检索结果-内蒙古大学图书馆

分析化学 2018年第7期46卷 1152-1162页

作者：幺宝金张梅刘美辰王群刘宇昕赵雨长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心长春中医药大学创新实践中心

采用同位素标记相对定量(iTRAQ)技术、超高效液相色谱-质谱联用技术和生物信息学分析方法对东北梅花鹿快速生长期(60 d)与骨化期鹿茸(90 d)进行比较蛋白质组学研究,共鉴定出127种差异蛋白。与骨化期鹿茸比较,快速生长期鹿茸中显著上调... 详细信息

采用同位素标记相对定量(iTRAQ)技术、超高效液相色谱-质谱联用技术和生物信息学分析方法对东北梅花鹿快速生长期(60 d)与骨化期鹿茸(90 d)进行比较蛋白质组学研究,共鉴定出127种差异蛋白。与骨化期鹿茸比较,快速生长期鹿茸中显著上调的差异蛋白80种,显著下调差异蛋白47种,这些差异表达蛋白主要分布在细胞外基质、核小体、珠蛋白-血红蛋白复合物、肌动蛋白丝、内质网-高尔基中隔室、内质网官腔及核内膜等部位。快速生长期鹿茸显著上调的差异蛋白主要是参与血氧运输、神经生长和再生、软骨和骨组织发育及ATP合成的功能蛋白,而显著下调的差异蛋白主要为参与软骨内骨化过程的功能蛋白,这些蛋白在鹿茸不同生长时期表达量的变化与鹿茸的快速生长和骨化进程密切相关。本研究为系统揭示鹿茸快速生长及骨化的分子机制提供了基础数据,同时对研究鹿茸的药效物质基础及临床应用具有重要的指导意义。

关键词：梅花鹿茸快速生长期骨化期同位素标记相对定量技术蛋白质组学差异蛋白

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初生期和快速生长期梅花鹿茸蛋白表达谱差异分析

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分析化学 2018年第11期46卷 1732-1738页

作者：张梅幺宝金杨永刚胡耀中李银清王群赵雨长春中医药大学创新实践中心长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心长春中医药大学附属医院

采用同位素标记蛋白质相对和绝对定量技术、液相色谱-质谱联用技术和生物信息学分析方法对初生期(15 d)和快速生长期(60 d)东北梅花鹿茸进行蛋白表达谱差异分析,共鉴定出127种差异表达蛋白。其中,与快速生长期鹿茸相比,初生期鹿茸中显... 详细信息

采用同位素标记蛋白质相对和绝对定量技术、液相色谱-质谱联用技术和生物信息学分析方法对初生期(15 d)和快速生长期(60 d)东北梅花鹿茸进行蛋白表达谱差异分析,共鉴定出127种差异表达蛋白。其中,与快速生长期鹿茸相比,初生期鹿茸中显著性上调差异表达蛋白49种,显著性下调差异表达蛋白78种。这些差异表达蛋白主要为细胞外基质成分及参与调控神经生长和血液循环进程的功能蛋白。初生期鹿茸主要富含细胞外基质蛋白成分,且在快速生长期鹿茸中表达量显著下调。同时,与初生期鹿茸相比,参与调控神经生长和血液循环的相关蛋白表达量在快速生长期鹿茸中显著上调。这些差异表达蛋白共同参与调控梅花鹿茸的生长速度。本研究结果为进一步揭示鹿茸生长机制提供了基础数据,对研究鹿茸的临床应用具有重要的参考意义。

关键词：梅花鹿茸初生期快速生长期蛋白质表达谱差异分析

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人参PgMYB4基因表达载体构建及其对拟南芥的抗旱性分析

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中草药 2016年第17期47卷 3094-3097页

作者：孟祥宇谢红梅才可新王思明张丽轩宋岩张惠长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心吉林长春130117

目的构建人参Pg MYB4基因表达载体,并研究该基因对拟南芥的抗旱功能。方法采用RT-PCR技术克隆人参Pg MYB4基因,构建表达载体,通过农杆菌介导的花序浸蘸法将其转化到拟南芥中,获得转基因拟南芥,以野生型拟南芥作对照,检测植株与抗旱相关... 详细信息

目的构建人参Pg MYB4基因表达载体,并研究该基因对拟南芥的抗旱功能。方法采用RT-PCR技术克隆人参Pg MYB4基因,构建表达载体,通过农杆菌介导的花序浸蘸法将其转化到拟南芥中,获得转基因拟南芥,以野生型拟南芥作对照,检测植株与抗旱相关的生理指标。结果获得的人参Pg MYB4基因全长为735 bp,编码245个氨基酸,预测其相对分子质量为27 914;在干旱胁迫条件下,转基因拟南芥的生长状态明显优于野生型拟南芥,与野生型相比,转基因拟南芥叶片相对叶绿素量降低幅度小、脯氨酸量显著升高、水丢失率较低。结论人参Pg MYB4基因具有抗干旱胁迫的能力。

