检索结果-内蒙古大学图书馆

莫特塞尼与EZH2抑制剂GSK126联合应用对肝癌Huh7细胞增殖和凋亡的影响及其机制

吉林大学学报（医学版） 2023年第4期49卷 896-904页

作者：梁媛媛赵颂胡静安妮魏验芦苏荣健锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第一医院风湿免疫科辽宁锦州121000

目的:探讨多激酶抑制剂莫特塞尼联合果蝇zeste基因增强子的人类同源物2 (EZH2)抑制剂GSK126对肝癌Huh7细胞体外增殖和凋亡的影响,初步阐明其相关机制。方法:不同浓度(0、1、5、10、20、40和60μmol·L^(-1))莫特塞尼处理Huh7细胞,采... 详细信息

目的:探讨多激酶抑制剂莫特塞尼联合果蝇zeste基因增强子的人类同源物2 (EZH2)抑制剂GSK126对肝癌Huh7细胞体外增殖和凋亡的影响,初步阐明其相关机制。方法:不同浓度(0、1、5、10、20、40和60μmol·L^(-1))莫特塞尼处理Huh7细胞,采用CCK-8法检测各组Huh7细胞增殖率,采用Western blotting法检测不同浓度(0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol·L^(-1))莫特塞尼组Huh7细胞中EZH2和磷酸化EZH2 (p-EZH2)蛋白表达水平。莫特塞尼和GSK126联合作用于Huh7细胞,采用CCK-8法和克隆形成实验确定后续实验合适的药物浓度。Huh7细胞分为对照组、莫特塞尼(10μmol·L^(-1))组、GSK126 (5μmol·L^(-1))组和联合组(莫特塞尼+GSK126),采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)荧光染色法检测各组Huh7细胞增殖率,流式细胞术检测各组Huh7细胞凋亡率,Western blotting法检测各组Huh7细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK (p-ERK)、蛋白激酶B (AKT)和磷酸化AKT (p-AKT)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,不同浓度莫特塞尼组Huh7细胞存活率随着药物浓度升高逐渐降低,与0μmol·L^(-1)莫特塞尼组比较,20、 40和60μmol·L^(-1)莫特塞尼组Huh7细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01);Western blotting法检测,与0μmol·L^(-1)莫特塞尼组比较,5.0、10.0和20.0μmol·L^(-1)莫特塞尼组Huh7细胞中EZH2和p-EZH2蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。通过CCK-8法和克隆形成实验确定10μmol·L^(-1)莫特塞尼和5μmol·L^(-1) GSK126用于后续实验。与对照组比较,莫特塞尼组、GSK126组和联合组Huh7细胞增殖率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01);与莫特塞尼组和GSK126组比较,联合组Huh7细胞增殖率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与对照组、莫特塞尼组和GSK126组比较,联合组Huh7细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:单独应用莫特塞尼抑制肝癌Huh7细胞增殖和促进凋亡效果不明显,可能与EZH2升高导致细胞耐药有关。莫特塞尼与GSK126联合应用可通过抑制AKT和ERK信号通路,增强莫特塞尼对肝癌Huh7细胞的增殖抑制和促凋亡作用。

关键词：莫特塞尼肝肿瘤细胞增殖细胞凋亡果蝇zeste基因增强子的人类同源物2 GSK126

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

NaAsO_(2)通过Hippo通路影响PC12细胞形态和突触蛋白

引用

中国药理学通报 2023年第2期39卷 399-400页

作者：刘宇李成朱卫吴松刘晓红王宏健王东艳杨莉潘际刚贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州贵阳550025

砷是一种自然环境中广泛存在的非金属元素[1]。人类在自然环境和工业活动中长期接触受砷污染的水、空气和食物而中毒,造成组织器官损伤、甚至癌变。此外,砷引起神经系统损害也受到人们越来越多的关注[2]。但目前砷引起神经损伤的具体机... 详细信息

砷是一种自然环境中广泛存在的非金属元素[1]。人类在自然环境和工业活动中长期接触受砷污染的水、空气和食物而中毒,造成组织器官损伤、甚至癌变。此外,砷引起神经系统损害也受到人们越来越多的关注[2]。但目前砷引起神经损伤的具体机制仍不是十分明确。Hippo信号通路是一条在进化上高度保守的激酶级联信号通路,主要控制器官大小、组织稳态和组织再生[3]。本课题组已经证实,NaAsO_(2)可通过激活Hippo信号通路,诱导PC12细胞凋亡。突触后致密蛋白95(post synaptic density protein,PSD95)、突触素蛋白(synaptophysin,SYN)作为神经突触功能相关蛋白,其表达和缺失在神经系统疾病中十分重要[4]。因此,本实验在前期研究的基础上探讨Hippo通路是否参与NaAsO_(2)对PC12细胞活性、形态以及PSD95、SYN神经突触相关蛋白表达的影响。

