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第四军医大学学报 2007年第5期28卷 469-471页

作者：石华成海恩易发平杨俊霞张溢马永平宋方洲重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室临床检验诊断学教育部重点实验室重庆医科大学基础医学研究所重庆400016

目的:克隆人IL-24基因并构建真核表达载体,转染Ca Ski细胞进行真核表达.方法:利用RT-PCR技术扩增出Ca Ski细胞中的IL-24基因.将IL-24基因克隆入pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24.将重组质粒转染入CaSki细胞,利用Wester... 详细信息

目的:克隆人IL-24基因并构建真核表达载体,转染Ca Ski细胞进行真核表达.方法:利用RT-PCR技术扩增出Ca Ski细胞中的IL-24基因.将IL-24基因克隆入pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24.将重组质粒转染入CaSki细胞,利用Western blot检测hIL-24的表达.结果:PCR及测序结果均证实成功克隆了人IL-24基因,构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24,该质粒被转染入Ca Ski细胞中能表达出hIL-24蛋白.结论:成功构建了hIL-24基因的真核表达载体.

关键词：白细胞介素24 克隆真核表达 Ca Ski细胞

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QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健食品中21种非法添加化学药物

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色谱 2017年第12期35卷 1257-1265页

作者：郑佳郗存显曹淑瑞王国民唐柏彬王智母昭德重庆医科大学药学院重庆400016 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆出入境检验检疫局重庆市进出口食品安全工程技术研究中心重庆400020

建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱测定改善睡眠类和提高免疫力类保健食品中21种非法添加化学药物的分析方法。口服液、保健酒分别用乙腈和乙腈-水-甲酸(60∶39∶1,v/v/v)振荡提取,QuEChERS法净化;采用Acquity UPLCTMBEH C18色谱... 详细信息

建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱测定改善睡眠类和提高免疫力类保健食品中21种非法添加化学药物的分析方法。口服液、保健酒分别用乙腈和乙腈-水-甲酸(60∶39∶1,v/v/v)振荡提取,QuEChERS法净化;采用Acquity UPLCTMBEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以乙腈和2 mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%(v/v)甲酸)为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾离子源正离子模式(ESI+)下电离,多反应监测(MRM)模式检测。结果表明,21种化学药物在1~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(R2)均≥0.992,检出限(LOD)为0.07~3.41μg/kg,定量限(LOQ)为0.22~11.36μg/kg。3种加标水平(10、20和100μg/kg)下,21种化学药物在口服液和保健酒中的平均加标回收率分别为61.4%~116.5%和67.4%~98.4%;相对标准偏差(RSD)分别为0.2%~13.4%和0.2%~11.8%。该法简便,灵敏性高,实用性强,可用于改善睡眠和提高免疫力类保健食品中21种非法添加化学药物的检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱 QuEChERS 化学药物保健食品

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Kupffer细胞在非酒精性脂肪肝病中的作用

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生命的化学 2019年第3期39卷 464-471页

作者：徐芳芷熊令伊万敬员杨森重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是一种无过量饮酒史、以肝细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征。Kupffer细胞是位于肝脏中的特殊巨噬细胞,是先天免疫中的重要组成部分,在肝脏疾病中起关键作... 详细信息

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是一种无过量饮酒史、以肝细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征。Kupffer细胞是位于肝脏中的特殊巨噬细胞,是先天免疫中的重要组成部分,在肝脏疾病中起关键作用。多项研究表明,Kupffer细胞在NAFLD的发生发展过程中起重要作用。本文总结了Kuffer细胞在NAFLD疾病发生发展中的多重作用,旨在为NAFLD的治疗提供一个有效的靶点。

关键词：非酒精性脂肪肝病(NAFLD) Kupffer细胞脂质堆积氧化应激炎症反应

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丙戊酸钠对慢性不可预见性温和刺激致抑郁大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能的影响

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中国生物制品学杂志 2016年第8期29卷 829-833,839页

作者：费慧芝胡小娅邱红梅刘丹周岐新重庆三峡医药高等专科学校重庆404100 重庆医科大学重庆生物化学和分子药理学重点实验室重庆400016 重庆市中山医院重庆400016

目的探讨丙戊酸钠对慢性不可预见性温和刺激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)所致抑郁大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA)功能的影响及其机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(CG... 详细信息

