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UCH-L3基因沉默对人乳腺癌细胞MCF7生物学功能的影响

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长治医学院学报 2024年第6期38卷 403-406,417页

作者：刘振华长治医学院基础医学部基础医学研究所感染与免疫实验室山西长治046000

目的:探讨沉默UCH-L3基因对非三阴性乳腺癌细胞MCF7生物学功能的影响。方法:使用靶向UCH-L3的siRNA转染MCF7细胞,构建UCH-L3沉默表达模型。采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测UCH-L3的mRNA和蛋白表达水平。使用CCK8法和克隆形... 详细信息

目的:探讨沉默UCH-L3基因对非三阴性乳腺癌细胞MCF7生物学功能的影响。方法:使用靶向UCH-L3的siRNA转染MCF7细胞,构建UCH-L3沉默表达模型。采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测UCH-L3的mRNA和蛋白表达水平。使用CCK8法和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力。采用Transwell法评估细胞侵袭能力。结果:经过3种不同siRNA的基因沉默处理,UCH-L3-001显示出最显著的沉默效果,mRNA表达水平降低至空白对照组的24.7%,蛋白表达水平降低至空白对照组的32.0%;相比空白对照组,UCH-L3-001 siRNA沉默导致MCF7细胞的增殖率下降17.5%,克隆形成能力下降57.8%,迁移克隆数减少55.0%,细胞凋亡率增加61.6%。结论:沉默UCH-L3能够有效抑制MCF7细胞增殖和克隆形成能力,同时降低细胞侵袭能力并促进细胞凋亡,有望成为一种治疗非三阴性乳腺癌的新策略。

关键词： UCH-L3 基因沉默非三阴性乳腺癌增殖侵袭

Med1对T细胞发育及CD4^(+)T细胞在免疫应答中分化的影响

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中南大学学报（医学版） 2023年第9期48卷 1296-1303页

作者：郑会强焦安君刘海艳雷蕾丁人一封钊张丹张连军张保军西安交通大学基础医学院病原生物学与免疫学系西安710061 西安交通大学医学部转化医学研究院感染与免疫研究所西安710061 西安市胸科医院检验科西安710100 苏州系统医学研究所江苏苏州215123 环境与疾病相关基因教育部重点实验室(西安交通大学) 西安710061

目的:CD4^(+)T细胞在免疫应答过程中的分化受到由众多分子组成的复杂而精细的信号通路的调控,且调控T-bet表达的分子机制并未阐明。中介体复合物亚基1(mediator complex subunit 1,Med1)与多种辅助因子结合调节基因转录,促进细胞存活和... 详细信息

目的:CD4^(+)T细胞在免疫应答过程中的分化受到由众多分子组成的复杂而精细的信号通路的调控,且调控T-bet表达的分子机制并未阐明。中介体复合物亚基1(mediator complex subunit 1,Med1)与多种辅助因子结合调节基因转录,促进细胞存活和增殖,影响恒定自然杀伤T细胞(invariant natural killer T cell,iNKT)的发育。本研究旨在探讨Med1对T细胞发育及CD4^(+)T细胞在免疫应答中分化的影响。方法:构建T细胞特异性敲除Med1基因(KO)小鼠(Med1F/FCD4cre^(+))并对其进行验证。采用流式细胞术检测KO组和对照(Con)组(Med1F/FCD4cre−)小鼠胸腺、脾和淋巴结中CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的百分比及数目;用淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)感染小鼠8 d后,检测小鼠脾中CD4^(+)T细胞及抗原特异性(GP66^(+))CD4^(+)T细胞的百分比及数目、Th1细胞(Ly6c^(+)PSGL1^(+))占CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞的百分比及数目、CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞中Tbet的荧光强度。结果:KO组与Con组小鼠胸腺中CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的百分比及数目、脾和淋巴结中CD4^(+)T细胞的百分比及数目差异均无统计学意义(均P>0.05),但KO组脾和淋巴结中CD8^(+)T细胞的百分比及数目较Con组均显著降低(均P<0.05)。感染LCMV后,KO组与Con组小鼠脾中CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞的百分比及数目差异均无统计学意义(均P>0.05),但KO组Th1细胞占CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞的百分比及数目、CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞中T-bet的表达较Con组均显著降低(均P<0.05)。结论:T细胞中特异性敲除Med1基因不影响胸腺中CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的发育,但是影响外周CD8^(+)T细胞的维持。在免疫应答中Med1基因缺失影响转录因子T-bet的表达,最终导致CD4^(+)T细胞向Th1细胞分化减少。

关键词：中介体复合物亚基1 T细胞发育免疫应答 Th1细胞 T-bet

APP/PS1ΔE9阿尔茨海默症小鼠脾免疫细胞以及相关干细胞比例与正常小鼠的差异研究

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中国实验动物学报 2022年第4期30卷 482-487页

作者：栾晶胡峰瑞郭慧芳劳可静苟兴春陕西省缺血性心血管疾病重点实验室陕西省脑疾病重点实验室西安医学院基础与转化医学研究所西安710021 陕西省感染与免疫疾病重点实验室(西安医学院) 西安医学院基础医学部西安710021