关键词：亚砷酸钠突触素蛋白突触后致密蛋白95 Hippo通路 MST1/2 PC12细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G通过Akt信号通路促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭

引用

解剖学报 2024年第5期55卷 573-581页

作者：张明姝王艺慧张晴叶丽平锦州医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学生物人类学研究所辽宁锦州121001 沈阳市第五人民医院医学检验中心沈阳110000

目的探讨非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)调控卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法生物信息学GEPIA数据库分析NCAPG在卵巢癌组织中的差异表达。Western blotting检测正常卵巢上皮细胞IOSE80、卵巢癌A2780和SKOV3细胞... 详细信息

目的探讨非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)调控卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法生物信息学GEPIA数据库分析NCAPG在卵巢癌组织中的差异表达。Western blotting检测正常卵巢上皮细胞IOSE80、卵巢癌A2780和SKOV3细胞中NCAPG的蛋白表达。NCAPG siRNA沉默实验分为空白组、对照组、siNCAPG-1组和siNCAPG-2组。NCAPG过表达实验分为空白组、对照组、NCAPG组、NCAPG+MK2206组和MK2206组。MTT实验检测细胞增殖活性;细胞划痕实验和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测细胞的磷酸化Akt(p-Akt)、总Akt(t-Akt)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果NCAPG在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中高表达。沉默NCAPG可明显抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达减少,E-cadherin表达增多。过表达NCAPG质粒可促进卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达增多,E-cadherin表达降低。Akt抑制剂MK2206可明显抑制NCAPG的上述作用。结论NCAPG激活Akt信号通路,调控PCNA、MMP-9和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达,促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词：卵巢癌非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G 蛋白激酶B信号通路增殖细胞核抗原基质金属蛋白酶9 钙黏蛋白免疫印迹法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

化学遗传学调控高血压大鼠室旁核促肾上腺皮质激素释放因子神经元对前交感神经元兴奋性的影响

引用

中国药理学通报 2023年第12期39卷 2338-2345页

作者：马宏宇郭鑫淇张荧高璐杜梓硕王浩然马会杰河北医科大学基础医学院生理学教研室河北石家庄050017

目的观察下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin-releasing factor,CRF)神经元对正常血压Wistar Kyoto(WKY)大鼠或自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)前交感神经元兴奋性的影响,阐明交感中枢过度兴奋的可能神经环路机制。方法本研究使用成年雄性WKY和SHR。通过蛋白印迹实验明确WKY与SHR PVN CRF蛋白表达水平。同时,借助免疫荧光实验观察WKY与SHR PVN CRF神经元与前交感神经元。通过将CRF启动子特异性Cre依赖的腺相关病毒(adeno-associated viruses,AAV)与化学遗传学AAV共同注入PVN,使得CRF神经元特异性表达仅由设计性药物激活的设计性受体(designer receptors exclusively activated by designer drugs,DREADDs),即WKY室旁核CRF神经元特异性表达与Gq亚基偶联的人M3毒蕈碱型DREADD(hM3Dq),SHR室旁核CRF神经元特异性表达与Gi亚基偶联的人M4毒蕈碱型DREADD(hM4Di),而叠氮平-N-氧化物(clozapine-N-oxide,CNO)作为配体可结合兴奋性hM3Dq或抑制性hM4Di,进而调控PVN CRF神经元的兴奋性。而后向脊髓中间外侧柱(intermediolateral column,IML)微量注入荧光示踪剂逆行标记室旁核前交感神经元。最后,我们应用全细胞膜片钳记录CNO(10μmol·L^(-1))对室旁核前交感神经元自发兴奋性突触后电流(spontaneous excitatory postsynaptic currents,sEPSCs)和诱发动作电位的影响。结果SHR室旁核CRF蛋白表达水平明显高于WKY大鼠,SHR室旁核CRF神经元活动增强、数量增多。化学遗传学DREADDs可成功表达在PVN CRF神经元,同时,逆行荧光示踪剂可成功标记在向脊髓投射的PVN前交感神经元。用含CNO的人工脑脊液灌流预先在PVN CRF神经元表达hM4Di-mCherry的SHR脑片,可以引起PVN前交感神经元sEPSCs频率明显降低,但不影响其幅度。此外,用含CNO的人工脑脊液灌流预先在PVN CRF神经元表达hM3Dq-eGFP的WKY大鼠脑片,PVN前交感神经元sEPSCs的频率和幅度均无明显差异。PVN CRF神经元表达有hM3Dq-eGFP的WKY大鼠脑片或表达有hM4Di-mCherry的SHR脑片用CNO灌流给药,PVN前交感神经元电流诱发动作电位均无明显变化。结论自发性高血压大鼠PVN CRF神经元活动增强、数量增多,增强前交感神经元sEPSCs,室旁核CRF神经元与前交感神经元之间存在神经调控微环路。

