼠模型,观察干扰素调节因子-7(IRF-7)的mRNA及蛋白表达水平在急性HBV感染小鼠模型中的变化,以期探讨IRF-7在HBV急性感染清除机制中的作用。方法用高压水动力法经小鼠尾静脉注射HBV基因组1.3倍体真核表达质粒(pcDNA3.1-HBV1.3)构建急性乙型肝炎病毒感染小鼠模型,用RT-PCR和Western blot检测正常组(NC组)、模型组(pHBV组)及空载体组(pcDNA组)小鼠肝脏中IRF-7的mRNA和蛋白表达水平。结果 pHBV组在6 h即可检测到肝脏内HBsAg及HBcAg阳性,抗原表达在12 h达峰值,至第5天逐渐消失。pHBV组肝脏组织中IRF-7 mRNA和蛋白表达在6 h均显著上调(P<0.05),12 h达最高,随后下降,48 h恢复至正常水平。而pcDNA组与正常组的IRF-7表达在各时间点均无显著变化。结论成功构建了急性HBV感染小鼠模型,该模型肝脏组织IRF-7 mRNA及蛋白水平变化与肝脏内HBV抗原表达变化趋势一致,提示肝脏内IRF-7可能参与了HBV的急性感染清除过程。

关键词：干扰素调节因子-7 乙型肝炎病毒急性感染小鼠动物模型

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第三军医大学学报 2012年第17期34卷 1733-1736页

作者：彭辉陈维贤常琳陈敏重庆医科大学附属第二医院检验科重庆400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学省部共建教育部重点实验室重庆400010

目的探讨HBV感染相关的慢加急性肝衰竭患者(HBV-associated acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)外周血中TCRγδT(γδT)细胞的比例及产生IFN-γ、TNF-α及IL-17等促炎细胞因子的能力,分析它们与临床指标间的相关性。方法入选26... 详细信息

目的探讨HBV感染相关的慢加急性肝衰竭患者(HBV-associated acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)外周血中TCRγδT(γδT)细胞的比例及产生IFN-γ、TNF-α及IL-17等促炎细胞因子的能力,分析它们与临床指标间的相关性。方法入选26例HBV-ACLF患者、40例慢性HBV感染患者(CHBV)、25例健康对照者,用流式细胞仪方法检测外周血中γδT细胞的频率及产生炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17细胞的比例,采用SPSS 13.0统计软件分析各组间各细胞比例的差异及细胞比例与临床指标的相关性。结果 HBV-ACLF患者外周血中γδT细胞占总T细胞的比例的中位值为4.8%,低于CHB患者(10.7%)与健康对照者(10.3%),差异有统计学意义(P<0.01)。在体外经刺激后,IFN-γ阳性的γδT细胞在HBV-ACLF组的比例中位值为73.9%、CHBV组为70.9%,高于健康对照组(45.3%,P<0.01);HBV-ACLF患者中TNF-α阳性的γδT细胞中位值为26.7%,显著高于CHBV患者(11.5%)及健康对照组(11.7%,P<0.01);产生IL-17因子的γδT在HBV-ACLF组中中位值为0.7%,高于CHBV组(0.3%)及健康对照组(0.3%,P<0.01)。经Spearman Correlation相关性分析,HBV-ACLF组中TNF-α+γδT细胞的比例与ALT或AST水平呈负相关。结论虽然HBV-ACLF患者外周血中总的γδT细胞比例降低,但产生炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17的能力显著增强,可能参与了HBV-ACLF发病过程中炎症因子急剧升高的过程。

关键词： γδT细胞慢加急性肝衰竭乙型肝炎病毒炎性因子

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利用pSOS系统筛选靶向HBV病毒X基因的siRNA

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生物技术通报 2010年第11期26卷 146-152页

作者：韦德芳高健曾春华彭明利任红重庆医科大学附属第二医院消化科重庆400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010

