检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2014年第3期36卷 232-235页

作者：冯倩刘杞向荣孙航刘燕倩胡怀东重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所国家教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆400010

目的探讨legumain在胃癌中的表达以及临床意义。方法采用免疫组织化学染色方法检测胃腺癌组织芯片上50例胃癌组织及2007年9月至2011年6月期间重庆医科大学附属第二医院普通外科收治的210例胃癌患者(其中男性140例,女性70例,平均年龄65岁... 详细信息

目的探讨legumain在胃癌中的表达以及临床意义。方法采用免疫组织化学染色方法检测胃腺癌组织芯片上50例胃癌组织及2007年9月至2011年6月期间重庆医科大学附属第二医院普通外科收治的210例胃癌患者(其中男性140例,女性70例,平均年龄65岁)经临床手术切除的胃癌组织中legumain的表达,分析其与多项临床指标间的相关性,运用单因素和多因素生存分析研究legumain表达以及各项临床指标与预后的关系。结果芯片上50例胃癌组织中,29例(58%)高表达legumain,而在50例相应正常组织中只有16例(32%)高表达legumain,胃癌组织中legumain表达较相应正常组织中高(P<0.05);在210例临床手术切除胃癌组织切片中,124例(59%)高表达legumain;legumain与多项临床指标间具有一定程度的相关性;生存分析结果显示legumain高表达(P<0.01)、MMP-9高水平(P<0.05)、肿瘤远处转移(P<0.01)以及肿瘤低分化(P<0.01)是影响胃癌预后的因素。结论 legumain在胃癌组织中高表达,高表达legumain的胃癌患者其生存率明显降低,legumain高表达是影响胃癌临床预后的独立危险因素。

关键词： legumain 胃癌 MMP-9 远处转移预后

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γδT细胞在急性乙型肝炎病毒感染小鼠模型中的变化分析

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中国免疫学杂志 2014年第1期30卷 18-23,29页

作者：常琳王磊彭辉陈敏重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学省部共建教育部重点实验室重庆400010 重庆医科大学附属第二医院检验科重庆400010

目的:通过构建急性乙型肝炎病毒(HBV)感染小鼠模型,观察肝脏内γδT细胞的比例、激活表型及细胞因子表达的变化,探讨γδT细胞在HBV急性感染清除机制中的作用。方法:用尾静脉高压水动力法注射HBV基因组1.3倍体真核表达质粒(pcDNA3.1-HBV... 详细信息

目的:通过构建急性乙型肝炎病毒(HBV)感染小鼠模型,观察肝脏内γδT细胞的比例、激活表型及细胞因子表达的变化,探讨γδT细胞在HBV急性感染清除机制中的作用。方法:用尾静脉高压水动力法注射HBV基因组1.3倍体真核表达质粒(pcDNA3.1-HBV1.3)构建急性乙型肝炎病毒感染小鼠模型,用流式细胞仪方法检测pcDNA3.1-HBV1.3质粒模型组(pHBV组)、pcDNA3.1对照质粒组(pcDNA组)在质粒注射后不同时间肝脏、脾脏及外周血中γδT细胞比例的变化,以及pHBV组肝脏中γδT细胞的CD25与CD69激活分子,IFN-γ及TNF-α细胞因子产生的变化,用SPSS统计软件分析各时间点及各组间的差异。结果:pHBV组血清中的HBsAg在第1天即为阳性(33.64±14.88 COI),到第5天上升到最高(146.92±24.23 COI),而后逐渐降低;而血清中的HBeAg在第1天为阳性并达峰值(2.26±2.34 COI),然后降低。而正常对照小鼠(NC)与pcDNA组的外周血中HBV标志物一直为阴性。在pHBV组中,肝脏内的γδT细胞的比例在第1天即升高至(8.3±4.3)%,而后降低,到第10天时,又快速升高至(8.0±1.2)%。统计结果显示,第1天的比例明显高于第5及15天的比例,差异有显著性(P<0.05)。但各时间点脾脏或外周血中的γδT细胞比例未见有明显的变化,差异无显著性(P>0.05)。在pcDNA组中,小鼠肝脏、脾脏或外周血中的γδT细胞比例均未见有显著性的变化发生(P>0.05)。同时pHBV组小鼠肝脏内CD25+γδT细胞比例在第5天升高至最高(8.4±3.7)%,但各时间点间的差异无显著性(P>0.05);而CD69+γδT细胞比例随着时间延长而逐渐降低,第10天的CD69+γδT细胞比例与其他组比较差异有显著性(P<0.05)。pHBV组第1天IFN-γ+γδT细胞比例升高至(8.6±3.2)%,之后即刻降低,与其他组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:急性乙型肝炎病毒感染小鼠模型构建成功,模型中肝脏内γδT细胞的比例、激活表型或细胞因子产生均发生了显著性变化,提示γδT细胞可能参与了急性HBV感染与清除过程。

