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Ad-生长抑制因子4-polyA-promoter-白细胞介素-24对NCI-H460肺癌细胞抑癌增效作用的体内实验研究

中华实验外科杂志 2020年第6期37卷 1093-1098页

作者：梁光辉丁志丹袁东风杨吉成赵军邢文群郑州大学附属肿瘤医院胸外科 450008 郑州大学第一附属医院胸外科 450052 苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室 215123 苏州大学附属第一医院心胸外科 215000

目的探讨腺病毒介导的生长抑制因子4(ING4)和白细胞介素(IL)-24双基因共表达对NCI-H460肺癌细胞裸鼠移植瘤的抑癌增效作用及分子机制。方法根据腺病毒携带基因类型,把实验分5组,PBS、Ad、Ad-IL-24、Ad-ING4、Ad-ING4-IL-24组。以50的感... 详细信息

目的探讨腺病毒介导的生长抑制因子4(ING4)和白细胞介素(IL)-24双基因共表达对NCI-H460肺癌细胞裸鼠移植瘤的抑癌增效作用及分子机制。方法根据腺病毒携带基因类型,把实验分5组,PBS、Ad、Ad-IL-24、Ad-ING4、Ad-ING4-IL-24组。以50的感染复数(MOI)各重组腺病毒分别感染NCI-H460细胞(苏州大学基础医学院细胞和分子生物学教研室提供),蛋白质印迹法(Western blot)鉴定ING4和/或IL-24基因在NCI-H460细胞中的表达;噻唑蓝(MTT)法检测各重组腺病毒对NCI-H460细胞的生长抑制作用;各重组腺病毒注入裸鼠瘤体内进行抗肿瘤实验,观察各组瘤体体积变化;治疗15 d后处死裸鼠、摘取瘤体并称瘤体质量;免疫组织化学检测瘤体组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、生存素(Survivin)等相关因子的表达。统计学采用单因素方差分析。结果动物实验结果表明,腺病毒介导白细胞介素-24(Ad-IL-24)、腺病毒介导生长抑制因子4(Ad-ING4)、腺病毒介导白细胞介素-24及生长抑制因子4(Ad-ING4-IL-24)组的肿瘤平均体积明显低于腺病毒(Ad)组[(559.880±43.704)mm3,t=12.811,P<0.01;(573.720±42.019)mm3,t=13.654,P<0.01;(834.700±44.948)mm3,t=18.570,P<0.01]和磷酸盐缓冲液(PBS)组[(-710.210±32.608)mm3,t=21.780,P<0.01;(724.050±30.313)mm3,t=23.886,P<0.01;(-985.030±34.257)mm3,t=28.754,P<0.01],平均瘤体重量明显低于Ad组[(0.547±0.080)g,t=6.812,P<0.01;(0.607±0.082)g,t=7.433,P<0.01;(0.919±0.082)g,t=11.221,P<0.01]和PBS组[(0.572±0.067)g,t=8.597,P<0.01;(0.632±0.068)g,t=9.260,P<0.01;(0.944±0.069)g,t=13.775,P<0.01],差异均有统计学意义;Ad-ING4-IL-24组对裸鼠NCI-H460肺癌移植瘤的抑癌作用明显优于Ad-IL-24、Ad-ING4单基因组(0.302±0.048,t=6.213,P<0.01;0.250±0.053,t=4.685,P<0.01),差异有统计学意义,呈现抑癌增效相加作用(Q=0.940)。ING4和/或IL-24能够上调bax、Caspase-3等因子的表达,下调bcl-2、Survivin等因子的表达,且Ad-ING4-IL-24组优于Ad-IL-24、Ad-ING4单基因组(0.263±0.055,t=4.286,P<0.01),差异有统计学意义。结论Ad-ING4-IL-24双基因共表达在体内对NCI-H460细胞裸鼠移植瘤均具有抑癌增效作用,其分子机制可能与上调bax、Caspase-3等促凋亡因子的表达,下调bcl-2、Survivin等凋亡抑制因子的表达有关。

关键词：生长抑制因子4 白细胞介素-24 腺病毒肺癌抑癌增效

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SM22α在肿瘤发生发展中作用的研究进展

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山东医药 2020年第31期60卷 97-100页

作者：郭惠珊宋楠席豪王榕陈宁吕品河北医科大学医学与健康研究院心血管医学研究中心石家庄050017 河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室

收缩型平滑肌细胞标志蛋白平滑肌22 alpha(SM22α)是一种重要的细胞骨架相关蛋白,进化上高度保守,在维持血管稳态中起关键作用。近年研究发现,SM22α表达异常与肿瘤的分化状态密切相关,其不仅作为一种肌动蛋白相关蛋白,还作为信号分子... 详细信息