构建靶向乙肝病毒(HBV)X基因的真核表达载体pSOS-X-siRNA和pSOS-siRNA,转染肝癌细胞系HepG2和HepG2.2.15,筛选和验证高效siRNA。设计4个靶向X基因siRNA,将siRNA和HBx基因插入载体pSOS得重组质粒pSOS-X-siRNA;pSOS-X-siRNA经PacI酶切去除目的片段HBx后得pSOS-siRNA。将质粒pSOS-X-siRNA和pSOS-siRNA分别转HepG2和HepG2.2.15肝癌细胞株。荧光显微镜下观察HepG2细胞绿色荧光(GFP)减弱程度预估干扰效率。ELISA检测HepG2.2.15细胞上清HBsAg、HBeAg表达,Western blotting检测胞内蛋白HBsAg、HBcAg表达,Real time PCR检测胞内HBsmRNA、HBx mRNA的转录。转染4d后,siRNA4使HepG2细胞的GFP信号表达程度最低,为阴性对照的9%,预测其干扰效果最强。siRNA4使HepG2.2.15细胞转染后4d上清的HBsAg蛋白表达为对照的(13.92±1.14)%(P<0.05)、HBeAg为(21.69±4.92)%(P<0.05),胞内的HBsAg、HBcAg蛋白表达量灰度比值为0.175±0.025、0.0825±0.028,均为各处理组中最低(P<0.01),HBs mRNA和HBx mRNA分别降为对照的0.237±0.028(P<0.01)、0.110±0.022(P<0.01),差异有统计学意义,证实siRNA4为高效干扰位点。利用pSOS成功筛选并验证构建靶向HBV X基因的siRNA靶点。

关键词： pSOS 乙肝病毒 X基因 RNA干扰

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基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株及其表型研究

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免疫学杂志 2024年第1期40卷 87-95页

作者：李雪银吴传新刘慧玲李丽程莎孙航重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所401336 重庆医科大学附属第二医院肝胆外科 401336

目的采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成... 详细信息

目的采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成Lenti-IDO1-gRNA慢病毒。利用Cas9慢病毒感染THP-1细胞获得稳定表达Cas9蛋白的细胞株,再经Lenti-IDO1-gRNA慢病毒感染敲除IDO1基因,有限稀释法获得单克隆细胞株。T7E1酶切检测gRNA打靶效率,PCR产物测序和Western blot鉴定IDO1基因敲除效果。CCK8法检测IDO1基因敲除对THP-1细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测对巨噬细胞标志物CD11b、CD68和CD14表达的影响,中性红法检测巨噬细胞吞噬功能。结果成功构建了3种IDO1-gRNA重组质粒,3条gRNA均能有效编辑IDO1基因,以gRNA2编辑效率最高。经PCR产物测序和Western blot验证获得了3株THP-1 IDO1-KO单克隆细胞株,并发现IDO1基因敲除可抑制THP-1细胞增殖,下调THP-1巨噬细胞CD11b、CD68表达,上调CD14表达,增强THP-1巨噬细胞吞噬功能。结论成功构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株;IDO1对THP-1细胞增殖活性、分化调节以及THP-1巨噬细胞吞噬功能调节有重要作用,为后续进一步探讨IDO1基因在巨噬细胞中的功能及机制研究奠定基础。

关键词： CRISPR/Cas9 吲哚胺-2,3-双加氧酶1 基因敲除 THP-1细胞巨噬细胞

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中国西部地区丙型肝炎危害消除模式的探讨

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中华肝脏病杂志 2024年第S2期32卷 63-67页

作者：吴虓杨嫣曹青甘立松吴国辉蔡大川重庆市南岸区阳光健康服务中心重庆400060 重庆市疾病预防控制中心重庆400707 重庆医科大学附属第二医院感染病科重庆400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400010

丙型肝炎病毒感染作为一种对人类健康构成重大威胁的传染病,其防控工作在全球范围内引起了广泛关注。特别是在中国西部地区,由于地理环境的复杂性、经济发展水平的相对滞后以及文化背景的多样性,丙型肝炎的防控形势显得尤为严峻。该文... 详细信息

丙型肝炎病毒感染作为一种对人类健康构成重大威胁的传染病,其防控工作在全球范围内引起了广泛关注。特别是在中国西部地区,由于地理环境的复杂性、经济发展水平的相对滞后以及文化背景的多样性,丙型肝炎的防控形势显得尤为严峻。该文的主要目的是深入探讨中国西部地区丙型肝炎的危害消除模式,通过对当前丙型肝炎流行现状的详细分析、对其危害性的深入探讨以及防治策略的综合评估,结合中国西部地区的具体特点,提出切实可行的消除模式和具体措施。以期通过这些研究和建议,能够为西部地区乃至全国的丙型肝炎防控工作提供有价值的参考和借鉴,从而有效减轻丙型肝炎对人类健康的威胁。

关键词：丙型肝炎病毒预防消除治疗

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还原型谷胱甘肽治疗酒精性肝病疗效观察

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中国药房 2007年第17期18卷 1338-1339页

作者：刘毅张大志曾维群石小枫王志毅何华周智赵有蓉重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆市肝病治疗研究中心教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆市400010