关键词：高血压化学遗传学室旁核 CRF神经元前交感神经元神经微环路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肌肽对血管性认知功能障碍大鼠海马内Akt/mTOR通路及自噬的影响

引用

神经解剖学杂志 2024年第6期40卷 713-723页

作者：王高卢金莹冉睿黎赵欣敏边疆王宇彤姜晓涵杨菁锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室锦州121001

目的:观察肌肽(CAR)对血管性认知功能障碍(VCI)大鼠的空间学习记忆能力的影响,并探究Akt/mTOR通路及自噬在其中的作用。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、VCI组及VCI+CAR-L组、VCI+CAR-M组和VCI+CAR-H组。Morris水迷宫实... 详细信息

目的:观察肌肽(CAR)对血管性认知功能障碍(VCI)大鼠的空间学习记忆能力的影响,并探究Akt/mTOR通路及自噬在其中的作用。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、VCI组及VCI+CAR-L组、VCI+CAR-M组和VCI+CAR-H组。Morris水迷宫实验评测大鼠的空间学习记忆能力;Nissl染色检测海马CA1区细胞损伤的范围和程度;氮蓝四唑法和硫代巴比妥酸法分别检测海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;Western Blot测定p-Akt、p-mTOR、Beclin-1以及LC3B蛋白表达,同时免疫荧光染色检测CA1区LC3B表达变化。将SH-SY5Y细胞分为对照(Control)组、氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)组、OGD/R+雷帕霉素(RAPA)组、OGD/R+CAR(1.2 mmol/L)组及OGD/R+CAR+RAPA组。噻唑蓝(MTT)检测神经元存活率:Western Blot检测神经元细胞p-mTOR、Beclin-1及LC3B水平,免疫荧光染色检测自噬程度。结果:CAR可改善VCI大鼠学习记忆能力,降低海马组织细胞损伤,抑制氧化应激(P<0.01),提高p-Akt、p-mTOR、p62蛋白的表达(P<0.01或P<0.05),降低Beclin-1的表达和LC3B II/I的比值(P<0.01或P<0.05)。CAR可提高SH-SY5Y各组细胞OGD/R后的存活率(P<0.01),抑制海马神经元的自噬。此外,RAPA的干预抑制了CAR的治疗效果,降低SH-SY5Y各组的存活率(P<0.01),增强了细胞自噬。结论:CAR可改善大鼠VCI损伤,其机制可能通过抑制氧化应激、激活神经细胞中的Akt/mTOR信号通路,进而抑制过度自噬发挥保护作用。

关键词：肌肽血管性认知障碍自噬 Akt/mTOR信号通路氧化应激大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

月见草素B通过调控P53抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移

引用

中国中药杂志 2023年第14期48卷 3904-3912页

作者：罗茂红何娅李红陈腾祥雷珊张金娟王璐贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院机能学实验中心贵州贵阳550025

通过体外细胞培养、网络药理学和分子对接,研究月见草素B(oenothein B,OEB)对乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。体外细胞实验发现OEB抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成能力,并促进乳腺癌细胞的凋亡... 详细信息

通过体外细胞培养、网络药理学和分子对接,研究月见草素B(oenothein B,OEB)对乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。体外细胞实验发现OEB抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成能力,并促进乳腺癌细胞的凋亡和凋亡小体的形成,同时OEB抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移。利用SwissTargetPrediction数据库获得OEB的靶点,在GeneCards数据库获得乳腺癌作用靶点,在Venny 2.1软件中分别录入OEB与乳腺癌的作用靶点,获得OEB与乳腺癌的共同作用靶点韦恩图。在STRING数据库中,输入OEB与乳腺癌共同靶点,构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,将PPI网络录入Cytoscape 3.7.2软件进行网络拓扑结构分析,根据蛋白关联强度筛选关键靶点,并对关键靶点进行KEGG通路富集分析;使用AutoDock软件对OEB和筛选的关键靶点进行分子对接验证,发现OEB与P53的活性口袋稳定结合,同时OEB促进P53蛋白的表达;沉默P53后MCF-7、MDA-MB-231细胞活力和迁移能力增加,加入OEB处理后逆转了这种变化。因此该研究表明OEB可抑制乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞凋亡,这可能与靶向调控P53有关。

