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吉林大学学报（医学版） 2020年第4期46卷 739-744,I0002页

作者：贾答淇孔雯聪苏荣健杜晓媛贺武斌锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法:选择人肺癌A549细胞,不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细... 详细信息

目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法:选择人肺癌A549细胞,不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞14 d,同时设对照组,采用克隆形成实验观察各组细胞克隆形成情况并检测各组细胞增殖率;不同浓度(10和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞24 h,同时设对照组,采用EdU掺入法检测各组细胞中EdU阳性细胞率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞48 h,同时设对照组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;应用Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、聚酰苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、活化型PARP(Cleaved-PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase 9)和活化型Caspase 9(Cleaved-Caspase 9)蛋白表达水平。结果:MTT实验,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。克隆形成实验,与对照组比较,10μmol·L^-1 BMS777607组细胞克隆形成数量明显减少,20μmol·L^-1 BMS777607组细胞几乎无克隆形成;与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01)。EdU掺入法实验,与对照组比较,10和20μmol·L^-1 BMS777607组细胞中EdU阳性细胞率均明显降低(P<0.05或P<0.01)。双染流式细胞术检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L^-1 BMS777607组A549细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase 9蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:MST1R抑制剂BMS777607能够抑制肺癌A549细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制p-AKT、p-ERK表达和促进PARP、Caspase 9表达有关。

关键词：巨噬细胞刺激1受体 BMS777607 肺肿瘤细胞凋亡磷酸化蛋白激酶B 聚酰苷二磷酸核糖聚合酶

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基于预训练的Swin Transformer模型构建及其对糖尿病视网膜病变的诊断效能分析

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中国临床新医学 2023年第4期16卷 360-365页

作者： WANG Gang 王洪敏王善志朱永俊柳明杰渤海大学信息科学与技术学院辽宁121031 海南医学院第一附属医院肾内科海口570100 锦州医科大学基础医学院免疫教研室辽宁121031

目的构建基于预训练的Swin Transformer模型,分析其对糖尿病视网膜病变诊断的效能。方法在数据建模及数据分析竞赛平台(https://***/competitions/aptos2019-blindness-detection)下载APTOS 2019 Blindness Detection竞赛的训练数据集。使用OpenCV图像处理库通过更改亮度、不同角度翻转和直方图均衡化的方式来增广数据,共得到9160张彩色眼底图片作为完整数据集。构建预训练的Swin Transformer模型对图片进行病变等级分类,与预训练的Vision Transformer、EfficientNetV2、ResNet-50和GoogLeNet四个神经网络模型的训练结果进行对比。还与非预训练的随机初始化参数的Swin Transformer模型对比分析预训练对于模型的影响。结果基于预训练的Swin Transformer模型的二次加权Kappa值为0.977,准确率达94.6%,相较于Vision Transformer、EfficientNetV2、ResNet-50和GoogLeNet模型的准确率分别提高了1.9%、2.3%、5.4%和7.1%;相较于不使用预训练的Swin Transformer模型,准确率提高4.4%,训练轮数减少近400次。结论基于预训练的Swin Transformer模型对糖尿病视网膜病变的诊断准确率高,有较好的临床应用价值。

关键词：深度学习 Swin Transformer模型糖尿病视网膜病变预训练智慧医疗

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miR-17-5p调控STAT1表达对Aβ_(1-42)诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响

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哈尔滨医科大学学报 2023年第3期57卷 247-253页

作者：林青明健锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121001 瓦房店市中心医院神经内科辽宁瓦房店116300 北部战区总医院病理科辽宁沈阳110015

目的探讨miR-17-5p过表达调控信号转导子与转录活化子1(signal transducers and activators of transcription 1,STAT1)对Aβ_(1-42)诱导人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法常规培养SH-SY5Y细胞系,应用Trypan染色进行形态学观察,Cell Counting Kit-8测定增殖活性;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法检测毒力;荧光探针法测定氧活性;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应方法检测miR-17-5p、STAT1 mRNA的表达;免疫印迹试验法检验STAT1基因的表达。结果与对照组比较,Aβ_(1-42)组细胞STAT1 mRNA与蛋白水平、增殖抑制率、细胞毒性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)升高(P<0.05),miR-17-5p水平降低(P<0.05);与Aβ_(1-42)组比较,mimics NC组数据无统计学意义(P>0.05),miR-17-5p mimics组数据降低(P<0.05);与miR-17-5p mimics组比较,miR-17-5p mimics组+pcDNA3.1组数据无统计学意义(P>0.05),miR-17-5p mimics组+pcDNA3.1 STAT1组数据升高(P<0.05)。与对照组、mimics-NC组比较,miR-17-5p mimics组SH-SY5Y细胞中STAT1 mRNA与蛋白水平降低(P<0.05)。结论miR-17-5p的过表达可以作为STAT1的靶向负调节,从而对SH-SY5Y细胞的损害起到一定的保护作用。

