检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2007年第2期23卷 121-125,130页

作者：周维英吴超石云张卫军邹全明第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的构建和表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)黏附素(HpaA)和尿素酶B亚单位(UreB)表位串联体(HUepi)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合蛋白(HUepi-LTB),并对其进行纯化和鉴定。方法采用PCR技术分别扩增HpaA-UreB表位多肽编... 详细信息

目的构建和表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)黏附素(HpaA)和尿素酶B亚单位(UreB)表位串联体(HUepi)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合蛋白(HUepi-LTB),并对其进行纯化和鉴定。方法采用PCR技术分别扩增HpaA-UreB表位多肽编码基因HUepi和LTB的编码基因LtB,重叠延伸PCR将2段基因拼接起来,T-A克隆后构建融合基因表达质粒pET-22b(+)-HUepi-LtB,经酶切鉴定后转化***21(DE3),IPTG诱导表达,采用阳离子和阴离子交换层析进行纯化,PAGE检测、N端测序和westernblotting、ELISA检测、GM1活性检测。结果成功构建表位串联体(HUepi)与LTB融合蛋白的高效表达质粒pET-22b(+)-HUepi-LtB,重组工程菌pET-22b(+)-HUepi-LtB/BL21经IPTG诱导目的蛋白表达率约28%,PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约20.7×103,破菌后电泳证实目的蛋白以包涵体形式表达,纯化后蛋白纯度达97%,免疫学鉴定该融合蛋白与兔抗LTB抗血清可以发生特异性的结合。结论HpHpaA-UreB表位串联体(HUepi)与LTB融合蛋白(HUepi-LTB)经基因克隆获得了较高的表达量,并初步显示了较好的免疫活性。为新一代Hp疫苗的研制奠定基础。

关键词：幽门螺杆菌黏附素尿素酶B亚单位大肠杆菌不耐热毒素B亚单位

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌双亚单位基因疫苗的构建及免疫原性研究

引用

中国免疫学杂志 2007年第8期23卷 684-687页

作者：袁小澎邹全明洪愉柏杨吴超张卫军第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的:构建幽门螺杆菌(Hp)两个保护性亚单位UreB、HspA融合基因疫苗并观察其免疫原性。方法:从Hp基因组分别扩增出UreB、HspA基因片段,采用重叠延伸PCR方法将两个基因片段构建融合基因,以BglⅡ和XhoⅠ酶切位点克隆入真核表达载体pcDNA3.1... 详细信息

目的:构建幽门螺杆菌(Hp)两个保护性亚单位UreB、HspA融合基因疫苗并观察其免疫原性。方法:从Hp基因组分别扩增出UreB、HspA基因片段,采用重叠延伸PCR方法将两个基因片段构建融合基因,以BglⅡ和XhoⅠ酶切位点克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经测序确认后转染COS-7细胞,Western blot检测目的蛋白表达,胫前肌注射免疫小鼠后收集血清检测特异性抗体效价。结果:经测序后证实成功将融合基因构建到真核表达载体中,免疫印记检测到目的蛋白表达,并具有良好的抗原性,免疫小鼠后能够产生特异性抗体。结论:成功构建Hp双价DNA疫苗,免疫小鼠后显示出良好的免疫原性,为Hp进一步基因疫苗的研究奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌 DNA疫苗尿素酶热休克蛋白A

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于HSV-1型特异性表位的血清抗体ELISA检测方法建立与初步应用评价

引用

免疫学杂志 2006年第6期22卷 683-685页

作者：姬小薇邹全明于庆潭赵莉莉毛旭虎第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的建立并评价HSV-1型特异性抗体鉴别诊断的ELISA方法。方法以HSV-1-gG112-127型特异性表位的串联重组表达蛋白作为包被抗原,建立检测血清HSV-1特异性IgG的间接ELISA方法。同时以免疫印迹检测作为“金标准”,评价检测方法的真实性和可... 详细信息

目的建立并评价HSV-1型特异性抗体鉴别诊断的ELISA方法。方法以HSV-1-gG112-127型特异性表位的串联重组表达蛋白作为包被抗原,建立检测血清HSV-1特异性IgG的间接ELISA方法。同时以免疫印迹检测作为“金标准”,评价检测方法的真实性和可靠性。结果采用棋盘法确定了包被抗原、抗体的最佳浓度,建立ELISA检测方法。血清特异性IgG检测的灵敏度为91%,特异度为97.6%,阳性预测值为97%,阴性预测值为93%,符合率为94.5%,试验的一致率为98%。结论用串联重组蛋白作为包被抗原对HSV-1感染的血清进行ELISA分型检测,其特异性好。

关键词：单纯疱疹病毒I型 gG112-127 重组蛋白酶联免疫吸附实验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗幽门螺旋杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体抗原识别表位的初步鉴定

