检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2008年第13期30卷 1268-1271页

作者：孙卫忠胡晓梅饶贤才谭银玲陈志谨丛延广胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的构建铜绿假单胞菌噬菌体内溶素重组原核表达载体,检测重组蛋白的酶学活性及抑菌活性。方法利用重组技术将铜绿假单胞菌裂解性噬菌体PaP1内溶素基因构建到表达载体pQE31中,并在大肠杆菌M15(pREP4)中诱导表达,通过非变性方法纯化重组... 详细信息

目的构建铜绿假单胞菌噬菌体内溶素重组原核表达载体,检测重组蛋白的酶学活性及抑菌活性。方法利用重组技术将铜绿假单胞菌裂解性噬菌体PaP1内溶素基因构建到表达载体pQE31中,并在大肠杆菌M15(pREP4)中诱导表达,通过非变性方法纯化重组融合蛋白,利用酶谱电泳、抑菌实验等技术检测酶学活性及抑菌活性。结果酶谱电泳方法结果显示重组融合蛋白对铜绿假单胞菌细胞壁肽聚糖有降解作用,抑菌活性检测结果显示重组融合蛋白对金黄色葡萄球菌有一定的抑菌效果。结论该研究从实验方面证实了噬菌体PaP1内溶素基因的生物学功能。

关键词：噬菌体内溶素基因表达活性鉴定

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大鼠少突胶质细胞前体细胞的生后发育特点及围生期电生理特性的研究

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第三军医大学学报 2008年第19期30卷 1783-1786页

作者：陈鹏慧蔡文琴王丽雁第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究少突胶质细胞前体细胞(OPC)的发育特点及围生期电生理特性。方法应用免疫组化及Western blot,观察生后不同发育阶段大鼠大脑皮质、海马等区域OPC细胞数量。应用脑片膜片钳记录出生后7d大鼠皮层白质和海马OPC电生理学特性。结果... 详细信息

目的研究少突胶质细胞前体细胞(OPC)的发育特点及围生期电生理特性。方法应用免疫组化及Western blot,观察生后不同发育阶段大鼠大脑皮质、海马等区域OPC细胞数量。应用脑片膜片钳记录出生后7d大鼠皮层白质和海马OPC电生理学特性。结果出生后0、7、14、21、35、50d、18个月大鼠大脑皮层及海马区域均有OPC细胞表达。在发育生后7d,细胞数量密度最高,成年大鼠也有较高数量OPC的分布。P7d大鼠海马OPC有小的内向Na+电流,而白质区域OPC仅表现外向K+电流和细胞膜被动反应。结论P7d大鼠皮层及海马区域OPC细胞数量及NG2蛋白表达量最大,海马和白质区域的OPC表现电生理学特性的异质性。

关键词：少突胶质细胞前体细胞 NG2 发育膜片钳

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ATP通过P2Y_1受体引发脊髓背角星形胶质细胞[Ca^(2+)]i升高和GFAP表达上调

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免疫学杂志 2008年第2期24卷 150-154页

作者：曾俊伟刘晓红阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察体外培养的背角星形胶质细胞P2Y1受体激活对其[Ca2+]i的变化和GFAP表达的影响。方法培养并纯化脊髓背角星形胶质细胞,采用免疫组织化学染色观察背角星形胶质细胞P2Y1受体及GFAP的表达,激光共聚焦技术观察星形胶质细胞[Ca2+]i的... 详细信息

目的观察体外培养的背角星形胶质细胞P2Y1受体激活对其[Ca2+]i的变化和GFAP表达的影响。方法培养并纯化脊髓背角星形胶质细胞,采用免疫组织化学染色观察背角星形胶质细胞P2Y1受体及GFAP的表达,激光共聚焦技术观察星形胶质细胞[Ca2+]i的变化。结果体外培养的大鼠脊髓背角星形胶质细胞大多表达P2Y1受体;P2Y受体激动剂ATP、ADP、ADP-βs剂量依赖性促进星形胶质细胞[Ca2+]i升高;10μmol/L的ATP、ADP和ADP-βs显著增加胞内[Ca2+]i,此作用可被特异性P2Y1受体拮抗剂MRS2179所阻断,并具量效关系。免疫组织化学染色结果显示,100μmol/L的ATP、ADP和ADP-βs作用下,星形胶质细胞GFAP表达上升,此效应可被100μmol/L的MRS2179所抑制。结论体外培养的大鼠脊髓背角星形胶质细胞表达P2Y1受体;P2Y1受体介导了ATP、ADP及ADP-βs促进星形胶质细胞[Ca2+]i升高和GFAP表达增强的过程。