关键词： miR-17-5p STAT1 细胞损伤氧化应激

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m6A修饰与血管重构

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中国动脉硬化杂志 2024年

作者：柳鑫龙于倩孔鹏河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河北省血管生物学重点实验室神经与血管生物学教育部重点实验室

血管重构是指血管壁出现的一系列结构和功能异常，其特征是血管内外微环境改变引发的管腔狭窄、血管壁增厚、血管弹性和顺应性降低，最终造成心血管事件的发生。尽管临床心血管疾病的预防、诊断和干预有所改进，但血管重构所致的血管功... 详细信息

血管重构是指血管壁出现的一系列结构和功能异常，其特征是血管内外微环境改变引发的管腔狭窄、血管壁增厚、血管弹性和顺应性降低，最终造成心血管事件的发生。尽管临床心血管疾病的预防、诊断和干预有所改进，但血管重构所致的血管功能障碍仍是困扰临床疗效的巨大难题和挑战。N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine， m6A)修饰是真核生物RNA中最普遍和最丰富的转录后修饰类型，m6A甲基转移酶、m6A去甲基化酶和m6A阅读蛋白分别负责m6A修饰的发生、删除和识别。m6A修饰通过参与RNA靶分子的剪接、降解、翻译以及亚细胞易位来调节重要转录产物命运，从而在血管生理性稳态维持和病理性重构过程中发挥调控作用。研究证实，m6A修饰介导的血管内皮细胞（ECs）功能障碍、中膜平滑肌细胞（VSMCs）表型转化、异常增殖、迁移和单核/巨噬细胞聚集和激活过程，参与动脉粥样硬化、动脉瘤等血管重构性疾病的发生和发展。本文综述了近年来有关血管重构中m6A修饰相关的文献，讨论了血管重构相关重要靶点分子的m6A甲基化修饰对血管细胞功能的影响，基于此m6A甲基化的干预可能是未来临床治疗和诊断的新靶点。

关键词： N6-甲基腺苷修饰血管重构甲基转移酶去甲基化酶阅读蛋白

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角质细胞生长因子-2在金黄色葡萄球菌所致肺部感染中的作用及机制研究

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陕西医学杂志 2021年第12期50卷 1482-1486页

作者：樊宇张轶博锦州医科大学基础医学院病原生物教研室辽宁锦州121017

目的:探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)在金黄色葡萄球菌所致肺部感染中的作用及机制。方法:使用经鼻滴入金黄色葡萄球菌(2×10^(8) CFU/ml)构建肺部感染小鼠模型,以经鼻滴入等体积磷酸缓冲液作为对照组。滴入金黄色葡萄菌群1 h后,将... 详细信息

目的:探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)在金黄色葡萄球菌所致肺部感染中的作用及机制。方法:使用经鼻滴入金黄色葡萄球菌(2×10^(8) CFU/ml)构建肺部感染小鼠模型,以经鼻滴入等体积磷酸缓冲液作为对照组。滴入金黄色葡萄菌群1 h后,将肺部感染小鼠分别经尾静脉注射KGF-2(2.5、5、10 mg/kg)。滴入金黄色葡萄球菌24 h后麻醉处死小鼠,HE染色观察肺组织病理情况;检测小鼠肺湿/干质量比和肺泡灌洗液中性粒细胞和白细胞水平;采用酶联免疫法检测肺泡灌洗液炎性因子水平[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β]、氧化应激因子水平[髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)]以及巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平;使用半体内法检测各组小鼠肺泡巨噬细胞的吞噬功能。结果:对照组小鼠肺泡排列完整且无组织损伤,细菌组小鼠肺泡有炎性浸润和水肿,KGF-2不同剂量组小鼠肺组织炎性浸润和水肿情况得到明显改善。细菌组肺湿/干质量比和肺泡灌洗液中性粒细胞、白细胞、TNF-α、IL-6、IL-1β、MPO、MDA、MIP-2水平高于对照组,而T-AOC水平、肺泡巨噬细胞吞噬百分比和吞噬指数低于对照组(均P<0.05)。KGF-2不同剂量组肺湿/干质量比和肺泡灌洗液中性粒细胞、白细胞、TNF-α、IL-6、IL-1β、MPO、MDA水平均低于细菌组,而T-AOC水平、肺泡巨噬细胞吞噬百分比和吞噬指数高于细菌组(均P<0.05)。结论:KGF-2可以改善金黄色葡萄球菌所致肺部感染损伤和肺炎症反应,其机制可能与影响肺泡巨噬细胞功能有关。

关键词：肺部感染金黄色葡萄球菌角质细胞生长因子-2 肺损伤巨噬细胞炎症反应

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EZH2抑制剂GSK126对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