收缩型平滑肌细胞标志蛋白平滑肌22 alpha(SM22α)是一种重要的细胞骨架相关蛋白,进化上高度保守,在维持血管稳态中起关键作用。近年研究发现,SM22α表达异常与肿瘤的分化状态密切相关,其不仅作为一种肌动蛋白相关蛋白,还作为信号分子在肿瘤细胞侵袭、转移、细胞增殖、凋亡、细胞外基质降解、自噬和耐药等过程中发挥作用。

关键词：肿瘤细胞骨架相关蛋白平滑肌22 alpha

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新型pH响应性噻虫嗪纳米脂质体的制备及其杀虫活性

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农药学学报 2020年第6期22卷 1054-1060页

作者：杨君张正崔忠凯杨青大连理工大学生物工程学院辽宁大连116024 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515 中国农业科学院植物保护研究所北京100193 中国农业科学院(深圳)农业基因组研究所广东深圳518120

为提高农药利用率,减少环境风险,提高农药靶向性,利用胆固醇和硬脂胺通过自组装形成的非磷脂类纳米脂质体作为农药载体,构建了具有缓控释特性的噻虫嗪纳米脂质体。电镜和粒度分析结果表明,该纳米制剂呈现出良好的分散性和稳定性,载药后... 详细信息

为提高农药利用率,减少环境风险,提高农药靶向性,利用胆固醇和硬脂胺通过自组装形成的非磷脂类纳米脂质体作为农药载体,构建了具有缓控释特性的噻虫嗪纳米脂质体。电镜和粒度分析结果表明,该纳米制剂呈现出良好的分散性和稳定性,载药后的纳米粒径为173.7 nm±1.6 nm,载药量为8.97%,带有正电荷的脂质体与噻虫嗪间存在静电相互作用。体外释放试验结果表明,相对于原药组8 h内完全释放,噻虫嗪纳米脂质体8 h累计释放率为62%,实现了噻虫嗪的缓释效果。制备的噻虫嗪纳米脂质体具有碱性pH敏感性,其中当pH值为10.0时噻虫嗪的释放速率显著提高,有助于噻虫嗪在鳞翅目昆虫独特的碱性pH中肠环境中进行响应性释放和积累。以亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis为模式昆虫的杀虫活性试验结果表明,有效成分为0.6 mg/mL的噻虫嗪纳米脂质体较原药组的杀虫活性更佳,作用1 d后原药组仅部分影响其生命活动,而纳米脂质体组存活率已降至60%以下,表现出纳米脂质体载体提高了噻虫嗪对玉米螟的杀虫活性。以非磷脂类脂质体作为农药载体,为农药活性成分的定向可控递送和缓控释提供了新的理论依据与技术途径,不仅可高效提高农药利用率,同时具备经济和环境友好等优势,具有广阔的应用前景。

关键词： pH响应性噻虫嗪非磷脂类脂质体纳米农药亚洲玉米螟杀虫活性

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姜油酮联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2019年第2期45卷 228-233,470页

作者：徐振华苏荣健锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学生命科学研究院遗传学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨姜油酮联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其相关作用机制。方法:采用不同浓度姜油酮和索拉非尼单独或联合对人肝癌HepG2细胞进行干预,MTT法检测细胞增殖率,根据其结果选择姜油酮和索拉非尼的适合浓度。实... 详细信息

目的:探讨姜油酮联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其相关作用机制。方法:采用不同浓度姜油酮和索拉非尼单独或联合对人肝癌HepG2细胞进行干预,MTT法检测细胞增殖率,根据其结果选择姜油酮和索拉非尼的适合浓度。实验分为对照组(DMSO)、姜油酮组(30μmol·L^(-1))、索拉非尼组(3μmol·L^(-1))和联合组(姜油酮30μmol·L^(-1)+索拉非尼3μmol·L^(-1)),采用细胞划痕实验检测各组HepG2细胞划痕愈合率,Transwell实验检测各组HepG2细胞穿膜细胞数,Western blotting法检测各组HepG2细胞中基质金属蛋白酶2 (MMP-2)和基质金属蛋白酶9 (MMP-9)蛋白表达水平。结果:MTT实验,与对照组比较,姜油酮组和联合组细胞增殖率明显降低(P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,姜油酮组和索拉非尼组HepG2细胞划痕愈合率降低(P<0.05);与姜油酮组和索拉非尼组比较,联合组HepG2细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。Transwell实验,与对照组比较,姜油酮组和索拉非尼组HepG2细胞穿膜细胞数减少(P<0.05);与姜油酮组和索拉非尼组比较,联合组穿膜细胞数明显降低(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,姜油酮组和索拉非尼组HepG2细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05);与姜油酮组和索拉非尼组比较,联合组HepG2细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:姜油酮可通过降低HepG2细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达来抑制人肝癌细胞迁移和侵袭能力,且与索拉非尼联用效果更佳。

