检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肝脏病杂志 2008年第6期16卷 412-415页

作者：曾爱中邓惠彭凤英辛小娟杨春李青岭郭进军张祯祯赫美君袁喆黄文祥黄爱龙重庆医科大学病毒性肝炎研究所教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆400010 重庆医科大学附属第一医院感染科重庆医科大学附属第二医院淌化科

目的阐明不同基因型HBV对阿德福韦酯治疗反应是否存在差异。方法首先利用型特异引物PCR法结合型特异核苷酸分析法检测HBV基因型，然后根据基因型对阿德福韦酯Ⅲ期临床资料进行分析及统计学处理（计量资料用t检验，计数资料用卡方检验）... 详细信息

目的阐明不同基因型HBV对阿德福韦酯治疗反应是否存在差异。方法首先利用型特异引物PCR法结合型特异核苷酸分析法检测HBV基因型，然后根据基因型对阿德福韦酯Ⅲ期临床资料进行分析及统计学处理（计量资料用t检验，计数资料用卡方检验）。结果177例临床标本检出B基因型HBV感染者102例，C基因型感染者65例，B＋C混合型感染者6例，B＋D混合型感染者4例。治疗第12、24周时，B基因型组和C基因型组血清HBVDNA下降均值分别为2.2log10拷贝／ml、2.1log10拷贝／ml和2.7log10拷贝／ml、2．4log10拷贝／ml，两组差异均无统计学意义（P〉0．05），第48周时两组HBVDNA分别下降3.6log10拷贝／ml和3．1log10拷贝／ml，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗结束时（48周）B基因型组和C基因型组分别有43例（42．2％）和22例（33．8％）出现血清HBVDNA转阴，差异有统计学意义（P〈0．05）；两组患者HBeAg阴转率和抗-HBe血清转换率分别为30．4％、29．2％和21．6％、20．0％，差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患者血清ALT复常率在治疗第12、24、36周和48周时分别为35．3％、33．9％，51．0％、53．9％，63．4％、61．5％和83．3％、81．5％，各时间段两组ALT复常率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎48周时，部分病毒学指标（如血清HBVDNA下降均值和HBVDNA阴转率）B基因型优于C基因型HBV感染者。但由于阿德福韦酯起效较慢，抑制病毒作用相对较弱，有必要延长治疗时间进一步证实这一现象。

关键词：肝炎乙型慢性肝炎病毒基因型阿德福韦酯

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乙型肝炎病毒基因的型特异引物结合型特异核苷酸分析

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中华肝脏病杂志 2008年第2期16卷 84-87页

作者：曾爱中黄爱龙郭进军邓小燕李青岭黄文祥重庆医科大学病毒性肝炎研究所、教育部感染性疾病分子生物学重点实验室 400010 重庆医科大学附属第一医院

目的研究HBV感染者HBV基因型分布状况，并建立一套适合HBV病毒株分型的简便可靠的分析方法。方法通过对GenBank中全部S区基因序列（1000余条）进行比对，筛选A～H8个基因型的型特异核苷酸。采用型特异引物PCR法分型，对238例慢性乙型肝... 详细信息

目的研究HBV感染者HBV基因型分布状况，并建立一套适合HBV病毒株分型的简便可靠的分析方法。方法通过对GenBank中全部S区基因序列（1000余条）进行比对，筛选A～H8个基因型的型特异核苷酸。采用型特异引物PCR法分型，对238例慢性乙型肝炎患者所感染病毒中未能分型的病毒株再进行S区基因巢式PCR扩增、测序筛选出其特异性核苷酸从而判定其基因型。结果238株HBV均得到分型。其中B型HBV感染者159例（男120例、女39例）；C型69例（男52例、女17例）；B＋C混合型6例（男4例、女2例），B＋D混合型4例（男3例、女1例）。B型、C型、B＋C和B＋D混合型检出率分别为66．8％、28．9％、2．5％和1．6％。未检出A、E、F、G、H基因型。结论HBV感染以B、C基因型为主，B基因型高于C基因型。少数患者为B＋C或B＋D混合型感染。B、C基因型分布与性别无关（x^2=0．794，P〉0．05）。