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吉林大学学报（医学版） 2020年第4期46卷 786-791,I0005页

作者：张爽爽贺武斌苏荣健杜晓媛锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第一医院辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)特异性抑制剂GSK2816126(GSK126)对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制。方法:常规体外培养A549细胞,将细胞分为对照组和不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0和15.0μmol·L-1)GSK126组... 详细信息

目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)特异性抑制剂GSK2816126(GSK126)对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制。方法:常规体外培养A549细胞,将细胞分为对照组和不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0和15.0μmol·L-1)GSK126组。MTT比色法检测各组细胞存活率,克隆形成实验检测各组细胞集落形成数并计算克隆形成率,EdU细胞增殖成像法检测各组细胞增殖率,Hoechst-33342荧光染色法观察各组细胞凋亡形态表现,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、B细胞淋巴瘤-2原癌基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和活化型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-Caspase-3)蛋白表达水平。结果:MTT比色法,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组细胞存活率明显降低(P<0.05);克隆形成实验,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组克隆形成率逐渐降低(P<0.05);EdU成像,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组增殖率明显降低(P<0.01);Hoechst-33342染色,与对照组比较,随着GSK126浓度的升高,5、10和15μmol·L-1 GSK126组凋亡细胞数明显增加;流式细胞术检测,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。Western blotting法,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组细胞中p-AKT和Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05)。结论:GSK126可能通过降低AKT磷酸化水平抑制细胞增殖,并且通过诱导Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路活化,激活凋亡途径,促进肺癌细胞凋亡。

关键词： zeste基因增强子同源物2 肺肿瘤 GSK2816126 细胞增殖细胞凋亡

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人炎症组织来源的乳牙牙髓干细胞的分离培养及鉴定

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中华老年口腔医学杂志 2024年第6期22卷 321-327页

作者：刘亚蕊黄智庆邓楚左中夫锦州医科大学基础医学院人体解剖学教研室 121000 广州医科大学口腔医学院·附属口腔医院儿童口腔科·广东省口腔组织修复与重建工程技术研究中心·广州市口腔再生医学基础与应用研究重点实验室广州510000

目的研究分离提取人炎症组织来源的乳牙牙髓干细胞(stem cells from inflamed pulps of deciduous teeth,SCID)的可行性,并对所分离的细胞进行功能鉴定。方法从人牙髓活髓切断术中获取6例乳牙牙髓炎患者的炎症牙髓并进行SCID的分离培... 详细信息

目的研究分离提取人炎症组织来源的乳牙牙髓干细胞(stem cells from inflamed pulps of deciduous teeth,SCID)的可行性,并对所分离的细胞进行功能鉴定。方法从人牙髓活髓切断术中获取6例乳牙牙髓炎患者的炎症牙髓并进行SCID的分离培养。将原代SCID进行扩增培养直至P5,对SCID进行间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的功能鉴定。结果成功从炎症的乳牙牙髓组织中提取SCID且无细菌污染,SCID具有良好的MSC的细胞形态、克隆形成能力和增殖能力,细胞培养至P5后未表现出明显衰老表型。SCID可在诱导培养基中成骨、成脂及成神经分化。流式细胞术检测其表达MSC阳性标志物CD73、CD90和CD105,不表达CD34和CD45。同时,小鼠尾静脉注射SCID不引起血常规的明显变化。结论使用活髓切断术的方法可以保留感染牙髓中一部分符合MSC特性的SCID,初步验证SCID具有良好的生物安全性,为进一步研究炎症情况下干细胞的功能特性和临床转化应用提供了可能,同时也拓宽了乳牙牙髓干细胞的来源。

关键词：炎症乳牙牙髓干细胞活髓切断术间充质干细胞鉴定

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蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其临床意义

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中国临床解剖学杂志 2020年第6期38卷 680-684,690页

作者：李菁金玉李启阳许英卓刘超肖建英锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院遗传学教研室辽宁锦州121001

目的探讨蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床指标的相关性,并阐述其在胃癌发生发展中的作用。方法使用Oncomine数据库分析WEE1在胃腺癌和胃黏膜组织中的表达差异。选取100例胃腺癌和80例癌旁组织标本,通过免疫组织化学法和... 详细信息

目的探讨蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床指标的相关性,并阐述其在胃癌发生发展中的作用。方法使用Oncomine数据库分析WEE1在胃腺癌和胃黏膜组织中的表达差异。选取100例胃腺癌和80例癌旁组织标本,通过免疫组织化学法和组织芯片技术检测WEE1蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达水平。对免疫组织化学结果中染色的比例以及染色程度进行半定量分析,对半定量分析结果与胃癌临床指标进行相关性分析。使用RT-PCR和Western blotting检测WEE1在胃癌和癌旁组织中的mRNA和蛋白表达水平。结果WEE1在100例胃癌患者中的阳性率为86%,高表达86例,低表达14例。通过Oncomine数据库分析,蛋白激酶WEE1在胃腺癌中的表达明显高于胃黏膜组织中的表达(P<0.01)。免疫组化、RT-PCR和Western blotting均显示,WEE1在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);免疫组化还显示WEE1的表达量随着胃癌组织分期的增加而增加(P<0.01)。结论蛋白激酶WEE1在胃癌组织中高表达,提示其可作为胃癌治疗靶点之一。