关键词：人参 PgMYB4基因表达载体构建转基因拟南芥干旱胁迫

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玉米须黄酮提取物对痛风性关节炎大鼠的影响

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现代食品科技 2015年第4期31卷 13-16 7,7页

作者：林贺董金香邱智东律广富张婧卓常志达林喆长春中医药大学药学院吉林长春130117 长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心吉林长春130117

研究了玉米须黄酮提取物对尿酸钠所致大鼠痛风性关节炎的影响。给药组大鼠灌胃给予玉米须黄酮提取物(1 g/kg、0.5g/kg、0.25 g/kg),连续8天,空白及模型对照组灌胃给予等体积蒸馏水,第5天灌胃1小时后于模型及给药组大鼠右踝关节腔内注射... 详细信息

研究了玉米须黄酮提取物对尿酸钠所致大鼠痛风性关节炎的影响。给药组大鼠灌胃给予玉米须黄酮提取物(1 g/kg、0.5g/kg、0.25 g/kg),连续8天,空白及模型对照组灌胃给予等体积蒸馏水,第5天灌胃1小时后于模型及给药组大鼠右踝关节腔内注射尿酸钠溶液2.5 mg/m L,诱导痛风性关节炎的发生,72小时后测定大鼠踝关节肿胀度及血浆中白细胞介素1α(IL-1α)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间粘附分子1(ICAM-1)及基质金属蛋白酶1(MMP-1)的水平,并进行大鼠右踝关节病理组织学检查。与模型对照组比较,给予玉米须黄酮提取物后,其高、中剂量组(1 g/kg、0.5 g/kg)的踝关节肿胀度均明显降低(P<0.01),血浆IL-1α、IL-6、TNF-α及血浆ICAM-1、MMP-1水平明显降低(P<0.05),并且可以改善造模大鼠关节滑膜组织的病理改变。提示玉米须黄酮提取物具有较好的抗痛风性关节炎的作用。

关键词：玉米须黄酮提取物痛风急性关节炎炎症细胞因子

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电喷雾质谱结合化学计量学方法快速筛选玛咖促睾丸间质细胞增殖活性成分

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分析化学 2016年第11期44卷 1735-1741页

作者：孙佳明田淋淋何忠梅孟令文孙慧阚俊明张辉长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心吉林农业大学中药材学院长春中医药大学研究生院

应用电喷雾串联质谱法(ESI-MS/MS)对云南和秘鲁产玛咖样品中低极性化学成分进行检测,获得各样品的一级质谱指纹谱图和各离子峰的二级质谱数据,并测定各样品促进大鼠睾丸间质细胞增殖活性,采用化学计量学方法主成分分析(PCA)、偏最小二乘... 详细信息

应用电喷雾串联质谱法(ESI-MS/MS)对云南和秘鲁产玛咖样品中低极性化学成分进行检测,获得各样品的一级质谱指纹谱图和各离子峰的二级质谱数据,并测定各样品促进大鼠睾丸间质细胞增殖活性,采用化学计量学方法主成分分析(PCA)、偏最小二乘法(PLS)和灰色关联度分析(GRA)对所获得的一级质谱数据进行处理后,可有效区分玛咖的不同产地,且筛选出其中具有促大鼠睾丸间质细胞增殖活性的可能成分,进而通过二级质谱数据分析得到可能活性成分的结构。实验结果表明,玛咖低极性成分具有很好的促大鼠睾丸间质细胞增殖活性,其中活性较强的主要为N-benzylhexadecanamide和N-benzy-(9Z,12Z,15Z)-octadecatrienamide。本方法为简单、快速分析中药中促睾丸间质细胞增殖活性成分筛选方法提供了借鉴。

关键词：玛咖不同产地电喷雾串联质谱化学计量学方法促睾丸间质细胞增殖

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枸杞多糖对中波紫外线照射HaCaT细胞低氧诱导因子1α、血管内皮细胞生长因子表达的影响

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中华皮肤科杂志 2017年第9期50卷 667-670页

作者：张洪长左立春孙海才律广富李娜林喆长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心 130117

目的探讨枸杞多糖对中波紫外线（UVB）照射HaCaT细胞低氧诱导因子1α（HIF？1α）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。方法将常规培养的HaCaT细胞，分为对照组和枸杞多糖给药组（12.5、25.0、50.0、100.0 μg/ml浓度），各组在给... 详细信息