关键词：肝炎病毒,乙型基因型型特异性核苷酸聚合酶链反应(PCR)

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肝再生增强因子对大鼠腹腔移植的肝细胞的影响

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中华器官移植杂志 2008年第7期29卷 398-401页

作者：张艳王志毅曾翔石小枫孙航刘杞重庆医科大学附属第二医院感染科 400010 自贡市第四人民医院外科重庆医科大学附属第二医院教育部感染性疾病分子生物学重点实验室病毒性肝炎研究所

目的探讨肝再生增强因子（ALR）对急性肝功能衰竭大鼠腹腔移植的肝细胞的影响。方法采用D-氨基半乳糖诱导SD大鼠急性肝功能衰竭（AHF），然后将其随机分为空白对照组（仅接受生理盐水腹腔注射）、移植对照组（腹腔移植SD大鼠的肝细胞2&#... 详细信息

目的探讨肝再生增强因子（ALR）对急性肝功能衰竭大鼠腹腔移植的肝细胞的影响。方法采用D-氨基半乳糖诱导SD大鼠急性肝功能衰竭（AHF），然后将其随机分为空白对照组（仅接受生理盐水腹腔注射）、移植对照组（腹腔移植SD大鼠的肝细胞2×10^7个）、环孢素A组（CsA组，接受肝细胞移植后腹腔注射CsA6d）、ALR组（接受肝细胞移植后腹腔注射ALR6d）和ALR对照组（仅腹腔注射ALR6d）。实验期为14d，观察受者的存活情况及移植肝细胞存活情况，检测腹腔内细胞CD4、CD8及CD68的表达情况，测定血清及腹腔冲洗液中白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNFα）的水平。结果空白对照组、移植对照组、CsA组、AL，R组及ALR对照组的受者2周存活率分别为0、46．7％、20％、66．7％和14．3％，ALR组显著高于空白对照组（P=0．001）。移植后1～2d，ALR组血清TNF-α和IL-1β明显低于空白对照组和移植对照组（P〈0．01）；移植对照组腹腔冲洗液中TNF-α和IL-1β水平明显高于其它各组（P〈0．05，P〈0．01）。至移植后14d，各组存活大鼠的血清TNF-α和IL-1β水平接近正常水平。移植后1～2d，ALR组移植物内CD68表达水平为（0．5±0．3）％，明显低于移植对照组和CsA组（P〈0．01）；ALR组腹腔内细胞CD68、CD4及CD8表达水平分别为（1．3±1．2）％、（0．1±0．3）％和（0．2±0．1）％，均明显低于移植对照组（P〈0．01，P〈0．01，P〈0．05）。移植后1～3d，接受肝细胞移植的大鼠腹腔内可见聚集成团的肝细胞结节，ALR组存活的肝细胞数明显多于移植对照组和CsA组，且炎症细胞浸润较少，至移植后14d，仅ALR组可见少量形态正常的肝细胞。结论腹腔内肝细胞移植联合ALR腹腔注射能提高AHF大鼠的存活率；ALR能短期改善移植肝细胞的存活状况。

关键词：肝细胞生长因子肝细胞细胞移植移植物存活

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高脂饮食对大鼠脂肪肝胰岛素受体底物1、2表达的影响

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中国糖尿病杂志 2008年第7期16卷 409-412页

作者：陈世清黎华刘杞郧阳医学院附属太和医院湖北十堰442000 重庆医科大学病毒性肝炎研究所、教育部感染性疾病分子生物学重点实验室

目的探讨高脂饮食对大鼠脂肪肝胰岛素受体底物(IRS)1、IRS-2分子表达的影响。方法对8周高脂饲养(n=7)和正常饲养(n=7)大鼠的胰岛素敏感性、脂质代谢、肿瘤坏死因子(TNF)α以及肝脏IRS-1、IRS-2的mRNA和蛋白表达进行检测。结果与正常组比... 详细信息