关键词：脊髓背角星形胶质细胞 P2Y1受体

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新生大鼠少突胶质前体细胞的培养与鉴定

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第三军医大学学报 2008年第6期30卷 489-491页

作者：王丽雁蔡文琴陈鹏慧第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的在体外培养条件下获取纯度较高的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法原代混合胶质培养,利用振荡法和差速贴壁法分离纯化少突胶质前体细胞,再用无血清化学条件培养基培养。免疫荧光法及膜片钳记录细胞... 详细信息

目的在体外培养条件下获取纯度较高的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法原代混合胶质培养,利用振荡法和差速贴壁法分离纯化少突胶质前体细胞,再用无血清化学条件培养基培养。免疫荧光法及膜片钳记录细胞电生理特性进行鉴定。结果振荡分离后超过90%细胞为NG2阳性OPCs;OPCs电生理特性:输入阻抗Ra相对较高;电压依赖的K+电流具有外向整流特性;对河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)敏感的小的内向Na+流,不能产生动作电位。结论振荡法结合差速贴壁可以获得纯度较高的OPCs;OPCs具有区别于神经元、星型胶质细胞、小胶质细胞的独有电生理特性。

关键词：少突胶质前体细胞细胞培养大鼠

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NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态特征

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 31-34页

作者：陈鹏慧蔡文琴王丽雁吴喜贵第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态差异。方法应用免疫组化SABC法,观察成年大鼠大脑皮质、海马、齿状回、丘脑、下丘脑等区域NG2免疫反应阳性细胞。采用Image-Pro Plus5.0图像分析软件计数单位面积阳性细胞数量,并进行统... 详细信息

目的研究NG2胶质细胞在成年大鼠脑内的分布及形态差异。方法应用免疫组化SABC法,观察成年大鼠大脑皮质、海马、齿状回、丘脑、下丘脑等区域NG2免疫反应阳性细胞。采用Image-Pro Plus5.0图像分析软件计数单位面积阳性细胞数量,并进行统计学分析。结果NG2胶质细胞在成年大鼠多个脑区均有表达,其中大脑皮质的灰质、白质,海马、齿状回,丘脑室下区、下丘脑室周区等区域表达比较集中。成年脑内NG2胶质细胞突起丰富、有较多分支,细胞体呈星形但是在各脑区形态不完全一致。结论NG2细胞是成年脑内另一类特殊胶质细胞,数量较多且一部分脑区集中表达。

关键词：少突胶质细胞前体细胞 NG2胶质细胞免疫组化大鼠

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前列腺结石患者结石中纳米细菌的分离和16SrRNA基因的鉴定

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第三军医大学学报 2008年第2期30卷 124-126页

作者：沈学威杨杰饶贤才宋波周占松第三军医大学西南医院全军泌尿外科研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的检测纳米细菌在前列腺结石中的分布情况,探讨其在前列腺结石发病中的作用。方法采集前列腺结石患者的前列腺结石标本,分离培养纳米细菌,采用PCR法对纳米细菌16S rRNA基因进行扩增,电泳分析结果并测序。结果将PCR得到的特异性片段的... 详细信息

目的检测纳米细菌在前列腺结石中的分布情况,探讨其在前列腺结石发病中的作用。方法采集前列腺结石患者的前列腺结石标本,分离培养纳米细菌,采用PCR法对纳米细菌16S rRNA基因进行扩增,电泳分析结果并测序。结果将PCR得到的特异性片段的测序结果与已知纳米细菌16S rRNA序列进行比较,相似度为98%:分值=2480bits(1290),期望值=0.0;相似度=1387/1409(98%),缺失=4/1409(0%);链=正/正。结论PCR法和测序可以作为纳米细菌16S rRNA基因的检测手段;前列腺结石患者的结石中存在着纳米细菌的感染。

关键词：纳米细菌前列腺结石聚合酶链式反应 16S rRNA基因

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角膜缘基质诱导毛囊干细胞角膜上皮样转分化的研究

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第三军医大学学报 2008年第13期30卷 1235-1238页

作者：姜自玲杨力连小华杨恬杨柯重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的体外诱导培养毛囊干细胞角膜上皮样分化。方法体外分离培养毛囊干细胞,然后用角膜缘基质组织匀浆液对其进行诱导培养,并用免疫细胞化学(ICC)法检测诱导前后α6-integrin、CD34、K12的变化;RT-PCR方法检测细胞诱导前后K12的mRNA表达... 详细信息