目的探讨APP/PS1ΔE9阿尔茨海默症小鼠(AD小鼠)脾各免疫细胞以及相关干细胞比例与正常小鼠比较是否存在差异。方法取9月龄AD小鼠与其同窝对照小鼠脾(每组各6只),流式细胞法检测各组小鼠脾中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、B细胞、单核细... 详细信息

目的探讨APP/PS1ΔE9阿尔茨海默症小鼠(AD小鼠)脾各免疫细胞以及相关干细胞比例与正常小鼠比较是否存在差异。方法取9月龄AD小鼠与其同窝对照小鼠脾(每组各6只),流式细胞法检测各组小鼠脾中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、B细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突细胞比例;同时,检测上述细胞中具有干细胞特性的细胞(C-kit^(+)Sca-1^(+))比例。比较AD小鼠脾各免疫细胞比例及相应干细胞比例与正常小鼠的差异。结果9月龄AD小鼠与其同窝对照小鼠相比行为学存在显著性差异;与其同窝对照野生型小鼠相比,9月龄AD小鼠脾中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、B细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突细胞比例无明显差异;AD小鼠脾CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞以及B细胞中C-kit^(+)Sca-1^(+)细胞比例高于其同窝对照野生型小鼠,但由于个体差异较大,无统计学意义;单核细胞、巨噬细胞和树突细胞比例中C-kit^(+)Sca-1^(+)细胞比例低于其同窝对照野生型小鼠,在巨噬细胞和树突细胞中有明显的统计学意义。结论虽然9月龄AD小鼠与正常小鼠相比,脾中各免疫细胞比例无明显差异,但AD小鼠髓系细胞中具有干细胞特性的细胞储备显著低于正常小鼠,而淋系细胞中具有干细胞特性的细胞比例与正常小鼠相比有升高趋势,说明AD小鼠与正常小鼠相比存在免疫衰老加速现象。

关键词：阿尔茨海默症小鼠脾免疫细胞干细胞比例差异

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中华肝胆外科杂志 2021年第1期27卷 12-29页

作者：中华预防医学会肝胆胰疾病预防与控制专业委员会中国研究型医院学会肝病专业委员会中华医学会肝病学分会中华预防医学会肿瘤预防与控制专业委员会感染性肿瘤防控学组杨永平卢实春丁惠国屠红曲春枫曹广文庄辉赵平徐小元不详解放军总医院肝病医学部北京100853 解放军总医院肝胆胰外科医学部北京100853 首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化中心上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室免疫室海军军医大学基础医学部流行病学教研室北京大学医学部基础医学院病原生物学系中国癌症基金会学术部北京大学第一医院感染科

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数占全球55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践... 详细信息

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数占全球55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践的低危、中危、高危和极高危4个层次的肝癌风险人群辨识特征。在医院和社区人群中筛查伴肝癌风险的患者,并科学地进行分层监测。伴有肝癌风险的患者需要终生监测,指南根据风险层次推荐了不同的肝癌监测间隔和工具,对于肝癌高危人群,6个月1次腹部超声联合血清甲胎蛋白监测(常规监测);对于肝癌极高危人群,3个月1次常规监测,6~12个月增强CT或MRI检查1次,以提高早期肝癌诊断率和降低监测成本;低中危人群中,肝癌年发生率低,可延长监测间隔为1年或以上。指南部分推荐意见的成本-效益仍需要进一步评价。

关键词：肝肿瘤肝硬化慢性乙型肝炎筛查监测

Arntl基因敲除对小鼠T细胞发育及抗感染功能的影响

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西安交通大学学报（医学版） 2021年第3期42卷 402-407,432页

作者：孙亚娥焦安君王昕张星哲雷蕾杨小丰解涛周晓勃史霖张保军刘晓斌延安大学医学院陕西延安716000 西安交通大学基础医学院病原生物学与免疫学系陕西西安710061 西安交通大学医学部转化医学研究院感染与免疫研究所陕西西安710061 环境与疾病相关基因教育部重点实验室(西安交通大学) 陕西西安710061 西安市免疫相关疾病重点实验室陕西西安710061

目的观察Arntl基因敲除对小鼠T细胞发育及抗感染功能的影响。方法构建在T细胞中特异性敲除Arntl基因小鼠(Arntl^(F/F)CD4cre^(+),KO);采用流式细胞术(FCM)检测KO小鼠胸腺和脾脏中T细胞各亚群的比例及数目;检测淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(... 详细信息