关键词：蛋白激酶WEE1 胃癌免疫组织化学组织芯片免疫印迹逆转录-聚合酶链反应

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酸敏感离子通道对细胞外酸化时海马锥体神经元发作性和非发作性癫痫样活动具有不同调控作用

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南方医科大学学报 2020年第7期40卷 972-980页

作者：刘帅陈荣清南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

目的探讨细胞外酸化时酸敏感离子通道(ASICs)对癫痫样活动的调控作用及其潜在机制。方法在海马脑片上使用场电位记录方法研究细胞外酸化对高钾环境的高钾模型和使用GABAA受体拮抗剂的去抑制模型的癫痫样活动的影响;使用全细胞膜片钳技... 详细信息

目的探讨细胞外酸化时酸敏感离子通道(ASICs)对癫痫样活动的调控作用及其潜在机制。方法在海马脑片上使用场电位记录方法研究细胞外酸化对高钾环境的高钾模型和使用GABAA受体拮抗剂的去抑制模型的癫痫样活动的影响;使用全细胞膜片钳技术记录方法研究细胞外酸化对神经元的兴奋性的影响;使用ASICs拮抗剂研究ASICs对癫痫样活动和神经元兴奋性影响。结果细胞外酸化在高钾模型明显减弱癫痫样放电的程度(P<0.001),明显减少癫痫样活动的单次峰电位数量(P<0.01)及其幅度(P<0.001),并且癫痫样放电的模式从发作性癫痫样放电转换为发非发作性癫痫样放电;ASICs的拮抗剂不能阻断细胞外酸化对神经元兴奋性的抑制作用以及对癫痫样放电的模式的转换的作用;ASICs的拮抗剂在细胞外酸化条件下可增强非发作性癫痫样放电的活动(P<0.05)。在去抑制模型中,细胞外酸化对癫痫样活动的抑制和癫痫放电模式的转换作用与高钾模型一致;细胞外酸化可明显升高动作电位的阈电位(P<0.01)、半波宽(P<0.05)和达到动作电位峰值的时间(P<0.01),可明显降低神经元兴奋性,并且这种减弱作用不能被ASICs拮抗剂和GABAA受体拮抗剂阻断。结论ASICs可以直接作用于兴奋性神经元,对癫痫样放电中的发作性癫痫样放电和非发作性癫痫样放电的活动有不同的调控作用。

关键词：癫痫细胞外酸化酸敏感离子通道 ASICs 场电位记录

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RNA m;A甲基化与神经发育（英文）

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中国生物化学与分子生物学报 2021年

作者：薛李婷赵天叶海虹首都医科大学基础医学院医学遗传学与发育生物学教研室首都医科大学神经再生与修复北京市重点实验室

中枢神经系统控制高级神经活动，例如知觉、运动、语言和认知等。它作为人体神经系统最重要的部分，其正常的发育及功能活动在人体发育过程中至关重要。更好地了解调节神经系统发育的基本分子途径以及对大脑的基本生物学理解，可以帮助... 详细信息

中枢神经系统控制高级神经活动，例如知觉、运动、语言和认知等。它作为人体神经系统最重要的部分，其正常的发育及功能活动在人体发育过程中至关重要。更好地了解调节神经系统发育的基本分子途径以及对大脑的基本生物学理解，可以帮助诊断和治疗各种神经疾病。RNA分子m;A修饰状态的动态变化及其功能主要由m;A甲基转移酶、m;A去甲基化酶和m;A阅读蛋白等蛋白质复合物共同调控。本文对此进行了详细介绍，并详细概述了m;A修饰对神经发育的影响，重点介绍了表观转录组学在基因调控中的作用。此外，还强调了m;A修饰在神经发育过程中的生物学意义，包括神经发生、神经分化、轴突导向、突触形成及突触可塑性等。根据不同的实验原理和实验技术，本文详细介绍了最近发展的几种检测m;A位点的技术，每种方法都有各自的优点，据此将能够更广泛和更深入地研究这一修饰，并选择合适的方法去研究课题。RNA m;A甲基化是神经科学领域的一个新前沿。近年来，随着m;A检测技术的发展，m;A甲基化在神经系统发育过程中及神经疾病发生中的作用研究逐渐成为热点，具有很大潜力，为神经发育和神经疾病的研究提供了新视角。

关键词：表观转录组学 N -腺苷酸甲基化神经发育神经发生突触

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