关键词：肝肿瘤姜油酮索拉非尼细胞迁移细胞侵袭

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双氢青蒿素影响人胶质瘤细胞生物学特性的研究

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中国药物与临床 2021年第20期21卷 3361-3364,I0002页

作者：刘秀中董金垚张燕燕师如意山西省武乡县人民医院普通外科 046300 山西医科大学附属山西省肿瘤医院外科特需病区山西医科大学第一医院普通外科山西医科大学基础医学院医学细胞生物学与遗传学教研室

目的观察中药制剂双氢青蒿素(DHA)对胶质瘤SHG44细胞生物学特性的影响。方法利用细胞增殖实验(MTT)法、trans-well法、流式细胞术、聚合酶链反应(PCR)等方法分别检测DHA对SHG44细胞在增殖、迁移、细胞周期及Claudin-1基因表达等方面的... 详细信息

目的观察中药制剂双氢青蒿素(DHA)对胶质瘤SHG44细胞生物学特性的影响。方法利用细胞增殖实验(MTT)法、trans-well法、流式细胞术、聚合酶链反应(PCR)等方法分别检测DHA对SHG44细胞在增殖、迁移、细胞周期及Claudin-1基因表达等方面的影响。结果SHG44细胞的增殖、迁移能力可受到DHA显著抑制;DHA可以显著影响细胞之间的紧密连接蛋白Claudin-1的表达水平,使其上调表达。结论DHA可以通过影响SHG44细胞生物学特性起到抗癌作用,是潜在的治疗胶质瘤的新药。

关键词：双氢青蒿素胶质瘤细胞生物学

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任务教学法在细胞工程概论教学中的应用

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转化医学杂志 2019年第3期8卷 168-170页

作者：崔洪勇汪世婕孔令敏李玲蒋建利陈志南空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室

细胞工程概论是生物技术专业的重要专业基础课程,其教学方法的改革与创新具有重要意义。任务教学法(task-based learning,TBL)是将教学内容具体分解为若干任务,学生通过内容研究、相互协作完成任务,并达到学习目的的教学模式。作者通过... 详细信息

细胞工程概论是生物技术专业的重要专业基础课程,其教学方法的改革与创新具有重要意义。任务教学法(task-based learning,TBL)是将教学内容具体分解为若干任务,学生通过内容研究、相互协作完成任务,并达到学习目的的教学模式。作者通过自身4年的教学实践,分析了TBL教学法的优点、不足以及需要注意的问题。通过课后问卷调查发现,学生对TBL教学法具有较好的接受度,TBL教学法有助于提高学生的学习积极性,培养学生自主学习和解决问题的能力,对学生知识点的掌握和运用具有提升作用,提高了教学效果。同时TBL教学也对教师的自身素质和业务水平提出了更高的要求。

关键词：任务教学法细胞工程概论教学模式

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千里光苯丙氨酸解氨酶基因克隆与系统进化分析

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遵义医科大学学报 2020年第3期43卷 305-309页

作者：李林左青青谢欣刘朝波陈立张俊钱刚遵义医科大学基础医学院细胞生物学教研室贵州遵义563099 遵义医科大学第一临床学院贵州遵义563099

目的对具有良好抗菌性的千里光进行pal基因克隆,进行序列结构与系统进化分析,揭示该酶生物学功能与进化地位。方法以千里光转录组数据库中分离得到pal基因核酸序列设计引物,PCR扩增全长验证,运用SignalP、MEGA等系列生物信息学软件进行... 详细信息

目的对具有良好抗菌性的千里光进行pal基因克隆,进行序列结构与系统进化分析,揭示该酶生物学功能与进化地位。方法以千里光转录组数据库中分离得到pal基因核酸序列设计引物,PCR扩增全长验证,运用SignalP、MEGA等系列生物信息学软件进行核酸序列信息、氨基酸结构特征与系统进化分析。结果克隆获得长度为2159 bp的核酸序列,ORF分析表明该基因编码708个氨基酸,无信号肽,是非跨膜蛋白。与近缘物种pal基因blast分析表明其氨基酸序列与黑心菊、雪莲等相似度达92.22%,具有相同的活性位点和保守结构域。系统进化树分析表明,千里光与菊科植物青蒿、雪莲归于一个亚支,表明3种植物pal在进化上具有较近的亲缘关系。结论千里光pal基因序列结构与其他14种PAL酶家族成员相似度高,在进化上与菊科植物较近。