目的探讨高脂饮食对大鼠脂肪肝胰岛素受体底物(IRS)1、IRS-2分子表达的影响。方法对8周高脂饲养(n=7)和正常饲养(n=7)大鼠的胰岛素敏感性、脂质代谢、肿瘤坏死因子(TNF)α以及肝脏IRS-1、IRS-2的mRNA和蛋白表达进行检测。结果与正常组比,高脂组大鼠呈现胰岛素抵抗、游离脂肪酸(FFA)和TNF-α增高;肝脏的IRS-1 mRNA和蛋白含量分别降低了28%和32%(P<0.01),IRS-2 mR-NA和蛋白含量分别降低了30%和27%(P<0.01)。结论高脂饮食导致大鼠肝脏IRS-1、IRS-2的mR-NA和蛋白含量明显降低,这可能是高脂饮食引起脂肪变肝脏胰岛素抵抗的重要分子机制。

关键词：高脂饮食胰岛素抵抗胰岛素受体底物

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HBV前S2蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定

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生物技术通报 2008年第3期24卷 76-80页

作者：赖梅梅王雪梅张君蔡雪飞郑健黄爱龙重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的克隆表达HBV前S2蛋白,用纯化的重组蛋白GST-S2免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗HBV前S2蛋白的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法利用含双拷贝乙肝病毒adw2亚型基因全序列的质粒pEcob6,经PCR方法扩增出HBV前S2片段,在GST表达... 详细信息

目的克隆表达HBV前S2蛋白,用纯化的重组蛋白GST-S2免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗HBV前S2蛋白的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法利用含双拷贝乙肝病毒adw2亚型基因全序列的质粒pEcob6,经PCR方法扩增出HBV前S2片段,在GST表达系统中表达,表达产物用谷胱甘肽亲和层析纯化后,用于免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗前S2蛋白的mAb,采用间接ELISA方法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA方法鉴定mAb相对亲和力。结果获得一株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞7A6;相对亲和力均在107以上。Western blot显示该株mAb能特异识别重组前S2蛋白。结论成功地制备出抗HBV前S2蛋白的一株mAb。

关键词：乙肝病毒前S2蛋白单克隆抗体生物学特性

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乙型肝炎病毒正链负性调节元件的亚元件鉴定

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中国病原生物学杂志 2008年第4期3卷 241-244页

作者：余波吴莹杨扬张文露黄爱龙重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆400016

目的研究乙型肝炎病毒正链负性调节元件（HBVnt453～250）中存在的重要功能亚元件。方法通过构建pHBVnt453～250质粒一系列缺失10 bp的突变体,与内参pRL-TK质粒共转染HepG2细胞,于转染后48 h检测荧光素酶活性并确定亚元件的位置和序列... 详细信息

目的研究乙型肝炎病毒正链负性调节元件（HBVnt453～250）中存在的重要功能亚元件。方法通过构建pHBVnt453～250质粒一系列缺失10 bp的突变体,与内参pRL-TK质粒共转染HepG2细胞,于转染后48 h检测荧光素酶活性并确定亚元件的位置和序列。构建亚元件与pGL3-control载体质粒的重组质粒,与内参pRL-TK质粒共转染HepG2细胞并检测荧光素酶活性,半定量RT-PCR检测荧光素酶的mRNA水平。结果与pHBVnt453～250对照组比较,6个缺失突变体实验组的荧光素酶活性恢复到60%～80%,鉴定出3个功能亚元件。这3个亚元件的重组质粒荧光素酶活性比pGL3-control对照组降低,半定量RT-PCR显示荧光素酶的mRNA水平降低。结论HBVnt453～250序列中含有3个重要功能亚元件,以协同的方式发挥调节抑制作用。

关键词：肝炎病毒,乙型正链负性调节元件

来源：评论

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乙型肝炎病毒转录调控的研究进展

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中国病原生物学杂志 2008年第2期3卷 147-148,135页

作者：余波黄爱龙重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆400016

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)基因组由一个约3.2 kb的环形DNA组成,包含了C、P、S和X 4个基因开放读码框、4个启动子和2个增强子,基因组开放读码框相互重叠,所有转录调控元件均隐含在基因编码序列中,病毒DNA序列达到高效重复利... 详细信息