关键词： γδT细胞乙型肝炎病毒急性感染非特异性免疫

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高通量测序分析5例母婴传播中HBV准种变化趋势

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重庆医科大学学报 2014年第10期39卷 1461-1465页

作者：陈茹娟唐香赖方方黄爱龙任红许红梅重庆医科大学附属儿童医院、儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室、儿科学重庆市重点实验室、重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆400014 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400014 重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆400010 重庆医科大学附属儿童医院感染消化科重庆400014

目的：探讨5例乙肝疫苗接种失败儿童及其母亲在母婴传播过程中乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）＂a＂决定簇准种变化趋势。方法：选择5例重庆地区乙肝疫苗接种失败的儿童及其母亲,应用PCR法扩增其HBV基因组全长,构建HBV全基因组... 详细信息

目的：探讨5例乙肝疫苗接种失败儿童及其母亲在母婴传播过程中乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）＂a＂决定簇准种变化趋势。方法：选择5例重庆地区乙肝疫苗接种失败的儿童及其母亲,应用PCR法扩增其HBV基因组全长,构建HBV全基因组测序文库后进行solexa高通量测序,并对测序数据进行生物信息学分析。结果：母子HBV序列同源性为99%～100%;5对母子HBV基因型均为B＋C混合型,其中4对优势基因型为B型,1对为C型,母子优势基因型相同;所有儿童均在＂a＂决定簇存在复杂度明显增高位点;5对母子＂a＂决定簇复杂度明显增高的氨基酸（Amino acid,aa）位点共有10个,仅存在于儿童的有2个,为aa126和aa143,儿童中有1例发生优势氨基酸突变,突变形式为G145R。结论：乙肝疫苗接种失败儿童在＂a＂决定簇存在准种现象,儿童体内的突变株可能来源于其母亲。

关键词：高通量测序乙肝病毒准种母婴传播

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干扰素治疗慢性乙型肝炎经治患者的疗效分析

干扰素治疗慢性乙型肝炎经治患者的疗效分析

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第九届全国肝脏疾病临床学术大会

作者：熊月丽胡鹏重庆医科大学附属第二医院感染科感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所 400010

目的评价干扰素治疗既往使用核苷类似物或干扰素的慢乙肝患者的疗效.方法回顾性分析49例既往使用核苷类似物或干扰素的慢性乙型病毒性肝炎患者(包括核苷经治组27例,干扰素经治组16例,干扰素联合核苷类似物经治组6例),分析接受干扰素... 详细信息

目的评价干扰素治疗既往使用核苷类似物或干扰素的慢乙肝患者的疗效.方法回顾性分析49例既往使用核苷类似物或干扰素的慢性乙型病毒性肝炎患者(包括核苷经治组27例,干扰素经治组16例,干扰素联合核苷类似物经治组6例),分析接受干扰素抗病毒治疗后在12周(早期应答率)、24周和48周的病毒学应答率,e抗原或s抗原血清学应答率以及ALT复常率.结果早期病毒学应答率：核苷经治组为55.6％干扰素经治组为68.75％,联合经治组为50％;24周病毒学应答率：核苷经治组66.7％,干扰素经治组75％,联合经治组50％;48周病毒学应答率：核苷经治组87.5％,干扰素经治组71.4％;差异均无统计学意义;e抗原或s抗原血清学应答率：12周：核苷经治组22.7％,干扰素经治组28.5％,联合经治组60％;24周：核苷经治组14.8％,干扰素经治组7.1％,联合经治组40％;48周：核苷经治组42.8％(其中28.5％发生s抗原消失),干扰素经治组50％,差异均无统计学意义;ALT复常率：12周：核苷经治组10.5％,干扰素经治组15.3％,联合经治组0％;24周：核苷经治组21％,干扰素经治组23％,联合经治组25％.48周：核苷经治组25％,干扰素经治组16.7％,差异均无统计学意义.结论干扰素治疗既往使用核苷类似物或干扰素的慢性乙型肝炎患者仍可获得较高的病毒学应答、生化应答及血清学应答率.