目的探讨丙戊酸钠对慢性不可预见性温和刺激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)所致抑郁大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA)功能的影响及其机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(CG)、模型组(MG)、丙戊酸钠给药对照组(VCG)和丙戊酸钠给药模型组(VMG),每组15只。模型组采用孤养结合CUMS的方式建立大鼠抑郁模型,建模周期为28 d。VCG和VMG组灌胃给予丙戊酸钠300 mg/(kg·d),CG和MG组灌胃等体积的0.5%CMC-Na溶液。采用旷场试验和强迫游泳试验评价大鼠抑郁行为,试剂盒测定大鼠大脑皮层丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和血清皮质酮(concertmaster,CORT)含量,RT-PCR和Western blot法检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin releasing factor,CRF)基因m RNA和蛋白的表达水平。结果与CG组相比,MG组大鼠水平活动和垂直活动水平得分明显下降(P<0.01),不动时间明显延长(P<0.01),大脑皮层MDA含量明显升高(P<0.05),SOD活力显著下降(P<0.05),血清CORT含量明显升高(P<0.05),下丘脑CRF基因m RNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01及<0.05);丙戊酸钠能够明显阻遏上述变化。结论丙戊酸钠能够明显改善CUMS大鼠的抑郁行为,改善机体氧化应激失衡,下调HPA轴功能。

关键词：抑郁症慢性不可预见性温和刺激丙戊酸钠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴

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用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶的抑制作用

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第四军医大学学报 2007年第13期28卷 1161-1163页

作者：陈虹程真莉左渝平廖飞重庆医科大学药学院重庆市生物化学与分子药理学重点实验室生物信息学与制药生物技术组重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:考察用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶抑制作用的可靠性.方法:测定碱性磷酸酶水解对硝基苯酚磷酸酯(PNPP)的产物生成初速度.用两个底物浓度下标定比活性计算米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),再据二者对抑制... 详细信息

目的:考察用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶抑制作用的可靠性.方法:测定碱性磷酸酶水解对硝基苯酚磷酸酯(PNPP)的产物生成初速度.用两个底物浓度下标定比活性计算米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),再据二者对抑制剂浓度的响应确定抑制剂类型和抑制常数.结果:双倒数分析法重复测定发现70%的Km和Vm随抑制剂浓度升高而同步下降,两动力学参数变化对应抑制常数的比值为(2.4±0.6,n=9).线性动力学方法所得参数精度稍高,Km和Vm随抑制剂浓度升高同时下降的出现率约80%,两抑制常数之比为(2.0±0.8,n=10),两参数变化对应的抑制常数及两抑制常数之比都与双倒数分析法一致.如允许两抑制常数之比在2.5倍内波动,则两种方法都表明L-苯丙氨酸为此碱性磷酸酶的反竞争性抑制剂.结论:此线性动力学方法可用于表征反竞争性抑制剂.

关键词： L-苯丙氨酸反竞争性抑制碱性磷酸酶线性动力学方法抑制常数

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大黄素和芹菜素对高血压大鼠的肾脏保护及抗氧化作用

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中药药理与临床 2018年第4期34卷 69-73页

作者：马春艳陈雨微黄家君党红星重庆医科大学儿科学院重庆400014 重庆医科大学临床二系重庆400016 重庆医科大学药学院药理学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属儿童医院重症医学科儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的:探讨大黄素、芹菜素及大黄素和芹菜素联合应用对自发性高血压大鼠(SHR)的降压和肾脏保护及抗氧化作用。方法:13周龄SPF级雄性SHR大鼠随机分成5组:模型组、大黄素16mg/kg组、芹菜素110mg/kg组、大黄素16mg/kg和芹菜素110mg/kg联合... 详细信息