目的观察Arntl基因敲除对小鼠T细胞发育及抗感染功能的影响。方法构建在T细胞中特异性敲除Arntl基因小鼠(Arntl^(F/F)CD4cre^(+),KO);采用流式细胞术(FCM)检测KO小鼠胸腺和脾脏中T细胞各亚群的比例及数目;检测淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)感染7 d后小鼠脾脏中T细胞各亚群比例、病毒特异性CD8^(+)T细胞的比例,以及CD8^(+)T细胞中IFN-γ的表达水平;qPCR方法检测小鼠脾脏中病毒载量;借助流式细胞仪分选初始CD4^(+)T细胞(CD4^(+)CD25^(-)CD44^(-)CD62L^(+)T细胞),经体外诱导Th1细胞分化,检测表达IFN-γ细胞的比例。结果与对照组(Arntl^(F/F)CD4cre^(-),WT)小鼠相比,KO小鼠胸腺和脾脏中T细胞各亚群的百分比及数目均无明显改变(P>0.05)。感染LCMV后,KO小鼠脾脏中效应T细胞的比例较对照组无明显改变(P>0.05),但分泌IFN-γT细胞的比例显著增多(P<0.05),病毒清除率升高(P<0.05)。此外,KO小鼠初始CD4^(+)T细胞向Th1细胞分化较对照组显著增强(P<0.05)。结论Arntl在T细胞中特异性敲除不影响T细胞的发育,但会增强T细胞抗病毒感染的能力。

关键词： Arntl T细胞发育病毒感染免疫应答辅助性(Th)T细胞分化

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氢气与阿尔茨海默病

中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2022年第10期 21-25页

作者：栾晶戴雨轩郭慧芳张茂森陕西省脑疾病重点实验室·陕西省缺血性心血管疾病重点实验室西安医学院基础与转化医学研究所陕西西安710021 陕西省感染与免疫疾病重点实验室西安医学院基础医学部陕西西安710021

阿尔茨海默病(Alzheimers Disease,AD)是导致痴呆的最常见原因,脑内淀粉样β蛋白(Aβ)异常沉积是其主要病理特征。氧化应激和免疫衰老是AD发生过程中的重要环节。近年来,研究发现氢气在临床上多种疾病的治疗中表现出良好的效果,加之成... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimers Disease,AD)是导致痴呆的最常见原因,脑内淀粉样β蛋白(Aβ)异常沉积是其主要病理特征。氧化应激和免疫衰老是AD发生过程中的重要环节。近年来,研究发现氢气在临床上多种疾病的治疗中表现出良好的效果,加之成本较低且对人体无明显的毒副作用,具有广阔的应用前景。大量的研究表明气氢气作为医用气体在脑疾病的治疗方面具有潜能,可明显改善AD患者的病情,但由于AD的发病机制十分复杂,相关机制的研究尚不够系统和深入。本文主要对现有关于氢分子在缓解AD发展过程中所发挥的作用及其潜在机制进行综述,同时,也期待有更多学者加入到该研究领域,以提供更多的理论支持和实验证据,相信氢分子医学时代的到来可为AD的治疗带来新的曙光。

关键词：氢气氢溶液阿尔茨海默病发病机制

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临床肝胆病杂志 2021年第2期37卷 286-295页

作者：中华预防医学会肝胆胰疾病预防与控制专业委员会中国研究型医院学会肝病专业委员会中华医学会肝病学分会中华预防医学会肿瘤预防与控制专业委员会感染性肿瘤防控学组丁惠国屠红曲春枫曹广文庄辉赵平徐小元杨永平卢实春不详首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化中心上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室免疫室海军军医大学基础医学部流行病学教研室北京大学医学部基础医学院病原生物学系中国癌症基金会学术部北京大学第一医院感染科解放军总医院肝病医学部肝癌诊疗中心解放军总医院肝胆胰外科医学部

关键词：肝肿瘤肝硬化乙型肝炎,慢性筛查监测诊疗准则(主题)

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肿瘤 2021年第1期41卷 1-23页

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数仍占全球的55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床... 详细信息

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数仍占全球的55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践的低危、中危、高危和极高危4个层次的肝癌风险人群辨识特征。在医院和社区人群中筛查伴肝癌风险的患者,并科学地进行分层监测。伴有肝癌风险的患者需要终生监测,指南根据风险层次推荐了不同的肝癌监测间隔和工具,对于肝癌高危人群,6个月1次腹部超声联合血清甲胎蛋白监测(常规监测);对于肝癌极高危人群,3个月1次常规监测,6~12个月进行增强CT或MRI检查1次,以提高早期肝癌诊断率和降低监测成本;低中危人群中,肝癌年发生率低,可延长监测间隔为1年或以上。指南部分推荐意见的成本-效益仍需要进一步评价。

关键词：肝肿瘤肝硬化慢性乙型肝炎筛查监测

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中华肿瘤防治杂志 2021年第2期28卷 83-99页

作者：无杨永平卢实春丁惠国屠红曲春枫曹广文庄辉赵平徐小元中华预防医学会肝胆胰疾病预防与控制专业委员会中国研究型医院学会肝病专业委员会中华医学会肝病学分会中华预防医学会钟瘤预防与控制专业委员会感染性肿瘤防控学组解放军总医院肝病医学部北京100853 解放军总医院肝胆胰外科医学部北京100853 首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化中心上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室免疫室海军军医大学基础医学部流行病学教研室北京大学医学部基础医学院病原生物学系中国癌症基金会学术部北京大学第一医院感染科

关键词：肝肿瘤肝硬化慢性乙型肝炎筛查监测