关键词：核苷类似物经治干扰素慢性乙型肝炎

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恩替卡韦联合阿德福韦酯和拉米夫定联合阿德福韦酯治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎的Meta分析

恩替卡韦联合阿德福韦酯和拉米夫定联合阿德福韦酯治疗拉米夫定耐...

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第九届全国肝脏疾病临床学术大会

作者：徐华曾腾周智重庆医科大学附属第二医院感染科感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所 400010

目的比较恩替卡韦(ETV)联合阿德福韦酯(ADV)与拉米夫定(LAM)联合阿德福韦酯(ADV)治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎的疗效.方法检索2013年3月10日前公开发表在Medline/Pumed,EMBASE,Cochrane数据库,收集有关的LAM耐药患者挽救治疗的研究,... 详细信息

目的比较恩替卡韦(ETV)联合阿德福韦酯(ADV)与拉米夫定(LAM)联合阿德福韦酯(ADV)治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎的疗效.方法检索2013年3月10日前公开发表在Medline/Pumed,EMBASE,Cochrane数据库,收集有关的LAM耐药患者挽救治疗的研究,按照严格的排纳标准筛选文献,使用Revman5.0对数据进行meta分析,检验各研究间的异质性,并计算分类变量(血清HBV DNA阴转率、血清ALT复常率、HBeAg阴转率及病毒突破率)合并相对危险度RR (relative risk)及95％可信区间(CI),连续变量(血清HBV DNA下降水平)合并平均差(mean difference MD)及95％ CI,并绘制森林图.结果共检索和筛查到655篇相关的文章,最后纳入4篇合格文献,研究对象共323例.Meta分析结果显示：①与拉米夫定联合阿德福韦酯组的疗效比较,经恩替卡韦联合阿德福韦酯治疗后,患者血清HBV DNA降低水平更加显著,且差异具有统计学意义：治疗3个月、6个月、12个月后,ETV+ADV组HBV DNA下降水平均较LAM+ADV组明显(3个月MD =0.90,95％ CI： 0.74 1.07,P＜0.00001;6个月MD=0.96,95％ CI：0.37 1.56,P=0.002;12个月MD=1.34,95％ CI.0.58 2.11,P=0.0006);②治疗6月后,ETV+ADV组的血清HBV DNA的阴转率高于LAM+ADV组(RR =1.63,95％ CI： 1.14 2.34,P=0.007);③ETV+ADV组治疗6个月后丙氨酸氨基转移酶(ALT)复常率高于LAM+ADV组(RR=3.64,95％ CI;1.,32 10.02,P=1.01);④ETV+ADV组在治疗12个月后病毒突破率较LAM+ADV组低(RR=0.24,95％ CI：0.10 0.58,P=0.002).结论对于LAM耐药的慢性乙型肝炎患者,ETV+ADV组在血清HBV DNA下降水平、血清HBV DNA阴转率及肝功能复常率方面均高于LAM+ADV组,病毒突破率低于LAM+ADV组.

关键词：慢性乙型肝炎拉米夫定阿德福韦酯恩替卡韦耐药联合治

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基于“PCR-克隆-测序”方法对乙型肝炎病毒预存耐药的研究

基于“PCR-克隆-测序”方法对乙型肝炎病毒预存耐药的研究

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第九届全国肝脏疾病临床学术大会

作者：李虎胡鹏重庆重庆医科大学附属第二医院感染科感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所 400010

目的研究在CHB患者中乙型肝炎病毒(hepatitis B Virus,HBV)预存耐药的情况.方法选取28例未经核苷(酸)类似物治疗的CHB患者的血清标本(包括免疫耐受期10例,免疫活动期9例,非活动期9例),检测HBV DNA,HBsAg,HBeAg,抗-HBs,抗-HBe,ALT等,... 详细信息

