目的探讨泛素样含PHD和环指域蛋白2(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 2,UHRF2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖和转移中的作用及其机制。方法检索TCGA数据库中HCC的基因表达谱数据和患者的临床数据,分析...
详细信息
目的探讨泛素样含PHD和环指域蛋白2(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 2,UHRF2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖和转移中的作用及其机制。方法检索TCGA数据库中HCC的基因表达谱数据和患者的临床数据,分析UHRF2的表达差异与HCC患者的预后情况,采用Cox比例风险模型探索UHRF2对HCC患者预后的独立作用;收集2018年7月至2019年12月在重庆医科大学附属第一医院确诊的20例肝癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组化检测UHRF2蛋白的表达,分析蛋白的表达与患者临床病理参数的关系;构建UHRF2表达质粒,通过RT-qPCR和Western blot检测转染效率,在HCC细胞系中过表达UHRF2进行划痕及平板克隆实验检测肝细胞癌细胞的迁移和增殖情况;基因富集分析探讨UHRF2与PI3K/Akt通路活化的关系,Western blot检测Akt、PI3K、p-Akt、p-PI3K的表达。结果 TCGA数据库分析显示UHRF2 mRNA在HCC组织中表达明显升高并提示预后不良;Cox多因素回归分析发现UHRF2的表达是影响患者预后的独立危险因素。免疫组化检测结果显示UHRF2蛋白在HCC中的表达明显高于癌旁组织。UHRF2的高表达与肿瘤大小(P=0.002)、肿瘤转移(P=0.002)密切相关。在迁移实验和平板克隆实验中,UHRF2过表达组的划痕愈合能力及增殖能力较对照组显著增强(P<0.01);PI3K/Akt通路在UHRF2高表达HCC患者中显著富集;Western blot检测结果显示,UHRF2过表达组的p-Akt、p-PI3K的表达水平明显上调(P<0.05)。结论 UHRF2的表达水平与HCC的预后密切相关,是影响患者预后的独立危险因素;过表达UHRF2通过PI3K/Akt信号通路促进HCC细胞的增殖和转移。
目的:探讨脱水穿心莲内酯(DA)对四氯化碳(CCl 4)诱导的肝纤维化模型小鼠肝细胞凋亡的抑制作用,并阐明其可能的作用机制。方法: 30只6~8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。除正常对照组外其余2组小鼠采用20%CCl 4 2.0 mL·kg^-1 腹腔注射,每周3次,制备肝纤维化模型,对照组小鼠给予等量的橄榄油。治疗组小鼠按100 mg·kg^-1 DA灌胃给药,每周3次,对照组和模型组小鼠灌服等体积生理盐水。给药4周,末次给药后24 h摘眼球取血,断髓,取肝脏。检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;检测各组小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;HE染色和天狼猩红染色观察各组小鼠肝脏病理学表现;Western blotting法检测各组小鼠肝组织中8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(Ogg1)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白水平;免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清中ALT和AST活性及肝组织中MDA水平均明显升高( P <0.05),肝组织中SOD活性明显下降( P <0.05);与模型组比较,治疗组小鼠血清中ALT和AST活性及肝组织中MDA水平明显降低( P <0.05),肝组织中SOD活性明显升高( P <0.05)。HE染色和天狼猩红染色,与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中炎性细胞浸润和胶原沉积程度明显改善。与对照组比较,模型组小鼠肝组织中Ogg1、Caspase-3、Bax、TGF-β1、α-SMA和Bcl-2蛋白表达水平明显升高( P <0.05);与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中Ogg1、Caspase-3、Bax、TGF-β1和α-SMA蛋白表达水平明显降低( P <0.05),Bcl-2蛋白表达水平明显升高( P <0.05)。结论: DA对CCl 4导致的肝纤维化小鼠具有保护作用,其机制可能与降低氧化应激损伤、抑制肝细胞凋亡和减少肝星状细胞活化有关。
暂无评论