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基于miRNA-134-5p/BDNF/Akt信号通路探讨X线辐射致大鼠心肌细胞凋亡的机制

海军军医大学学报 2024年第11期45卷 1352-1361页

作者：顾静付力文韩晓斐方丹金戈董晓丽颉亚辉侯敏甘肃中医药大学基础医学院生理学教研室兰州730000 甘肃中医药大学公共卫生学院数学与卫生统计学教研室兰州730000 甘肃中医药大学基础医学院解剖学与组织胚胎学教研室兰州730000

目的探讨X线辐射对大鼠心肌细胞凋亡的影响及相关机制。方法将大鼠H9C2心肌细胞分为空白对照组、X线照射组(X-ray组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂组(X-inhibitor组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂阴性对照组(X-NC组)。最终选择以6 Gy X线... 详细信息

目的探讨X线辐射对大鼠心肌细胞凋亡的影响及相关机制。方法将大鼠H9C2心肌细胞分为空白对照组、X线照射组(X-ray组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂组(X-inhibitor组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂阴性对照组(X-NC组)。最终选择以6 Gy X线辐照大鼠H9C2心肌细胞,48 h后检测各项指标变化。采用CCK-8法检测细胞存活率,用流式细胞术和Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率,用DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,用JC-1法检测细胞线粒体膜电位变化,用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)检测试剂盒分别测定细胞中SOD活性、MDA水平,用qPCR法检测细胞中miRNA-134-5p表达,用蛋白质印迹法检测细胞中脑源性神经营养因子(BDNF)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、Bcl2、Bax蛋白的表达。结果与空白对照组相比,X-ray组大鼠心肌细胞中ROS和MDA水平上升、SOD活性下降、线粒体膜电位下降百分比增加、DNA损伤微核形成数增加、细胞凋亡率升高(均P<0.01);与X-ray组相比,X-inhibitor组上述各项指标均有所逆转(P<0.05或P<0.01),而X-NC组的以上各指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。与空白对照组相比,X-ray组大鼠心肌细胞中miRNA-134-5p水平上调,BDNF表达及Bcl2/Bax、p-Akt/Akt比值下降(均P<0.01);与X-ray组相比,X-inhibitor组大鼠心肌细胞中miRNA-134-5p水平下降,BDNF表达及Bcl2/Bax、p-Akt/Akt比值升高(均P<0.01),X-NC组各项指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论X线照射诱导了大鼠心肌细胞发生氧化应激、线粒体损伤及DNA损伤,最终导致细胞凋亡,其发生机制可能涉及miRNA-134-5p/BDNF/Akt信号通路。

关键词：放射性心脏损伤辐射心肌细胞微RNA-134-5p 细胞凋亡

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过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立

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生物学杂志 2024年第4期41卷 24-29页

作者：徐菁何柳周芳婷潘勤陈姗罗靓湖北中医药大学、药学院、药物分析教研室武汉430071 武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学与组织胚胎学系武汉430071 武汉市蔡甸区人民医院检验科武汉430100

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳... 详细信息

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。

关键词： TLR2 慢病毒载体 B淋巴细胞 PI3K-AKT信号通路细胞增殖

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巧用思维导图易化形态学课程教学

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四川解剖学杂志 2023年第3期31卷 187-189页

作者：谢璐霜龚艳菊史良琴李敏陈雄斌易晓红钟占琼龚圆渊钟铧杨岚姜岑成都中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室成都611175

形态学是医学基础课程的重要组成部分,内容多而繁,学习难度大是其特点.思维导图是图形思维工具的重要表现形式.能够较好地反映各主题节点间的层次关系.巧妙地使用思维导图能提高形态学的学习效率.本文介绍了我们探索和应用多种思维导图... 详细信息

形态学是医学基础课程的重要组成部分,内容多而繁,学习难度大是其特点.思维导图是图形思维工具的重要表现形式.能够较好地反映各主题节点间的层次关系.巧妙地使用思维导图能提高形态学的学习效率.本文介绍了我们探索和应用多种思维导图开展基础课形态学教学的情况.