目的探讨枸杞多糖对中波紫外线（UVB）照射HaCaT细胞低氧诱导因子1α（HIF？1α）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。方法将常规培养的HaCaT细胞，分为对照组和枸杞多糖给药组（12.5、25.0、50.0、100.0 μg/ml浓度），各组在给药4 h后同时进行不同强度UVB（0、20、40、60 mJ/cm2）照射，培养24 h。用CCK？8法检测细胞生存率。酶生化法检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）的活性；RT？PCR及Western 印迹检测HIF？1α、VEGF基因及蛋白的表达。结果对照组同照射剂量比，枸杞多糖（12.5 、25.0 、100.0 μg/ml浓度）各组不同程度提高UVB照射损伤细胞的生存率（P 〈 0.05），以50.0 μg/ml 枸杞多糖组升高最明显，差异有统计意义（P 〈 0.01）。枸杞多糖各给药组SOD活性以50.0 μg/ml SOD活性升高最明显，差异有统计学意义（P 〈 0.01）。随着UVB照射剂量（20、40、60 mJ/cm2）增加，HIF？1α、VEGF基因、蛋白的表达也逐渐增高，与对照组相比，50.0 μg/ml 枸杞多糖给药组能够有效降低细胞内HIF？1α、VEGF基因及蛋白的表达，差异有统计意义（P 〈 0.05）。结论枸杞多糖通过对HaCaT细胞内HIF？1α、VEGF基因及蛋白表达的影响，可能参与预防UVB照射损伤的过程。

关键词：紫外线枸杞多糖类内皮生长因子低氧诱导因子1α HaCaT细胞

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鹿茸多肽对心肌干细胞凋亡和线粒体膜稳定性的影响

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中国组织工程研究 2017年第9期21卷 1426-1431页

作者：黄晓巍徐岩刘玥欣李智萌曲晓波长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心吉林省长春市130117

背景:心肌干细胞在体外经鹿茸多肽诱导后可以分化为心肌细胞这一研究成果为其治疗心肌损伤提供了新思路。目的:观察鹿茸多肽对心肌干细胞凋亡和线粒体膜稳定性的影响,探讨其作用机制。方法:选取出生2 d的雄性Wistar大鼠,提取心肌干细胞... 详细信息

背景:心肌干细胞在体外经鹿茸多肽诱导后可以分化为心肌细胞这一研究成果为其治疗心肌损伤提供了新思路。目的:观察鹿茸多肽对心肌干细胞凋亡和线粒体膜稳定性的影响,探讨其作用机制。方法:选取出生2 d的雄性Wistar大鼠,提取心肌干细胞,以培养皿作为实验单位,共计分为以下4组(n=12):鹿茸多肽组:使用鹿茸多肽(质量浓度为800 mg/L)进行诱导;联合组:使用5-氮胞苷(浓度为3μmol/L)和鹿茸多肽(质量浓度为800 mg/L)联合诱导;5-氮胞苷组:使用5-氮胞苷(浓度为3μmol/L)进行诱导;空白对照组:加入等量缓冲液进行诱导。诱导48 h后流式细胞仪检测心肌干细胞的凋亡率,免疫荧光检测心肌干细胞的线粒体膜电位,Western blotting方法检测心肌干细胞Nkx 2.5、GATA4、ATF-2、MEF-2C的表达水平。结果与结论:(1)细胞培养2周后,出现大量的小、圆、亮细胞,心肌干细胞集落形成;(2)与空白对照组比较,5-氮胞苷组心肌干细胞凋亡率明显升高(P<0.05),线粒体膜电位明显降低(P<0.05);与5-氮胞苷组比较,鹿茸多肽组、联合组心肌干细胞凋亡率明显降低(P<0.05,P<0.01),线粒体膜电位明显升高(P<0.05,P<0.01);(3)与5-氮胞苷组比较,鹿茸多肽组及联合组Nkx2.5的表达水平明显升高(P<0.05),各组GATA4、ATF-2表达水平不高,且差异无显著性意义(P>0.05),MEF-2C表达在中等水平,各组间差异无显著性意义(P>0.05);(4)结果表明,鹿茸多肽可降低心肌干细胞凋亡率,提高线粒体膜稳定性,其作用机制在一定程度上与提高Nkx 2.5表达有关,是否与GATA4、ATF-2、MEF-2C有关尚待进一步研究。

关键词：鹿茸角肌细胞,心脏线粒体组织工程干细胞分化鹿茸多肽心肌干细胞凋亡率膜稳定性

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五味子抑制α-葡萄糖苷酶活性成分的研究

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现代食品科技 2017年第12期33卷 104-108页