关键词：千里光生物信息学分析苯丙氨酸裂解酶(PAL) 进化分析

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乳腺癌干细胞标志物CD44/CD24与ALDH1的相关性分析

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山西医科大学学报 2019年第4期50卷 421-426页

作者：樊新宇梦遥盛长斌何朵李玲空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室西安710032

目的分析CD44/CD24与乙醛脱氢酶1(ALDH1)两种乳腺癌干细胞标记物表达的阳性细胞比率及其相关性。方法收集培养4例乳腺癌转移胸腔积液和8株乳腺癌细胞系,进行CD44/CD24与ALDH1的标记染色,应用流式细胞术检测CD44^+CD24-与ALDH1^+细胞亚... 详细信息

目的分析CD44/CD24与乙醛脱氢酶1(ALDH1)两种乳腺癌干细胞标记物表达的阳性细胞比率及其相关性。方法收集培养4例乳腺癌转移胸腔积液和8株乳腺癌细胞系,进行CD44/CD24与ALDH1的标记染色,应用流式细胞术检测CD44^+CD24-与ALDH1^+细胞亚群的比例,并分析两种标记物之间的相关性。结果 8株乳腺癌细胞系CD44^+CD24-细胞亚群比例仅2株高达85%以上,其余均在5%以下; ALDH1^+细胞亚群比例总体较低,在0. 98%-25. 2%之间。4例胸腔积液中,CD44^+CD24^-细胞亚群比例较高,ALDH1^+细胞亚群则比例波动较大。乳腺癌细胞系CD44^+CD24-与ALDH1^+细胞亚群比例的相关性分析显示,两种标记物无相关性(r=-0. 168 3,P=0. 383)。对ALDH1^+、ALDH1^-与未标记细胞中CD44^+CD24^-细胞亚群比例分别进行比较分析,未见差异。结论 CD44/CD24与ALDH1两种乳腺癌标记物在乳腺癌细胞中的表达是独立的,二者没有相关性。

关键词：乳腺癌干细胞 ALDH1 CD44/CD24 相关性

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活化转录因子4基因敲除小鼠完全缺失晶状体致小眼症

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动物医学进展 2019年第7期40卷 39-42页

作者：张晟林晓琳和法莲彭珊申红芬南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广东广州510515 中山大学中山医学院广东广州510080

旨在研究活化转录因子4(ATF4)基因敲除对小鼠眼睛发育的影响。将小鼠分为野生型(WT)组和ATF4敲除(KO)组,采用器官大体观察和组织病理学分析,明确ATF4基因敲除后对小鼠眼睛发育的影响。结果发现,WT小鼠眼球大小及组织结构正常。而ATF4^-/... 详细信息

旨在研究活化转录因子4(ATF4)基因敲除对小鼠眼睛发育的影响。将小鼠分为野生型(WT)组和ATF4敲除(KO)组,采用器官大体观察和组织病理学分析,明确ATF4基因敲除后对小鼠眼睛发育的影响。结果发现,WT小鼠眼球大小及组织结构正常。而ATF4^-/-小鼠眼球体积缩小;脉络膜和视网膜层层次结构基本存在,各个层次结构紊乱;神经节细胞层细胞数基本正常,约2层细胞,但细胞排列不整齐;内丛状层结构疏松,厚度增加;外核层细胞层次增加,超过10层,同时结构松散、形成裂隙和囊样结构;内核层细胞层次减少、约6层~8层细胞,细胞排列轻度紊乱。整个视网膜在局部形成乳头状突起;脉络膜基本正常,但没有乳头状的睫状突形成。眼球内玻璃体缺失,由水肿的纤维结缔组织构成,中央可见多个小血管。总之,ATF4^-/-小鼠展示了小眼表型,同时ATF4^-/-小鼠眼睛结构异常。

关键词：活化转录因子4 基因敲除小鼠晶状体小眼症

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人脐带间充质干细胞预防小鼠急性移植物抗宿主病作用及机制研究

人脐带间充质干细胞预防小鼠急性移植物抗宿主病作用及机制研究

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中国病理生理学会第十八届全国实验血液学学术会议

作者：洪涛王瑞王筱淇王蔚浩杜雨軒何云地张云芳高强国杨世杰张曦陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心全军血液病中心创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室陆军军医大学基础医学院细胞生物学教研室遵义医科大学

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