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)基因组由一个约3.2 kb的环形DNA组成,包含了C、P、S和X 4个基因开放读码框、4个启动子和2个增强子,基因组开放读码框相互重叠,所有转录调控元件均隐含在基因编码序列中,病毒DNA序列达到高效重复利用。而HBV新的调控元件和正链转录体,以及转录后调节元件的发现,则为以后的研究提供了新的思路。

关键词：乙型肝炎病毒转录调控综述

来源：评论

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乙型肝炎病毒启动子结构及调节机制的研究

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国际病毒学杂志 2008年第2期15卷 -页

作者：杨扬(综述) 黄爱龙(审校) 重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所重庆400010 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部省部共建重点实验室

乙型肝炎病毒(HBV)表达调控是近年来分子生物学研究的重点之一.各种肝细胞核因子和调节元件通过作用于HBV启动子而发挥转录调节作用.因此,研究HBV启动子调节机制对深入了解HBV的致病机理及寻找有效的抗病毒治疗方法具有重要意义.

关键词： HBV 启动子表达调控

来源：评论

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体外鉴定汉坦病毒包膜糖蛋白G2与β3整合素的相互作用

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生物技术通报 2008年第5期24卷 136-139页

作者：郭进军李青岭周倩云曾爱忠黄爱龙重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

根据汉坦病毒76-118株M基因和β3整合素基因序列设计引物,分别以质粒M56和Hela细胞cDNA为模板通过PCR扩增和基因重组获得G2蛋白膜外区81～140片段的GST融合表达质粒以及β3整合素膜外区23～133片段FLAG融合表达质粒。通过SDS-PAGE检测G... 详细信息

根据汉坦病毒76-118株M基因和β3整合素基因序列设计引物,分别以质粒M56和Hela细胞cDNA为模板通过PCR扩增和基因重组获得G2蛋白膜外区81～140片段的GST融合表达质粒以及β3整合素膜外区23～133片段FLAG融合表达质粒。通过SDS-PAGE检测G2片段在BL21表达菌中诱导表达及纯化的效果,Western blot检测β3整合素片段在真核细胞中的表达。将在BL21裂解上清中表达的G2蛋白N端81～140位氨基酸片段(G2N81～140)纯化后与经过GST蛋白预处理的含有β3整合素片段的细胞裂解上清进行孵育,同时以未做任何转染的HEK293细胞裂解上清和无关蛋白GST-TLM作为阴性对照,通过GSTPull-down验证G2蛋白与β3整合素之间的相互作用。结果显示在Pull-down所获蛋白复合物中检测到β3整合素27～133位氨基酸片段产物的存在。结果表明G2蛋白与β3整合素之间可能存在有直接的相互作用,为β3整合素作为汉坦病毒细胞膜受体提供了进一步证据。

关键词：汉坦病毒受体包膜糖蛋白G2 β3整合素 GST Pull—down

来源：评论

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抗登革病毒2型E蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定

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生物技术通报 2008年第5期24卷 145-148页

作者：陶萍帅光泽赖梅梅王雪梅郑健黄爱龙重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016 成都大学校医院成都610106

为了制备可用于胶体金快速检测试纸条的抗登革病毒2型(DEN2)E蛋白单克隆抗体(mAb),通过基因克隆获得E基因与质粒pET32a(+)的重组质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21,IPGT诱导表达重组蛋白。以DEN2重组E蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技... 详细信息

为了制备可用于胶体金快速检测试纸条的抗登革病毒2型(DEN2)E蛋白单克隆抗体(mAb),通过基因克隆获得E基因与质粒pET32a(+)的重组质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21,IPGT诱导表达重组蛋白。以DEN2重组E蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗DEN2E蛋白的mAb,以间接ELISA法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA法鉴定mAb的Ig亚类。结果表明获得1株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(7C7),其抗体亚类为IgG1。Western blot显示该株mAb能特异识别重组pET32a-DEN2E蛋白。因此,成功制备出抗DEN2E的1株mAb,为建立快速特异检测登革病毒感染的实验方法提供了有力的工具。

关键词：登革病毒单克隆抗体生物学特性 E蛋白

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