关键词：乳腺癌细胞月见草素B 增殖凋亡迁移

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丹酚酸B调节RhoA/ROCK1信号通路抑制糖尿病大鼠心肌纤维化的作用研究

引用

中国药理学通报 2022年第10期38卷 1487-1491页

作者：张昕符丽娟锦州医科大学基础医学院药理学教研室辽宁锦州121000

目的基于RhoA/ROCK1信号通路,研究丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其作用机制。方法健康♂SD大鼠尾静脉一次性注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型;12周末,天狼星红试剂染色检测大鼠左室心肌胶原表达情况... 详细信息

目的基于RhoA/ROCK1信号通路,研究丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其作用机制。方法健康♂SD大鼠尾静脉一次性注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型;12周末,天狼星红试剂染色检测大鼠左室心肌胶原表达情况;Western blot检测大鼠左室心肌中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达。SD大鼠乳鼠差速贴壁培养心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFs),不同浓度的SalB(12.5,25,50μmol·L^(-1))预处理CFs 1 h,高糖诱导确定最佳给药剂量;免疫荧光检测CFs内RhoA蛋白表达;Western blot检测CFs内α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、RhoA、ROCK1蛋白表达。结果与正常对照组相比,糖尿病组大鼠左室心肌组织胶原表达明显增多,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达明显升高,经SalB干预后,胶原表达明显减少,上述各蛋白表达明显降低(P<0.01)。25 mmol·L^(-1)高糖刺激CFs 24 h,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、RhoA、ROCK1表达明显升高,经SalB(25μmol·L^(-1))及抑制剂Y-27632(10μmol·L^(-1))预处理后,CFs活力明显受到抑制,上述各蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论SalB可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,对保护糖尿病大鼠心肌具有一定的作用,其机制可能是与抑制RhoA/ROCK1信号通路有关。

关键词：丹酚酸B 糖尿病心肌病心肌纤维化高糖心肌成纤维细胞 RhoA/Rho相关蛋白激酶通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大肠杆菌定植感染相关研究进展

引用

生理科学进展 2025年

作者：张钦涵梅雯捷纪巧荣徐州医科大学徐州医科大学基础医学院病理生理学教研室

大肠杆菌（Escherichia coli）是常驻肠道微生物群的主要共生菌，其致病菌株是导致发展中国家婴儿腹泻的主要病因。鉴于腹泻治疗的抗生素耐药性的不断增长，目前传统的抗生素疗法正面临日益严峻的挑战，寻找新型的治疗策略已成为迫切需... 详细信息

大肠杆菌（Escherichia coli）是常驻肠道微生物群的主要共生菌，其致病菌株是导致发展中国家婴儿腹泻的主要病因。鉴于腹泻治疗的抗生素耐药性的不断增长，目前传统的抗生素疗法正面临日益严峻的挑战，寻找新型的治疗策略已成为迫切需求。大肠杆菌致病性主要由毒力因子介导，在感染早期对其肠道定植黏附至关重要。本文对近年来大肠杆菌定植感染的相关研究进展，包括大肠杆菌的分类及感染现状、大肠杆菌定植感染的分子机制等展开综述，重点分析了相关毒力因子以及DcuSR双组份系统对大肠杆菌黏附定植的影响。此外，文章还讨论了透明质酸（hyaluronic acid）对大肠杆菌感染的影响，为大肠杆菌防治提供了新思路。

关键词：大肠杆菌毒力因子透明质酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

沉默信息调节因子2对大肠癌细胞有氧糖酵解和生长增殖的调控作用及其机制

引用

吉林大学学报（医学版） 2023年第2期49卷 385-394页

作者：岳金金庞一心张秀梅锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁锦州121001

目的:探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)对大肠癌细胞有氧糖酵解和生长增殖的影响,阐明其相关作用机制。方法:选择大肠癌HCT116细胞和SW480细胞进行培养,采用Western blotting法检测2种细胞中SIRT2蛋白表达情况。选择SIRT2蛋白表达高的大肠... 详细信息