关键词：形态学教学思维导图

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慢病毒载体介导Gag-Caspase-8诱导三阴性乳腺癌原代细胞凋亡及S期阻滞

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山东大学学报(医学版) 2025年第1期63卷 25-34页

作者：王敏李习平檀军邱梅侯泽宇田莹罗鸿莹范超文齐玲俞琦谢薇贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学第一附属医院急诊科贵州贵阳550001 遵义医科大学组织胚胎学教研室贵州遵义563006 贵州中医药大学护理学院贵州贵阳550025 遵义医科大学附属医院甲乳外科贵州遵义563099 贵州中医药大学第一附属医院重症医学科贵州贵阳550001

目的探讨携Gag-Caspase-8慢病毒样颗粒对三阴性乳腺癌原代细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及作用机制。方法收集临床人乳腺癌标本3例,通过改良组织块培养法培养人乳腺癌原代细胞,通过HE染色、免疫组化及免疫荧光鉴定所培养的细胞是否... 详细信息

目的探讨携Gag-Caspase-8慢病毒样颗粒对三阴性乳腺癌原代细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及作用机制。方法收集临床人乳腺癌标本3例,通过改良组织块培养法培养人乳腺癌原代细胞,通过HE染色、免疫组化及免疫荧光鉴定所培养的细胞是否为高纯度三阴性人乳腺癌原代细胞;慢病毒转染构建携Gag-Caspase-8慢病毒样颗粒,细胞分为PBS组、Gag-VLPs组和Gag-CASP8-VLPs组。采用MTT法评估细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移能力,AO/EB染色检测细胞凋亡,流式细胞术分析细胞周期和凋亡,蛋白质免疫印迹考察凋亡相关蛋白表达。结果临床肿瘤标本经HE染色确定为乳腺癌病理组织,免疫组化鉴定乳腺癌原代细胞特异性分子标记物CA153阳性高表达,并通过计算阳性细胞比例评估细胞纯度约为98%,免疫荧光检测结果显示,HER2、ER、PR均阴性表达,证明所培养的细胞为高纯度三阴性人乳腺癌原代细胞;Western blotting检测发现构建的Gag-VLPs和Gag-CASP8-VLPs内有慢病毒载体特异性分子标志物P24表达,证明慢病毒样颗粒包装成功。Gag-CASP8-VLPs干预三阴性人乳腺癌原代细胞24、48 h后,与对照组PBS和Gag-VLPs相比,倒置显微镜下观察到细胞皱缩、体积减小、贴壁能力下降且漂浮细胞增多;MTT检测显示,Gag-CASP8-VLPs组显著抑制了人乳腺癌原代细胞的生长(P<0.01),并呈时间依赖性;细胞划痕实验观察到,Gag-CASP8-VLPs组可显著抑制人乳腺癌原代细胞的迁移能力(P<0.05);流式细胞术检测发现,Gag-CASP8-VLPs组S期细胞数量显著增高(P<0.01),细胞阻滞于S期;AO/EB染色及流式细胞术检测发现,Gag-CASP8-VLPs组可诱导细胞发生凋亡(P<0.01);Western blotting结果显示,Gag-CASP8-VLPs组三阴性乳腺癌原代细胞内Gag-Caspase-8、Pro caspase-8、Activecaspase-8和Caspase-3凋亡相关蛋白表达显著增高(P<0.01)。结论慢病毒介导Gag-Caspase-8将活化的Caspase-8导入三阴性乳腺癌原代细胞,通过激活下游Caspase-3,诱导细胞凋亡,并使细胞停滞在S期,从而抑制细胞增殖和迁移。

关键词：慢病毒载体 Gag-Caspase-8 三阴性人乳腺癌原代细胞 Caspase-8 S期阻滞

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特发性膜性肾病的损伤机制及中医药诊疗

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生命的化学 2024年第3期44卷 465-476页

作者：郭敏王羽于梅姜国华周旋刘庆燕董云英薄颖迪王乾黑龙江中医药大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室哈尔滨150000 黑龙江省中医药科学院内科哈尔滨150001

足细胞又称为肾小球上皮细胞,是肾小球滤过屏障(glomerular filtration barrier,GFB)的最后一道关卡。作为蛋白尿的主要诱因,足细胞损伤可以由特发性膜性肾病引发,而且如果损伤不断加重将会进展为终末期肾病。目前认为,特发性膜性肾病... 详细信息

足细胞又称为肾小球上皮细胞,是肾小球滤过屏障(glomerular filtration barrier,GFB)的最后一道关卡。作为蛋白尿的主要诱因,足细胞损伤可以由特发性膜性肾病引发,而且如果损伤不断加重将会进展为终末期肾病。目前认为,特发性膜性肾病破坏足细胞的机制主要包括凋亡、自噬失调、氧化应激、炎症、足细胞肌动蛋白骨架异常等。现阶段,我国西医对其的治疗药物主要有肾素-血管紧张素系统抑制剂、皮质类固醇单药、环磷酰胺、钙调磷酸酶抑制剂以及利妥昔单抗等生物制剂,但是存在成本较高和不良反应严重的问题。中药具有多成分、多靶点的特点,治疗疾病时可以作用于多条途径缓解症状、防治并发症、延缓疾病进展。本文综述了特发性膜性肾病足细胞损伤的相关机制,并从中药以及针灸方面对干预相关信号通路治疗特发性膜性肾病进行了总结,旨在为中医药抗特发性膜性肾病的作用机制及靶向药物的研发提供一定的参考依据。

