检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2005年第5期28卷 543-544页

作者：王易伟钟敏胡频频重庆市肺科医院重庆市结核基因诊断中心实验室 400020

为满足临床迫切需要一种更快、更准确地早期诊断结核病的方法,以保证及早的、更合理地进行治疗,我们引进了美国Gen-Probe公司rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测(MTD)技术[1]应用于临床,并与传统的涂片抗酸染色和L-J培养法进行平行观察,以比... 详细信息

为满足临床迫切需要一种更快、更准确地早期诊断结核病的方法,以保证及早的、更合理地进行治疗,我们引进了美国Gen-Probe公司rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测(MTD)技术[1]应用于临床,并与传统的涂片抗酸染色和L-J培养法进行平行观察,以比较其优劣,以探讨该法的临床应用价值。

关键词：临床应用价值结核分枝杆菌 RNA扩增直接检测早期诊断抗酸染色结核病培养法

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依赖利福平结核菌肺结核一例分析

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中华传染病杂志 2008年第2期26卷 110-111页

作者：张西雁张春智陈刚胡频频钟敏重庆市肺科医院呼吸科 430020 重庆市结核基因诊断中心实验室

研究发现，有的分枝杆菌在含利福平的培养基中生长旺盛，无利福平反而生长不良，于是将此类结核杆菌称为依赖利福平分枝杆菌（依R菌）。临床上，如果结核病患者体内出现依R菌，再使用利福平，不仅对治疗无反应，而且可使病情加重，预后... 详细信息

研究发现，有的分枝杆菌在含利福平的培养基中生长旺盛，无利福平反而生长不良，于是将此类结核杆菌称为依赖利福平分枝杆菌（依R菌）。临床上，如果结核病患者体内出现依R菌，再使用利福平，不仅对治疗无反应，而且可使病情加重，预后不佳，但目前临床医师对依R菌普遍认识不足，现将临床1例确诊的依R菌患者报道如下。

关键词：依赖利福平肺结核结核菌临床医师分枝杆菌生长不良类结核杆菌结核病患者

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依赖利福平结核分枝杆菌相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列研究

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中华结核和呼吸杂志 2006年第2期29卷 83-86页

作者：钟敏王易伟胡频频包佳玲钟静胡忠义罗永艾重庆市肺科医院重庆市结核基因诊断中心实验室 400020 复旦大学生命科学院上海市肺科医院重庆医科大学第一临床学院肺科

目的研究临床依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列。方法以罗氏绝对浓度法药敏实验鉴定临床依R菌株(49株)、耐R菌株(54株)和R敏感菌株(30株),用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳(SDSPAGE)法对不同临床菌株及H3... 详细信息

目的研究临床依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列。方法以罗氏绝对浓度法药敏实验鉴定临床依R菌株(49株)、耐R菌株(54株)和R敏感菌株(30株),用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳(SDSPAGE)法对不同临床菌株及H37Rv标准株共计134株菌株的菌体蛋白质图谱进行比较分析,通过QTOF2型毛细管液相色谱电喷雾四极杆飞行时间串联质谱仪(LCESIMSMS)对其差异表达蛋白的氨基酸序列进行鉴定,并用对其蛋白的编码基因进行DNA序列分析。结果不同菌株的SDSPAGE菌体蛋白图谱基本相似。49株依R菌有41株(84%)在含R管中的菌体蛋白图谱有一条相同的高表达蛋白带(相对于标准物分子质量43000的下端),约占总菌体蛋白的30%～50%,H37Rv标准株、28株R敏感菌(28/30)及44株耐R菌(44/54)的含R管和对照管的蛋白图谱相似,且无相应的高表达现象;该高表达蛋白经氨基酸序列鉴定为结核分枝杆菌H37Rv假设蛋白Rv0341,相对分子质量为43894,等电点(PI)5.25,得分183。不同菌株的Rv0341编码基因1440bp扩增片段,经DNA测序分析均未发现突变。结论利福平对Rv0341在依R菌中的表达有上调作用,Rv0341与依R菌相关,可视为依R菌的相关蛋白或标志物;Rv0341与依R菌的毒力及细胞壁的合成是否相关有进一步的研究价值。

关键词：分枝杆菌结核利福平蛋白质组基因

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在临床分枝杆菌L-J培养中增加利福平管的实验观察——从初代培养中筛检临床依赖利福平分枝杆菌

在临床分枝杆菌L-J培养中增加利福平管的实验观察——从初代培养...