目的:探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)对大肠癌细胞有氧糖酵解和生长增殖的影响,阐明其相关作用机制。方法:选择大肠癌HCT116细胞和SW480细胞进行培养,采用Western blotting法检测2种细胞中SIRT2蛋白表达情况。选择SIRT2蛋白表达高的大肠癌HCT116细胞进行后续RNA干扰实验,设立阴性对照组、SIRT2-siRNA#1组、SIRT2-siRNA#2组和SIRT2-siRNA#3组;选择SIRT2蛋白表达低的大肠癌SW480细胞进行后续过表达实验,构建SIRT2重组质粒,选取处于对数生长期的SW480细胞,设立空白组、空载体质粒转染组和SIRT2质粒转染组;采用HCT116细胞进行回复实验,设立对照组、SIRT2-siRNA和葡萄糖-6磷酸脱氢酶(G6PD)质粒共转染组和SIRT2-siRNA#3组。利用Lipofectamine2000将质粒和siRNA分别转染至SW480细胞和HCT116细胞,验证沉默和过表达SIRT2后,采用葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖水平,比色法检测培养液中乳酸水平,克隆形成实验检测细胞克隆形成率,CCK-8实验检测细胞增殖活性。反转录PCR(RTPCR)法检测沉默和过表达SIRT2后细胞中G6PD mRNA表达水平,Western blotting法检测沉默和过表达SIRT2后细胞中G6PD蛋白表达水平。免疫组织化学法检测大肠癌组织中SIRT2和G6PD蛋白表达水平。共转染SIRT2-siRNA和G6PD质粒后检测HCT116细胞中葡萄糖水平、乳酸水平、克隆形成率和细胞增殖活性。结果:与阴性对照组比较,SIRT2-siRNA#3组培养液中葡萄糖水平明显升高(P<0.05),乳酸水平明显降低(P<0.05),细胞增殖活性和细胞克隆形成率明显降低(P<0.05),G6PD mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与空载体质粒转染组比较,SIRT2质粒转染组培养液中葡萄糖水平明显降低(P<0.05),乳酸水平明显升高(P<0.05),细胞增殖活性和克隆形成率明显升高(P<0.05),G6PD mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。在大肠癌组织中SIRT2和G6PD蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05)。与SIRT2-siRNA#3组比较,SIRT2-siRNA和G6PD质粒共转染组培养液中的葡萄糖水平明显降低(P<0.05),乳酸水平明显升高(P<0.05),细胞增殖活性和克隆形成率明显升高(P<0.05)。结论:SIRT2促进大肠癌细胞有氧糖酵解及细胞生长增殖,其机制可能与SIRT2调控G6PD基因表达有关。

关键词：大肠肿瘤沉默信息调节因子2 葡萄糖-6磷酸脱氢酶有氧糖酵解生长增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫沉淀联合质谱筛选与纳尔逊湾正呼肠孤病毒σNS互作的宿主RNA结合蛋白

引用

安徽医科大学学报 2023年第9期58卷 1546-1550页

作者：李润林胡思漫骆丽可贾雪娇刘梦琦李永刚陶晓莉锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室锦州121000

目的筛选出宿主细胞中与纳尔逊湾呼肠孤病毒(NBV)非结构蛋白σNS互作的RNA结合蛋白并分析其生物信息学功能。方法本研究通过构建NBVσNS真核表达载体pEF-HA-MB-S3,验证正确后转染HEK293T细胞,所得的细胞蛋白裂解液经RNase A处理后,利用... 详细信息

目的筛选出宿主细胞中与纳尔逊湾呼肠孤病毒(NBV)非结构蛋白σNS互作的RNA结合蛋白并分析其生物信息学功能。方法本研究通过构建NBVσNS真核表达载体pEF-HA-MB-S3,验证正确后转染HEK293T细胞,所得的细胞蛋白裂解液经RNase A处理后,利用免疫沉淀富集σNS结合蛋白,经LC-MS/MS质谱分析技术鉴定分析互作蛋白,并且借助相关生信工具挖掘蛋白性质和具体功能。结果本实验成功筛选出32个与NBVσNS蛋白存在互作的候选RNA结合蛋白;生物分析结果显示,这些蛋白主要定位于细胞质与细胞核中,并且主要参与细胞代谢、生物调控、病毒翻译与转录等生物学过程。结论本研究初步分析与NBVσNS互作的RNA结合蛋白功能,为深入研究σNS蛋白在NBV生命周期中的作用机制奠定基础。

关键词：纳尔逊湾病毒 σNS蛋白 RNA结合蛋白宿主蛋白免疫沉淀

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：