作者：邱明阳田双赵武刘玉婷弓佩含严铭铭邵帅长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心吉林长春130117

本研究探索了五味子中总木脂素、总黄酮、总三萜及五味子醇乙、五味子甲素、五味子醇甲、五味子酯甲对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。利用体外α-葡萄糖苷酶活性抑制模型,以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,阿卡波糖(ACAR)为阳... 详细信息

本研究探索了五味子中总木脂素、总黄酮、总三萜及五味子醇乙、五味子甲素、五味子醇甲、五味子酯甲对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。利用体外α-葡萄糖苷酶活性抑制模型,以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,阿卡波糖(ACAR)为阳性对照,测定了五味子中总木脂素、总黄酮、总三萜及五味子醇乙、五味子甲素、五味子醇甲、五味子酯甲对α-葡萄糖苷酶活性的体外抑制作用。五味子中总木脂素、总黄酮、总三萜浓度为1.0 mg/m L对α-葡萄糖苷酶抑制率分别为96.15±1.52%、60.33±1.84%和48.62±2.15%,五味子醇乙、五味子甲素、五味子醇甲和五味子酯甲浓度为0.33 mg/m L对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率分别为96.53±1.62%、68.48±1.83%、15.57±2.37%和6.24±2.49%。五味子中总木脂素及五味子醇乙均对α-葡萄糖苷酶活性有显著抑制作用,且具有明显的量效关系。

关键词：五味子活性成分 α-葡萄糖苷酶抑制作用

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鹿茸寡肽的制备及其促成骨细胞的增殖作用

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高等学校化学学报 2008年第9期29卷 1791-1796页

作者：王华林喆刘强蔡明军徐力张学忠吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室长春130021 长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心长春130117 吉林大学中日联谊医院长春130033

从梅花鹿鹿茸中提取了天然鹿茸总多肽（VATP）.在进一步分离纯化的过程中,筛选出具有促进成骨细胞增殖的高活性肽组分（VAP-B）,并通过制备型HPLC对其纯化,得到了分子量分布约为200～600的小肽活性组分（VAP-B2）.细胞周期分析结果表明... 详细信息

从梅花鹿鹿茸中提取了天然鹿茸总多肽（VATP）.在进一步分离纯化的过程中,筛选出具有促进成骨细胞增殖的高活性肽组分（VAP-B）,并通过制备型HPLC对其纯化,得到了分子量分布约为200～600的小肽活性组分（VAP-B2）.细胞周期分析结果表明,鹿茸肽VAP-B2组分促进了人成骨肉瘤细胞OS-732的周期转化,使其细胞周期S期细胞指数明显增加,即表现为S期DNA含量明显提高.碱性磷酸酶（ALP）活性检测结果表明,随着鹿茸肽VAP-B2剂量的增加,ALP的活性明显增加.这与成骨细胞增殖分化及成熟过程中,细胞的周期性变化和骨形成标志物碱性磷酸酶水平的明显增高相符.

关键词：梅花鹿鹿茸鹿茸肽分离与纯化生理活性成骨细胞

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梅花鹿胸腺素beta10基因真核表达载体的构建及鉴定

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生物技术通报 2017年第6期33卷 149-154页

作者：王佳雯高云鹏孙天霞刘美辰赵雨王思明长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心长春130117

转录组测序发现Tβ10在鹿茸中高表达,为了研究Tβ10与鹿茸生长发育间的关系,构建Tβ10真核表达载体。使用Trizol法提取梅花鹿鹿茸总RNA,PCR技术特异性扩增梅花鹿Tβ10基因,利用酶切位点将目的片段插入真核表达载体VR1012构建表达质粒,通... 详细信息

转录组测序发现Tβ10在鹿茸中高表达,为了研究Tβ10与鹿茸生长发育间的关系,构建Tβ10真核表达载体。使用Trizol法提取梅花鹿鹿茸总RNA,PCR技术特异性扩增梅花鹿Tβ10基因,利用酶切位点将目的片段插入真核表达载体VR1012构建表达质粒,通过Fugene~?6将质粒瞬时转染到293T细胞中,使用Western blotting和免疫荧光方法检测目的基因的表达。结果发现克隆得到的梅花鹿Tβ10基因长度为129bp,编码42个氨基酸,成功构建真核表达载体VR1012-Tβ10-HA,转染后使用Western blotting方法检测到梅花鹿Tβ10在293T细胞中表达,免疫荧光方法证明梅花鹿Tβ10主要定位在细胞浆中。

关键词：梅花鹿胸腺素beta10 质粒构建转染真核表达

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