目的研究在CHB患者中乙型肝炎病毒(hepatitis B Virus,HBV)预存耐药的情况.方法选取28例未经核苷(酸)类似物治疗的CHB患者的血清标本(包括免疫耐受期10例,免疫活动期9例,非活动期9例),检测HBV DNA,HBsAg,HBeAg,抗-HBs,抗-HBe,ALT等,同时提取HBV DNA,Nest-PCR扩增RT区基因与T载体连接后转入JM109感受态细胞中培养.每例标本随机挑选25 ～ 30个克隆,菌液PCR验证后测序.运用BLAST,MAFFT,GenBank,HBVdb等进行序列分析.结果纳入研究的28例CHB患者的平均年龄为31岁,50％为男性,HBV DNA平均值为5.99 log10 IU/mL,ALT平均值为71 U/L,68％ (19/28)患者为HBeAg阳性,32％ (9/28)为HBeAg阴性,75％ (21/28)的患者为基因B型感染,25％ (7/28)的患者为基因C型感染.共获得601条HBV RT基因序列,平均每例标本21条.1.16％ (7/601)的序列及3.57％ (1/28)的患者检测出了耐药. 所有的耐药株集中在基因B型、免疫活动期和HBeAg阳性阶段,而在基因C型、免疫耐受期和非活动期以及HBeAg阴性阶段的HBV病毒株均为野生株(统计值分别为：1.304、 11.697、 1.176;P值分别为：0.253、0.001、 0.183).对检测出耐药的个体准种分析显示：耐药HBV病毒株的比例为31.82％ (7/22),其中42.86％ (3/7)耐药株表现为rt I169T+rt A181T,50.14％ (4/7)耐药株表现为rt A181T.结论在慢性乙型肝炎患者中预存耐药的发生率低且与免疫状态有关.

关键词：肝炎,乙型耐药突变准种

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甲型H7N9流感病毒血凝素和神经氨酸酶的进化及抗原位点变异分析

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中华医学杂志 2013年第30期93卷 2381-2384页

作者：李虎胡鹏重庆医科大学附属第二医院感染科感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所 400010

目的分析甲型H7N9流感病毒的血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）进化及其抗原位点变异。方法从美国国立生物技术信息中心（NCBI）和全球共享禽流感数据倡议组织（GISAID）数据库检索并下载从建库到2013年4月13日的I-17N9病毒HA、NA的基因... 详细信息

目的分析甲型H7N9流感病毒的血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）进化及其抗原位点变异。方法从美国国立生物技术信息中心（NCBI）和全球共享禽流感数据倡议组织（GISAID）数据库检索并下载从建库到2013年4月13日的I-17N9病毒HA、NA的基因和氨基酸序列。应用Clustal．W、MEGA5．0、NetNGlyc1．0Server、DNAMAN等生物信息学软件，对HA、NA的基因序列和氨基酸序列进行比对分析以及预测其潜在的抗原位点。结果共有26条HA基因和氨基酸序列以及24条NA基因和氨基酸序列纳入分析。美洲地区的H7N9流感病毒HA、NA基因和氨基酸的保守性较亚欧地区高。HA、NA基因进化分为亚欧地区和美洲地区两大系。所有病毒HA裂解位点附近仅含1个碱性氨基酸R（Arg）。HA蛋白裂解位点和NA蛋白糖基化位点表现出地区差异，HA蛋白糖基化位点保守。HA、NA蛋白在亚欧地区和美洲地区有多个抗原位点发生变异。7例中国分离的新型H7N9病毒进化位于亚欧地区分支，NA的茎部在69～73位有5个氨基酸缺失，HA蛋白裂解位点、糖基化位点未发生变异，HA、NA蛋白多个抗原位点发生了与其他病毒株不同的变异。结论H7N9病毒HA、NA进化表现出地区差异性。NA茎部氨基酸的缺失和HA、NA蛋白多个抗原位点的变异可能与人感染H7N9流感爆发有关。

关键词：流感病毒A型 H7N9亚型血凝素类神经氨酸酶抗原位点进化分子

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人感染H7N9禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶的B细胞表位预测

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第12期29卷 1319-1321,1326页

作者：李虎胡鹏重庆医科大学附属第二医院感染科感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆400010

目的利用计算机软件预测人感染H7N9禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的B细胞表位。方法以HA、NA的氨基酸序列为基础,用Protean、PORTER、MEGA等生物信息学软件综合预测HA、NA蛋白可能的B细胞表位,再结合吴玉章的平均抗原指数方案... 详细信息

目的利用计算机软件预测人感染H7N9禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的B细胞表位。方法以HA、NA的氨基酸序列为基础,用Protean、PORTER、MEGA等生物信息学软件综合预测HA、NA蛋白可能的B细胞表位,再结合吴玉章的平均抗原指数方案进一步筛选。结果 HA蛋白最有可能的B细胞表位位于其N端的第53～57、179～183区段,HA蛋白的其它区段:62～66、98～101、164～166、315～320、424～426、443～445、493～496等也有可能存在B细胞表位。NA蛋白最有可能的B细胞表位位于N端的第321～329、379～386区段,NA蛋白的其他区段:46～48、52～54、74～78、136～141、145～150、160～164、194～197、246～248、333～343、426～431等也有可能存在B细胞表位。结论综合多种方案预测了H7N9病毒HA、NA蛋白的B细胞表位,为人感染H7N9禽流感病毒表位疫苗研究提供了实验基础。

