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第三军医大学学报 2003年第17期25卷 1540-1543页

作者：袁碧波蔡文琴孙榆吴喜贵胡志安第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的　培养纯化嗅球成鞘细胞 (Olfactoryensheathingcells ,OECs)并对其进行免疫细胞化学研究 ,探讨其相关功能。方法　分离嗅球嗅神经纤维层获得嗅球成鞘细胞 ,采用免疫溶解法对培养的嗅球成鞘细胞进行纯化 ,并利用免疫细胞化学方法和... 详细信息

目的　培养纯化嗅球成鞘细胞 (Olfactoryensheathingcells ,OECs)并对其进行免疫细胞化学研究 ,探讨其相关功能。方法　分离嗅球嗅神经纤维层获得嗅球成鞘细胞 ,采用免疫溶解法对培养的嗅球成鞘细胞进行纯化 ,并利用免疫细胞化学方法和电镜技术进行形态学观察。结果　通过纯化可以使培养的OECs纯度达 95 %以上 ,免疫细胞化学显示OECs表达P75NGFr、GAP43、N CAM和GFAP ;电镜结果显示OECs呈分叶状核 ,胞浆电子致密 ,胞膜有伪足样皱褶。结论　免疫溶解法可以较好的纯化OECs并保持其良好的生长状态 ,培养的OECs表达P75NGFr、GAP43、N

关键词：嗅球成鞘细胞细胞培养电镜技术免疫细胞化学

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细胞电融合芯片技术的发展及展望

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分析化学 2012年第3期40卷 331-338页

作者：王振宇杨军胡宁郑小林杨忠重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室

细胞电融合芯片技术是最近十几年来发展迅速的一种细胞融合方法,它可以广泛用于遗传学、动植物远缘杂交育种、发育生物学、免疫学、医药、食品以及农业等领域的基础研究和应用开发。由于其不仅具有可控性强、操作简便、对细胞无毒害等优... 详细信息

细胞电融合芯片技术是最近十几年来发展迅速的一种细胞融合方法,它可以广泛用于遗传学、动植物远缘杂交育种、发育生物学、免疫学、医药、食品以及农业等领域的基础研究和应用开发。由于其不仅具有可控性强、操作简便、对细胞无毒害等优点,还比传统细胞电融合技术更安全、快捷、高效、便携、集成度高,而且便于实验观察,样本消耗少,因此,在国内外广受关注。本文综述了细胞电融合芯片技术的基本原理、实现方法、研究进展,并对其未来发展作了展望。

关键词：细胞电融合芯片微电极微流控综述

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登革病毒在中枢神经系统传播机制的研究

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 396-400页

作者：周德山安静王嘉丽第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的　分析登革 (DEN)病毒感染后中枢神经系统 (CNS)的病理变化及病毒在CNS内的传播方式。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,电镜观察感染后不同时间 ,DEN病毒在CNS的分布、增殖及感染细胞的... 详细信息

目的　分析登革 (DEN)病毒感染后中枢神经系统 (CNS)的病理变化及病毒在CNS内的传播方式。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,电镜观察感染后不同时间 ,DEN病毒在CNS的分布、增殖及感染细胞的病变特点。结果　在感染早期 ,脊髓中央管上皮细胞胞浆内可见数量不等的病毒颗粒 ,随着感染的进展 ,子代病毒主要分布在神经元的粗面内质网和高尔基体内。在感染晚期 ,典型的神经突触及有髓和无髓的神经纤维中均可见病毒颗粒 ,其中有些病毒颗粒有与突触前膜融合倾向。在感染过程中 ,被感染的神经元逐渐出现空泡变性 ,进而溶解、死亡。结论　经脑内接种的登革病毒可能通过脑脊液播散 ,侵入脊髓灰质 ,并在神经元内增殖 ;并且 ,除组织间隙外 ,从神经元到神经元的传播途径可能参与登革病毒在CNS内的传播。

关键词：登革病毒严重联合免疫缺陷小鼠神经元中枢神经系统

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经脑感染后登革病毒在小鼠脊髓分布特点的研究

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第三军医大学学报 2002年第4期24卷 401-403页

作者：安静周德山张俊磊第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　分析登革 (DEN)病毒在中枢神经系统 (CNS)内的生长规律和分布特点。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,应用空斑法和免疫荧光染色分别检测感染后小鼠CNS和血清中的病毒滴度及病毒抗原的... 详细信息