目的:探讨大黄素、芹菜素及大黄素和芹菜素联合应用对自发性高血压大鼠(SHR)的降压和肾脏保护及抗氧化作用。方法:13周龄SPF级雄性SHR大鼠随机分成5组:模型组、大黄素16mg/kg组、芹菜素110mg/kg组、大黄素16mg/kg和芹菜素110mg/kg联合应用组及卡托普利30mg/kg组。以同周龄SPF级SD雄性正常大鼠(n=8)为正常对照组。各组大鼠每日灌胃相应药物和溶媒。给药前及给药6周后分别测定大鼠血压; 6周后,测定右肾质量指数;检测肾功能血浆肌酐(SCr)、尿素氮(BUN);测定肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量; HE、Masson染色观察肾组织病理变化。结果:各给药组均明显降低SHR大鼠血压,升高右肾质量指数,大黄素和芹菜素联合应用较单用药更明显;显著降低血浆SCr、BUN及肾脏MDA、AngⅡ含量,升高肾脏SOD水平,且联合应用更显著;大黄素和芹菜素及联合用药均能减轻肾间质纤维化,减少肾小球系膜区及肾小管胶原沉积。结论:大黄素和芹菜素对自发性高血压大鼠能降低收缩压,并具有部分肾脏保护作用,且联合用药更有优势,可能与其抗氧化应激反应有关。

关键词：大黄素芹菜素自发性高血压大鼠

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美斯地浓聚乳酸载药纳米粒的制备及体外释放

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中国组织工程研究 2013年第8期17卷 1384-1389页

作者：徐美玲杨林廖红胡雪原张景勍重庆医科大学药物高校工程研究中心和生物化学与分子药理学重点实验室重庆市400016 重庆市食品药品检验所重庆市401121

背景:美斯地浓临床常用于治疗重症肌无力,但其水溶性较强,半衰期短,生物利用度低,给药频率高,患者依从性差,因此提高其缓释作用对临床应用有重要意义。目的:制备美斯地浓聚乳酸纳米粒,并考察其体外释放性能。方法:以聚乳酸为载药材料,... 详细信息

背景:美斯地浓临床常用于治疗重症肌无力,但其水溶性较强,半衰期短,生物利用度低,给药频率高,患者依从性差,因此提高其缓释作用对临床应用有重要意义。目的:制备美斯地浓聚乳酸纳米粒,并考察其体外释放性能。方法:以聚乳酸为载药材料,采用复乳液中干燥法制备美斯地浓聚乳酸纳米粒,运用单因素实验设计优化处方,动态透析法进行体外药物释放实验。结果与结论:确定以二氯甲烷作为油相制备纳米粒,内水相与油相的比例1:10,聚乳酸浓度6%,外水相聚乙烯醇浓度3%,美斯地浓投药量40mg为最佳制备工艺,此条件制备的药物纳米粒包封率和载药率分别为(67.59±1.46)%和(4.31±0.17)%。美斯地浓聚乳酸纳米粒的平均粒径为937nm,圆球形,表面光滑,未观察到粘连现象。与美斯地浓游离药物相比,美斯地浓聚乳酸纳米粒存在突释现象,之后呈现缓慢释放特性,72h释放量为57.03%,提示成功制备美斯地浓聚乳酸纳米粒,具有缓释效应。

关键词：生物材料纳米生物材料生物材料与药物控释纳米粒美斯地浓聚乳酸体外药物释放单因素实验缓释生物材料图片文章

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冬凌草甲素抑制SW620结肠癌细胞增殖与BMP7-p53通路的相关性研究

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药物评价研究 2018年第10期41卷 1770-1774页

作者：马妍刘荣兴朱茄慧王涵廖云鹏任文艳周林云何百成孙文娟重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学药理学教研室重庆400016

目的研究冬凌草甲素(ORI)对人结肠癌细胞SW620的增殖抑制、诱导凋亡作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用结晶紫染色研究ORI(5、10、15、20、25μmol/L)对SW620细胞的增殖抑制作用;流式细胞术研究ORI(10、15、20μmol/L)诱导SW620细... 详细信息

目的研究冬凌草甲素(ORI)对人结肠癌细胞SW620的增殖抑制、诱导凋亡作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用结晶紫染色研究ORI(5、10、15、20、25μmol/L)对SW620细胞的增殖抑制作用;流式细胞术研究ORI(10、15、20μmol/L)诱导SW620细胞凋亡作用;采用Western blotting技术研究ORI对SW620细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关指标(Caspase-3)、骨形态发生蛋白7(BMP7)、p53蛋白表达的影响;转染重组p53腺病毒实现p53的外源性过表达,p53抑制剂PFTα降低BMP7水平,检测ORI是否通过调节p53表达影响细胞增殖凋亡、BMP7-p53信号通路。结果与对照组比较,ORI可以时间和剂量依赖性地抑制SW620细胞生长,上调PCNA蛋白水平;流式细胞术以及Western blotting检测结果显示,ORI明显增加细胞凋亡率,促进Caspase-3蛋白表达,并且上调BMP7和p53蛋白表达;外源性过表达p53加强了ORI对上述蛋白表达的调控,PFTα则部分抑制了ORI的作用。结论 ORI可以通过激活BMP7-p53信号通路抑制SW620细胞增殖、诱导凋亡。