引用

免疫学杂志 2007年第2期23卷 184-186,190页

作者：李海侠吴亚男王宪灵张卫军罗平余抒陈洪章毛旭虎第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的初步确定抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体(mAb)6E6识别的抗原表位。方法采用截短法分段构建含UreB抗原的重组质粒,分别命名为U12,U13,U15,U16,U47。用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblo... 详细信息

目的初步确定抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体(mAb)6E6识别的抗原表位。方法采用截短法分段构建含UreB抗原的重组质粒,分别命名为U12,U13,U15,U16,U47。用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblot分析。结果6E6能够分别识别1～300位氨基酸的U12片段,1～260位氨基酸的U16片段,1～230位氨基酸的U15片段,而不能识别1～200位氨基酸的U13片段和251～389位氨基酸的U47片段。结论mAb6E6抗体识别的抗原表位位于200～230位氨基酸。

关键词：幽门螺杆菌 UreB分段抗原分子单克隆抗体抗原表位

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠骨髓树突状细胞的体外诱导培养及生物学特性分析

引用

解放军医学杂志 2006年第5期31卷 398-400页

作者：吴超石云王晓勤邹全明第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的探讨从小鼠骨髓中体外诱导培养树突状细胞(DC)的可行性并进行生物学特性分析与鉴定。方法用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞,倒置显微镜动态观察形态学变化,扫描电镜观察其表面... 详细信息

目的探讨从小鼠骨髓中体外诱导培养树突状细胞(DC)的可行性并进行生物学特性分析与鉴定。方法用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞,倒置显微镜动态观察形态学变化,扫描电镜观察其表面形态特征,流式细胞术分析细胞表面分子,同时进行抗原吞噬功能和刺激初始型T淋巴细胞增殖能力的检测。结果经体外诱导培养可获得大量未成熟和成熟DC,出现典型树突状形态。未成熟DC的细胞表型为CD11chigh、MHCⅡlow、CD86low,具有极强的抗原吞噬能力;未成熟DC经LPS刺激培养后可转变为成熟DC,细胞表型为CD11chigh、MHCⅡhigh、CD86high,可显著刺激同种异体混合淋巴细胞增殖。结论体外诱导培养可获得小鼠骨髓来源的未成熟和成熟DC。

关键词：树突细胞粒细胞巨噬细胞集落刺激因子细胞培养

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Th17细胞及IL-17在病原微生物感染中的研究进展

引用

中国免疫学杂志 2009年第9期25卷 854-857页

作者：刘晓斐石云邹全明郭刚第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

在机体的适应性免疫应答中,CD4^+T细胞作为效应T细胞的重要成员之一,参与免疫应答的各个阶段,能协调固有免疫和适应性免疫系统的功能活性,并在免疫调节中发挥着关键作用。根据产生细胞因子和生物功能的不同,传统上将CD4^+T细胞分为Th1和... 详细信息

在机体的适应性免疫应答中,CD4^+T细胞作为效应T细胞的重要成员之一,参与免疫应答的各个阶段,能协调固有免疫和适应性免疫系统的功能活性,并在免疫调节中发挥着关键作用。根据产生细胞因子和生物功能的不同,传统上将CD4^+T细胞分为Th1和Th2两类细胞亚群,它们在免疫过程中相互调节并相互制约。Th1细胞分泌IFN-γ和IL-2,清除胞内病原微生物;Th2细胞分泌IL-4、IL-5和IL-13,清除细胞外病原微生物并参与变态反应。[第一段]

关键词： CD4^+T细胞病原微生物感染 IL-17 适应性免疫系统免疫应答细胞分泌 IFN-γ 固有免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肠出血性大肠杆菌(EHEC) O157∶H7志贺毒素研究进展

引用

中国人兽共患病学报 2007年第1期23卷 83-85页

作者：陈洪章邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

肠出血性大肠杆菌(EHEC)0157:H7于1975年被首次分离,为革兰氏阴性杆菌,对酸耐受性强,在pH3－5条件下,可长期生存,能产生致死性志贺毒素(Shiga toxin,Stx),1982年被确认为严重致病菌。其感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和抗... 详细信息

肠出血性大肠杆菌(EHEC)0157:H7于1975年被首次分离,为革兰氏阴性杆菌,对酸耐受性强,在pH3－5条件下,可长期生存,能产生致死性志贺毒素(Shiga toxin,Stx),1982年被确认为严重致病菌。其感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和抗生素治疗可加剧病情的危险性等特点,已经成为全球性的公共卫生问题,对人们的健康构成了巨大威胁。据报道,美国每年感染STEC约有10万例.其中O157:H7感染约有7.3万例。近年来,美国、日本、加拿大、英国等发达国家EHEC O157:H7发病呈上升趋势,许多国家已把它列为法定报告传染病。我国江苏、安徽省曾于1999年暴发流行大肠杆菌O157感染性腹泻,患者超过2万例,死亡177例,流行时间7个月。[第一段]