目的体外诱导培养毛囊干细胞角膜上皮样分化。方法体外分离培养毛囊干细胞,然后用角膜缘基质组织匀浆液对其进行诱导培养,并用免疫细胞化学(ICC)法检测诱导前后α6-integrin、CD34、K12的变化;RT-PCR方法检测细胞诱导前后K12的mRNA表达情况;流式细胞分析(FCM)检测毛囊干细胞角膜上皮样分化的阳性率。结果体外培养的毛囊干细胞保持高增殖的状态,α6-integrin、CD34于细胞质表达。经过10d的诱导培养,可见K12于细胞质阳性表达;RT-PCR结果显示毛囊干细胞经诱导后K12的mRNA明显表达;FCM结果亦显示毛囊干细胞经诱导培养后有较高比率的K12阳性细胞。结论毛囊干细胞经角膜缘组织匀浆液体外诱导可成功地分化为角膜上皮样细胞。

关键词：毛囊干细胞角膜上皮细胞转分化

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淋巴增强因子-1在大鼠触须毛囊生长周期中的表达

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 43-45页

作者：施春英张艺陈伟郭燕燕杨恬杨力重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的研究淋巴增强因子(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)在大鼠触须毛囊生长周期中表达及其重要作用。方法选取处于毛发周期各阶段的触须毛囊,采用免疫组织化学的方法检测LEF-1在各时期毛囊中的表达及变化。结果生长期,LEF-1主要表达... 详细信息

目的研究淋巴增强因子(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)在大鼠触须毛囊生长周期中表达及其重要作用。方法选取处于毛发周期各阶段的触须毛囊,采用免疫组织化学的方法检测LEF-1在各时期毛囊中的表达及变化。结果生长期,LEF-1主要表达于毛囊的毛母质和外根鞘的细胞核内,随着生长的推进,核表达逐渐转化为细胞质表达;退化期,LEF-1表达明显减弱,毛母质中弱表达,外根鞘内表达消失;静止期,LEF-1重新出现在bulge区的外侧,在内根鞘中的表达明显增强。结论LEF-1参与毛干和内根鞘的分化,并且在毛囊周期的维持中起到重要的作用。

关键词：毛发周期 LEF-1 表达

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Pax6基因和蛋白在大鼠触须毛囊中的表达

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第三军医大学学报 2008年第13期30卷 1296-1298页

作者：杨珂杨恬姜自玲第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038 重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044

目的初步研究转录因子Pax6(paired homebox 6)在大鼠触须毛囊中的表达。方法运用免疫组织化学法检测Pax6蛋白在大鼠触须毛囊及培养的毛囊bulge细胞中的表达,RT-PCR分析毛囊中Pax6两种亚型的表达情况。结果大鼠触须毛囊细胞中Pax6表达阳... 详细信息

目的初步研究转录因子Pax6(paired homebox 6)在大鼠触须毛囊中的表达。方法运用免疫组织化学法检测Pax6蛋白在大鼠触须毛囊及培养的毛囊bulge细胞中的表达,RT-PCR分析毛囊中Pax6两种亚型的表达情况。结果大鼠触须毛囊细胞中Pax6表达阳性,RT-PCR显示表达量以Pax6-5a为高,在体外培养细胞中表现出细胞增殖能力与Pax6在细胞中的表达部位相关。结论Pax6在大鼠触须毛囊中表达,可能在其形成和功能的维持上发挥一定的作用。

关键词： Pax6 毛囊

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大鼠毛囊干细胞的纯化培养鉴定及其生物学特性

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 39-42页

作者：黄恩毅杨恬陈伟杨力重庆大学生物工程学院国家“111计划”基地重庆400044 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038

目的采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性。方法显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分... 详细信息

目的采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性。方法显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分别收集CD34+细胞和CD34-细胞,检测细胞活性后进行细胞培养并绘制细胞生长曲线。扫描电镜观察毛囊干细胞表面形态,透射电镜观察干细胞内部结构形态。免疫细胞化学检测培养细胞中β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达。结果用VarioMACS法有效分离并成功培养CD34+毛囊干细胞,分选后的细胞仍具有较好的活性,细胞生长曲线表明,CD34+毛囊干细胞增殖速度快,增殖期长,而CD34-细胞则较快进入平台期。培养的CD34+细胞中干细胞标记物β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达均强于CD34-细胞。获得电镜观察毛囊干细胞表面形态学特征及内部结构特征资料。结论VarioMACS法能有效分离获得的CD34+毛囊干细胞,该细胞具有良好的生物学性能。

关键词：免疫磁珠 CD34 毛囊干细胞

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