关键词：冬凌草甲素人结肠癌细胞抑制增殖凋亡 p53 BMP7

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吴茱萸碱复合纳米粒对急性肝损伤模型小鼠的保护作用

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中国医院药学杂志 2020年第10期40卷 1094-1097页

作者：向晓燕余忠姝张敏杨强张景勍刘颖菊重庆医科大学药学院重庆高校药物工程研究中心重庆400016 重庆市巴南区人民医院药剂科重庆401320 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016

目的:探讨吴茱萸碱复合纳米粒(evodiamine complex loaded nanoparticles,ECNP)对四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤模型小鼠的保护作用。方法:采用离子凝胶法制备ECNP,测定其粒径和电位。腹腔注射CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。评估ECNP和... 详细信息

目的:探讨吴茱萸碱复合纳米粒(evodiamine complex loaded nanoparticles,ECNP)对四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤模型小鼠的保护作用。方法:采用离子凝胶法制备ECNP,测定其粒径和电位。腹腔注射CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。评估ECNP和EVO干预对肝损伤小鼠血清指标AST、ALT、TNF-α、IL-1β和肝脏指数的影响;测定肝脏GSH、CAT、SOD水平和MDA含量。光镜下观察肝脏病理改变。结果:ECNP的粒径和电位分别为(435.30±24.70)nm和(43.43±0.50)mV。ECNP和EVO干预能降低小鼠肝脏指数,改善小鼠肝组织病理损伤,降低血清ALT、AST水平,减少炎症因子IL-1β、TNF-α的产生,增强肝组织抗氧化物SOD、GSH、CAT的能力;ECNP调节血清转氨酶、降低炎症因子、增加机体抗氧化能力的作用较等剂量的游离EVO更强。结论:ECNP对CCl4致肝损伤有一定的保护作用,且比EVO效果更好。

关键词：吴茱萸碱复合物纳米粒四氯化碳保肝

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Cu-Zn SOD和Mn-SOD表达与铝过负荷致小鼠神经元退行性变的关系研究

Cu-Zn SOD和Mn-SOD表达与铝过负荷致小鼠神经元退行性变的关系研究

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药物相关蛋白质组学专题研讨会

作者：周岐新何百成罗映邱红梅杨俊卿重庆市生物化学及分子药理学重点实验室重庆医科大学药理教研室重庆市生物化学及分子药理学重点实验室重庆医科大学药理教研室重庆市生物化学及分子药理学重点实验室重庆医科大学药理教研室重庆市生物化学及分子药理学重点实验室重庆医科大学药理教研室重庆市生物化学及分子药理学重点实验室重庆医科大学药理教研室

目的:观察铝经胃肠道吸收致慢性铝过负荷引起小鼠脑神经元退行性变时程中脑内Cu-Zn SOD和Mn-SOD mRNA和蛋白表达量及活性变化,以及与酶蛋白相关金属离子水平变化规律, 分析铝过负荷致神经元退行性变的可能机制。方法:采用葡萄糖酸铝溶液... 详细信息

目的:观察铝经胃肠道吸收致慢性铝过负荷引起小鼠脑神经元退行性变时程中脑内Cu-Zn SOD和Mn-SOD mRNA和蛋白表达量及活性变化,以及与酶蛋白相关金属离子水平变化规律, 分析铝过负荷致神经元退行性变的可能机制。方法:采用葡萄糖酸铝溶液(含Al3+ 400 mg／kg)灌胃给予小鼠,每天1次,一周5 d,连续12 W,建立铝负荷模型。以跳台、明暗刺激、Morris水迷宫和自主活动测试仪进行行为学测

关键词：神经元退行性变 SOD 铝过负荷 Mn-SOD Cu-Zn SOD

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