关键词：特发性膜性肾病足细胞中医药

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课程思政元素融入医学专业人体解剖学"第一堂课"的初探

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四川解剖学杂志 2022年第4期30卷 179-181页

作者：陈雄斌龚圆渊谢璐霜游茂春杨岚李敏成都中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室成都611175

"课程思政"是新时代中国高校落实大学生思想政治教育、"立德树人""三全育人"的重要途径.因此,在完成专业课程教学内容,实现专业教学目标的同时开展课堂课程思政,不仅有利于大学生专业技术能力的培养,还... 详细信息

"课程思政"是新时代中国高校落实大学生思想政治教育、"立德树人""三全育人"的重要途径.因此,在完成专业课程教学内容,实现专业教学目标的同时开展课堂课程思政,不仅有利于大学生专业技术能力的培养,还可以通过"融物细无声"的方式培养具有社会主义核心价值观的大学生.《人体解剖学》作为医学院校医学生的必修课,为医学生专业基础课的"第一堂课".由于学科特点,解剖学的发展中有众多涉及爱国主义、医者仁心等的感人事迹,这些事迹为解剖学课堂开展课程思政教育提供了丰富的素材.因此,基于解剖学的学科特点在新生中开展课程思政具有巨大的优势,并且尤为必要.本文以人体解剖学绪论部分为例,对如何结合教学内容开展课程思政进行了初探,希望为培养"有红又专"的医学人才提供参考.

关键词：课程思政人体解剖学教育改革课程教学

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藏北高原藏族女青年三庭特征分析

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医学信息 2022年第19期35卷 115-117页

作者：丁瑶钟铧西藏大学医学院人体解剖学教研室成都中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室

目的通过对藏北高原地区藏族女青年面部三庭特征研究，探讨其面部美学特征。方法选择西藏那曲地区（尼玛县海拔4530 m、安多县海拔4690 m、双湖县海拔4920 m）藏族女青年174例为研究对象，按照年龄分为20岁以下、20～29岁、30～39岁... 详细信息

目的通过对藏北高原地区藏族女青年面部三庭特征研究，探讨其面部美学特征。方法选择西藏那曲地区（尼玛县海拔4530 m、安多县海拔4690 m、双湖县海拔4920 m）藏族女青年174例为研究对象，按照年龄分为20岁以下、20～29岁、30～39岁和40岁及以上，共4个年龄组，使用Canon(1200D)相机对受试者进行面部图像采集，图像采用面部测量Digizer软件进行面部上庭、中庭以及下庭的测量。结果藏族女青年面部三庭均值分别为上庭（65.10±0.80）mm，中庭（70.10±0.70）mm，下庭（67.70±0.75）mm。海拔4530 m人群上庭值与海拔4690 m人群和海拔4920 m人群比较，差异有统计学意义（P<0.01）；肥胖人群与BMI正常人群下庭值比较，差异有统计学意（P<0.01）；经Pearson相关分析显示，上庭与年龄呈负性相关（r=-0.352,P<0.01）、与身高呈弱正性相关（r=0.164,P<0.05）、与海拔高度呈正性相关（r=0.223,P<0.01）；中庭与年龄呈负性相关（r=-0.205,P<0.01）；下庭与体重呈正性相关（r=0.300,P<0.01）、与BMI值呈正性相关（r=0.253,P<0.01）。结论随着年龄增长，藏北高原藏族女轻蔑的头面部形态特征中，与软组织有关的指标和指数会随着年龄增长呈现出一定的变化规律，同时也会受到机体内部变化和外部环境因素的影响。

关键词：三庭特征藏族女青年

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组织胚胎学课堂教学融入人文素质教育的实践研究

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中华医学教育探索杂志 2021年第10期20卷 1153-1156页

作者：赵英侠姚云王强利王奕周武雄上海中医药大学基础医学院组织胚胎学教研室 201203

为充分发挥专业基础课教师的教书育人功能,从组织学和胚胎学各章节中挖掘人文素质教育内容,并与专业基础知识有机融合进行课堂教学。通过学生撰写心得体会、任课教师访谈和全国同行评议,检测教学效果。结果发现,学生不仅受到感恩、奉献... 详细信息

为充分发挥专业基础课教师的教书育人功能,从组织学和胚胎学各章节中挖掘人文素质教育内容,并与专业基础知识有机融合进行课堂教学。通过学生撰写心得体会、任课教师访谈和全国同行评议,检测教学效果。结果发现,学生不仅受到感恩、奉献与责任等教育,同时课程学习的积极性得到明显提高;任课教师认为,教书育人同时得到了自育;全国同行一致认为,该项工作具有引领和示范作用。