关键词： H7N9 HA NA B细胞表位

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NK与NKT细胞在慢加急性肝衰竭患者外周血中的变化分析

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重庆医学 2013年第31期42卷 3747-3749页

作者：彭辉常琳王磊陈敏重庆医科大学附属第二医院检验科 400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所/感染性疾病分子生物学省部共建教育部重点实验室 400016

目的研究NK及NKT细胞在乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血中的变化。方法用流式细胞仪分别检测25例健康对照者(HC)、40例慢性乙型肝炎(CHB)患者、26例HBV-ACLF患者外周血淋巴细胞中NK、NKT细胞的比例,经统计分析,比较各组... 详细信息

目的研究NK及NKT细胞在乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血中的变化。方法用流式细胞仪分别检测25例健康对照者(HC)、40例慢性乙型肝炎(CHB)患者、26例HBV-ACLF患者外周血淋巴细胞中NK、NKT细胞的比例,经统计分析,比较各组间NK或NKT的差异,同时分析HBV-ACLF组中的NK或NKT细胞与乙型肝炎标志物或肝功能间的相关性。结果 HC、CHB、HBV-ACLF组外周血的NK细胞比例分别为(15.0±6.0)%、(11.4±6.8)%和(8.9±6.7)%,HBV-ACLF组与其他两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而NKT细胞在HC、CHB、HBV-ACLF组外周血中的比例分别为(1.9±1.3)%、(4.3±3.7)%和(5.4±8.6)%,HBV-ACLF组与HC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBVACLF患者外周血内NK细胞比例显著性降低,而NKT细胞比例显著性升高,他们可能在HBV-ACLF疾病中发挥着一定的作用。

关键词：杀伤细胞,自然 NKT 慢加急性肝衰竭乙型肝炎病毒

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丙型肝炎病毒F蛋白抑制肝癌细胞增殖功能的研究

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中华肝脏病杂志 2012年第5期20卷 368-371页

作者：周帆刘娇陈庆美单晓亮陈林林权会琴唐霓重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室 400010

目的研究HCV F蛋白的生物学功能。方法扩增目的基因片段，通过酶切连接方法将编码HCVF蛋白的基因片段克隆至载体pSEB-3Flag中，用构建好的重组质粒pSEB-3Flag-F转染Huh7、SMMC7721细胞，经Blasticidine抗性筛选，拟建立HCVF蛋白稳定表... 详细信息

目的研究HCV F蛋白的生物学功能。方法扩增目的基因片段，通过酶切连接方法将编码HCVF蛋白的基因片段克隆至载体pSEB-3Flag中，用构建好的重组质粒pSEB-3Flag-F转染Huh7、SMMC7721细胞，经Blasticidine抗性筛选，拟建立HCVF蛋白稳定表达的细胞株，用RT-PCR方法检测HCV-F基因的表达。通过MTS、细胞计数、结晶紫以及流式细胞检测实验观察F蛋白对转染细胞增殖和细胞周期的影响。计量资料分析采用t检验。结果成功建立了HCVF基因稳定表达的细胞株Huh7-F和SMMC7721-F，MTS、细胞计数实验均证实Huh7-F和SMMC7721-F细胞较对照细胞增殖速度减慢，Huh7-F稳定细胞株结晶紫定量爿值为1．072±0．070，对照组为1．387±0．005（f=-6．347，P〈0．05）；SMMC7721-F稳定细胞株4值为1．594±0．007，对照组为1．921±0．090（t=-4．81，P〈0．05）。流式细胞仪检测Huh7-F稳定细胞株48hS期细胞百分比分别为47．1妣±0．040／0，对照组S期细胞数为55．32％±1．45％（f=-7．99，P〈0．05）；SMMC7721-F稳定细胞株S期细胞百分比分别为30．75％±0．09％，对照组S期细胞数为33．23％±0．28％（f=-5．91，P〈0．05）。结论稳定转染HCVF基因可以明显抑制Huh7细胞、SMMC7721细胞的增殖。

关键词：肝炎病毒丙型细胞增殖癌肝细胞

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