关键词：肠出血性大肠杆菌志贺毒素 O157:H7 O157:H7感染大肠杆菌O157 革兰氏阴性杆菌法定报告传染病公共卫生问题

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌napA基因克隆及高效表达与鉴定

引用

中国人兽共患病学报 2006年第9期22卷 882-883,887页

作者：高原邹全明吴超第三军医大学检验系临床微生物学及临床免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

世界上约有超过50%的人口感染幽门螺杆菌。目前,已证实这种革兰氏阴性的微需氧菌与慢性浅表性胃炎(胃黏膜炎症)、慢性活动性胃炎(胃黏膜炎症伴有分叶核白细胞浸润)、胃溃疡疾病(胃及十二指肠溃疡)和胃癌密切相关。幽门螺杆菌产生一系列... 详细信息

世界上约有超过50%的人口感染幽门螺杆菌。目前,已证实这种革兰氏阴性的微需氧菌与慢性浅表性胃炎(胃黏膜炎症)、慢性活动性胃炎(胃黏膜炎症伴有分叶核白细胞浸润)、胃溃疡疾病(胃及十二指肠溃疡)和胃癌密切相关。幽门螺杆菌产生一系列独特的毒力因子,其中包括尿素酶、细胞空泡毒素和中性粒细胞激活蛋白(H矿NAP)。Hp-NAP可以激起中性粒细胞的天然免疫反应,[第一段]

关键词：幽门螺杆菌高效表达基因克隆中性粒细胞激活蛋白胃及十二指肠溃疡慢性浅表性胃炎慢性活动性胃炎胃黏膜炎症

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

比较蛋白质组学在幽门螺杆菌及其宿主细胞的研究进展

引用

中国人兽共患病学报 2008年第9期24卷 882-884页

作者：刘晓斐郭刚邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

自1982年澳大利亚学者Warren等成功地在人胃黏膜组织中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）以来，有关Hp的研究进展迅速。研究发现，Hp是全球人群感染最广泛的致病菌之一，是公认的慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子，并与... 详细信息

自1982年澳大利亚学者Warren等成功地在人胃黏膜组织中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）以来，有关Hp的研究进展迅速。研究发现，Hp是全球人群感染最广泛的致病菌之一，是公认的慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子，并与胃腺癌和胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的形成密切相关，已被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌因子，给人类的健康带来严重威胁。

关键词：幽门螺杆菌比较蛋白质组学宿主细胞胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤世界卫生组织胃黏膜组织消化性溃疡澳大利亚

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌分子内佐剂三价疫苗的构建、纯化及活性研究

引用

免疫学杂志 2006年第6期22卷 690-693,697页

作者：高原张卫军邹全明第三军医大学临床微生物学及临床免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的构建幽门螺杆菌(helicobacterpylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白基因napA、黏附素hpaA、尿素酶B亚单位活性功能片段ureB414与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(heat-labileenterotoxinBsubunit,LTB)的分子内佐剂三价融合蛋白疫苗,并通过口... 详细信息

目的构建幽门螺杆菌(helicobacterpylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白基因napA、黏附素hpaA、尿素酶B亚单位活性功能片段ureB414与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(heat-labileenterotoxinBsubunit,LTB)的分子内佐剂三价融合蛋白疫苗,并通过口服免疫小鼠研究其抗原性,为疫苗的开发奠定基础。方法利用分子克隆技术构建携带napA-hpaA-ureB414-LTB融合基因的重组原核表达质粒pET-22b-NHUL,转化***21(DE3),进行原核表达,重组表达蛋白采用HK26/60Superdex-75分子筛和亲和层析柱ChelatingSepharose进行纯化,Tris-Tricine电泳和Westernblot鉴定,GM1-ELISA检测rNHUL与神经节苷脂的结合。口服免疫Balb/c小鼠,检测重组融合蛋白的抗原性。结果重叠延伸PCR扩增出了约1590bp的NHUL融合基因;其核苷酸序列与GenBank公布的相关序列一致。重组融合蛋白以可溶和包涵体两种形式表达,表达量约占细菌总蛋白的25%,Tris-Tricine初步测定目的蛋白的Mr约59000,纯化后纯度大于90%。Westernblot检测其具有良好的抗原性。该重组蛋白保持了与神经节苷脂GM1结合的生物学活性。动物实验表明,多亚单位疫苗口服免疫小鼠后血清特异性IgG、IgA和胃黏液、肠黏液的抗原特异性sIgA抗体显著高于单一亚单位疫苗。结论所获得重组融合蛋白具有良好的抗原性和黏膜佐剂活性,为进一步的疫苗研究奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位疫苗分子内佐剂

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：