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耐多药结核病诊断与治疗研讨会

作者：钟敏王易伟胡频频钟明彭建军钟静刘莉莎重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室

依赖利福平分枝杆菌(依R菌)具有在R中成长旺盛的特点。现有常规方法从枝杆菌的分离培养到药敏实验,至少需要1个半月才能了解菌株是否存在药物依赖现象。本文通过在临床痰标本分枝杆菌L-J初代培养中增加R药物管的平行培养,希望从初代培... 详细信息

依赖利福平分枝杆菌(依R菌)具有在R中成长旺盛的特点。现有常规方法从枝杆菌的分离培养到药敏实验,至少需要1个半月才能了解菌株是否存在药物依赖现象。本文通过在临床痰标本分枝杆菌L-J初代培养中增加R药物管的平行培养,希望从初代培养中筛检临床依R菌株,了解临床是否存在利福平绝对依赖株,并探讨其应用价值,为临床依赖菌的早期发现及其生物学特性的全面了解等提供依据。材料:306份痰标本来源于重庆市肺科医院2004年10月26日至2005月3月23日间

关键词：分枝杆菌利福平 L-J 初代培养实验观察

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分枝杆菌L-J药敏实验中一个值得关注的问题——一个常规药敏结果敏感而临床疗效不好的可能原因

分枝杆菌L-J药敏实验中一个值得关注的问题——一个常规药敏结果...

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2007年中国防痨协会全国学术会议

作者：钟敏钱武刘莉莎钟静姚永秀重庆市肺科医院——重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院——重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院——重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院——重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院——重庆市结核基因诊断中心实验室

在常规分枝杆菌 L-J 药敏培养1个月观察结果时,我们发现：有的菌株培养管斜面虽然未见菌落生长,但仔细观察可见膜状或沙粒状生长物(可疑生长),致使结果难以准确报告。为此我们对可疑生长菌株进行了延长培养观察,拟确认其是否有细

关键词：分枝杆菌 L-J 关注的问题

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rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测系统的方法学探讨(摘要)

rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测系统的方法学探讨(摘要)

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中华医学会结核病学分会2004年学术会议

作者：钟敏王易伟胡频频重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室

MTD方法基本原理:MTD系统的基本原理,是使用间接转录扩增技术,以结核分枝杆菌特异性rRNA为扩增目标,扩增片段被特异性DNA探针结合(杂交),再经杂交保护分析法筛选,最后以化学发光仪检测被标记的rRNA。

关键词：结核分枝杆菌方法学直接检测系统

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结核分枝杆菌H_(37)Rv株Rv0341编码基因iniB的克隆与表达

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中国生物制品学杂志 2008年第7期21卷 557-559,564页

作者：吴园钟敏王易伟钟静胡频频毛旭虎第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038 重庆市肺科医院暨重庆市结核基因诊断中心实验室重庆400020

目的克隆并表达编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因。方法利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增iniB基因,克隆于pET-22b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-... 详细信息

目的克隆并表达编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因。方法利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增iniB基因,克隆于pET-22b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性。结果克隆并表达了iniB基因,表达的蛋白相对分子质量约43000,诱导2h表达量较高,约为25%。目的蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化后蛋白纯度可达98%以上。经Western blot检测,纯化蛋白与依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)肺结核患者血清呈现强阳性反应,而与非依R菌肺结核患者血清不反应。结论已成功克隆并表达了编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因,表达的重组蛋白具有反应原性及特异性,为依R菌结核病临床血清学快速诊断方法的建立及试剂盒的研发奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌 H37Rv株 Rv0341蛋白 iniB基因克隆表达

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二聚体蝎型探针荧光定量PCR快速检测临床标本结核分枝杆菌DNA

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中国人兽共患病学报 2007年第7期23卷 661-663,666页

作者：王虹钟敏舒朝忠陈淑惠尹一兵重庆医科大学医学检验系重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016 重庆市肺科医院重庆市结核菌基因诊断中心实验室 400020

目的比较二聚体蝎型探针荧光定量PCR与抗酸染色、L-J培养法、结核分枝杆菌直接试验(MTD)的检出率、检测时间等,探讨二聚体蝎型探针荧光定量PCR检测临床标本中结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)的实际应用价值。方法以建立的结核二聚体蝎型探针荧... 详细信息