目的:评价注射用还原型谷胱甘肽(阿拓莫兰)对酒精性肝病的疗效及安全性。方法:采用随机对照研究方法,以注射用还原型谷胱甘肽(古拉定)作对照,治疗261例酒精性肝病。患者按1:1随机分为2组,治疗组135例,对照组126例,2组用药剂量、途径及... 详细信息

目的:评价注射用还原型谷胱甘肽(阿拓莫兰)对酒精性肝病的疗效及安全性。方法:采用随机对照研究方法,以注射用还原型谷胱甘肽(古拉定)作对照,治疗261例酒精性肝病。患者按1:1随机分为2组,治疗组135例,对照组126例,2组用药剂量、途径及疗程相同。观察2组肝生化指标、临床症状及体征变化。结果:治疗组显效率58·5%,有效率23·7%,总有效率82·2%;对照组显效率57·9%,有效率22·2%,总有效率80·2%,2组比较无显著性差异(P=0·90)。结论:国产注射用还原型谷胱甘肽对酒精性肝病临床症状改善及肝生化指标恢复有良好的治疗作用,验证药与对照药疗效相当,且安全性好。

关键词：还原型谷胱甘肽酒精性肝病疗效比较

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慢性乙型肝炎儿童肝脏病理特征分析及其肝纤维化非侵入性指标探索

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中华肝脏病杂志 2021年第6期29卷 551-557页

作者：梁程飞常宇南彭小蓉何怡陈敏彭明利胡鹏任红许红梅重庆医科大学附属儿童医院感染科国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿童感染免疫重庆市重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆400014 教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆医科大学附属第二医院感染科重庆400010

目的分析总结儿童乙型肝炎患者肝脏病理学特征及其与临床指标间的相关性,进一步探索可用于儿童肝脏纤维化评估的非侵入性指标。方法回顾性分析2011年至2020年住院的80例行肝活检的未经抗病毒治疗的乙型肝炎患儿资料。分析不同年龄段及... 详细信息

目的分析总结儿童乙型肝炎患者肝脏病理学特征及其与临床指标间的相关性,进一步探索可用于儿童肝脏纤维化评估的非侵入性指标。方法回顾性分析2011年至2020年住院的80例行肝活检的未经抗病毒治疗的乙型肝炎患儿资料。分析不同年龄段及不同性别患儿的炎症和纤维化特征,选取与肝纤维化分期相关性较好的变量建立儿童肝纤维化非侵入性诊断评分。采用t检验或秩和检验比较计量资料,双向有序分组资料采用Mantel-Haenszelχ^(2)检验,等级相关性分析采用Spearman秩相关性检验,采用受试者操作特征曲线(ROC)评估新建立诊断评分对儿童肝纤维化的诊断价值。结果患儿中位年龄为6.4岁;HBV DNA水平较高(P50=7.6 log10 IU/ml);血清丙氨酸转氨酶(ALT)P50=171 U/L[<正常值上限(ULN):5例;1~2 ULN:10例;>2 ULN:65例]。病理学分析显示肝组织炎症的发生率为97.5%,G≥2者占比为42.5%;S≥2者占比为36.3%,肝纤维化的发生率为81.3%,肝硬化发生率为1.3%。肝组织炎症和纤维化改变随着患儿年龄增加逐渐加重,且男性患儿高等级炎症及纤维化改变的比例高于女性患儿。慢性乙型肝炎儿童的血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)水平、γ-谷氨酰转移酶/血小板比值(GPR)及HBeAg水平与纤维化分期具有较好相关性(r_(s)分别为0.397、0.389、-0.311),将GGT、GPR及HBeAg联合,可建立评估儿童患者肝纤维化的非侵入性诊断评分,当评分<1.5时,可诊断纤维化S0,1.5≤评分<3.5时,可诊断纤维化S1;3.5≤评分<5.5时,诊断纤维化S2;评分≥5.5时,诊断纤维化S≥3。其敏感度分别为80%、83%、86%,特异度分别为53%、55%、67%。结论转氨酶升高波动的慢性乙型肝炎患儿肝组织炎症发生率高,且肝组织病理改变随着患儿年龄增长而加重。GGT、GPR及HBeAg与乙型肝炎患儿肝脏纤维化相关性好,联合上述指标建立新的非侵入性诊断评分对慢性乙型肝炎儿童S0~S3期纤维化有一定诊断价值。

关键词：儿童慢性乙型肝炎肝活检炎症纤维化诊断

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肝再生增强因子对大鼠腹腔移植的肝细胞的影响

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中华器官移植杂志 2008年第7期29卷 398-401页