关键词：组织学胚胎学人文素质教育过程性评价

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五味子醇甲诱导缺血半影区神经元自噬提高脑卒中后神经保护

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中国生物化学与分子生物学报 2020年第5期36卷 544-551页

作者：臧瑞杨继苹郭涛褚鑫张雪玉武煜明邓仪昊云南中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室昆明650500 昆明理工大学医学院解剖学教研室昆明650500

五味子醇甲(Schisandra A,Sch A)是五味子中具有生物活性的木脂素化合物,其神经保护作用已在多种神经系统疾病动物模型中得到验证。然而,五味子醇甲是否能通过影响大鼠脑缺血半影区神经元自噬活性对脑缺血再灌注大鼠模型产生神经保护作... 详细信息

五味子醇甲(Schisandra A,Sch A)是五味子中具有生物活性的木脂素化合物,其神经保护作用已在多种神经系统疾病动物模型中得到验证。然而,五味子醇甲是否能通过影响大鼠脑缺血半影区神经元自噬活性对脑缺血再灌注大鼠模型产生神经保护作用,尚缺乏系统研究。为探究Sch A对大鼠脑卒中后神经损伤及缺血半影区神经元自噬活性的影响,本研究将90只SD雄性大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型组(MCAO)、Sch A低剂量组(40μg/kg)、Sch A中剂量组(80μg/kg)、Sch A高剂量组(160μg/kg),每组18只。线栓法制备大鼠大脑中动脉梗塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,脑缺血持续90 min后进行再灌注,立即侧脑室给药,1/d,连续给药7 d。各组分别取6只大鼠进行神经功能评分后,取脑进行TTC染色检测脑梗死体积。另有6只大鼠取缺血半影区脑组织,通过Western印迹检测自噬相关蛋白质Beclin1、LC3-Ⅱ的表达水平。剩余6只大鼠脑组织用于免疫荧光双标,对Sch A改变的自噬活性进行细胞表达定位。研究结果显示,MCAO组大鼠脑梗死体积及神经功能损伤评分均显著高于Sham组(P<0.05),且Beclin1及LC3-Ⅱ的表达显著增加(P<0.05)。各Sch A治疗组大鼠脑梗死体积较未给药组显著减少(P<0.05),神经功能损伤得到明显改善(P<0.05)。同时,Sch A给药组Beclin1及LC3蛋白质表达水平明显升高(P<0.05),且免疫荧光双标显示该自噬活性改变主要呈现于神经元。以上结果表明,Sch A可显著减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,该神经保护作用与其提高缺血半影区神经元自噬活性密切相关。

关键词：五味子醇甲脑缺血再灌注自噬神经保护

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去卵巢大鼠全身肌肉、脂肪和雌二醇含量与骨密度的相关性及补肾健脾穴位针刺的调节作用

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中华中医药杂志 2020年第1期35卷 434-436页

作者：原淳淳艾尔扎提·艾尔宝王达宝杨飞宇张云龙赵英侠上海中医药大学基础医学院上海201203 上海中医药大学基础医学院组织胚胎学教研室上海201203

目的:探讨绝经后骨质疏松症的发生与全身肌肉、脂肪变化的关系及针刺的作用。方法:6月龄雌性SD大鼠去除双侧卵巢后第4天,取补肾健脾、通经活络穴位肾俞、脾俞、足三里(均双侧)及大椎针刺3个疗程,以骨密度检测仪prodigy测定全身骨密度(B... 详细信息

目的:探讨绝经后骨质疏松症的发生与全身肌肉、脂肪变化的关系及针刺的作用。方法:6月龄雌性SD大鼠去除双侧卵巢后第4天,取补肾健脾、通经活络穴位肾俞、脾俞、足三里(均双侧)及大椎针刺3个疗程,以骨密度检测仪prodigy测定全身骨密度(BMD)、肌肉和脂肪含量,以ELISA法测定血清雌二醇(E2)含量,以Western Blot技术测定双侧股四头肌肌球蛋白重链(MHC)蛋白表达水平,以假手术组和模型组作为对照。结果:与假手术组比较,模型组大鼠全身BMD和肌肉含量呈下降趋势,脂肪与E2含量明显升高(P<0.05),MHC蛋白呈高表达趋势;与模型组比较,针刺组全身BMD和肌肉含量呈上升趋势,脂肪与E2含量明显降低(P<0.01,P<0.05),MHC蛋白呈低表达(P<0.05)。结论:绝经后骨质疏松症的发生与肌肉减少、脂肪增加密切相关,针刺具有良性调节作用。

关键词：骨质疏松症去势大鼠补肾健脾针刺骨肉不相亲肌肉脂肪骨密度

来源：评论

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