目的　分析登革 (DEN)病毒在中枢神经系统 (CNS)内的生长规律和分布特点。方法　用 2型登革病毒 (DEN 2 )对严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠进行脑内接种 ,应用空斑法和免疫荧光染色分别检测感染后小鼠CNS和血清中的病毒滴度及病毒抗原的分布。结果　感染后小鼠逐渐出现皮毛不整、脊柱侧凸及弛缓性麻痹。从感染后 3d到麻痹发生日 ,可在小鼠的脑皮质和脊髓中检测到滴度较高的DEN 2病毒 ,而血清中则检测不到病毒。免疫荧光染色显示DEN病毒抗原大量存在于大脑海马、基底核和脊髓灰质的神经元内。登革病毒抗原在感染早期和晚期在脊髓灰质的分布也存在差异。结论　感染后DEN在脊髓灰质内的分布不同提示脊髓不同部位的神经元对登革病毒的易感性可能不同。病毒在大脑、脊髓神经细胞内的增殖造成的细胞损害可能是登革病毒感染某些临床表现的病理基础。

关键词：登革病毒严重联合免疫缺陷小鼠脊髓脑感染

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大鼠中枢神经系统结缔组织生长因子免疫反应阳性细胞的发育

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第三军医大学学报 2000年第12期22卷 1135-1138页

作者：苏炳银蔡文琴张成岗 Perbal.B 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 UniversiteParisⅦ ParisFrance

目的　研究E8～P30 0大鼠中枢神经系统 (CNS)结缔组织生长因子 (CTGF)免疫反应阳性细胞的发育规律。方法　应用免疫细胞化学方法检测大鼠中枢神经系统CTGF免疫反应阳性细胞在不同发育阶段的变化情况。结果　出生前大鼠CNS未检测到CTGF... 详细信息

目的　研究E8～P30 0大鼠中枢神经系统 (CNS)结缔组织生长因子 (CTGF)免疫反应阳性细胞的发育规律。方法　应用免疫细胞化学方法检测大鼠中枢神经系统CTGF免疫反应阳性细胞在不同发育阶段的变化情况。结果　出生前大鼠CNS未检测到CTGF免疫反应阳性细胞。出生后早期较少 ,而后逐渐增加。出生后 1～ 2月间出现发育高峰 :阳性细胞数量最多 ,分布范围广泛 ,阳性信号强。随年龄的增加阳性细胞数量逐渐减少 ,分布范围逐渐减小。阳性细胞主要是大脑扣带皮质、纹状皮质、海马、下丘脑、小脑的神经元和脊髓白质的星形胶质细胞、室管膜细胞。阳性细胞具长突起 ,且突起显示较强阳性信号。结论　CTGF在CNS的发育。

关键词：结缔组织生长因子中枢神经系统大鼠发育

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大鼠皮层神经元NMDA受体通道动力学特性的发育变化

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第三军医大学学报 1999年第6期21卷 410-412页

作者：熊鹰蔡文琴李希成隋建峰第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织与胚胎学教研室重庆400038

目的:探讨大鼠发育过程中皮层神经元NMDA受体通道动力学特性的变化。方法:采用细胞贴附式记录急性分离神经元NMDA受体的单通道电流。结果:新生大鼠皮层神经元NMDA受体通道以20ps通道开放最常见，而且多数是以短开放为主，猝发样开放（bu... 详细信息

目的:探讨大鼠发育过程中皮层神经元NMDA受体通道动力学特性的变化。方法:采用细胞贴附式记录急性分离神经元NMDA受体的单通道电流。结果:新生大鼠皮层神经元NMDA受体通道以20ps通道开放最常见，而且多数是以短开放为主，猝发样开放（burst）为主的长开放通道少见;成年大鼠20pS通道明显减少，35pS通道明显增多，并且出现35pS长开放通道，20、35pS通道的开放时间和开放概率均明显高于新生大鼠。结论:大鼠皮层神经元NMDA受体通道动力学特性有明显的发育变化。

关键词：皮层神经元 NMDA受体通道动力学特性

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犬烧伤早期脑水肿时毛细血管密度的体视学研究

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第三军医大学学报 2001年第2期23卷 179-181页

作者：黎海涛应大君何小川孙建森附属西南医院放射科第三军医大学基础医学部解剖学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　探讨严重烧伤早期脑水肿时脑血流的变化特点。方法　将 2 6只家犬随机分为对照组 ,烧伤后 6、12、18和 2 4h组。采用内源性碱性磷酸酶组化染色 (EAHCS)及图像分析方法观察脑组织毛细血管形态和分布 ,并用体视学分析方法测定脑毛... 详细信息