目的比较二聚体蝎型探针荧光定量PCR与抗酸染色、L-J培养法、结核分枝杆菌直接试验(MTD)的检出率、检测时间等,探讨二聚体蝎型探针荧光定量PCR检测临床标本中结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)的实际应用价值。方法以建立的结核二聚体蝎型探针荧光定量PCR方法为基础,对43例结核确诊患者的标本及11例非肺结核患者的痰标本进行检测,并与抗酸染色、L-J培养法、结核分枝杆菌直接试验(MTD)进行比较。结果二聚体蝎型探针荧光定量PCR能快速准确的检测临床标本中的TB-DNA。其标准品浓度在102～106copies/μl时,方法能够保持良好的线性关系(相关系数为0.9994),阳性检出率(100%)显著高于抗酸染色法(16.28%)和培养法(37.21%)的检出率,与MTD试验的检出率(100%)一致。MTD试验检测时间约4～5h,而二聚体蝎型探针FQ-PCR检测约需80min即可得到检测结果,检测费用仅为MTD的1/4。结论二聚体蝎型探针荧光定量PCR用于临床标本结核分枝杆菌DNA的检测具有快速价廉、敏感特异的特点,该方法作为定量检测结核分枝杆菌的分子诊断新途径值得临床推广应用。

关键词：结核分枝杆菌荧光定量PCR 二聚体蝎型探针

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依赖利福平结核分枝杆菌Rv0341天然蛋白的诊断价值

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中国生物制品学杂志 2009年第11期22卷 1126-1129页

作者：王易伟吴园胡频频钟明彭建军杨晓梅姚永秀钟敏毛旭虎重庆市肺科医院暨重庆市结核基因诊断中心实验室重庆400020 第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400030 重庆市公共卫生医疗救治中心重庆400036

目的探讨依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,诊断依R菌感染肺结核病的价值。方法典型依R菌经SDS-PAGE、转膜后,获得Rv0341天然蛋白带,采用结核分枝杆菌抗体DIGFA诊断试剂检测血清Rv0341抗体,并考察该方法... 详细信息

目的探讨依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,诊断依R菌感染肺结核病的价值。方法典型依R菌经SDS-PAGE、转膜后,获得Rv0341天然蛋白带,采用结核分枝杆菌抗体DIGFA诊断试剂检测血清Rv0341抗体,并考察该方法的重复性、特异性及敏感性。结果利用Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,具有良好的批内和批间重复性;血清Rv0341抗体在耐R菌肺结核组和R敏感菌肺结核组的特异性分别为92.3%(24/26)和79.3%(23/29),在依R菌肺结核R治疗组中的敏感性为88.9%(16/18);在培养阴性结核组中,阳性率为23.8%(29/122)。54份阳性结果血清进行重复实验,确认为阳性。结论Rv0341天然蛋白可作为诊断抗原用于依R菌结核病血清学诊断试剂盒的研发,以快速辅助诊断依R菌结核病,特别对菌阴依R菌结核病更有诊断价值。

关键词： Rv0341蛋白 DIGFA 依赖利福平结核分枝杆菌结核病诊断

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基因探针与结核分枝杆菌直接检测(摘要)

基因探针与结核分枝杆菌直接检测(摘要)

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中华医学会结核病学分会2004年学术会议

作者：钟敏重庆市肺科医院-重庆市结核基因诊断中心实验室

近20年来,随着分子生物学技术的不断发展,基因探针技术在人类疾病的研究和诊断等方面越来越显示出它的重要作用。检测目标及意义:MTD试验的检测目标是结核分枝杆菌复合体的rRNA。结核分枝杆菌复合体包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、田鼠... 详细信息

近20年来,随着分子生物学技术的不断发展,基因探针技术在人类疾病的研究和诊断等方面越来越显示出它的重要作用。检测目标及意义:MTD试验的检测目标是结核分枝杆菌复合体的rRNA。结核分枝杆菌复合体包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、田鼠分枝杆菌利非洲分枝杆菌,它们均可被MTD试验检出。但是,由于牛分枝杆菌很少从感染动物感染人体,田鼠分枝杆菌只感染动物,非洲分枝杆菌只在热带非洲引起肺部疾病。而结核分枝杆凶是世界范围内最

关键词：直接检测非洲分枝杆菌田鼠分枝杆菌基因探针结核分枝杆菌

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