作者：张艳王志毅曾翔石小枫孙航刘杞重庆医科大学附属第二医院感染科 400010 自贡市第四人民医院外科重庆医科大学附属第二医院教育部感染性疾病分子生物学重点实验室病毒性肝炎研究所

目的探讨肝再生增强因子（ALR）对急性肝功能衰竭大鼠腹腔移植的肝细胞的影响。方法采用D-氨基半乳糖诱导SD大鼠急性肝功能衰竭（AHF），然后将其随机分为空白对照组（仅接受生理盐水腹腔注射）、移植对照组（腹腔移植SD大鼠的肝细胞2&#... 详细信息

目的探讨肝再生增强因子（ALR）对急性肝功能衰竭大鼠腹腔移植的肝细胞的影响。方法采用D-氨基半乳糖诱导SD大鼠急性肝功能衰竭（AHF），然后将其随机分为空白对照组（仅接受生理盐水腹腔注射）、移植对照组（腹腔移植SD大鼠的肝细胞2×10^7个）、环孢素A组（CsA组，接受肝细胞移植后腹腔注射CsA6d）、ALR组（接受肝细胞移植后腹腔注射ALR6d）和ALR对照组（仅腹腔注射ALR6d）。实验期为14d，观察受者的存活情况及移植肝细胞存活情况，检测腹腔内细胞CD4、CD8及CD68的表达情况，测定血清及腹腔冲洗液中白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNFα）的水平。结果空白对照组、移植对照组、CsA组、AL，R组及ALR对照组的受者2周存活率分别为0、46．7％、20％、66．7％和14．3％，ALR组显著高于空白对照组（P=0．001）。移植后1～2d，ALR组血清TNF-α和IL-1β明显低于空白对照组和移植对照组（P〈0．01）；移植对照组腹腔冲洗液中TNF-α和IL-1β水平明显高于其它各组（P〈0．05，P〈0．01）。至移植后14d，各组存活大鼠的血清TNF-α和IL-1β水平接近正常水平。移植后1～2d，ALR组移植物内CD68表达水平为（0．5±0．3）％，明显低于移植对照组和CsA组（P〈0．01）；ALR组腹腔内细胞CD68、CD4及CD8表达水平分别为（1．3±1．2）％、（0．1±0．3）％和（0．2±0．1）％，均明显低于移植对照组（P〈0．01，P〈0．01，P〈0．05）。移植后1～3d，接受肝细胞移植的大鼠腹腔内可见聚集成团的肝细胞结节，ALR组存活的肝细胞数明显多于移植对照组和CsA组，且炎症细胞浸润较少，至移植后14d，仅ALR组可见少量形态正常的肝细胞。结论腹腔内肝细胞移植联合ALR腹腔注射能提高AHF大鼠的存活率；ALR能短期改善移植肝细胞的存活状况。

关键词：肝细胞生长因子肝细胞细胞移植移植物存活

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NK与NKT细胞在慢加急性肝衰竭患者外周血中的变化分析

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重庆医学 2013年第31期42卷 3747-3749页

作者：彭辉常琳王磊陈敏重庆医科大学附属第二医院检验科 400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所/感染性疾病分子生物学省部共建教育部重点实验室 400016

目的研究NK及NKT细胞在乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血中的变化。方法用流式细胞仪分别检测25例健康对照者(HC)、40例慢性乙型肝炎(CHB)患者、26例HBV-ACLF患者外周血淋巴细胞中NK、NKT细胞的比例,经统计分析,比较各组... 详细信息

目的研究NK及NKT细胞在乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血中的变化。方法用流式细胞仪分别检测25例健康对照者(HC)、40例慢性乙型肝炎(CHB)患者、26例HBV-ACLF患者外周血淋巴细胞中NK、NKT细胞的比例,经统计分析,比较各组间NK或NKT的差异,同时分析HBV-ACLF组中的NK或NKT细胞与乙型肝炎标志物或肝功能间的相关性。结果 HC、CHB、HBV-ACLF组外周血的NK细胞比例分别为(15.0±6.0)%、(11.4±6.8)%和(8.9±6.7)%,HBV-ACLF组与其他两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而NKT细胞在HC、CHB、HBV-ACLF组外周血中的比例分别为(1.9±1.3)%、(4.3±3.7)%和(5.4±8.6)%,HBV-ACLF组与HC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBVACLF患者外周血内NK细胞比例显著性降低,而NKT细胞比例显著性升高,他们可能在HBV-ACLF疾病中发挥着一定的作用。

关键词：杀伤细胞,自然 NKT 慢加急性肝衰竭乙型肝炎病毒

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