目的　探讨严重烧伤早期脑水肿时脑血流的变化特点。方法　将 2 6只家犬随机分为对照组 ,烧伤后 6、12、18和 2 4h组。采用内源性碱性磷酸酶组化染色 (EAHCS)及图像分析方法观察脑组织毛细血管形态和分布 ,并用体视学分析方法测定脑毛细血管的体积、面积和长度密度分数。结果　烧伤后 6h和 12h毛细血管分布密度逐渐增加 ,血管形态无明显改变 ;伤后 18h和 2 4h毛细血管分布密度趋于减少 ,血管形态出现枯藤状改变。体视学分析发现 ,伤后 6h和 12h毛细血管密度分数趋于增加 ,而伤后 18h和 2 4h毛细血管密度分数明显减少 ,于伤后 2 4h达最低值 (P <0 .0 5 )。结论　提示脑血流量的变化在严重烧伤脑水肿的病理过程中起着重要作用。

关键词：脑水肿脑血流体视学方法烧伤毛细血管密度

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石蜡包埋标本用于制作树脂半薄大切片的方法

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第三军医大学学报 2003年第16期25卷 1488-1489页

作者：孙榆应希马千里于彬周德山第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学附属西南医院眼科重庆400038

目的　介绍利用石蜡包埋标本制作树脂半薄大切片用于光镜研究的方法。方法　将石蜡包埋标本方法与树脂包埋方法结合并进行改良 ,利用超薄切片机和玻璃刀制作树脂半薄大切片。结果　光镜观察见切片平整 ,结构显示清晰。结论　该方法制作... 详细信息

目的　介绍利用石蜡包埋标本制作树脂半薄大切片用于光镜研究的方法。方法　将石蜡包埋标本方法与树脂包埋方法结合并进行改良 ,利用超薄切片机和玻璃刀制作树脂半薄大切片。结果　光镜观察见切片平整 ,结构显示清晰。结论　该方法制作的切片与电镜树脂包埋方法制作的连续半薄大切片结果相似。

关键词：环氧树脂包埋树脂半薄大切片视神经石蜡包埋标本制作光镜

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缓慢牵伸肢体延长时周围神经损害及修复过程中生长相关蛋白43mRNA表达的实验研究

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第三军医大学学报 2000年第2期22卷 153-155页

作者：范少地许建中李起鸿吴康第三军医大学附属西南医院骨科重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的 :观察缓慢牵伸肢体延长时周围神经相应的脊髓及背根神经节(DRG)中生长相关蛋白 43(GAP 43)mRNA表达。方法 :29只日本大耳白兔胫骨以1mm/d的速度缓慢牵伸延长至20 %、40 %,停止延长后2、4周 ,用原位杂交技术观察坐骨神经相应背根... 详细信息

目的 :观察缓慢牵伸肢体延长时周围神经相应的脊髓及背根神经节(DRG)中生长相关蛋白 43(GAP 43)mRNA表达。方法 :29只日本大耳白兔胫骨以1mm/d的速度缓慢牵伸延长至20 %、40 %,停止延长后2、4周 ,用原位杂交技术观察坐骨神经相应背根神经节及脊髓中GAP 43mRNA的表达及定位 ,以图像分析仪进行半定量分析。结果 :缓慢牵伸至20 %时相应脊髓及神经节呈阳性表达 ,延长40 %时呈强阳性表达 ,停止延长4周恢复正常。结论 :缓慢牵伸周围神经虽无神经临床损害症状 ,但引起GAP 43mRNA表达的上调 ,并在停止延长后4周恢复正常 ;缓慢牵伸过程中神经的亚临床损害广泛存在 ,并存在着强烈的神经再生反应。

关键词：肢体延长周围神经损害 GAP-43 mRNA

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GAP-43cDNA及TH-3cDNA重组逆转录病毒载体的构建

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第三军医大学学报 1997年第4期19卷 386-387页

作者：刘俊蔡文琴杨辉张可成第三军医大学附属新桥医院神经外科第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室

ＧＡＰ┐４３ｃＤＮＡ及ＴＨ┐３ｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体的构建ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＧＡＰ┐４３ｃＤＮＡａｎｄＴＨ┐３ｃＤＮＡｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｒｅｔｒｏｖｉ┐ｒａｌｖｅｃｔｏｒｓ刘俊＊＊蔡文琴＊＊＊... 详细信息

ＧＡＰ┐４３ｃＤＮＡ及ＴＨ┐３ｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体的构建ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＧＡＰ┐４３ｃＤＮＡａｎｄＴＨ┐３ｃＤＮＡｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｒｅｔｒｏｖｉ┐ｒａｌｖｅｃｔｏｒｓ刘俊＊＊蔡文琴＊＊＊杨辉张可成（第三军医大学附属新桥医...

关键词：逆转录病毒载体载体构建 GAP-43 TH-3 cDNA

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